高效液相色谱法同时测定果蔬汁中脱氢乙酸与纳他霉素及其降解规律研究

目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定果蔬汁中的脱氢乙酸与纳他霉素。方法样品采用超声提取,以乙腈与0.1%甲酸-水溶液为流动相进行梯度洗脱,经过C_(18)色谱柱分离,采用二极管阵列检测器检测,检测波长为310 nm和305 nm,以外标法定量。结果脱氢乙酸与纳他霉素在0.01~20μg/m L浓度范围内线性关系良好(r~2=0.99987),定量限分别为1.0 mg/kg和0.5 mg/kg,均小于等于国标方法定量限。脱氢乙酸与纳他霉素分别在5、10和50 mg/kg及0.5、1和5 mg/kg 3个水平加标回收率分别为92.44%~95.02%和91.20%~103.49%,实验室内部变异系数分别为0.28%~0.43%和0.78%~10.44%。与国标方法对比,在置信度为95%时的显著性检验结果较好。研究脱氢乙酸和纳他霉素的降解规律发现,脱氢乙酸自身降解较慢,且受到样品基质影响较小;而纳他霉素自身降解较快,且受到样品基质影响较大。结论本方法准确可靠,精密度良好,可用于果蔬汁样品中脱氢乙酸与纳他霉素的同时测定。     

发酵液中纳他霉素的快速测定

采用紫外分光光度计法快速测定发酵液中的纳他霉素产量,以5%冰乙酸的甲醇溶液为提取剂提取发酵液中的纳他霉素,紫外检测波长为303nm。实验表明,回收率为99.6%以上。该方法简单,快速,准确。     

高效液相色谱法测定月饼中纳他霉素残留

建立了测定月饼中防霉剂纳他霉素的高效液相色谱分析方法。采用ODS分离柱,V(甲醇):V(水)=70∶30流动相,在303 nm波长下检测纳他霉素含量,测定结果的相对标准偏差为1.8%~7.3%,检出限为0.5mg/kg,平均回收率为77.8%~97.9%%。     

变波长高效液相法同时测定糕点中的丙酸钙和纳他霉素

建立一种同时测定糕点中丙酸钙和纳他霉素的变波长梯度洗脱高效液相色谱检测方法。样品采用超声处理,以甲醇和0.01mol/m L酸性磷酸氢二铵为流动相进行梯度洗脱,经色谱柱为C18(4.6mm×150mm,5μm)分离,程序化变波长检测,外标法定量。该方法可以将丙酸钙和纳他霉素两种防腐剂很好的分离,保留时间分别为(3.5±0.2)min和(9.4±0.2)min,丙酸钙和纳他霉素的线性回归方程相关系数均大于0.9999,方法回收率为89%~98%。采用高效液相色谱同步测定糕点中丙酸钙和纳他霉素的方法具有快速、准确、灵敏度和精密度高的优点,能满足糕点中丙酸钙和纳他霉素含量同步测定的要求。     

发酵液中纳他霉素含量快速检测方法研究

对紫外分光光度法和高效液相色谱法（HPLC）测定纳他霉素的各项参数进行了研究，结果表明：紫外分光光度法，确定甲醇＋1％冰乙酸（pH3．4）为提取剂，配比为1：9，303nm为检测波长，以纳他霉素标准溶液做标准曲线，求得线性回归方程为Y=0．1066X-0．0069，R^2=0．9995，纳他霉素回收率超过99．9314％。紫外分光光度法与高效液相色谱法两种检测方法结果基本一致，以高效液相色谱为基准，紫外分光光度法的相对误差为0．17％。最终确定高效液相色谱法作为检测发酵液中纳他霉素含量的方法。检测波长：303nm；流动相：甲醇：水：冰乙酸体积比为70：30：2；流速：1．00mL/min；检测器Waters2996二极管阵列检测器；线性回归方程为Y=12500X＋12600，R^2=0．9995，精密度试验结果：平均RSD为0．753％。当信噪比为3时的最小检测限为31ng。     

超高效液相色谱法检测饮料中纳他霉素的含量

建立用超高效液相色谱测定饮料中纳他霉素含量的方法。用甲醇溶液提取样品中的纳他霉素,UPLC分析,外标法定量。采用BEHShieldRP18色谱柱,检测波长为303nm,以乙酸铵和乙腈为流动相,进行等度洗脱。该方法操作简单快捷,方法准确度和稳定性好。     

快速测定生产中纳他霉素含量的方法探讨

针对目前国内外纳他霉素含量测定使用HPLC方法,对仪器和操作人员要求高,生产过程又需要快速测定其含量的实际情况,比较了用甲醇溶液、1%乙酸的甲醇溶液、丙二醇溶液三种萃取剂对含纳他霉素样品的萃取效果,最终确定以丙二醇溶液为萃取剂,萃取时间可选择9min,用紫外分光光度法(UV)在303nm作为它的检测波长,来测定纳他霉素含量.制作的工作曲线相关系数r=0.9998,回归方程为y=0.1057x+0.0074.UV法与HPLC法的测定结果经统计检验,认为无显著差异(α=0.05),回收率为99.54%～99.74%.该方法简单、快速、准确,分析过程对人体健康危害轻,可在生产中快速测定纳他霉素含量.为了防止纳他霉素在紫外线下降解生成的四氮烯纳他酸干扰UV法测定,使用该方法测定时必须定期用国家标准HPLC法来对照、校正.     

