两种红树植物抑菌活性内生真菌的研究

文章通过稀释涂布平板法分离广州南沙红树植物海桑和桐花树的内生真菌,并采用改良菌饼法对所有菌株进行抑菌活性筛选。结果显示,从两种红树植物中共分离得到38株内生真菌,均对至少一种指示菌有抑菌活性,其中有31株可抑制两种或以上指示菌,占总菌株的81.6%。     

生防芽孢杆菌的分离筛选与初步鉴定

从不同环境中采集7份土壤样品用于芽孢杆菌的分离纯化,通过多次平板划线分离纯化得到30个菌落形态不同的菌株。以黄瓜枯萎病菌为指示菌对得到的菌株进行抑菌活性筛选,其中的4个菌株具有明显的抑菌作用。采用对峙生长法,测定4株芽孢杆菌对其它植物病原真菌的活性,结果显示4个芽孢杆菌均具有广谱抑菌性。进一步试验表明,4株芽孢杆菌的发酵液也具有明显的抑菌作用,说明对病原真菌有抑制作用的物质水溶性较大,大部分释放到发酵液中,并且发酵液可使黄瓜枯萎等植物病原真菌菌丝膨大、褐变、末端钝圆,促进镰刀菌产生小孢子。通过菌落形态特征、系列生化测定对其进行初步鉴定,结果表明其中一株为枯草芽孢杆菌。     

白花前胡内生菌的筛选及抑菌活性研究

目的:筛选白花前胡的根中具有抑菌效果的内生菌,利用LC-MS技术鉴定其代谢产物。方法:以微量稀释法评价不同的内生菌株对金黄色葡萄球菌以及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌效果,采用HPLC技术分析菌株以及白花前胡代谢产物的差异,以LC-MS分析技术分析菌株与白花前胡的相同代谢产物。结果:内生真菌MG-1对金黄色葡萄球菌以及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度达到0.059 mg/mL,利用LC-MS鉴定其共有代谢产物,分别为紫花前胡素、珊瑚菜内酯、白花前胡丁素。结论:本实验从富含香豆素类化合物的白花前胡中筛选具有抑菌作用的内生菌,为扩大药用微生物资源,筛选具有抗菌活性的新颖化合物提供了借鉴。     

侧柏内生真菌的分离鉴定及抗菌活性筛选

采用组织分离法从侧柏的根、茎、叶中分离获得内生真菌110株,经形态观察将其中103株鉴定分类为4个目、6个科、15个属,未产孢7株;内生真菌以链格孢属为优势属,茎叶中内生真菌的株数、种类多于根中.通过与苹果腐烂病菌、葡萄黑痘病菌等4种植物病原真菌平板对峙培养,从分离的内生真菌中筛选出21株(占总分离株数的19.1%)有拮抗活性的菌株,其至少对1种植物病原真菌有生长抑制作用,活性菌株主要分布在链格孢属,其抗菌活性成分值得进一步研究.     

一株红树林内生真菌次级代谢产物中活性组分的活性跟踪法分离研究

对从广西山口红树林保护区采集的21株植物内生真菌进行了抗菌、抗肿瘤筛选,得到4株活性菌株,其中SK11菌株活性最强。采取活性跟踪方法,从SK11菌株次级代谢产物中分离到了活性成分Lichexanthone和Bikaverin,并用分子生物学方法鉴定该菌株为链格孢霉菌（Alternaria sp.）。这是首次从该属中分离得到这两种化合物。     

