响应面法优化大豆分离蛋白提取及复合酶解制备活性肽

用碱提酸沉法从大豆中提取大豆分离蛋白,并经单因素及响应面优化法确定大豆分离蛋白最佳提取工艺为碱提时间60 min、碱提温度60℃、碱提pH值11.0、酸沉pH值5.0.使用最佳提取工艺提取大豆分离蛋白提取率为29.25％.用胰蛋白酶、糜蛋白酶分别酶解大豆蛋白产生的肽均具有抑菌活性,而采用胰蛋白酶与糜蛋白酶复合酶解大豆分...     

超声辅助复合酶预处理提取黑豆蛋白工艺研究

在碱提酸沉工艺基础上,将超声辅助复合酶预处理应用于黑豆蛋白提取中。通过混料设计法对复合酶配比进行优化,确定超声辅助复合酶预处理最优工艺为:超声功率300 W,纤维素酶添加量0.7%,半纤维素酶添加量0.7%,果胶酶添加量1.6%,酶解温度50℃,酶解pH5,酶解时间30 min。然后再经碱提酸沉法提取黑豆蛋白,蛋白质提取率为91.28%,纯度达80.64%,且高于传统碱提酸沉法提取的黑豆蛋白,同时缩短了提取时间,提高了提取效率。     

响应面法优化薏仁米糠蛋白碱提工艺的研究

该试验以贵州兴仁县产纯种小薏仁米米糠作为研究对象,采用碱提酸沉法提取薏仁米糠中的蛋白质。考察料液比、碱提温度、碱提时间、碱提pH对蛋白提取率的影响。在单因素试验基础上,采用4因素3水平响应面优化试验,并对试验数据进行多元回归拟合分析,建立各因素对提取率的二次多项式回归预测模型,确定最佳碱提工艺参数。结果表明,碱提酸沉法提取薏仁米糠蛋白最佳提取工艺为料液比1∶22（g∶mL）,碱提温度45.5 ℃,碱提时间3 h,碱提pH9.6,平均蛋白提取率为78.9%。     

碱提酸沉法提取薏仁碎米中蛋白质的研究

采用贵州兴仁县产纯种小薏仁碎米作为研究对象,采用碱提酸沉法提取薏仁碎米中的蛋白质。通过单因素试验,确定各个因 素对薏仁碎米蛋白提取率的影响,然后用响应面法优化薏仁碎米蛋白的提取工艺,确定碱提酸沉法提取蛋白质的最佳工艺条件为 料液比1∶12（g∶mL）、碱提pH 10.1、碱提温度47.2 ℃、碱提时间4 h,理论蛋白提取率最大41.11%,验证此条件下薏仁碎米蛋白平均提取 率为38.75%,蛋白纯度为57.38%。     

灵芝多糖的复合酶法提取工艺优化

以灵芝子实体为原料,采用复合酶法(纤维素酶、半纤维素酶、木瓜蛋白酶)提取灵芝多糖,并分析工艺条件对多糖提取率的影响。在正交试验确定复合酶比例的基础上,采用响应面法对复合酶法提取灵芝多糖的提取条件进行了优化,得到最优工艺条件。研究结果表明,复合酶比例为:纤维素酶3.5%、半纤维素酶4.0%、木瓜蛋白酶3.0%;最佳酶解提取条件为:酶解处理pH值、温度和时间分别为5.70、50℃和81 min,在此条件下灵芝多糖的提取率为3.73%。     

响应面法优化云南野生玛卡多糖的提取工艺

以多糖提取率为考察指标,用水提醇沉法,在单因素试验基础上,响应面优化玛卡多糖的最佳提取工艺。确定玛卡多糖的最佳提取工艺为:料液比1:60 g/mL,提取温度90℃,提取时间9.5 h,提取次数5次,多糖提取率为39.78%±0.89%。     

酶解谷壳制备阿魏酸的工艺优化

目的:利用响应面优化谷壳中阿魏酸的提取工艺。方法:采用木聚糖酶酶解谷壳提取阿魏酸,采用HPLC法对阿魏酸提取率进行测定。在单因素试验基础上,利用Design Expert数据处理软件进行响应面实验设计,确定最佳提取工艺。结果:木聚糖酶可有效降解谷壳得到阿魏酸。响应面优化得到的最佳提取工艺为加酶量1.2%、酶解时间31min、酶解温度48℃,酶解pH4.8,该条件下阿魏酸提取率为8.04mg/g结论:利用响应面分析方法对谷壳中阿魏酸的提取工艺进行优化,可获得最佳工艺参数。     

