电子束辐照降解玉米中玉米赤霉烯酮和呕吐毒素

利用电子束辐照(electron beam irradiation,EBI)降解玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)和呕吐毒素(deoxynivalenol,DON),考察EBI对单一及混合毒素的降解效果,分析毒素降解及相互作用规律。结果表明,在0～10 k Gy范围内,随着剂量的增加,标准品溶液中单一毒素降解率升高,且毒素初始浓度越低,降解率越高。10k Gy时,1μg/m L的ZEN和DON降解率分别可达76. 04%和89. 31%。以EBI处理单一毒素为对照,DON与ZEN混合后同时经EBI处理,标准品和玉米浆中ZEN降解率均呈显著降低,DON降解率无明显趋势变化。14. 20%(质量分数)水分含量的玉米粉中混合毒素经EBI处理后,ZEN和DON降解率均低于单一毒素对照组;水分含量为19. 80%(质量分数)时,ZEN降解率低于对照组而DON高于对照组。该研究阐明了EBI同时降解玉米中ZEN和DON的效果,为EBI在粮食真菌毒素降解中的应用提供了理论参考。     

免疫快速同步检测玉米中五种真菌毒素胶体金试纸条的构建和应用

玉米作为重要的粮食和饲料来源，容易受到多种真菌毒素的污染，给居民健康和养殖业造成严重的危害。本文优化了适合五种真菌毒素（黄曲霉毒素B1、伏马毒素、T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮）同时提取的样品前处理方法，并构建了五检测线胶体金试纸条，检测结果可以通过肉眼定性，结合Image J软件可以进行定量分析，并应用于实际玉米样品检测。结果表明，最佳提取条件为90%乙腈/水，涡旋20 min，样品的添加回收率为71.9%-113.3%，相对标准偏差为0.9%-7.5%；测定基质添加样品建立标准曲线，通过肉眼判定得到五种真菌毒素的消线值分别为80.0、1000.0、100.0、400.0和200.0 μg/kg；结合Image J 软件提取多重检测试纸条的检测线灰度值，结果表明当AFB1、FB1、T-2、DON和ZEN的浓度为8.0、20.0、10.0、40.0、20.0 μg/kg时，各真菌毒素浓度对应的检测线显色值比空白对照显色值低。最后，通过检测11个实际玉米样品，结果表明部分玉米样品受到了不同程度的AFB1、DON和ZEN的污染。因此，本研究开发的免疫快速同步检测玉米中五种真菌毒素胶体金试纸条可以用于玉米中真菌毒素的现场快速筛查。     

智能真菌毒素消减机对玉米中真菌毒素的脱除效果研究

玉米穗腐病不仅会造成玉米减产、籽粒品质降低,还会产生真菌毒素污染谷物,威胁人类和动物健康。选用智能真菌毒素消减机对不同真菌毒素污染水平的玉米进行柔性擦皮处理,采用国标方法测定处理前后呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)和玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的变化。结果显示,低污染水平玉米(DON≤1 000μg·kg^-1、ZEN≤200μg·kg^-1)经真菌毒素消减机处理,每处理1次真菌毒素的脱除率达到15%～30%;高污染水平玉米(DON> 2 000μg·kg^-1、ZEN> 500μg·kg^-1)经真菌毒素消减机处理,每处理1次真菌毒素的脱除率仅达到10%～20%。表明智能真菌毒素消减机能够去除玉米籽粒表面的真菌毒素,玉米加工过程可选用合适的清理工艺,以保证产品的质量和品质。     

玉米赤霉烯酮和脱氧雪腐镰刀菌烯醇双特异性抗体的制备及检测方法构建

玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEN）和脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON）是粮食中常见的真菌毒素,长期的饮食暴露会对生物体造成严重危害。目前针对ZEN和DON同步免疫检测分别依赖各自对应的单克隆抗体,而传统单克隆抗体制备周期长、成本高。作者利用重组抗体表达技术在短时间内获得了可同时识别ZEN和DON的双特异性抗体（Bis-scFv）,并构建了基于Bis-scFv的间接竞争酶联免疫检测方法（indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,IC-ELISA）,获得ZEN和DON标准曲线的半数抑制质量浓度（IC₅₀）分别为20.64 ng/mL和132.29 ng/mL;Bis-scFv具有良好的特异性,与其他真菌毒素均无显著的交叉反应。同时,将IC-ELISA方法对玉米中的ZEN和DON进行加标回收实验,其回收率为86.02%～108.14%。本研究证明了所开发的Bis-scFv未来可应用于粮食样本中ZEN与DON的同步快速检测方法的开发。     

