高效液相色谱串联质谱法测定肉制品中栀子黄色素

建立肉制品中栀子黄色素中藏花素和藏花酸残留的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。实验优化了样品提取方法、液相色谱条件和质谱参数。样品用甲醇超声提取,乙腈饱和的正己烷脱脂,Eclipose plus C18色谱柱分离,流动相为乙腈-水溶液,流速1.0 m L/min。采用电喷雾质谱负离子模式电离,多重反应选择离子检测。藏花素的检测离子对为m/z 975.4/651.3和m/z 975.4/327.1,其中定量离子对为m/z 975.4/651.3,藏花酸的检测离子对为m/z 327.2/105.0和m/z 327.2/185.1,其中定量离子对为m/z 327.2/105.0。结果表明,线性范围50~2000 ng/m L,回收率为80.49%~90.34%,相对标准偏差3.01%,藏花素和藏花酸的仪器检出限分别为5、3 ng/m L,方法定量限分别为20、12 ng/m L,该方法简单、准确,适用于肉制品中栀子黄色素的定量检测。     

加速溶剂萃取-高效液相色谱法测定方便面中栀子黄色素

建立一种检测方便面中栀子黄色素的加速溶剂萃取-高效液相色谱方法。采用加速溶剂萃取法萃取方便面,以甲醇为萃取剂,在1 500 psi和50 ℃静态循环提取2 次,用乙腈饱和的正己烷溶液除脂。采用XBridgeTM C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,藏花素和藏花酸在二极管阵列检测器中的检测波长为441 nm和427 nm进行分离分析。结果表明,藏花素和藏花酸在1.0～20 μg/mL范围内具有良好的线性关系（r＞0.999 6）;平均回收率（n=6）在83.64%～94.82%之间;相对标准偏差为0.92%～2.13%,方法的定量限和检出限分别为0.5～1.0 μg/g和0.05～0.20 μg/g,本方法快速简便、自动化程度高、准确可靠,是一种适合测定方便面中栀子黄色素的方法。     

方便食品中栀子黄色素提取溶剂优化

栀子黄色素是从茜草科植物栀子的果实中提取的天然食用色素,其主要有效成分是藏花素和藏花酸。栀子黄具有较好的稳定性,着色力强,安全性好,具有一定的保健作用。在国内食品行业中栀子黄色素在方便食品中的应用越来越广泛,但添加量很低。我国现行的栀子黄色素国标检验方法是以甲醇为提取剂,由于栀子黄色素在甲醇中的溶解度较低,提取效果受到较大影响。因此,优化方便食品等固体食品中栀子黄色素的提取方法,提高提取效率,对低含量栀子黄色素食品的检测具有重大意义。本文以方便面为原料,探索优化栀子黄色素提取溶剂,为栀子黄色素的科学检测提供实验基础。     

高效液相色谱法测定糕点中的栀子黄

目的改进GB/T5009.149-2003《食品中栀子黄的测定第一法高效液相色谱法》的方法。方法样品经甲醇:甲酸(6:4,V:V)洗脱,采用Angilent Extend C_(18)反相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇:0.2%氨水(50:50,V:V)为流动相(等度洗脱),流速为1.0 mL/min,进样量20μL,经配有二极管阵列检测器(DAD)的高效液相色谱仪(high performance liquid chromatograph,HPLC)进行测定。结果本方法检出限为3.2 mg/kg,栀子黄中藏花酸和藏花素峰面积的相对标准偏差分别为1.6%、2.5%,在5~50μg/mL范围内有较好的线性,Y=1.34X-0.54,r~2=0.9998,不同浓度的回收率在91.2%~98.4%之间。结论本方法简单、高效、准确度高,回收率和重现性良好,适用检测的食品类别范围较宽,具有推广应用价值。     

高效液相色谱法测定栀子中藏花素的含量

建立了一种用高效液相色谱法测定栀子中藏花素含量的方法。采用XBridge Amide氨基柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇∶乙腈∶水(17∶33∶50)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长440nm,柱温25℃,用外标法定量,测定栀子中藏花素的含量。结果表明,测定藏花素的线性回归方程为y=1.508 7x-0.014 1,相关系数R2=0.996 2,回收率97.68%,相对误差0.729%,该方法简便,快速,线性关系良好。     

微波-表面活性剂协同提取栀子黄色素的工艺

以栀子为原料,研究微波-表面活性剂协同提取栀子黄色素,确定十二醇硫酸酯钠盐(K12)为栀子黄色素提取的最佳表面活性剂,通过正交试验确定最佳协同提取条件为:微波功率为420W,提取时间为90 s,十二醇硫酸酯钠溶液浓度为0.05%,提取料液比为1:20(g/mL).对比试验结果表明,采用该法栀子黄色素的提取率比仅用微波法提高了10.2%.     

