应用二次回归正交旋转组合设计优化中国毛虾蒸煮液酶解工艺的研究

以蛋白水解度为指标,在中国毛虾蒸煮液单因素酶解研究的基础上,采用二次回归正交旋转组合设计对其酶解工艺进行优化.建立了蛋白水解度与酶解初始pH、酶解时间及蛋白酶用量三个实验因素的正交回归模型方程,根据回归模型进行主效应分析,通过频率分析法得到了酶解最佳工艺条件:酶解初始pH为7.6,酶解时间为8h,蛋白酶用量为0.51%(w/w),最佳条件下的水解度为38.8%.     

山杏仁多肽的制备及清除自由基能力研究

以DPPH自由基清除率为指标,对风味蛋白酶酶解脱脂山杏仁的工艺进行研究。在单因素实验的基础上,采用二次回归正交旋转组合设计对其酶解工艺进行优化。建立脱脂山杏仁酶解液的DPPH自由基清除率与蛋白酶用量、酶解温度及酶解pH,3个实验因素的正交回归模型方程,通过频率分析法得到酶解最佳工艺条件:蛋白酶用量0.50%,酶解温度55℃,酶解pH7.2,酶解时间4h,最佳条件下酶解液的DPPH自由基清除率为56.8%。在此条件下,山杏仁蛋白酶解液清除DPPH自由基的IC50值为4.18mg/mL。经过超滤分离获得不同分子量的抗氧化多肽,用DPPH自由基清除率评价其抗氧化性,得分子量小于5ku的肽清除DPPH自由基能力最强。     

无花果蛋白酶酶解牡蛎肉的工艺优化及其抗氧化活性研究

研究无花果蛋白酶酶解牡蛎肉的工艺优化及其抗氧化活性,以氨基酸态氮含量和DPPH·清除率为指标进行单因素和正交实验,研究酶解时间、酶解温度、酶量、p H对氨基酸态氮含量和抗氧化活性的影响。正交实验确定牡蛎酶解的最佳工艺条件为:酶量5.5%,酶解温度50℃,p H6.0,酶解时间3.5 h。此工艺条件下,牡蛎酶解液氨基酸态氮的含量为0.181 g/100 m L,DPPH·清除率达71.80%,还原力为0.813,·OH清除率为16.19%,牡蛎酶解液具有较强的抗氧化活性。     

白贝酶解调味液的研制

以白贝肉为原料,利用蛋白酶作为催化剂研制酶解调味液,通过单因素试验和正交试验得到酶解调味液的最佳工艺条件,并对酶解过程中部分生化特性进行研究。结果表明,同时加入枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）蛋白酶和木瓜蛋白酶,添加比例为1∶3,总加酶量为0.16 g/10 g原料,水解温度为55 ℃,水解时间为3 h,初始pH值为7.5。在此优化条件下,所得酶解液水解度为60.02%。酶解过程中pH值从初始7.5逐步降低,2 h后降至pH 6.9并趋于稳定;氨基酸态氮含量呈逐渐升高的趋势,2.5 h达到最高值1.26 g/100 mL,而后趋于稳定;挥发性盐基氮含量也呈先升高后稳定的趋势,2.5 h后达到最高值12.32 mg/100 mL。     

红花籽粕氨基酸态氮酶法水解工艺优化

以红花籽粕为原料,探讨胰蛋白酶(parenzyme)、木瓜蛋白酶(papain)、枯草芽孢杆菌中性蛋白酶(bacillus subtilis neutral protease)3种商业酶水解红花籽粕中的氨基酸态氮并研究其最佳水解工艺条件。结果表明:胰蛋白酶parenzyme水解红花籽粕的正交试验优化条件为料液比1∶3(g/m L)、酶用量为2%、酶解温度为45~℃、酶作用时间3.0 h,此条件下水解红花籽粕中的氨基酸态氮含量达7.7%,木瓜蛋白酶papain水解红花籽粕的正交试验优化条件为料液比1∶3(g/m L)、酶用量为2.0%、酶解温度为55~℃、酶作用时间4.0 h,此条件下水解红花籽粕中的氨基酸态氮含量达8.2%,枯草芽孢杆菌中性蛋白酶bacillus subtilis neutral protease水解红花籽粕的正交试验优化条件为料液比1∶3(g/m L)、酶用量为2.0%、酶解温度为40~℃、酶作用时间4.0 h,此条件下水解红花籽粕中的氨基酸态氮含量达4.27%。     