真菌毒素在赤霉病小麦研磨及其湿法加工中的分布研究

小麦赤霉病不仅会导致粮食减产,更会引起多种真菌毒素的高污染风险。将染病小麦进行实验室制粉并湿法分离统粉中的粗淀粉、谷朊粉,采用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)测定各系统的呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)、黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)以及赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)的含量,以探究赤霉病小麦在制粉及其湿法加工中四种常见真菌毒素的分布变化规律。结果显示:研磨制粉及湿法加工对真菌毒素的分布影响显著。制粉加工后,皮磨和心磨系统粉的DON、AFB1、ZEN和OTA含量比原粮显著降低,降低率分别为1.38~16.24%、20.47~71.77%及26.71~69.51%;湿法加工产物中,DON消减为相应统粉的4.88~12.11%,AFB1与OTA浓缩富集,富集率分别可达统粉的2.55、3.65倍,粗淀粉中ZEN消减为统粉的12.70~15.83%,谷朊粉则富集为统粉的4.11倍。研究表明,在工业生产中,可根据赤霉病小麦的感染类型及程度,适当选用研磨或湿法加工等合适的方法加工处理。     

2017年上半年我国部分地区饲料及饲料原料中霉菌毒素的污染状况分析

应用酶联免疫吸附法结合高效液相色谱对我国部分地区饲料及原料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)3种霉菌毒素的含量进行检测。结果表明：356份样品中AFB1、ZEN和DON检出率分别是87.8%、95.0%和98.3%,平均含量分别为11.2、689.0和1 855.2 μg/kg,说明我国部分地区饲料及饲料原料霉菌毒素污染比较普遍。玉米、玉米副产物、配合饲料和粕类中ZEN和DON污染较严重,AFB1污染主要存在于粕类中,青贮料及发酵料中3种霉菌毒素的污染程度相对较轻,但污染范围较广,建议饲料生产企业应加强对饲料和饲料原料的品控管理。     

烟台市售谷类及其制品中真菌毒素污染状况调查分析

为了解烟台市谷类及其制品中真菌毒素的污染状况,采用随机采样方法,2014年4月~2017年9月在烟台辖区11个监测点采集4类225种样本,按照《国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》规定的真菌毒素标准操作程序,进行15种真菌毒素的检测。结果表明,烟台市玉米及其制品、小麦及其制品普遍存在不同种类真菌毒素污染,而大米、小米均未检出,检出率为52.44%,超标率2.22%。小麦及其制品中主要检出15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-acetyldeoxynivalenol,15-Ac-DON)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)、伏马菌素B1,检出率分别为0.8%、55.2%、0.24%,伏马菌素B1仅存在小麦(原粮)中,15-Ac-DON则仅存在湿面条中。小麦及其制品中DON均有检出,均值73.86μg/kg,馒头、面条(干、湿)、面包中DON的样本检出率100%,小麦粉为40%,小麦(原粮)为20%。玉米及其制品中真菌毒素检出率为53.85%,主要存在伏马菌素(B1、B2、B3)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)、DON、15-Ac-DON、赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)、黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)、黄曲霉毒素B2(Aflatoxin B2,AFB2),检出率分别为32.97%、19.78%、26.37%、21.98%、17.58%、13.19%、8.79%、4.40%、2.20%;而T-2毒素、黄曲霉毒素G1(Aflatoxin G1,AFG1)、黄曲霉毒素G2(Aflatoxin G2,AFG2)检出率均为1.10%;玉米油中仅检出ZEN,检出率51.85%,均值126.68μg/kg。小麦及其制品和玉米其制品中均在毒素多重混合污染同一样本状况,2种及以上真菌毒素的多重污染率13.33%,3种毒素多重污染率最高为5.33%,玉米及其制品多重污染水平高于小麦及其制品。     