高效液相色谱法测定配制酒中黄色素的方法学

建立高效液相色谱法同时测定配制酒中栀子黄、柠檬黄、日落黄的分析测定方法。样品经加热除去乙醇后,用水定容后经微孔滤膜(0.45μm)过滤。以甲醇和0.02 mol/L乙酸铵溶液为流动相,利用高效液相色谱分析,外标法定量。结果表明,藏花素、藏花酸、柠檬黄、日落黄在1.0～20.0μg/mL范围内线性良好,相关系数r≥0.998。检出限按公式C_L=3S_b/b计算,得出藏花素2.837 mg/kg、藏花酸0.614 mg/kg、柠檬黄0.117 mg/kg、日落黄0.105 mg/kg,满足定量分析的要求。添加不同浓度的黄色素(添加量0.5～9.0 mg/kg),加标回收率在94.0%～98.5%之间, RSD5%。该方法简单、快速,准确度高,精密度好,满足定量分析要求。     

响应面试验优化超声波辅助提取圆叶葡萄鞣花酸和总酚工艺

以圆叶葡萄Noble皮和籽为原料,使用丙酮提取溶剂（丙酮-水-盐酸体积比70∶29∶1）,采用超声波辅助提取圆叶葡萄中以鞣花酸为主的多酚类化合物。在单因素试验的基础上,利用响应面试验优化圆叶葡萄皮中鞣花酸和总酚提取工艺,建立数学回归模型,并分析双因素间的交互作用。结果表明,影响圆叶葡萄皮中鞣花酸和总酚含量的显著因素为料液比、提取时间和超声功率,得到的最佳提取工艺条件为料液比1∶30（g/mL）、提取时间28 min、超声功率616 W,此条件下鞣花酸和总酚含量分别为616.21 μg/g和15.06 mg/g（以没食子酸当量计,鲜质量）。用响应面试验对圆叶葡萄中鞣花酸和总酚提取进行优化,可得到最佳工艺条件,验证结果与理论预测拟合度高,可为实际生产提供理论依据。     

芝麻油中芝麻素、芝麻林素和细辛素检测方法优化

采用有机溶剂甲醇提取、HPLC同时分析芝麻油中芝麻素、芝麻林素和细辛素含量。为提高分析质量与准确性,优化甲醇提取溶剂用量和超声辅助提取的时间,并对检测方法进行方法学考察。结果表明：最佳提取条件为甲醇用量10 mL（芝麻油0.1 g）,超声时间2 min;芝麻素、芝麻林素和细辛素线性范围分别为4～100 mg/L、4～100 mg/L和1～40 mg/L,线性关系良好,相关系数分别为0999 5、0.999 6和0.999 2;芝麻素、芝麻林素和细辛素的检出限分别为0.03、0.02 mg/g和0.02 mg/g,定量限分别为0.06、0.06 mg/g和0.04 mg/g,加标回收率分别为87.17%～92.59%、9271%～102.24%和95.66%～108.93%,加标回收率的相对标准偏差均小于5%,方法的稳定性、准确性和精密度均符合检测要求。该方法操作简单、耗时短(完成一次分析只需30 min)、成本低、稳定性高,能有效应用于芝麻油中3种木脂素组分的分析检测。     

迎春花黄色素的超声提取及清除自由基作用研究

利用超声波作用,提取迎春花黄色素,对迎春花黄色素提取的影响因素:溶剂、酸度、超声时间、物料比等,作单因素试验和正交试验,研究迎春花色素对羟自由基、超氧自由基的清除作用.结果表明,超声波作用下提取迎春花色素的最佳条件是:溶剂80%的乙醇,pH=7、物料比1:10(g/mL),超声时间为20min,温度为70℃,提取级数是3级.迎春花色素对OH-·、O2-·自由基有清除作用,清除率随色素浓度的增加而增大,随时间的增加而减小.     