钦州牡蛎酶解条件的优化研究

本文以钦州牡蛎为原料,以氨基酸态氮的含量为指标,通过对比实验来确定牡蛎酶解的酶种,并在单因素实验的基础上,通过正交实验来优化酶解工艺条件。结果表明:在胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合风味酶、复合蛋白酶5种酶中,胰蛋白酶为牡蛎酶解理想蛋白酶,根据单因素实验的结果,确定了通过4因素、3水平正交实验来优化酶解的条件,其结果为:pH 8.5,温度45℃,酶用量350 U/g,底物浓度22%,在该条件下得到的酶解液的氨基氮含量最高,每克底物水解产生氨基酸态氮14.19mg。     

双酶法制备牡蛎抗氧化酶解液的工艺优化

以牡蛎肉为原料,用无花果蛋白酶和风味蛋白酶水解牡蛎肉制备抗氧化酶解液,以DPPH·清除率、氨基酸态氮含量和蛋白质回收率为指标进行单因素和正交试验,探究总酶量、pH、酶解时间和酶比对酶解效果的影响。得到双酶制备牡蛎抗氧化酶解液的最佳工艺条件为:总酶量12%,p H6.0,酶解时间3.0 h,无花果蛋白酶与风味蛋白酶的比例为5∶1(质量比);该酶解液具有较高抗氧化活性和蛋白质回收率,其氨基酸态氮含量为0.223 g/100 m L,DPPH·清除率可达89.42%、蛋白质回收率达到了79.81%。     

米糠复合酶解工艺条件研究

以膨化米糠为主要原料,先经α-淀粉酶液化,再经糖化酶和蛋白酶同步酶解,改善米糠液中的营养成分。试验结果表明,α-淀粉酶水解最佳条件为酶用量1.5%,酶解温度为80 ℃,酶解时间为75 min,淀粉酶水解后还原糖含量达到0.657 1 g/100 mL。糖化酶和蛋白酶复合水解米糠,最适条件为pH4.5,糖化酶添加量0.2%,蛋白酶添加量2%,酶解温度60 ℃,酶解时间120 min,在此条件下,酶解液还原糖含量可达3.0 g/100 mL,氨基酸含量可达5.2 g/100 mL。     

酶解法制备香菇酱工艺条件的研究

在酶解法制备香菇酱的工艺中,采用正交试验设计分别对纤维素酶酶解条件和蛋白酶酶解条件进行了选择优化。结果表明,纤维素酶酶解的最佳工艺条件为酶解温度50℃、pH值6.5、酶用量0.3%、酶解时间60 min;蛋白酶酶解的最佳工艺条件为酶解温度50℃、pH值4.5、酶用量1%、酶解时间30 min,在此工艺条件下香菇酱的氨基酸含量为0.92%。     

匙吻鲟软骨蛋白酶解工艺优化

为提高匙吻鲟软骨蛋白的利用价值和生物活性,以匙吻鲟软骨为原料,经微波- 碱法提取软骨蛋白,通过单因素试验确定碱性蛋白酶酶解软骨蛋白的关键因素为酶解温度、底物质量分数、pH 值和酶的用量。经正交试验优化,确定了酶解的最佳工艺条件。结果表明：最佳酶解工艺条件为酶解温度50℃、软骨蛋白质量分数1%、pH7.5、酶用量9000U、酶解时间5h,在此条件下氨基酸态氮生成率最高,达到21.89%。     

复合酶制备鱼蒸煮液水解肽及其抗氧化活性研究

目的:研究鳀鱼蒸煮液的最佳酶解工艺条件,并分析所制备水解肽的分子量分布和抗氧化特性。方法:以三氯乙酸氮溶解指数(Trichloroacetic acid-nitrogen soluble index,TCA-NSI)为酶解效率的评价指标,在单因素实验基础上,运用中心组合设计法优化水解肽的制备工艺,并对酶解产物的分子量分布及抗氧化活性进行分析。结果:鳀鱼蒸煮液的最佳酶解条件为酶解时间45 min、酶解温度54.5 ℃、酶解pH8.2、碱性蛋白酶与中性蛋白酶比例1:1,在此条件下TCA-NSI可达76.51%。所制备的水解肽中分子量低于1500 Da的多肽含量可达81.941%。水解肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除率的IC₅₀分别为2.45、1.37和3.45 mg/mL,表明其具有较强的抗氧化活性。结论:采用复合酶法可高效酶解鳀鱼蒸煮液,并获得具有较强抗氧化活性的水解肽,可为鳀鱼蒸煮液高值化利用及活性肽产品开发提供理论依据。     