粮食中三种主要真菌毒素常用定量检测技术概述

真菌毒素是粮食产品的重要污染物之一,黄曲霉毒素B(1AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、呕吐毒素(DON)是污染最为普遍的三种毒素。本文对粮食产品中这三种真菌毒素检测技术研究进行系统阐述,对以后的检验工作提供了一些的可借鉴经验。     

山东省玉米真菌毒素污染状况调查及分析

为掌握山东省玉米的真菌毒素污染状况,评估污染带来的安全风险,为加强真菌毒素污染防控提供依据,采集了山东省玉米主产县2013年~2014年收获和储藏的玉米样品共520批次,采用液相色谱—飞行时间质谱联用仪(UPLC-Q-TOF)方法检测了玉米中黄曲霉毒素(AFB_1、AFB_2、AFG_1、AFG_2)、伏马毒素(FB_1、FB_2、FB_3)、呕吐毒素(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的污染水平。结果表明,AFB1、AFB2、AFG1在玉米中检出率分别为18.08%、7.88%、0.77%,平均含量分别为7.62、0.60、0.05μg/kg;FB1、FB2、FB3检出率分别为92.50%、88.08%、83.85%,平均含量分别为1 798.69、531.83、197.71μg/kg;DON检出率为26.35%,平均含量为240.44μg/kg;ZEN检出率为14.62%,平均含量为74.90μg/kg;AFG2未检出。调查结果还表明,伏马毒素在所测样品中污染最为严重,超标率达33.46%;单一样品受多种毒素混合污染的情况较严重。     

基于超导体包被的免疫荧光快检试纸法同时测定玉米中3种毒素的适用性研究

应用基于超导体包被的免疫荧光快速定量检测技术，建立了一种AFB1-ZEN-DON三合一联检卡法，可同时快速测定玉米中的黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮（ZEN）、呕吐毒素（DON）三种常见真菌毒素。对质控样准确度、加标回收率、检测限、定量限进行测定，检测多个玉米样品并与液相色谱法的检测结果进行对比，评估方法的适用性。结果表明，AFB1-ZEN-DON三合一联检卡检测AFB1含量在0.5～30μg/kg,ZEN含量在5～200μg/kg,DON含量在100～2 500μg/kg的范围内线性良好。AFB1在5～20μg/kg加标量范围时，回收率为97.62%～99.37%,ZEN在50～150μg/kg加标量范围时，回收率为98.03%～104.07%, DON在500～2000μg/kg加标量范围时，回收率为102.49%～108.53%。与液相色谱法相比，使用该方法检测AFB1相对偏差在–2.84%～11.91%,ZEN相对偏差在–3.43%～18.12%,DON相对偏差在1.83%～12.91%，均在液相色谱法允许偏差20%、15%和23%之内。该方法检测AFB1检测限为0....     

北京市地区小包装食用油中真菌毒素污染状况调查

在北京市地区随机抽取120份小包装食用油,采用高效液相色谱法或液相色谱-质谱联用法检测AF、AFB1、ZEN、DON、OTA和FB 6种真菌毒素的含量,并进行危害性评估。结果表明:120份样品中,黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的检出率分别为6. 67%和17. 50%,且检出黄曲霉毒素的食用油都为花生油,检出玉米赤霉烯酮的食用油都为玉米油,未检出其他真菌毒素;黄曲霉毒素虽然没有超出我国食用油真菌毒素的限量标准,但超出了欧盟的真菌毒素限量标准;玉米赤霉烯酮检出率虽然很高,但没有超出人体的每日最大耐受摄入量。     

Fusarium mycotoxins in cereals harvested from Hungarian fields

The Fusarium mycotoxins deoxynivalenol (DON), zearalenone (ZEN) and T-2 frequently contaminate grain crops in Middle and Eastern Europe. In this survey, 116 cereal samples (maize, wheat, barley and oat) were examined for DON, ZEN and T-2 mycotoxins. Samples were collected from different areas in two Hungarian regions (North and South Transdanubia). The method of analysis was indirect competitive ELISA. Maize was the most contaminated grain regarding DON (86%), ZEN (41%) and T-2 (55%) toxins. The average results of the deoxynivalenol and zearalenone tests of maize proved to be significantly higher than those of barley or oat. DON was the most represented Fusarium mycotoxin followed by T-2 and ZEN. The examination of these mycotoxins would be necessary at a larger scale as to re-evaluate permissible levels, so increase of the monitoring programme would be advisable for the future.     