西南手参内生真菌的分离鉴定及其代谢产物抗肿瘤活性筛选

对西南手参内生真菌进行了分离纯化及形态学和分子学鉴定,并以CDC25A/CDC25B磷酸酶和PD-1/PD-L1作为抗肿瘤活性筛选靶点,对内生真菌代谢产物的抗肿瘤活性进行了筛选。结果表明,从西南手参根部分离得到20株内生真菌,分别属于镰刀菌属(Fusarium)、壳隔孢属(Camarosporium)、青霉菌属(Penicillium)、土赤壳属(Ilyonectria)、柔膜菌属(Hyalodendriella)、曲霉属(Aspergillus)、栓菌属(Trametes)、胶膜属(Tulasnellaceae)、油瓶霉属(Lecythophora)、红菇属(Russulaceae)、丝膜菌属(Cortinarius)等11个属;菌株G.orc-10的代谢产物对CDC25A/CDC25B酶活具有明显的抑制活性,菌株G.orc-05、G.orc-06的代谢产物对PD-1/PD-L1结合作用具有明显的抑制活性。揭示西南手参内生真菌代谢产物可能具有抗肿瘤药物筛选潜力,为从西南手参内生真菌代谢产物中发现抗肿瘤药物提供了科学依据。     

南极海泥来源抗肿瘤真菌的筛选与鉴定

从南极海泥样品中分离得到61株海洋真菌,先采用MTT法对其发酵液的乙酸乙酯萃取物进行体外抗肿瘤活性筛选,然后对活性较高的菌株进行分子鉴定,并进一步测定乙酸乙酯萃取物对HepG-2细胞的IC50值。结果表明:对HepG-2细胞抑制率大于60%的有27株菌,占总供试菌株的44.26%;对7901细胞具有抑制作用的有22株菌,占总供试菌株的36.07%;对116细胞抑制率大于50%的有22株菌,占总供试菌株的36.07%;菌株S45的抗肿瘤活性最强,对HepG-2细胞的IC50值为1.25μg·mL-1,经鉴定为青霉属真菌。     

敌草隆内生降解真菌筛选

[目的]筛选可降解敌草隆菌株,并研究其降解特性,为微生物降解敌草隆提供新途径。[方法]采用平板涂布法从植物体内分离内生真菌,并通过摇瓶富集法筛选有降解作用的菌株;通过形态学特征和ITS鉴定菌株;采用高效液相色谱法检测分离的内生菌对敌草隆的降解效果,并研究其降解的最适温度、pH值、营养源和降解动力学特性。通过标准品比对鉴定降解产物。[结果]从牛筋草中分离得到一株具有降解除草剂敌草隆能力的真菌,命名为D12,鉴定为镰刀菌属(Fusarium Lk.ex Fr.)。降解条件优化试验结果表明,该菌的最佳营养源为淀粉,在35℃和pH值6的条件下对敌草隆具有良好降解作用。以敌草隆50 mg/L为起始质量浓度进行研究,经过7 d培养,降解率达57.42%,半衰期为7.30 d。鉴定其降解产物为1-(3,4-dichlorophenyl)methylurea。[结论]镰刀菌属D12具有降解敌草隆得能力,在微生物降解除草剂领域具有良好的应用前景。     

杜仲叶部内生真菌的抗氧化活性测定以及菌株鉴定

本研究利用体外清除DPPH自由基的方法,测定了5株杜仲叶部内生真菌的抗氧化活性。通过插片培养,性状观察,显微摄影和分子鉴定对抗氧化活性高的杜仲内生真菌进行了分类研究。研究表明,这些杜仲内生真菌对DPPH清除率具有剂量依赖性,其抗氧化能力随样品浓度的增加呈增长趋势。在浓度为0.5 g/m L时,其中对DPPH自由基清除率在95%以上的菌株有1株(EL05),经鉴定属于曲霉属。     

云南红豆杉内生真菌次生代谢产物抗菌活性的研究

从红豆杉树皮中分离得到一株产紫杉醇或紫杉烷类化合物的内生真菌,分别用三氯甲烷、乙酸乙酯对其次生代谢产物进行提取,以白色念珠菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌作为指示菌株,对提取液的抑菌活性进行了检测。结果显示:目标菌株次生代谢产物的两种提取物对五种致病菌都有一定的抑制效果,且胞外提取物的抑菌活力均比胞内提取物的抑菌活力大;三氯甲烷提取物的抑菌活性强于乙酸乙酯提取物的抑菌活性;其中三氯甲烷胞外提取物对金黄色葡萄球和白色念珠菌菌表现出非常强烈的抑菌效果。     

