稗草皱缩矮化病毒与水稻皱缩矮化病毒之电子显微镜比较研究

本文以电子显微镜观察比较稗草皱缩矮化病毒(Echinochloa ragged stunt virus,ERSV)与水稻皱缩矮化病毒(rice ragged stunt virus,RRSV)之形态特徵。ERSV以PTA(phosphotungsticacid)负染在电显下可观察到类似fijiviruses之外部形态构造。完整粒子呈球形,直径约80nm,具双层核蛋白及A-spikes构造(图二,三)。不具外层核蛋白的亚粒子为20面体之球形构造,顶与顶间之距离约70nm。一般纯化后负染之病毒粒子都呈球形,其外层核蛋白显然受到破坏,内层亦部分受到破坏,此种粒子直径约54-58nm(图一)。内外层核蛋白均遭破坏的中核,直径约50nm     

水生动物病毒的电镜和荧光显微镜观察

应用透射电镜和荧光显微镜对三种水生动物病毒粒子形态、病毒感染细胞的超微结构变化及亚细胞定位进行比较和研究。负染电镜观察显示:鳜鱼弹状病毒(SCRV)粒子呈典型的子弹状形态,长约76～118 nm,直径约29～52 nm;鲈鱼呼肠孤病毒(LJRV)粒子呈正二十面体结构,具有双层衣壳,直径约70～80 nm;蛙虹彩病毒(RGV)粒子呈正二十面体结构,具有囊膜,直径大小约150 nm。超薄切片观察表明,宿主细胞的基本结构遭到不同程度的破坏,成熟病毒粒子分布在胞质中或以出芽的方式释放到胞外,且RGV增殖后在胞质中聚集形成晶格状结构。免疫荧光观察进一步显示,RGV感染细胞后能产生多个直径大小不一的包涵体。本研究结果有助于了解和认识水生动物病毒的超微形态特征、复制过程及致病机理。     

山羊痘病毒囊膜的超微结构与形态发生

痘病毒可以作为研究生物膜形态发生的很好材料。我们应用冷冻蚀刻技术并附以超薄切片、负染色,细胞表面复型和扫描电镜等技术,对一种复制周期很长的痘病毒——山羊痘病毒囊膜的精细结构和发生过程进行了比较研究。病毒发育早期,毒浆周围出现的弧形膜样结构在冷冻蚀刻样品中呈现出间距为15—20nm均匀排列的二层颗粒;未成熟病毒囊膜为圆形,直径约400nm,因其常常从病毒中部断裂,因而可清楚地显示出病毒周缘仍由二层颗粒围绕;细胞质内成熟病毒囊膜为直径320—340nm的规则球体,其的PF面和EF面上均可见到大量直径为7—10nm的膜内微粒。释放到细胞外的成熟病毒囊膜的PF或EF面仅有少量的膜内微粒,囊膜形态呈不规则的球体     

应用冷冻蚀刻技术研究几种病毒的超微结构

采用冷冻蚀刻技术研究了GPV、IBRV和NDV等几种病毒的超微结构,初步取得如下结果: 一、在冷冻蚀刻样品中,GPV呈球形(在细胞质内)或近似球形(释放到细胞外),直径约300nm,这与在超薄切片或负染色样品中所见的病毒形态和大小有很大的不同。二、IBRV囊膜的PF和EF面上,均可见到直径5—9nm的膜内微粒。GPV囊膜膜内微粒的数量及其在PF面和EF面上的分布与IBRV不同。细胞质内与细胞外成熟的GPV囊膜的膜内微粒也有明显的差异。三、在GPV毒浆基质中,可观察到由直径5—10nm颗粒的聚集或规则排列形成的弓形、环形、及直径150—400nm大小不等的球形结构。实验结果显示了冷冻蚀刻技术在病毒形态结构和形态发生,尤其在病毒囊膜结构研究中的优越性。对这一技术在病毒学中的应用进行了讨论。     

