臭氧对葡萄灰霉病的抑制效果

研究不同臭氧处理方式对离体及接种在活体葡萄上的灰霉菌的抑制作用,为降低采后葡萄贮藏过程中灰霉病带来的损失提供理论依据。在(20±1)℃条件下用不同剂量的臭氧(0、30、60、90μL/L)对离体灰霉菌分别处理不同时间(5、10、15 min),通过测定菌丝生长长度、孢子形成抑制率、孢子细胞膜完整性及扫描电镜观察来探究臭氧对其抑制效果。用上述4种剂量的臭氧分别对接种了灰霉菌的‘红地球’葡萄处理15 min后(20±1)℃条件下存放5 d。通过测定发病率、病斑直径及相关酶活性来观察臭氧对葡萄灰霉病的控制效果。结果表明:在离体实验中,与对照相比,不同剂量的臭氧对离体灰霉菌处理不同时间后,灰霉菌菌丝的生长均受到了不同程度抑制,随贮藏时间延长抑制效果逐渐减弱;灰霉菌的产孢子率显著下降,部分孢子的细胞膜完整性被破坏,臭氧剂量越高、处理时间越长,效果越好。在接种了灰霉菌的活体实验中,与对照组相比,用60μL/L和90μL/L剂量臭氧处理接种灰霉菌的葡萄果实后,灰霉菌在果实上的生长明显受到抑制;臭氧处理可以使果实丙二醛含量积累减慢,维持较高的抗氧化酶活性。综合分析,臭氧通过抑制灰霉菌菌丝在葡萄果实上的生长和诱导葡萄果实提高抗性来抵抗灰霉菌的侵染,采用90μL/L剂量臭氧处理15 min对离体条件下和接种在‘红地球’葡萄活体上的灰霉菌抑制效果均为最好。     

葡萄灰霉病抗性快速鉴定技术与应用

以不同抗性的3个葡萄品种‘巨峰’‘夏黑’‘金手指’的叶片为试材,对灰葡萄孢菌接种温度、湿度和时长等发病条件进行研究,形成了葡萄灰霉病抗性离体叶片快速鉴定方法,并应用该法对‘夏黑’‘巨峰’‘醉金香’‘阳光玫瑰’和申沪系列等在内的18个葡萄品种和杂交株系的灰霉病抗性进行了鉴定和比较。研究结果表明,温度20℃、湿度90%是灰葡萄孢菌的最佳侵染条件,在此条件下接种2 d后的病情指标可以较好地区分18个葡萄品种(系)对灰霉病的抗性差异。‘沪22’对灰葡萄孢菌显示高抗,而‘沪21’和‘沪27’显示高感。     

SO_2保鲜剂对玫瑰香葡萄灰霉菌的抑制作用

以玫瑰香葡萄果实为材料,分析了SO_2对果实表面微生物活性的影响,并对SO_2的抑菌作用进行了体外实验,以寻求葡萄果实采后保鲜的低浓度SO_2处理方式。研究发现:SO_2可降低葡萄果实表面微生物总量,抑制灰霉菌;SO_2类保鲜剂焦亚硫酸钠能抑制灰霉菌的孢子萌发和菌丝生长,抑菌作用随焦亚硫酸钠浓度升高和作用时间延长而增强,低温能增强抑菌作用;浓度为300和600 mg/L的焦亚硫酸钠,在p H3.00时抑菌强度均高于p H4.00;用300 mg/L焦亚硫酸钠孵育灰霉菌孢子1 h后,4℃培养45 d无可见菌丝。结果表明,一定剂量的SO_2类保鲜剂有效抑制了葡萄果实主要致病菌灰霉菌的发生,采用较低p H、低浓度焦亚硫酸钠处理葡萄果实可对采后贮藏保鲜发挥作用。     

CPPU和1-MCP处理对采后猕猴桃抗灰霉病的影响

为评价CPPU和1-MCP处理对采后猕猴桃抗灰霉病的影响,以陕西主产的"秦美"猕猴桃为试材,对照组、采前膨大剂(CPPU)处理、采后1-甲基环丙烯(1-MCP)处理的猕猴桃果实在(0±1)℃贮藏45 d后,取出,在常温(20±1)℃条件下放置1 d回温后接种灰霉菌,通过测定接种和未接种果内总多酚、单宁、类黄酮含量及POD酶活性变化评价其对灰霉病的抗性。结果表明,猕猴桃果实受机械损伤或灰霉菌侵染时:1-MCP处理果实总多酚含量和POD酶活性增幅显著高于对照组接种果,能迅速产生类黄酮,单宁含量在2 d内急剧上升,且上升幅度显著高于对照组接种果,1-MCP处理能提高猕猴桃果实贮藏期间对灰霉病的抗病性;接种灰霉菌2 d内,CPPU处理果实单宁含量上升幅度比对照组高,而POD酶活性平均值比对照组果低39.5%,其它指标无明显差别,CPPU处理对猕猴桃果实贮藏期间灰霉病抗性无明显影响。     