博落回产生物碱内生细菌的分离、筛选及鉴定

本文采用组织块法从健康新鲜野生博落回中分离内生细菌,采用碘-碘化钾、碘化铋钾、硅钨酸3种试剂鉴定其内生菌次级代谢产物,采用16srDNA分子生物学鉴定法对其进行菌种鉴定。结果显示,从博落回根、茎、叶共分离出10株内生细菌,通过鉴定最终确定有三株博落回内生细菌产生物碱,对三个菌株进行形态学、生理生化和分子生物学鉴定确定其中两株为枯草芽孢杆菌,一株为根瘤菌。     

蓝莓溃疡病生防链霉菌CX3的抑菌效果及其鉴定

[目的]为了明确从吉林省长白山保护区池西保护站马鞍山云杉人工林林下土壤分离,所获得1株拮抗菌株(编号记为CX3)的生防效果及分类地位。[方法]分别采用平板对峙法和杯碟法测定该菌株活菌及其发酵液的抑菌活性和抑菌谱;并通过形态学、生理生化特征、16S rRNA序列分析等方法研究了其分类地位。[结果]该菌株对13种供试植物病原菌均有抑制作用,抑菌谱广,其中对蓝莓溃疡病菌有极强的抑制作用,抑菌带达25.91 mm,发酵液的抑菌圈直径达31.73 mm;根据其菌株形态、生理生化特性、16S rRNA序列比对,最终鉴定菌株为链霉菌属Streptomyces sp.。[结论]该菌株对蓝莓溃疡病菌有显著的抑制效果,应用开发前景良好,此次是国内首次报道该菌株杀真菌活性。     

苦参杀虫活性菌株的筛选

为筛选苦参内生菌中对水稻害虫有毒杀作用的菌株,本研究采用研磨法从健康苦参植物的根、茎、叶和种子中进行菌株分离。用玻片浸渍法和喷雾法筛选产杀虫活性物质菌株,获得细菌93株、放线菌15株、真菌5株。经初筛及复筛,发现RoF2和LeB8两株菌株的发酵液粗提物分别对稻飞虱Rice planthopper、稻纵卷叶螟Cnaphalocrocis medinalis Guenee致死率达85%以上。苦参内生菌株LeB8和RoF2的粗提代谢物对稻纵卷叶螟和稻飞虱有明显的毒杀作用,为开发新的生物源农药提供了可能的生物质。     

一株海洋专性放线菌的分类鉴定及其抑菌活性

[目的]对一株海洋专性放线菌进行菌种鉴定,并考察其抑菌物质的性质。[方法]通过形态特征、生理生化特性以及16S rRNA基因序列分析,对专性海洋放线菌CMZ023进行鉴定;采用管碟法测定抑菌谱;测定菌株CMZ023抑菌物质的性质。[结果]鉴定菌株CMZ023为Salinispora arenicola,该菌对革兰氏阴性细菌、革兰氏阳性细菌、啤酒酵母以及多种植物病原真菌均有拮抗作用。其抑菌物质粗提液耐酸碱、耐高温,紫外照射不影响抑菌活性。[结论]该菌株具有开发成新型广谱生物农药的潜力。     

海南全缘褶萼苔内生真菌的分离及抑菌活性的初步研究

研究了海南全缘褶萼苔的表面消毒条件及其内生真菌TX003菌株发酵液的抑菌活性。结果表明,采用75%乙醇浸泡2min,无菌水冲洗4次,再用5.0%次氯酸钠浸泡5min,无菌水冲洗4次,是海南全缘褶萼苔表面消毒的最佳条件。其内生真菌TX003菌株发酵液具有广谱抑菌活性,对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌抑菌圈直径分别达到17mm、16mm、13mm、8mm、11mm。海南全缘褶萼苔内生真菌TX003可以产生具有抑菌活性的次生代谢产物,为新型抗菌药物的筛选提供了新的途径。     