应用电镜技术对牛流行热病毒形态学的研究

牛流行热病毒(BEFV)属于单股负链病毒目(Mononegavirales)、弹状病毒科(Rhabdoviridae)、狂犬病病毒属(Lyssavirus)成员。该病毒能引起牛流行热(又称牛暂时热或三日热),对养牛业造成很大的经济损失。本研究使用的材料是培养在BHK_(-21)细胞上的牛流行热病毒。应用负染色、超薄切片等方法制备样品,JEM-1200EX型电镜观察。通过电镜观察和研究,得出以下结果:1.病毒的基本形态,呈锥形(图1,2)、弹形(图3,4,5)、窝窝头形(图5)。大小为180X85nm。典型结构,外有囊膜,该囊膜是由纤突和病毒膜构成,内有螺旋对称的核衣壳(图4,5)。     

小双壳腹泻病毒的发现及初步研究

1983年作者用多价抗体—免疫电镜法从23例秋季婴幼儿胃肠炎病人粪中检出3例小双壳腹泻病毒(SmallDouble Capsids Diarrhea Virus SDCDV)。测算205个SDCDV颗粒的直径为32.1～36.7平均34.1±1.1nm。外观呈球形,由核心和核壳组成,无包膜。核心大而明显,有的如蜂窝样。核壳内层厚、外层薄。壳粒为点状和杆状,似辐条,与外核壳相连成“T”形,有10～16个。与有关病毒的形态作比较表明:(1)与小呼肠孤病毒、小轮状病毒和“Fuzzy—Wuzzys”相似但不尽相同,从核心、核壳和壳粒形状可加以区别;(2)与轮状病毒和呼肠孤病毒虽都有双层核壳,但其大小仅大     

昆虫病毒核多角体结构蛋白质的电镜观察

应用电子显微镜和图象计算机分析与处理,对经差速离心技术、分离、纯化的银纹夜蛾病毒核多角体结构蛋白质晶格进行了观察、分析与计算。待检测的蛋白质晶格再悬浮在1％葡萄糖溶液中,用1％PTA负染色后,和经病毒感染发病幼虫的气管和脂肪体的超薄切片,均在JEM-100C型电子显微镜下观察。银纹夜蛾病毒核多角体结构蛋白质晶格厚度测出为102.8埃,而过去获得的斜纹夜蛾病毒核多角体结构蛋白质晶格厚度为142.8埃。它们的晶格间距分别为57.5埃与109.0埃,银纹夜蛾的蛋白质晶格孔间的距离,通过图象处理,并由计算机计算出平均值为83.318埃。在斜纹夜蛾幼虫气管细胞质内,发现许多丝状纤维,它与病毒多角体结构蛋白质的发生有非常密切的关系。     

支气管淀粉样变沉积症病的超微结构观察

在左总支气管淀粉样变沉积症病人手术过程中，取病变组织进行光镜和电镜观察。电镜下见淀粉样沉积物呈块状分布于细胞外，染色灰淡，由不规则排列的5～10nm的细丝样结构组成。沉淀样物附近可见活跃的成纤维细胞和巨噬细胞分布。成纤维细胞体积大，胞质中有发达的高尔基体和丰富的粗面内质网，内质网扩张、充满染色灰淡的细丝样物质，与细胞外沉积物形态近似，提示淀粉样沉积物可能来源于成纤维细胞。巨噬细胞胞质中有多种吞噬体，其中有的内容物为染色灰淡的块状物，其形状与细胞上淀粉物中的块状噬斑相似，提示部分淀粉样沉积物可能被巨噬细胞所清除。     

高尔基氏体的显微与亚显微结构

本文采用光镜和电镜技术对高尔基氏体的显微与亚显微结构进行观察和研究。取人体胃癌组织,经常规TEM标本制片后,在电镜下观察胃癌细胞中的高尔基氏体。应用我们制备的单克隆抗体,染色显示人乳腺癌、大肠癌细胞和非洲绿猴肾上皮细胞(CV-1)等的高尔基氏体。以超速离心获取的培养大     

复合侵染的蚕豆黄花叶病病原诊断

应用透射电镜、ELISA和RT-PCR技术对浙江丽水的蚕豆黄化花叶病株进行了病原诊断,电镜负染色发现病株汁液中存在线状和球状两种病毒粒子,线状粒子长度在600nm～800nm的占73%,球状粒子直径约26nm;超薄切片观察到细胞质中存在Ⅱ型风轮状内含体及大量电子致密无定型体,还有线粒体增生聚集和膜结构的增生,两类细胞病变现象出现在相邻细胞中;用BBWV 2的单克隆抗体对病汁液ELISA检测结果为阳性反应;用Potyvirus通用引物进行RT-PCR检测有1.7kb特异性扩增片段产生.根据以上结果诊断病原为蚕豆萎焉病毒2（BBWV 2）和菜豆黄花叶病毒（BYMV）,二者为复合侵染.     

