嗜酸乳杆菌发酵法制备亚油酸异构酶的研究

以正交试验确定了嗜酸乳杆菌的最佳发酵条件，对其产生的亚油酸异构酶以硫酸铵分级沉淀和Sephadex G100层析进行了分离，并测定了酶活力。结果表明，嗜酸乳杆菌适宜发酵条件为：温度40℃，初始pH6．5，接种量1％，发酵时间24h；以上条件下产生的亚油酸异构酶经纯化后测得酶活为4358．6U。     

固定化亚油酸异构酶制备及其性质

以海藻酸钠、壳聚糖为载体,分别采用直接包埋、交联-包埋法制备固定化亚油酸异构酶;研究酶的固定化条件和固定化酶的部分性质。结果表明：以海藻酸钠为载体,采用交联-包埋法以戊二醛为交联剂时固定化效果较好;最佳固定化条件为：海藻酸钠质量浓度为3g/100mL,戊二醛质量浓度为0.3g/100mL,CaCl2质量浓度为2g/100mL;固定化酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为5.0;与游离酶相比,固定化酶的热稳定性显著提高,温度在20～60℃之间较稳定,pH值在2～8之间表现出较好的酸碱耐受性;固定化亚油酸异构酶的Km为0.36mg/mL。连续操作6次固定化相对酶活力仍保持70.6%,与游离酶相比,固定化亚油酸异构酶催化效率约提高了50%。     

嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的分离纯化及酶学性质研究

研究采用DEAE-Sepharose F.F离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析对嗜酸乳杆菌发酵液中的亚油酸异构酶进行了分离纯化,酶回收率为6.39,纯化倍数为37.9倍。经研究确定酶最适pH为6.0,最适反应温度为30℃。在pH 6~8之间,亚油酸异构酶可保持较高活力,超出此范围,酶活力明显下降;该酶对高温敏感,50℃保温2 h,酶活力即变得很低;亚油酸异构酶受底物LA的抑制,酶反应最适LA浓度为1.5×10-5g/mL,过高LA则对酶产生抑制作用。     

嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的酶学性质研究

本实验对嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶的酶学性质进行了研究.结果表明:以亚油酸为底物,亚油酸异构酶的最适反应温度为40℃;最适反应pH值为4.0,pH值在3.0～6.0范围内有较高的稳定性;不同的金属离子和有机试剂对亚油酸异构酶的影响程度不同,同一种金属离子和有机试剂在不同浓度下也不相同;以亚油酸为底物的酶促反应米氏常数Km=33.33mol/L,Vmax=15.6mol/L·h.     

链霉菌TCCC11564葡萄糖异构酶发酵条件优化及酶学性质的研究

通过单因素及正交试验设计确定链霉茵TCCC11564摇瓶发酵产葡萄糖异构酶的最佳发酵条件为:麦芽糖1.0%,蛋白胨0.5%,硫酸镁0.06%,磷酸氢二钾0.05%,氯化钠0.05%,30℃、180 r/min摇瓶发酵48 h,在此条件下得到的发酵液酶活最高达到428.8U/mL,比优化前的116.08U/mL提高了3.69倍.酶学性质研究结果表明,链霉茵TCCC11564葡萄糖异构酶最适反应温度为70℃～75℃,90℃保温120 min后酶活几乎完全丧失.pH为7.5～8.5之间具有较好的稳定性,pH在7.5以下时,稳定性下降,在pH为6.5时酶活损失50%以上,反应的最适pH是8.0.     

嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶活力测定的研究

亚油酸异构酶能催化亚油酸转化为具有生理活性的共轭亚油酸。有关该酶活力的测定方法在国内外不同的文献中差别较大,尚没有统一的方法。本文对嗜酸乳杆菌亚油酸异构酶活力的测定方法进行了研究,以期为该酶分离纯化过程中酶活力的测定提供参考。通过单因素试验和正交试验,确定了该酶的最佳酶反应条件为:粗酶液添加量0.10ml,亚油酸0.70ml,Tween-802.00ml,反应温度37℃,反应时间3h。     

德氏乳杆菌亚油酸异构酶提取条件的研究

对德氏乳杆菌中亚油酸异构酶的提取条件进行了研究,并对其粗酶液的性质进行了检测,为下一步的分离纯化工作提供依据。通过实验,确定了超声波破碎产亚油酸异构酶菌体的条件:间歇破碎,每次破碎时间20s,间歇5s,破碎20次。当缓冲液pH值为6.0,菌体质量浓度为0.50g/mL时,以粗酶液的酶活力为指标,确定反应的最佳条件:反应温度为40℃;反应时间为150min;粗酶液与底物比例为1:2。     

地衣芽孢杆菌2709高去酰胺活性碱性蛋白酶发酵条件及酶学性质的研究

就地衣芽孢杆菌2709发酵生产高去酰胺活性碱性蛋白酶的发酵条件进行了研究,以酶液对大豆蛋白的去酰胺度和肽键水解度为指标,对产酶条件进行优化,并研究了该酶的基本酶学特性;确定了培养基的最佳碳源为玉米粉.最佳氮源为黄豆饼粉,C/N在1:2～1:1范围时去酰胺度最高;最适摇瓶发酵条件为:种龄18h,接种量2%,装液量30mL/100mL,摇床转速140r/min,pH 7.0,35℃,发酵50h;碱性蛋白酶最适作用pH为10.0,最适反应温度为50℃,60℃保温2h后仅存5.9%的活力,在pH8～11之间有较高的pH稳定性.     

物理参数对α-乙酰乳酸脱羧酶发酵的影响

测定了α -乙酰乳酸脱羧酶产生菌 32 2 6 - 5的生长曲线 ,从而根据酶活变化确定出最佳的接种种龄。进一步考察了接种量、温度、pH、通气量、发酵时间等条件对ALDC发酵酶活的影响。结果表明 :在接种量 9%,培养温度 37℃ ,初始pH8.5 ,摇床 2 0 0r/min ,装液量 9mL发酵时间为 18h为最佳发酵条件     

解纤维热酸菌产L-阿拉伯糖异构酶的培养条件优化

解纤维热酸茵SKI.009发酵产生合成塔格糖所需的L-阿拉伯糖异构酶,通过单因素与正交实验优化确定产酶培养基条件.结果表明,发酵最佳条件(g/L):可溶性淀粉8、蛋白胨鱼粉1、L-阿拉伯糖1.5、NH、CI 1、KH2PO4 1、Na2HPO4·12H2O 0.135、MgSO4·7H200.2、CaCi2 0.15,发酵初始pH4.5,培养温度55℃,接种量4%,培养时间60h.在该最佳培养基下发酵产生酶活为0.184U/mL.