2019年饲料原料霉菌毒素污染状况调查

目的 调查分析2019年饲料原料霉菌毒素污染状况。方法 采用胶体金免疫层析法或上转发光免疫分析(up-conversion immunoassays, UPT)法对安佑集团各分子公司所采购的大宗饲料原料中呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B1含量进行快速检测, 2019年度共检测饲料原料样品20918份。结果 对比安佑集团企业标准, 2019年饲料原料霉菌毒素污染总超标率为3.2%。饲料原料霉菌毒素污染整体情况由重转轻, 上半年污染较重主要是由于麸皮及次粉霉菌毒素污染超标所致, 下半年霉菌毒素污染程度整体较轻, 但9月玉米和玉米干酒糟及其可溶物(distillers dried grains with soluble, DDGS)的玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)污染情况较重, 其中DDGS达重度污染; 从产地来源看, 2019年全国各产地麸皮和次粉呕吐毒素(vomitoxin, DON)污染较重; 河南产地米糠黄曲霉毒素B1(aflatoxins B1, AFB1)及四川产地米糠ZEN达重度污染; 山东、江苏、云南、安徽产地玉米AFB1及安徽产地玉米DON达重度污染; 且饲料原料中的霉菌毒素并非单一存在, 多数情况下是多种毒素共存。结论 与2018年饲料原料霉菌毒素污染调查数据(未公开发表)相比, 2019年原料污染程度较轻。     

臭氧熏蒸对玉米胚中真菌毒素的降解消除作用

为探究臭氧熏蒸对玉米胚中真菌毒素消除效果,固定臭氧质量浓度为150 mg/L,以蒸馏水调节玉米胚水分至不同质量分数(5％、10％、15％、20％、25％、30％),并熏蒸不同时间(20、30、40、50、60、80min),分析熏蒸处理后玉米胚中真菌毒素含量以及玉米胚和玉米油品质的变化.结果表明:玉米胚水分质量分数为2...     

安徽河南粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮的污染调查

目的：调查安徽、河南两省粮食中镰刀菌毒素污染情况。方法：以玉米、小麦为材料,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和高效液相色谱法(HPLC)检测了脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和玉米赤霉烯酮(ZEN)的含量,采用SPSS软件对检测结果进行统计学分析。结果：安徽河南两省玉米、小麦中的DON和ZEN含量平均值分别为424.0μg/kg和187.2μg/kg,检出率分别为76.7%和75.3%。其他省份的玉米、小麦中DON和ZEN含量的平均值为52.2μg/kg和24.1μg/kg,检出率分别为60%和70%。结论：和其他省份相比,安徽、河南两省的粮食受镰刀菌毒素污染程度更严重。根据现有的国家限量标准,ZEN的超标率比DON更高。     

Aerobic and anaerobic in vitro testing of feed additives claiming to detoxify deoxynivalenol and zearalenone

Deoxynivalenol (DON) and zearalenone (ZEN) are mycotoxins produced by fungi of the genus Fusarium which frequently contaminate maize and grain cereals. Mycotoxin-contaminated feed endangers animal health and leads to economic losses in animal production. Several mycotoxin elimination strategies, including the use of commercially available DON and ZEN detoxifying agents, have been developed. However, frequently there is no scientific proof of the efficacy of such adsorbents and degrading products. We therefore tested 20 commercially available products claiming to detoxify DON and/or ZEN either by biodegradation (4 products) or a combination of degradation and adsorption (16 products) under aerobic and anaerobic conditions at approx. pH 7. Under the applied conditions, a complete reduction of DON and consequent formation of the known non-toxic metabolite DOM-1 was exclusively observed in samples taken from the anaerobic degradation experiment of one product. For all other products, incubated under aerobic and anaerobic conditions, a maximum DON reduction of 17% after 72 h of incubation was detected. Aerobic and anaerobic incubation of only one tested product resulted in complete ZEN reduction as well as in the formation of the less-toxic metabolites DHZEN and HZEN. With this product, 68–97% of the toxin was metabolised within 3 h. After 24 h, a ZEN reduction ≥ 60% was obtained with four additional products during aerobic incubation only. Six of the 20 investigated products produced α- and/or β-ZEL, which are metabolites showing similar oestrogenic activity compared to ZEN. Aerobic and anaerobic degradation to unknown metabolites with unidentified toxicity was obtained with 10 and 3 products, respectively. The results of our study demonstrate the importance of in vitro experiments to critically screen agents claiming mycotoxin detoxification.     