高效液相色谱法测定腌渍蔬菜罐头中乙二胺四乙酸二钠的含量

建立高效液相色谱法测定腌渍蔬菜罐头中乙二胺四乙酸二钠含量的检测方法。试样中目标组分采用纯水提取,三氯化铁络合,PXA混合阴离子固相萃取柱净化,高效液相色谱检测,外标法定量。乙二胺四乙酸二钠的络合物质量浓度在1.0～100.0 μg/mL范围内时,线性关系良好,其相关系数为0.999 95,检出限为0.09 mg/kg,定量限为0.31 mg/kg,添加量在0.03～0.3 g/kg范围内,平均加标回收率为99.09%～103.95%,相对标准偏差为0.4%～3.3%。该方法准确度高、重复性好,适合腌渍蔬菜罐头中乙二胺四乙酸二钠含量的检测。     

蓝莓叶多酚组成成分分析

通过特征颜色反应、紫外-可见光谱、傅里叶红外光谱、高效液相色谱-质谱(high performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS)法对蓝莓叶多酚样品进行定性分析。结果表明:蓝莓叶多酚中含有羟基、糖基、苯环、甲氧基和含氧杂环等特征基团。蓝莓叶多酚在醇溶液中最大吸收波长分别在354 nm和748 nm处。通过HPLC-MS的保留时间和多酚单体的一、二级质谱图分析,并与标准的质谱数据和保留时间比较,得知蓝莓叶多酚中有5种多酚单体,分别为表儿茶素没食子酸酯、绿原酸、甲基-芥子酸-己糖苷、5-O-阿魏酰奎尼酸、槲皮素3-O-葡萄糖苷。     

正相高效液相色谱法测定腌腊肉制品中磷脂酰胆碱氢过氧化物的含量

采用正相高效液相色谱法对腌腊肉制品中的磷脂酰胆碱氢过氧化物（PC-OOH）进行检测。腌腊肉制品中的PC-OOH用氯仿-甲醇（2∶1,V/V）提取,以合成的C16∶0/18∶2 PC-OOH为标样,采用正相高效液相色谱-紫外法进行检测。色谱柱：Lichrosorb Si60（250 mm×4.0 mm,5 μm）;流动相：A为水,B为正己烷-异丙醇（3∶2,V/V）,采用梯度洗脱;流速：1 mL/min;柱温：30 ℃;检测波长：234 nm。结果表明：C16∶0/18∶2 PC-OOH在20～600 nmol/mL范围内呈现良好的线性关系（R2=0.999 9）,检出限为5.8 nmol/mL,定量限为19.4 nmol/mL,不同水平的平均回收率为79.4%～91.9%。实际样品分析显示,农家腊肠A、B和火腿中方样品中PC-OOH的含量比较高,为92.4、106.4 nmol/g和102.5 nmol/g,烟熏肉中未检出PC-OOH。本实验建立的分析方法简便快捷、具有较好的灵敏度和可靠性,可用于腌腊肉制品中PC-OOH的定量分析。     

奶粉中游离氨基酸的提取工艺参数优化及同时测定

根据单因素试验与响应面分析法中的Box-Behnken试验设计原理对影响奶粉游离氨基酸提取量的料液比、硫酸锌质量分数和离心时间3 个因素进行优化,并采用偏最小二乘法对以上游离氨基酸的模拟混合试样进行同时测定。结果表明,奶粉游离氨基酸的最佳提取条件为料液比1∶3.02（g/mL）、沉淀剂中硫酸锌质量分数10.23%、离心时间6.79 min,在此条件下,提取量为170 μg/g。硫酸铜与甘氨酸、谷氨酸、缬氨酸和苯丙氨酸反应生成的络合物,由于吸收光谱重叠严重,用光度法难以对单一组分进行同时测定。偏最小二乘法对游离氨基酸的模拟混合试样进行同时测定的结果显示,回收率98.2%～99.2%;相对预报误差为1.7%～2.9%。     

高效液相色谱法同时测定紫花地丁中6 种活性成分

目的：建立超声辅助萃取-高效液相色谱法分离紫花地丁中秦皮乙素、咖啡酸、芦丁、柚皮素、木犀草素和芹菜素6 种活性成分及其含量测定的方法。方法：采用Phenomenex C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）分离6 种成分;流动相为甲醇-0.1%醋酸溶液,梯度洗脱;流速0.8 mL/min,紫外检测波长340 nm,柱温35 ℃。结果：6 种成分在15 min内均达到基线分离,线性关系良好（r≥0.999 1,n=6）,平均回收率均在102.13%～104.68%（相对标准偏差小于1.20%,n=3）。结论：本实验采用超声波法提取,并对提取条件进行探讨,得出最佳条件为超声时间30 min、超声功率120 W、固液比1∶100（g/mL）、甲醇体积分数60%。同时该研究表明该方法简单、快速、经济、可靠,可用于紫花地丁的品质监控。     