BAY41—4109对乙肝病毒衣壳组装的影响

乙肝病毒衣壳蛋白成功组装成衣壳二十面体的过程是病毒前基因组RNA逆转录形成成熟DNA的必要步骤。衣壳结构的轻微改变或破坏能对病毒子代传播产生巨大影响。应用透射电子显微镜研究发现小分子抗病毒化合物（heteroaryldihvdropyrimidine,HAP）BAY41．4109在与衣壳蛋白二聚体摩尔浓度比达到1：2时,能干扰乙肝病毒衣壳蛋白组装成衣壳二十面体。在BAY41—4109的作用下,衣壳蛋白发生错误组装,形成不规则球体、平面片状结构和管状结构。应用图像处理技术对管状结构进行分析,发现它是衣壳蛋白重新装配形成的具有螺旋对称性的规则组装体,衣壳蛋白按六角晶格方式排列,其最小组成单位是衣壳蛋白的二聚体。     

新生儿皮肤疱疹病毒感染的电镜诊断

目的：电镜观察疱疹病毒（HV），为临床诊断提供形态学依据；并进一步研究人皮肤HV感染的组织病理变化及形态特征。方法：应用透射电子显微镜观察新生儿皮肤活检组织超薄切片。结果：表皮细胞、巨噬细胞、血管内皮细胞及神经纤维内均可观察到病毒颗粒，感染病毒的细胞有明显的形态学变化；成熟病毒颗粒直径约150－160nm，核衣壳直径约100－110nm。核衣壳的核心可分为空心型、颗粒型和致密型三种；郎格罕细胞和巨噬细胞数量明显增加。结论：HV可感染皮肤多种细胞及神经纤维；郎格罕细胞和巨噬细胞增生可能在限制病毒复制和阻止扩散中起重要作用；电镜对病毒疾病的诊断和研究具有很大的价值。     

三种动物慢病毒形态及形态发生的比较研究

用电镜检查确定了不同感染时间的马传染性贫血病毒 (EIAV)、维斯纳 梅迪病毒 (MVV)和山羊关节炎脑炎病毒 (CAEV)的形态和形态发生。成熟的病毒粒子为电子致密的球形 ,有囊膜 ,直径约 10 0nm ,含有 1个 (有时有 2个或 2个以上 )的核芯。维斯纳 梅迪病毒和山羊关节炎脑炎病毒的核芯为球形 ,马传染性贫血病毒为杆形或锥形。在大部分病毒里能清晰地看到核芯壳 ,成熟的病毒从感染细胞的胞浆膜上出芽 ,在胞浆中还见到了花环状粒子和多板层结构     

牛溃疡性乳头炎疱疹病毒(BHMV)的形态发生学研究

泌乳期奶牛溃疡性乳头炎的病原体为牛疱疹病毒Ⅱ型,又称牛溃疡性乳头炎疱疹病毒(BHMV)。是一种典型的在核内装配的DNA病毒。Huygelen等于1960年首先在非洲的乌干达—布隆迪发现该病毒,以后又相继在欧洲、美洲和澳大利亚发现。但是,迄今为止,亚洲地区还未见有关该病毒的报道。1982年我们从沈阳地区某畜牧场分离获得该病毒。用电镜研究了BHM病毒在犊牛肾继代细胞内的形态发生。 BHM病毒核壳体的装配在胞核内进行。在核内看到大量散在和聚集成堆的空心衣壳和装配好的核壳体,有的呈类结晶样排列(图1)。核壳体在穿过核膜时,获得一层囊膜,成为成熟病毒颗粒,其形态为园形或卵园形,     

侵染西瓜的黄瓜绿斑驳花叶病毒快速检测

黄瓜绿斑驳花叶病毒（ CGMMV）是危害西瓜生产的重要病害,造成西瓜果实腐烂,失去商业价值。应用透射电子显微镜和单抗dot?ELISA技术对采自浙江温岭的西瓜病叶进行快速病原检测,电镜负染色观察到病株汁液中存在大量刚直杆状的病毒粒子,超薄切片观察到细胞质内存在整齐排列的杆状病毒聚集体,与烟草花叶病毒属（ Tobamovirus）的形态特征相符;进一步采用dot?ELISA技术进行血清学检测,显示西瓜病叶与CGMMV特异性抗体呈阳性反应,检测结果表明感染西瓜的杆状病毒为CGMMV。从而为侵染西瓜的CGMMV提供快速检测途径。     