响应面法优化生物酶法提取滇红茶多糖工艺技术研究

以云南滇红茶为试验材料，采用响应面法优化生物酶法探讨其茶多糖提取工艺。在复合酶添加量、复合酶种类、复合酶比值、酶解时间、酶解温度、料液比各因素的单因素试验基础上，以茶多糖提取率为响应值，通过Box-Behnken中心组合优化法优化提取工艺参数，选取提取时间、复合酶添加量和料液比构建三因素三水平响应面优化试验。结果表明，滇红茶多糖的最佳工艺条件：复合酶种类为果胶酶和纤维素酶（质量比2∶1），复合酶添加量为0.90%（以底物质量计算），提取时间为3.0 h，提取温度45℃，料液比为1∶20(g/mL)。该条件下茶多糖提取率为4.22%±0.17%，与模型预测相符，可用于复合酶法提取滇红茶多糖。     

超声波辅助酶法提取北五味子多糖工艺研究

建立了超声波辅助复合酶(纤维素酶/蛋白酶/果胶酶=1∶1∶1)提取北五味子多糖的方法。以多糖的提取率为研究指标,通过设计正交试验和响应面优化试验,对超声波辅助复合酶法提取北五味子多糖的工艺进行了优化。确定最佳工艺条件为酶解温度45℃,缓冲液pH 4.6,复合酶用量2%,酶解时间为2.0h,超声波功率166W,萃取温度56℃,萃取时间39 min。在此最佳条件下,北五味子多糖提取量达到105.36mg/g。超声波辅助复合酶法应用到多糖的提取领域,节省了时间,降低了溶剂消耗,且明显提高了多糖的提取率,该法操作方便,简单易行,为北五味子多糖工业化生产提取提供了理论依据。     

响应面法优化复合酶酶解制备可口革囊星虫胶原蛋白抗氧化肽工艺研究

以可口革囊星虫为原料提取胶原蛋白,以总抗氧化能力和超氧阴离子清除率为考察指标,通过单因素实验和响应面法优化复合酶酶解制备可口革囊星虫胶原蛋白抗氧化肽工艺条件。结果表明,选用酶筛选试验中多肽抗氧化活性较高的木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶和酸性蛋白酶进行单酶和复合酶试验,最佳方案确定为木瓜蛋白酶与中性蛋白酶复合酶解。在单因素实验基础上确定复合酶添加量（U/g）、酶解温度（℃）、酶解pH、酶解时间（h）为自变量,通过响应面法优化并参考实际因素,确定复合酶酶解的最优条件是:复合酶添加量8135 U/g、酶解温度51.6 ℃、酶解pH6.4、酶解时间4.2 h,在此条件下酶解制备的胶原肽总抗氧化能力为(1.333±0.021）μmol/mL,超氧阴离子清除率为78.75%±0.94%。     

响应面法优化猪硫酸软骨素的提取工艺

以猪软骨为原料,采用复合酶法提取硫酸软骨素,为了优化硫酸软骨素的提取工艺,采Plackett-Burma设计和响应面分析法,研究不同的提取条件对猪硫酸软骨素提取率的影响,并建立了提取条件与提取率之间的数学模型,确定适宜的硫酸软骨素提取条件,并初步分析了其结构。结果表明:(1)根据Plackett-Burman设计,温度对硫酸软骨素的提取率影响最为显著,其次为酶加量、pH;(2)通过响应面交互作用分析与优化,确定猪硫酸软骨素酶解的适宜条件为温度57.00℃,酶加量为1.00%,pH为8.50,此时硫酸软骨素的提取率提高至58.12%,纯度为92.32%。     

酶解法从猪气管中提取硫酸软骨素

以猪气管软骨为原料,利用二次酶解法提取硫酸软骨素,设计正交试验对酶解工艺进行优化,并测定了硫酸软骨素的纯度、含氮量、含氯化物量等主要指标.结果表明:最佳工艺组合条件为温度40℃,酶质量分数1.5％,提取时间2.5h,在此条件下平均得率达到10.98％,纯度达到85.22％.该工艺简便易行,有望为工业生产提供参考.     

罗非鱼头中硫酸软骨素提取的工艺优化

目的：为罗非鱼头生产硫酸软骨素提供技术参考。方法：以罗非鱼头为原料,采用稀碱-酶解工艺,以产率和纯度为考察指标,研究了碱提取和蛋白酶水解的最佳工艺条件。结果：碱提取时碱浓度1%、时间7h、温度50℃、料液比1:5(m/V);酶解时pH7.0、加酶量1.5%、温度50℃、时间3h时有最高的产率、纯度及总得率。结论：在该条件下,产率为3.583%,纯度为81.28%,总得率为2.913%。     