青岛海域鲍鱼内生真菌代谢产物活性筛选探究

以开放实验的形式探究海洋内生真菌的分离纯化实验操作,锻炼学生微生物实验技术中的无菌操作、菌种的分离纯化过程,进而通过发酵条件的优化培养对海洋真菌的次级代谢产物进行初步的研究,使学生进一步了解环境微生物中真菌发酵条件的调控和次级代谢产物的应用。通过微生物开放实验分离纯化出4株来源于鲍鱼的海洋内生真菌A1、A2、A3和A4,选择菌株A1通过优化培养发现其RICE培养基的次级代谢产物量较大,且有较好的抑菌活性。开放实验既提高了学生科技创新意识,又使学生接受了初步的科研训练。     

一株白骨壤内生真菌亮白曲霉CW5-7代谢产物主成分其抗氧化活性研究

利用涂布法从厦门红树林植物白骨壤根部分离得到1株内生真菌,编号为CW5-7,通过测定ITS序列鉴定该菌株为亮白曲霉(Aspergillus candidus),对亮白曲霉CW5-7在大米培养基中的代谢产物进行分离纯化,通过波谱学数据分析对主成分结构进行鉴定,并对其抗氧化活性进行评价.结果 表明,从亮白曲霉CW5-7的代...     

一株车前子内生细菌的抑菌和促生活性初步研究

为了筛选到具有农用生物活性新的微生物资源,本研究以一株车前子内生细菌R6为试验材料,对其抑菌活性和促生作用进行了研究。抑菌测定结果表明,R6菌株对棉花枯萎病菌、甜瓜枯萎病菌、小麦赤霉病菌、草莓灰霉病菌、苹果腐烂病菌、番茄早疫病菌均有较强的抑菌活性,并能产生挥发性的抑菌活性物质。促生作用结果表明,R6菌株发酵液对黄瓜种子萌发、生长期的鲜重、根冠比、叶绿素含量等指标均有一定促进作用。     

侧柏内生真菌G21抑菌活性及其鉴定

[目的]研究侧柏内生真菌菌株G21在不同培养基中发酵产物抑菌活性,并进行鉴定。[方法]利用生长速率法测定抑菌活性,结合形态分类及ITS-18S rDNA序列分析鉴定菌株。[结果]G21在所有不同培养基中的发酵产物对苹果腐烂病菌、白菜黑斑病菌、小麦纹枯病菌及番茄灰霉病菌均有不同程度的抑制作用;G21鉴定为异茎点霉属(Paraphoma),与菊异茎点霉菌(Paraphoma chrysanthemicola)处于同一分支。[结论]G21马丁培养基和淀粉铵盐培养基发酵产物活性值得进一步研究。     

拮抗放线菌F-15的生防作用及其初步分类鉴定

从沈阳东陵区蔬菜大棚土壤中分离到1株拮抗放线菌,编号为F-15.采用平板对峙培养法和温室盆栽防治法测定了其抑菌活性,并通过形态学、化学的方法初步研究了其分类地位.结果表明:该菌株对供试的多种植物病原菌均有抑制作用,其中对瓜类枯萎病菌和番茄叶霉病菌抑制作用较强,平均抑菌带宽度达到14.8～15.0 mm.温室防病实验结果表明:其发酵上清液对番茄叶霉病具有良好的生防作用,防治效果可以达到73.2%.根据其菌株形态、培养特征、生理生化特性、细胞壁化学组分等分析,将菌株F-15归人链霉菌属,并初步鉴定为不吸水链霉菌的金色类群Streptomyces aureus.