苹果采后灰霉病抗性生理差异分析

以‘秦冠’、‘富士’苹果果实为材料,对损伤接种灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)后果肉组织抗病相关物质及酶活力变化进行分析测定,揭示苹果采后灰霉病抗性差异的生理机制。结果表明:接种B.cinerea后,两种果实的发病率和病斑直径存在差异,其中‘秦冠’苹果发病率和病斑直径显著小于‘富士’苹果(P0.05);进一步研究发现抗病品种果肉组织中苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、多酚氧化酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶活力均高于感病品种,从而促进抗病品种果肉中类黄酮和木质素的积累,降低膜脂过氧化程度,减少丙二醛的产生,提高了果实的抗病性,但总酚含量‘秦冠’苹果低于‘富士’苹果。研究结果可以为苹果灰霉病抗性鉴定和筛选抗灰霉病苹果资源提供理论指导。     

2,4-表油菜素内酯对葡萄果实采后灰霉病的抑制作用机理

为研究2,4-表油菜素内酯（2,4-epibrassionolide,EBR）处理对‘巨峰’葡萄果实采后灰霉病的抑制效果及作用机制,将葡萄果实经5 μmol/L EBR溶液处理12 h后刺伤接种灰葡萄孢（Botrytis cinerea）病原菌,然后置于25 ℃下贮藏60 h。结果显示：EBR处理有效抑制了葡萄采后灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与单一接种病原菌和EBR处理相比,先用EBR处理后接种B. cinerea葡萄果实展现出更强、更快的抗病反应,表现为几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和苯丙氨酸解氨酶等抗病相关酶活力及总酚含量显著提高（P＜0.05）,H2O2积累及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶活力提高,同时VvCHI、VvGNS和VvPAL-like抗病基因表达显著增加（P＜0.05）;体外实验发现,EBR处理可显著抑制B. cinerea孢子的萌发,但对芽管伸长长度没有显著影响。结论：EBR处理主要是通过敏化反应机制诱导提高葡萄果实的抗病性,从而减轻灰霉病的发生。     

五个玫瑰香味葡萄品种在兰州地区的栽培表现

将5个具有玫瑰香味的葡萄品种‘贵妃玫瑰’‘爱神玫瑰’‘巨玫瑰’‘醉人香’和‘醉金香’引入兰州进行试栽,通过观察和记载它们的物候期、果实经济性状、生长结果习性、植物学性状和抗病性,测定糖、酸等指标。结果表明,5个品种在兰州地区栽培适应性较强,穗形整齐、品质优良、香味浓郁,深受消费者青睐;但也具有各自的缺陷,‘贵妃玫瑰’表现果穗较紧;‘爱神玫瑰’有小青粒现象;‘醉人香’有生理落果现象,果实不耐贮运;‘醉金香’有生理落果现象,果穗较疏松。因此,各品种在兰州地区种植需加强花果管理,才能获得高质量的果品。     

酸性硫酸钙对红地球葡萄采后灰霉病的抑制

灰霉病是引起葡萄采后贮藏运输过程中的主要病害之一,为了探究酸性硫酸钙(ACS)对鲜食葡萄采后灰霉病的抑制及品质的影响。以红地球葡萄为试材,采用ACS(p H=5.45)喷洒处理20 s,在8±2℃条件下贮藏,分析ACS处理对果实灰霉病(Botrytis cinerea,B. cinerea)病斑面积、发病率和菌落直径的抑制效果;测定果实硬度、失重率、可溶性固形物、可滴定酸和电导率的变化,研究ACS处理对葡萄采后灰霉病抑制作用和品质参数的影响。结果表明,ACS处理能够显著抑制B. cinerea的生长,在贮藏期15 d时,病斑面积、发病率和菌落直径显著低于对照处理(p0.05),分别降低了67.02%、56.55%、98.16%,抑菌率达到96.06%。ACS处理能显著降低损伤接种灰霉病的病斑面积和发病率,在体外培养时对灰霉病发生也有显著的抑制作用。ACS处理能降低葡萄果实失重率,保持果实硬度,抑制果实可溶性固形物含量的下降,维持葡萄采后品质。ACS作为FDA和USDA认证的一种新型高效杀菌防腐剂,为鲜食葡萄采后保鲜技术的研究提供了新的方法。     