离子液体辅助超声萃取-高效液相色谱同时测定半边莲中6 种黄酮类化合物

目的：通过单因素试验和正交试验对离子液体辅助萃取半边莲中黄酮类化合物的条件进行优化,建立高效液相色谱法同时分离测定半边莲中芦丁、槲皮素、柚皮素、橙皮素、山柰酚和芹菜素的方法。方法：采用InertSustain C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）进行分离;流动相为甲醇（B）-乙酸溶液（A,pH 3.0）,梯度洗脱;流速1.0 mL/min;紫外检测波长285 nm;柱温35 ℃。结果：以黄酮类化合物的提取量为指标,最佳提取条件为甲醇体积分数80%、固液比1∶80（g/mL）、萃取时间30 min、离子液体浓度0.6 mol/L。在优化的色谱条件下,芦丁、槲皮素、柚皮素、橙皮素、山柰酚和芹菜素分离效果良好;定性检出限（RSN = 3）依次为0.001 2、0.002 3、0.002 6、0.000 2、0.001 0、0.000 6 μg/mL;样品回收率为91.77%～102.53%。结论：该萃取方法操作简单快速,为半边莲中黄酮类化合物的提取分离及检测提供了有效的方法。     

响应面试验优化海蓬子外种皮水溶性多糖提取工艺及其抗菌活性

对海蓬子外种皮多糖提取工艺进行研究,以干枯的海蓬子外种皮为原料,水提醇沉法获得多糖,考察提取时间、提取温度、料液比对多糖提取量的影响,通过单因素试验和响应面法对影响海蓬子外种皮多糖提取量的主要因素进行分析优化,微孔-平板法测定粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的最小抑菌浓度（minimal inhibitoryconcentration,MIC）。结果表明：影响海蓬子外种皮多糖提取量工艺的因素按主次顺序排列为提取温度＞料液比＞提取时间;确定海蓬子外种皮多糖水提取的最佳工艺条件为提取温度87 ℃、提取时间5 h、料液比1∶57（g/mL）,在该条件下,海蓬子外种皮多糖的提取量为（13.03±0.63） mg/g,与预测值12.42 mg/g接近,粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的MIC值分别为50、100 mg/mL,由此表明,响应面模型与实际情况拟合良好,能较好地预测海蓬子外种皮多糖的提取量,海蓬子外种皮粗多糖对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌抑制作用。     

Extraction optimization of bioactive compounds (crocin, geniposide and total phenolic compounds) from Gardenia (Gardenia jasminoides Ellis) fruits with response surface methodology

Response surface methodology (RSM) was employed to optimize the extraction parameters of crocin, geniposide and total phenolic compounds from gardenia fruits. The effects of three independent variables, namely ethanol concentration (EtOH, %), extraction temperature (°C) and time (min) on the yield of crocin, geniposide and total phenolic compounds were investigated. Results indicated that the data were adequately fitted into three second-order polynomial models. The independent variables, the linearity of extraction temperature and time, the quadratics of ethanol concentration and extraction time, the interactions between ethanol concentration and temperature, ethanol concentration and extraction time, as well as extraction temperature and time had a significant effect on the yield of crocin, geniposide or total phenolic compounds. The optimal extraction parameters were the EtOH of 51.3%, extraction temperature of 70.4 °C and time of 28.6 min according to the response surface analysis. Under this condition, the yield of crocin, geniposide and total phenolic compounds was 8.41 mg/g, 109.0 mg/g and 24.97 mg CAE/g dry powder of gardenia fruits, respectively.

Industrial relevance

There is a strong interest in the food industry in studying the extraction optimization of natural plants to produce higher quality products. Response surface methodology (RSM) is an effective technique for analyzing interactions among factors and optimizing the processes or products where multiple variables may influence the outputs. This work explores the extraction conditions for a natural pigment-gardenia yellow pigment by the RSM method and optimizes the extraction parameters to improve extraction yields of same main components of the natural pigment at the same time. The mathematical methods and models which can describe and predicate experimental data of the extraction would be extremely helpful in the extraction process of the natural products.     

基于分散液-液微萃取技术的石斛酚含量测定与分析

建立分散液-液微萃取与高效液相色谱联用技术测定石斛酚的分析方法。通过对实验条件的筛选及优化,得到最佳条件：pH 3,辅以涡旋方式进行萃取,萃取溶剂为120 μL正戊酸、萃取时间1 min,分散剂为曲拉通X-114、用量80 μL。此方法进行萃取,检出限为2.625 μg/L,定量限为8.74 μg/L,线性范围为0.10～30.00 mg/L,萃取富集倍数平均值为28.02,萃取回收率平均值为1.01。将建立的分析方法应用于实际石斛样品的测定,结果表明该方法能对石斛中的石斛酚进行高效萃取与富集,方法快速简便。