几种酶对鸭蛋蛋清水解效果的比较研究

为筛选利用鸭蛋蛋清酶解制备功能性多肽的条件,采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味酶4种酶对新鲜鸭蛋蛋清进行了水解。对每种酶分别进行单因素试验及正交试验,以水解度为指标确定每种酶的最佳水解条件。结果表明,在各自的最佳水解条件下,木瓜蛋白酶的水解效果最好,其最佳水解条件为pH为9.5,水解温度为50℃,底物浓度为25%,酶底比为8.0%,在此条件下水解度为29.01%。     

功能山杏整仁的酶法制备条件优化及功能评价

本研究对完整形态的山杏整仁进行酶解,使之释放出具有功能活性的短肽,以强化或赋予其保健功能,拟开发出具有降血糖和抗氧化活性的功能山杏仁产品。在单因素试验的基础上,采用响应面试验优化脱苦山杏整仁的酶解条件,得到的最佳酶解参数为：温度50 ℃、pH 7.0、加酶量6.0%、酶解时间8.0 h;同等条件下进行验证实验,得到山杏整仁的水解度为26.43%,与理论模型预测值27.85%基本相符。脱苦山杏整仁水解物表现出了良好的体外抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性。当质量浓度为10.00 mg/mL时,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、超氧阴离子自由基（O2－·）和羟自由基（·OH）的清除率分别为50.44%、65.22%、22.78%;当质量浓度为160.00 mg/mL时,其总还原力（吸光度）为1.072;通过超滤分离得到≤5、5～10、10～30、≥30 kD这4 组不同分子质量组分,当质量浓度为10.00 mg/mL时,对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别为3.65%、4.43%、7.94%、10.00%;选取抑制效果最好的≤5 kD组分经凝胶层析进一步分离得到3 个洗脱峰,质量浓度为10.00 mg/mL时,3 个洗脱峰的α-葡萄糖苷酶抑制率分别为11.52%、10.65%、9.67%。结果表明：脱苦山杏整仁酶解后产生了具有良好抗氧化活性和抑制α-葡萄糖苷酶活性的多肽,与未经酶解的山杏整仁相比,其保健活性显著提高。     

Optimization of enzymatic hydrolysis of Alaska pollock frame for preparing protein hydrolysates with low-bitterness

To obtain hydrolysates with high nitrogen recovery (NR) and low-bitterness, Alaska pollock frame (APF) was treated by high-pressure cooking at 120 °C for 30 min and hydrolyzed with ten different commercial proteases. MEAP (Mixed enzymes for animal proteolysis) hydrolysates exhibited the best characteristics (high NR and low bitter taste), which had high content of oligopeptides with molecular mass lower than 1355 Da. The optimum hydrolysis conditions using MEAP were determined as follows: temperature 45 °C, hydrolysis time 300 min, enzyme to substrate ratio (E/S) of 1.2 g/100 g, liquid-solid ratio 6:1, and initial pH 8.0. The NR and DH (degree of hydrolysis) of the hydrolysates were 76.89% and 18.09%, whereas the bitterness value was lower than that of 0.1 g/L tea alkaloid. The essential amino acid chemical scores (CS) were greater than 0.8 (0.8-1.4) in pollock frame hydrolysates (PFH) which exhibited high nutritional value. It showed that APF and PFH as high-quality protein source may have a wide application.     

响应面法优化酶法制备驴血红蛋白源二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽

食源性二肽基肽酶Ⅳ(dipeptidyl peptidase Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制活性肽成为近年来健康产品研究的方向之一.本研究以驴血红蛋白为原料,采用计算机模拟蛋白水解方法筛选最佳蛋白酶,研究酶解时间、温度和加酶量对蛋白水解度(degree of hydrolysis,DH)和酶解产物DPP-Ⅳ抑制率的影响,响应面优...     