纳他霉素对葡萄采后灰霉病菌的毒力及其防腐保鲜效果

以常用食品防腐剂山梨酸钾为对照研究了纳他霉素对葡萄采后灰霉菌的抑制毒力以及防腐保鲜效果。通过测定不同浓度的抑菌液对灰霉菌菌丝生长的抑制活性,以确定其抑制毒力。通过采前浸果处理,分别从感官指标、内在品质和代谢生理三方面研究纳他霉素对葡萄采后灰霉病的抑制效果。结果表明:纳他霉素抑菌液对葡萄采后灰霉菌的抑菌中浓度值(EC50=433.96 mg/L)明显小于山梨酸钾对照防腐液(EC50=5 753.65 mg/L);与对照相比,纳他霉素采前处理可有效抑制葡萄果实霉烂率和果梗褐变指数的增加,并较好的保持果实中可溶性固形物、可滴定酸和Vc含量,明显抑制贮藏后期果粒呼吸强度、果实质膜透性以及MDA含量的增加。综上,纳他霉素对葡萄采后灰霉菌的生长具有非常明显的抑制毒力,在鲜食葡萄的采后生物保鲜领域具有较好的应用前景。     

β-氨基丁酸抑制草莓低温贮藏过程中灰霉病的效果及其机理

以‘红颜’草莓为实验材料,研究β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)对草莓果实采后贮藏在低温((5±1)℃)条件下灰霉病的抑制效果及相关机理。草莓果实经过20 mmol/L的BABA处理后接种灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)孢子,然后在(5±1)℃的条件下贮藏12 d,结果发现BABA显著抑制了灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与对照组相比,处理组几丁质酶(chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)的活力分别提高了9.2%和54.9%,多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)和纤维素酶(cellulose,Cel)的活力分别降低了29.3%和24.4%,同时,BABA提高了FaCHI和FaGLU基因的表达,抑制了FaPG和FaCel基因的表达;此外,体外实验的结果发现,BABA能够破坏灰葡萄孢霉孢子的质膜完整性,导致了孢子内部可溶性蛋白质和可溶性糖的泄漏。结果表明,BABA通过诱导抗病相关酶活力来提高抗病性、延缓果实软化并通过对病原菌的直接抑制作用减轻草莓果实采后灰霉病的发生。     

山梨酸盐与钙胁迫对甜樱桃灰霉病抗性的诱导作用

以‘秦樱1号’樱桃为试材,研究不同质量浓度山梨酸钾（1、3、5、7 g/L）、CaCl2（5、10、15、 20 g/L）处理对离体灰霉菌的抑制效果,通过菌丝生长抑制率、扫描电子显微镜观察芽管生长及孢子萌发抑制率 筛选出最佳处理质量浓度。结果表明：与对照组相比,山梨酸钾、CaCl2处理均能不同程度地抑制灰霉菌菌丝的生 长,抑制灰霉菌芽管的伸长,降低孢子的萌发率,抑制效果随质量浓度的升高逐渐加强,20 g/L CaCl2、5 g/L山梨 酸钾处理抑制效果最好。以无菌水为对照,用采前喷20 g/L CaCl2、采后5 g/L山梨酸钾处理及二者复合处理接种灰 霉菌的甜樱桃,在（23±1）℃下存放5 d,通过测定发病率、病斑直径及相关酶活力探究不同处理对甜樱桃灰霉病 的抑制效果。在活体接种实验中,与对照组相比,20 g/L CaCl2、5 g/L山梨酸钾单独及复合处理均能有效抑制接种 到甜樱桃果实上灰霉菌的生长,减缓病斑的扩展,CaCl2与山梨酸钾处理能显著抑制樱桃果实中MDA含量上升,诱 导果实合成与积累抗性相关酶（多酚氧化酶、过氧化物酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶）在接种1 d后或接种3 d后的 活力提高,以5 g/L山梨酸钾与20 g/L CaCl2复合处理抑制效果最好,该研究为降低由灰霉菌侵染引起的病害及采后 甜樱桃果实防腐保鲜提供了参考。     

