5''''-磷酸二酯酶的研究进展

5'-磷酸二酯酶是水解磷酸二酯键生5'-磷酸物质的酶,用于水解核酸得到5'-核苷酸,随着核苷酸产业的发展,该酶的研究和应用也愈发显得重要起来,重点论述了在5'-核苷酸生产中常用的5'-磷酸二酯酶的作用方式、酶的性质和酶的制备及应用.     

提高酵母抽提物品质研究

以啤酒废酵母为原料.研究了5-磷酸二酯酶提取及提高酵母抽提物品质的最适合条件,结果表明:从麦芽根中浸提5'-磷酸二酯酶的最佳条件为加水比9:1、浸提温度5℃、浸提24h,过滤得到的粗酶液酶活力迭143.5 U/mL.在酵母自溶液中添加5'-磷酸二酯酶液可显著提高酵母抽提液中5'一核苷酸含量,适宜水解条件为:添加5.00%(v/w)的酶液,在pH7.0、60℃-F作用2h,酵母抽提液中5'-核苷酸含重达8.06mg/mL,比不添加的3.25mg/mL提高1.48倍.     

5＇-磷酸二酯酶的应用与进展

5’-磷酸二酯酶是一种能将单链DNA和RNA水解为5’-核苷酸的磷酸二酯酶，也是酶法生产5’-核苷酸的主要工业用酶。文章对5’-磷酸二酯酶的来源、制备方法、应用及研究进展进行了综述。     

5''''-磷酸二酯酶的提取

主要研究了桔青霉与麦芽根提取5′-磷酸二酯酶的方法,并对二者进行了比较.用快速登高法确定了麦芽根提取5′-磷酸二酯酶的最优区域.在此区域内浸提的5′-磷酸二酯酶酶活力可达300U/ml.酶液经超滤浓缩、冷冻干燥可制备得率较高的粗酶粉.     

5′-磷酸二酯酶的研究进展

5′-磷酸二酯酶是水解磷酸二酯键生5′-磷酸物质的酶，用于水解核酸得到5′-核苷酸，随着核苷酸产业的发展，该酶的研究和应用也愈发显得重要起来，重点论述了在5′-核苷酸生产中常用的5′-磷酸二酯酶的作用方式、酶的性质和酶的制备及应用。     

麦芽根中5'-磷酸二酯酶的提取及制备

主要研究了麦芽根中 5 ' 磷酸二酯酶的提取方法。采用细度 40目的原料 ,通过正交试验确定最佳提取工艺为 :加水 6倍 ,pH5 .0 ,在 4℃条件下浸提 2 0h后 5′ 磷酸二酯酶活力达到 1 6 0u/mL。不同浸提液种类、浓度、添加无机盐皆对酶活有影响 ,加入纤维素酶、果胶酶、Viscozyme对麦芽根破壁具有协同作用。酶液经超滤浓缩可制备得率较高的粗酶粉     

紫外光度法测定增鲜味精中呈味核苷酸二钠的含量

5'-肌苷酸二钠(Ionosine-5'-monophosphate,简称IMP)和5'-鸟苷酸二钠(Guanosine-5'-onophosphate,简称GMP)在250nm处有较强吸收,运用紫外分光光度法测定增鲜味精中呈味核苷酸二钠(I+G)的含量.当HCl浓度在1mol/L以下,样品浓度为0.01～0.25g/L时,标准曲线在250nm处的相关系数达到0.999,平均回收率为97.4%,RSD为3.59%.结果表明,该法是一种简单、方便、快捷的测定方法.     

毛细管电泳法测定增味剂中的5'-肌苷酸二钠和5'-鸟苷酸二钠的含量

建立了同时测定5'-肌苷酸二钠和5'-鸟苷酸二钠的毛细管电泳法,研究了缓冲溶液种类、浓度、pH、电压等对测定的影响,对测定条件进行了优化.在波长250nm,分离电压15kV,5mmol·L-1磷酸二氢钠-5mmol·L-1硼酸-5%乙醇缓冲溶液(pH=10.3)中,增味剂中的5'-肌苷酸二钠和5'-鸟苷酸二钠在5min内得到了较好的分离,浓度与峰面积之间具有良好的线性关系.     

香菇柄提取液鲜味成分的酶解增效工艺研究

为了进一步增强鲜味,采用5’-磷酸二酯酶和中性蛋白酶双酶酶解香菇柄提取液。通过单因素实验和正交实验优化5’-磷酸二酯酶酶解的最佳工艺条件,并在此基础上与中性蛋白酶联合,通过正交实验优化双酶酶解香菇柄提取液最佳工艺条件。结果表明,5’-磷酸二酯酶酶解的最佳工艺条件为加酶量0.3%、酶解pH5.0、酶解时间2 h、酶解温度60℃,在此条件下5’-核苷酸含量为0.41 mg/mL。复合酶法最佳工艺条件为5’-磷酸二酯酶加酶量0.3%、中性蛋白酶加酶量0.8%,酶解pH6.5、酶解温度50℃、酶解时间2 h,在此条件下测得5’-核苷酸含量为0.42 mg/mL,氨基态氮含量为0.45 mg/mL。通过以上结果,在不显著降低呈现滋味成分含量的情况下,复合酶解可比单酶分步酶解(5'-磷酸二酯酶2 h、中性蛋白酶3 h)节约一半时间以上。     

双孢蘑菇中核苷酸的测定及酶解条件的研究

建立了利用高效液相色谱法(HPLC)分离测定双孢蘑菇核酸提取液中的四种核苷酸(胞苷酸、尿苷酸、鸟苷酸、腺苷酸)的方法。采用紫外检测器,波长为260nm;色谱柱为EclipseXDB-C18,柱温为25℃,流动相为:超纯水:甲醇:冰乙酸:四丁基氢氧化铵(TBAOH,10%)=894·5:100:5:0·5;流速为1·0mL/min;四种核苷酸标准曲线相关系数r均达到0·999。利用5′-磷酸二酯酶酶解双孢蘑菇中提取制得的核酸制品,为获得酶解的最适工艺条件,通过单因素实验,在底物浓度为2mg/mL的条件下,对其酶解条件:时间、温度、pH和酶底比进行了初步研究,研究结果表明酶解的最适工艺条件:时间为3h、温度为40℃、pH为5·8、酶底比为1300U/g核酸,在该条件下核酸酶解率为68·1%。