木瓜蛋白酶制备草鱼鳞胶原肽的工艺优化及产物特性分析

以草鱼鱼鳞为对象,研究木瓜蛋白酶酶解条件对鱼鳞蛋白酶解产物水解度和氮收率的影响,以获得较高氮收率及水解度的鱼鳞胶原肽。结果表明,水解温度、起始pH值、底物浓度和加酶量对木瓜蛋白酶水解产物的水解度和氮收率都有显著影响(p<0.05);木瓜蛋白酶在底物浓度为5%、起始pH值为5.0、加酶量为3000 U/g蛋白、水解温度为60℃条件下水解鱼鳞120 min,鱼鳞水解产物的水解度和氮收率都较好,其水解度为12.68%、氮收率为89.42%;且水解产物在酸性、中性及碱性条件下的溶解性均在97%以上,分子量呈连续分布,主要分布在200～ 5000 u之间。     

鸡蛋清卵白蛋白酶解工艺优化及其结构性质

研究鸡蛋清卵白蛋白的酶解工艺及其结构性质,以水解度为指标,确定最佳酶源为碱性蛋白酶,其水解度为26.55%,显著优于其他蛋白酶（P＜0.05）。以碱性蛋白酶酶解鸡蛋清卵白蛋白,采用单因素和五元二次正交旋转试验研究酶解工艺;针对酶解前后卵白蛋白的功能特性进行分析,并采用紫外扫描、傅里叶红外变换光谱、差示扫描量热针对卵白蛋白及其酶解产物进行结构表征。结果发现,碱性蛋白酶酶解鸡蛋清卵白蛋白最佳工艺条件为反应温度52.5 ℃、反应时间5 h、pH 8.25、酶用量5 500 U/g、底物添加量5%,此条件下水解度为27.88%。酶解后产物表面巯基含量降低了3.6 mol/（L·g）,溶解度大幅度提高,起泡性降低了18.18%,泡沫稳定性降低了20.24%,乳化活性指数升高了13.56 m2/g,乳化稳定性提高了10.46%。同时,酶解后的卵白蛋白肽链发生了裂解,有序的二级结构被破坏,暴露出更多氨基酸残基,α-螺旋略有减少,β-转角相应增加,亲水基团也相应的增加。     

Characterization of hydrolysates produced by mild-acid treatment and enzymatic hydrolysis of defatted soybean flour

Acid (0.05–0.2 N HCl) pre-treatments and subsequent enzymatic hydrolysis (Alcalase™ and Flavourzyme™) of defatted soybean flour (DSF) were performed under aseptic conditions. The acid pre-treatment facilitated enzymatic hydrolysis of the protein in DSF by increasing the nitrogen solubility index. Protein was hydrolyzed primarily during the first 5 h of enzymatic hydrolysis. The degree of hydrolysis and α-amino nitrogen contents of the hydrolysates increased after acid pretreatment. The average peptide chain lengths were estimated at 7∼8 amino acid units after 3 h hydrolyzation by Alcalase, and 3–5 amino acid units after 21 h by Flavourzyme/Alcalase mixture. Gel permeation chromatography provided molecular size distribution to determine the molecular weights of the corresponding hydrolysates. At the end of 24 h enzymatic hydrolysis, the amounts of free amino acid, dipeptide and tripeptide accounted for almost half of the proteins in the hydrolysate, while the oligopeptides constituted 40%.     

扇贝加工废液多糖提取优化及生物活性的研究

目的优化扇贝加工废液多糖的提取条件,并研究其生物活性。方法以多糖纯度为指标,对比胃蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶及碱性蛋白酶对扇贝加工废液中多糖酶解的效果。在单因素试验的基础上,采用正交试验法对扇贝加工废液多糖提取工艺进行优化。结果木瓜蛋白酶为最佳反应酶,最佳酶解条件为酶解时间4 h,酶解pH 6,酶解温度60℃,加酶量为2.5%,此条件下提取物多糖纯度为62.23%。采用膜分离技术,对所提取多糖进一步纯化,得到纯度为84.75%的扇贝废弃液多糖。在多糖浓度为8mg/mL时,废弃液多糖对-OH的清除能力达到87.53%,对DPPH自由基的清除能力达到53.36%;在废弃液多糖浓度为800μmol/L时,巨噬细胞NO生成量达到了13.05μmol/L。结论扇贝蒸煮液可提取得到较高纯度多糖,并具有较强的抗氧化作用及良好的免疫调节作用。