根皮苷对苹果采后灰霉病的影响

为探究苹果特有酚类物质根皮苷对灰霉病的影响,以培养基体外接种灰霉菌确定抑菌效果,预实验筛选得 到活体实验的最佳质量浓度。以此质量浓度根皮苷溶液浸泡处理‘粉红女士’苹果20 min,诱导12 h,损伤接种灰 霉孢,定期统计发病情况并取样测定抗性相关指标,以清水浸泡为对照。结果表明：根皮苷可直接抑制灰霉菌的体 外生长,1.0 g/L的根皮苷处理可显著降低采后果实的发病率和抑制病斑直径的扩展（P＜0.05）,并诱导果肉苯丙 氨酸解氨酶、过氧化物酶和多酚氧化酶活力的升高,促进总酚、类黄酮和木质素的积累,同时降低了H2O2的含量, 果实抗性提高。结果可为根皮苷对采后病害抗性的机理研究提供理论依据。     

洋葱霍尔德氏菌对玫瑰香葡萄采后灰霉病的抑制活性

为研究生防菌洋葱霍尔德氏菌B-1的生防潜力,并为其生产性应用奠定基础,研究洋葱霍尔德氏菌B-1的生物量最大值的培养时间、浓度和发酵时间对玫瑰香葡萄采后病害的抑制效果。结果表明,在接种后24 h,拮抗菌B-1的抑菌效果最好,抑菌圈直径达2.81 cm。在液体培养基中,生防菌可有效抑制灰葡萄孢霉孢子萌发和芽管伸长,稀释5倍发酵液和发酵原液可完全抑制灰葡萄孢霉孢子萌发,稀释40倍发酵液孢子萌发率下降60.39%。在0,16℃和26℃温度条件下,拮抗菌均可显著降低葡萄采后自然腐烂率。菌株B-1不论是在离体条件还是在活体条件下,均有抑制灰葡萄孢霉的作用,能有效防治葡萄采后灰霉病的发生,是一株生防潜力较好的菌株。     

生防菌KD-16J的鉴定及其对番茄灰霉病的抑制作用

通过离体和活体筛选,确定一株生防菌KD-16J对果实灰霉病的抑制效果。经形态学鉴定、生理生化试验和内源转录间隔区序列分析鉴定,确定其为膜醭毕赤酵母菌(Pichia membranifaciens)属。在平板抑菌试验中发现,在105 CFU/mL~108 CFU/mL之间,酵母菌的应用浓度越高,对灰葡萄孢菌的抑制效果越好,1×108 CFU/mL的生防菌对灰葡萄孢菌菌丝生长的抑制率为85.53%,同时能够完全抑制孢子的萌发;显微镜观察发现与酵母菌共培养能够导致灰葡萄孢菌菌丝肿胀,内部物质泄漏。活体试验(番茄果实)结果表明,该菌株能够显著抑制番茄果实的自然发病率和有伤接种灰葡萄孢菌果实的灰霉病发病率,而且喷洒该菌的时间越早对果实灰霉病的抑制效果越好,当生防菌KD-16J先于灰霉菌36 h处理时,番茄果实的发病率仅为29.12%。     

不同物候期人工诱导葡萄果实日灼的相关研究

以4年生避雨栽培的‘阳光玫瑰’和‘巨玫瑰’葡萄为试材,对葡萄果实进行人工诱导日灼处理,研究不同物候期人工诱导日灼处理下两品种日灼发生情况及特点,以及不同发育期和不同日灼进程葡萄果实的总酚含量变化,探索葡萄果实日灼发生的表面阈值温度、敏感时期及日灼与果实总酚含量的关系。结果表明,在人工诱导日灼处理下‘阳光玫瑰’葡萄在E-L31～E-L33时期较容易发生日灼,在E-L33时期对日灼最敏感;‘巨玫瑰’葡萄在E-L31与E-L32时期较容易发生日灼,在E-L32时期对日灼最敏感。整个果实发育期‘阳光玫瑰’较‘巨玫瑰’葡萄更易发生日灼,两品种在日灼发生进程中果实总酚含量均在日灼诱导后有一次显著升高,‘阳光玫瑰’葡萄正常果中总酚含量在各个发育期均显著低于‘巨玫瑰’葡萄,表明果实总酚含量与日灼发生率有一定相关性。     

拮抗菌Burkholderia contaminans对玫瑰香葡萄采后灰霉病的抗性诱导

以玫瑰香葡萄为实验试材,研究洋葱霍尔德氏菌（Burkholderia contaminans B-1）对玫瑰香葡萄采后灰霉病的抗性诱导机理,对经拮抗菌处理贮藏后果实的腐烂率及其抗性相关物质进行测定。结果表明：拮抗菌B. contaminans B-1可有效降低玫瑰香葡萄采后腐烂率,与对照相比,果梗腐烂率降低69.58%,果肉腐烂指数降低63.93%。拮抗菌处理对果实苯丙烷代谢途径、活性氧代谢途径和其他抗性相关酶类活性均有影响。与对照相比,B. contaminans B-1处理可提高葡萄果实苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和多酚氧化酶（PPO）活性,促进过氧化氢（H2O2）含量积累,延缓过氧化氢酶（CAT）活性峰值出现的时间。此外,拮抗菌处理也可以诱导果实病程相关蛋白几丁质酶（CHI）和β-1,3葡聚糖酶（GLU）活性的上升。     