超导体包被免疫荧光试纸法同时测定玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮适用性研究

为了能同时快速测定玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)两种毒素,采用基于超导体包被的免疫荧光快速定量检测技术,检测了多个玉米样品,结合加标回收率、稳定性、检出限、精密度等指标,并与液相色谱法的检测结果进行比较分析,评估方法的适用性。结果表明,超导体包被的免疫荧光试纸法检测DON含量在100～2 500μg/kg,检测ZEN含量在5～200μg/kg的范围内线性良好。DON在500～2 000μg/kg添加水平范围内,回收率为103.72%～108.17%,ZEN在50～150μg/kg添加水平范围内,回收率为97.81%～111.27%。该方法于液相色谱法检测结果对比,DON相对偏差在3.72%～8.17%,ZEN相对偏差在2.19%～11.27%,均低于液相色谱法允许偏差23%和15%,超导体包被的免疫荧光试纸法是一种有效、实用、快速、定量的分析方法,能满足同时检测玉米中DON和ZEN的要求。     

适配体传感器在玉米赤霉烯酮检测中的应用

玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)是由镰刀菌属产生的一种非甾体真菌毒素,广泛存在于霉变的玉米、高粱等谷类作物以及奶制品中。由于其具有类雌激素作用,对动物和人均具有潜在的危害。因此,开发灵敏快速的ZEN检测技术对于防控ZEN具有重要意义。近年来,适配体传感器（aptasensors）因其分子量小、亲和力强、易于合成和修饰以及稳定性好等优点,已广泛应用于临床诊断、药物分析、环境监测、食品安全等领域。尤其在食品安全检测领域,适配体传感器可提供灵活多变的构建策略,且易于实现现场快速检测。因此本文结合国内外的研究进展,综述了近些年来基于适配体传感器的玉米赤霉烯酮检测方法,概括了各种检测方法的原理及其在实际样品检测中的应用,旨在为发展新的分析检测方法提供参考。     

时间分辨荧光免疫层析法定量检测谷物中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮残留

建立了一种快速定量检测谷物产品中黄曲霉毒素(Aflatoxin B1,AFB1)和玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的时间分辨荧光免疫层析方法。采用时间分辨荧光微球标记黄曲霉毒素B1抗体和玉米赤霉烯酮抗体,研究了如p H值、标记抗体浓度、荧光探针使用量、检测T线包被原浓度、质控C线羊抗鼠Ig G浓度、样品前处理方法等因素对时间分辨荧光免疫层析方法灵敏度的影响。结果表明:AFB1的检出限为0.80 ng/mL,线性范围(IC20~IC80)为0.81~5.67 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为2.15 ng/mL。在ZEN检出限为4.58 ng/mL,线性范围(IC20~IC80)为4.76~85.60 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为20.19 ng/mL。方法特异性良好,与T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、伏马毒素、赭曲霉毒素A多种真菌毒素交叉率小于10%。通过选择玉米、麦麸、大豆、小麦进行添加回收试验,AFB1的添加回收率在97.1%~108.7%之间,ZEN的添加回收率在92.8%~109.1%之间,相对标准偏差小于15%。选取经HPLC-MS/MS检测过的FAPAS标准质控样本进行测试,检测结果与其结果一致。在实际产品检测对比中,与市售胶体金免疫层析卡,ELISA试剂盒的检测结果基本一致。本方法操作简单快速、可定量,检测过程约25 min,适用于谷物样品中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的现场快速筛。