肾综合症出血热(HFRS)病毒的形态学研究

应用铁蛋白和辣根过氧化物酶标记抗体间接法染色免疫电镜超薄切片技术对经Vero E—6细胞从HFRS患者血清中直接分离到的二株病毒(H—8205及H—8278株)的形态作了观察。结果在细胞基质内、胞浆空泡内及细胞外查见为免疫复合物和铁蛋白颗粒或酶反应沉淀物包绕的病毒颗粒,园形或卵园形,平均直径108nm,变化范围50—156nm。颗粒有双层膜结构及表面突起,有的囊膜不连续,有小孔通过,颗粒内部为疏松的细颗粒状及微管状结构。两株病毒在形态上无差别。对照组(包括用正常人血清取代恢复期病人血清的对照)未见到类似     

猪瘟兔化弱毒株形态的初步观察

目前世界上各国对猪瘟病毒的形态结构已有许多报道,差别较大。而我国培育的“54—Ⅲ系”猪瘟兔化弱毒(即C株或K株)还未见到有这方面的研究报道。本实验对离子交换柱层析纯化的猪瘟兔化弱毒做了初步的电镜观察。从负染后的病毒电镜照片可以看出,病毒形态大致上分为三种颗粒:一种为30nm左右的颗粒,其中有的呈     

斑点热立克次体的表面结构

随着细胞化学和免疫细胞化学方法的广泛应用,近年来对立克次体的表面结构有了新的认识。按Silverman等介绍的方法稍加改进,我们对从我国新疆地区分离出的精河株斑点热立克次体感污的鸡胚卵黄囊材料,作了钌红(ruthenium red)、免疫铁蛋白和免疫酶染色。在常规超薄切片中立克次体与宿主细胞之间为一宽窄不均的电子透亮区,而在以上细胞化学和免疫细胞化学染色标本中则显示出了立克次体的表面结构:紧靠细胞壁外为15—20nm宽的电子透明带一微壳膜层(Microcapsular layer),最外面为能与钌红及标记抗体相结合的纤维粘液层(Slime leyer),此层厚薄变化较大,从20—250nm不等,有时呈条纹晶格状结构排列,甚至见到整个     

美国粘虫(Pseudatia unipuncta)颗粒体病毒(Granulosis Virus)荚膜(Capsule)电镜观察方法的比较

本文介绍五种(扫描电镜观察、透射电镜直接观察、透射电镜旋转喷镀观察、透射电镜投影喷镀观察、透射电镜负染观察)观察美国粘虫颗粒体病毒荚膜的方法,并对这五种方法进行了比较,其中以用透射电镜直接观察为最简便、准确。几种观察方法相互配合,可以充分肯定美国粘虫颗粒体病毒荚膜长约350nμ,宽约200nμ,表面光滑呈卵园型。     

细胞核体外重建过程中核纤层与核膜组装的关系

核纤层Nuclear lamina是位于内层核膜下的纤维蛋白片层结构,为了研究核纤层与核膜在功能上的关系,我们利用体外核装配这一实验模式,初步探索了核纤层与核膜装配的关系。首先,我们应用噬菌体Lambda DNA和非洲爪蟾卵细胞抽提物建立了体外细胞核组装体系,体外构建的细胞核具有正常细胞核的形态结构(图1),同时证明核纤层参与了细胞核的体外组装。为进一步探讨核纤层在细胞核组装过程中的作用,我们在非细胞体系中加入足量的能与两栖类卵细胞核纤层蛋白Lamin Ⅲ反应的抬体,观察核纤层蛋白抬体对核膜组装的影响,超薄切片电镜观察显示核纤层蛋白抬体的介入导致非细胞体系中膜系组装的紊乱,不能形成正常的双层核膜,而是形成呈同心圆状排列的多层单位膜(图2)。其机制有待进一步探讨,推测核纤层蛋白单体组装成核纤层可能是细胞核组装过程中的一个重要环节,这一环节的缺失导致了膜系统,特别是双层核膜的组装异常。