采前纳他霉素处理对玫瑰香葡萄货架期品质及生理的影响

以玫瑰香葡萄为试材,采用不同浓度的纳他霉素进行采前浸果处理,研究常温(25℃)货架期内葡萄的贮藏品质及生理的变化。结果表明,质量浓度为0.5g/L的纳他霉素可以抑制采后葡萄果粒和果梗的霉烂,显著降低失重率,提高好果率,保持葡萄果实硬度,维持其低水平的呼吸强度,延长葡萄贮藏寿命,提高葡萄贮藏品质和安全性。     

乙醇熏蒸对采后甜樱桃的保鲜效果

本研究利用从病害甜樱桃上分离的一株灰霉菌(Botrytis cinerea),选择0、250、500、1000 μL/L浓度的乙醇对灰霉菌分别进行体内、体外抑菌测试。同时,分析了经该熏蒸处理的新鲜甜樱桃于4℃贮藏期间的品质变化。研究发现,乙醇熏蒸可以有效降低甜樱桃果实灰霉病的发病率,抑制其菌丝的生长,且乙醇浓度越大,抑制效果越明显。乙醇熏蒸降低了甜樱桃果实的失重率、腐烂率及呼吸强度,维持了较高的硬度和可滴定酸的含量,降低了贮藏期间PPO活性,同时提高了POD活性并延迟了POD活性峰值的出现,结果表明,乙醇熏蒸对甜樱桃采后病害具有显著的抑制效果,500 μL/L的乙醇熏蒸处理可以有效保持甜樱桃的贮藏品质,有效延缓了果实贮藏期间的成熟与衰老。     

茉莉酸甲酯处理对采后葡萄果实酚酸合成和抗氧化活性的影响及其机理研究

以‘巨峰’葡萄果实(Vitis vinifera L.× V. labrusca L. cv. ‘Kyoho’)为试材,研究了10μmol/L茉莉酸甲酯(methyljasmonate,MeJA)熏蒸处理对采后葡萄果实在1℃贮藏期间酚酸含量和抗氧化活性的影响,并从苯丙烷类代谢角度分析了相关机理。结果显示：10μmol/L MeJA处理可显著抑制葡萄果实贮藏期间腐烂率和落粒率的上升,诱导苯丙烷类代谢关键酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸羟化酶(C4H)和查耳酮合成酶(CHS)活性的上升并延缓对香豆酰-CoA连接酶(4-CL)活性的下降,同时显著提高果实主要酚酸(没食子酸、咖啡酸、原儿茶酸、丁香酸和p-香豆酸)和总酚含量并维持了DPPH自由基清除率和总还原力。结果表明：MeJA可通过调控葡萄果实苯丙烷类代谢相关酶系的活性,从而有效诱导果实中酚酸的合成并维持果实贮藏期间抗氧化活性,最终提高了果实采后食用和营养品质。     

不同贮藏温度下李果实的品质比较

为探究‘蜂糖李’和‘空心李’适宜采后贮藏温度,将两种李果实贮藏于0、2、4 ℃下进行外观及内在相关品质指标测定。研究结果表明低温有助于维持李果实较高硬度、减弱呼吸作用从而维持品质;其中‘蜂糖李’在4 ℃下可溶性固形物迅速积累且呼吸速率飙升,颜色由绿转黄后失去商品价值,而0、2 ℃较好的抑制‘蜂糖李’呼吸速率延缓营养物质的消耗,但2 ℃下果实失重明显且贮藏前期超氧化物歧化酶活性显著低于0 ℃,0 ℃有利于李果实保持较好色泽并延迟硬度下降、抑制失重率、可溶性固形物含量上升等;‘空心李’在贮藏过程中,三个温度均延缓果实硬度下降且可溶性固形物含量较为稳定,但0 ℃比2、4 ℃更好的维持果实硬度、减缓失重率、呼吸速率的上升、以及丙二醛和过氧化氢的积累,且0 ℃下果实色泽保持良好,而2、4 ℃贮藏后期果实丧失特有色泽。综上所述,0 ℃贮藏有利于维持‘蜂糖李’和‘空心李’外观及内在品质,从而延长货架期。