HPLC-MS/MS定性分析大菱鲆不同组织中多糖成分

为开发大菱鲆功能性多糖成分,采用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶法结合碱浸提法对大菱鲆鱼骨、鱼肉、鱼皮3个部位的多糖进行提取与检测,同时将所得多糖使用三氟乙酸水解、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化,利用高效液相色谱-串联质谱对水解产物中的二糖衍生物片段进行分析。结果表明,采用先酶后碱法提取获得鱼骨粗多糖中性糖含量最高为6.79 mg/g干质量,鱼骨硫酸多糖含量最高为3.81 mg/g干质量。通过与标准品的保留时间和质谱数据对比,确定大菱鲆鱼骨中含糖醛酸多糖(uronic acid-containing polysaccharides,UACPs)主要为硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS);鱼皮中主要为透明质酸(hyaluronic acid,HA)和CS;鱼肉UACPs主要有HA、CS、肝素、Glc A(1→2)-Man聚糖以及一种由糖醛酸与己糖连接的重复片段构成的未知多糖UACP1。     

超声波辅助法提取硫酸软骨素的工艺研究

以猪喉管为原料提取硫酸软骨素,使用超声波辅助手段进行碱处理,浸出液再用木瓜蛋白酶进一步去除蛋白质。结果表明：最佳工艺条件为超声波处理时间139min、超声功率491W、木瓜蛋白酶酶解pH6.8、酶加入量1.3:1000(mg/mL)、酶解温度45℃、酶解时间1h,该工艺制备得到硫酸软骨素为白色粉末得率达23.15%,澄清度0.038,蛋白质含量2.48%,氨基己糖含量30.52%,硫酸软骨素纯度86.06%,水分6.32%,pH6.7,各项指标完全符合国家相关标准要求。     

响应面试验优化果胶酶辅助提取锁阳原花青素工艺

利用单因素试验和响应面法优化果胶酶辅助乙醇提取锁阳原花青素工艺。通过单因素试验筛选出酶解时间、pH值、酶解温度、乙醇体积分数作为影响因素,以锁阳原花青素提取得率为响应值进行Box-Behnken试验设计,建立锁阳原花青素提取得率的二次回归方程,得到最优提取条件。响应面法分析结果表明锁阳原花青素的最佳提取工艺参数为：在果胶酶质量分数为1%时,酶解时间34 min、pH 4.8、酶解温度52 ℃、用体积分数70%乙醇溶液浸提1.5 h。该条件下,锁阳原花青素提取率达14.30%。     

酶法辅助聚二乙醇-200提取金银花叶中绿原酸的工艺优化

为了优化酶法辅助聚二乙醇（PEG）-200提取金银花叶中绿原酸的工艺,利用单因素试验确定PEG-200体积分数、料液比、酶解时间等关键影响因素,以绿原酸提取率为响应值进行响应面优化分析。结果表明,金银花叶中绿原酸用纤维素酶辅助PEG-200提取的最佳条件为纤维素酶添加量为2%,料液比1∶27（g∶mL）,PEG-200体积分数50%,pH 4,55 ℃酶解2.0 h,提取温度90 ℃,提取时间15 min,在该条件下,绿原酸提取率为6.59%。该工艺环境友好、条件温和、提取效率高,可用于工业化提取金银花叶中绿原酸。     

响应面试验优化纤维素酶辅助提取莲子钻芯粉中甲基莲心碱工艺

以莲子钻芯粉为原料,采用纤维素酶辅助提取莲子钻芯粉中的甲基莲心碱,在单因素试验的基础上,选择加酶量、酶解温度、酶解时间、酶解pH值为自变量,以甲基莲心碱提取量为响应值,通过Box-Behnken响应面设计优选最佳工艺条件。结果表明：采用纤维素酶辅助提取莲子钻芯粉中甲基莲心碱,最佳提取工艺条件为加酶量3.1%（质量分数）、酶解时间1.7 h、酶解pH 4.8、酶解温度50 ℃。该工艺条件下得到的甲基莲心碱提取量为（7.02±0.22）mg/g,高于传统乙醇法（4.03±0.17）mg/g,提取量提高了71.9%。采用纤维素酶辅助提取法操作简单,条件温和,有效地提高了莲子钻芯粉的利用率。     

酶法预处理硫酸软骨素原料除杂工艺优化

选用胃蛋白酶处理牛鼻软骨,研究酶法预处理硫酸软骨素原料的除杂工艺。通过单因素和正交试验对酶解工艺进行优化,确定的最佳条件：酶解时间8h、酶解温度35℃、加酶量0.2%、pH2.5和料液比1:5(g/mL),在此条件下软骨得率、硫酸软骨素得率和蛋白质去除率,分别达到85.12%、28.98%和10.3%。     

酶解辅助超声波法提取五味子乙素

以五味子干果为原料,采用酶解法辅助超声波技术提取其中的五味子乙素。单因素试验结果表明,酶解温度、酶解时间以及酶用量对乙素得率的影响较大。通过响应面回归分析,得到酶解辅助超声波提取乙素的优化工艺条件为酶解温度52.89℃、提取时间4.04h、酶用量0.96%。在此最优条件下,五味子乙素的得率为0.262%。