RP-HPLC法测定石斛鲜汁中纳他霉素残留量研究

为研究纳他霉素在石斛汁中的降解规律,试验建立一种快速、准确检测石斛汁中纳他霉素含量的方法。石斛汁中纳他霉素采用甲醇超声萃取10 min进行高效液相检测,使用SGE protecol C_(18)(5μm, 4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为V_甲醇︰V_0.5%乙酸水溶液=57:43,检测波长为305 nm。纳他霉素在1.0～20.0μg/m L范围内线性关系良好,定量检出限为0.5 mg/L (S/N=10)。基质对纳他霉素降解影响较大,石斛汁冷藏1周,在纳他霉素初始添加量为24及48 mg/L的石斛汁样品中,纳他霉素含量分别降低62.99%及56.67%;在贮藏1及2周后,其残留量符合国标GB 2760—2014规定的最大残留量(10 mg/kg)要求。此次研究为纳他霉素在石斛鲜汁中的安全使用提供了技术支持。     

UPLC法测定乳制品中的纳他霉素

建立了乳制品中纳他霉素残留量的超高效液相色谱(UPLC)检测方法,并讨论了几种常用的"假阳性"验证方法。用甲醇提取样片中的纳他霉素,采用BEHShieldRP18分离,检测波长为303nm,以水:甲醇=55∶45为流动相进行等度洗脱,该方法前处理简单,回收率高及灵敏度高,准确度和稳定性好。     

ε-聚赖氨酸与纳他霉素复配剂抑菌性能的研究

研究了ε-聚赖氨酸(ε-PL)与纳他霉素复配剂的抑菌活性.以典型菌株大肠杆菌、伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和热带假丝酵母为研究对象,采用二倍稀释法确定ε-PL和纳他霉素的最小抑菌浓度,96孔板法确定ε-PL与纳他霉素对酵母菌最佳复配抑菌浓度,通过测定胞内物质渗漏来反映酵母细胞膜的完整性.结果表明,二者抑制酿酒酵母的最佳复配浓度为ε-PL 100μg/mL、纳他霉素4μg/mL,抑制热带假丝酵母的最佳复配浓度为ε-PL 400μg/mL、纳他霉素2μg/mL,且两种复配剂均能抑制大部分细菌.通过测定抑菌剂作用于酿酒酵母在260nm、280nm的吸光度以及电导率的变化,可知复配剂对酿酒酵母细胞膜的破坏性最强.总之,ε-PL与纳他霉素复配使用,能够减少用量,拓宽抑菌范围,能更好的抑制食品中腐败微生物的生长.     

超高效液相色谱-荧光检测法测定禽肉组织中乙氧酰胺苯甲酯残留量

建立超高效液相色谱-荧光检测法测定禽肉组织中乙氧酰胺苯甲酯（ethopabate,ETP）残留量的分析方法。样品用乙腈提取,采用C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）,乙腈-水（30∶70,V/V）为流动相,流速0.3 mL/min,柱温30 ℃,进样量5.0 μL,采用荧光检测器,在激发波长272 nm、发射波长394 nm条件下测定。结果表明：ETP在5～500 ng/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系（R2=0.999 7）;检出限为2 μg/kg,定量限为5 μg/kg;平均回收率为83.0%～91.5%,相对标准偏差为1.6%～2.9%。本方法适用于检测禽肉组织中ETP残留量。     

基于高效液相色谱法测定水产品中甘氨酸甜菜碱

应用高效液相色谱技术,建立水产品中甘氨酸甜菜碱定量检测方法。针对甘氨酸甜菜碱极性特点,选用BEH HILIC色谱柱,以乙腈:水为80:20构成优化的流动相,等度洗脱,紫外法于195 nm波长处检测甘氨酸甜菜碱特征峰。结果表明在15~200 μg/mL浓度范围内,检测目标物浓度与特征峰面积呈良好线性关系(R2=0.9999),方法检出限为5.12 μg/mL,定量限为12.00 μg/mL,平均回收率在96.5%~97.7%,相对标准偏差(RSD)为1.0%~2.2%。三类水产品实样测定,梭子蟹、对虾、花蛤所含甘氨酸甜菜碱分别为0.435、1.685和4.384 mg/g,相对标准偏差分别为0.5%、0.5%及1.8%。本方法简单快速、灵敏度高、重复性好,适用于水产品中甘氨酸甜菜碱定量检测。     

HPLC法测定曲奇饼干中丙烯酰胺的含量

确定了曲奇饼干中丙烯酰胺含量的高效液相检测方法.样品预处理采用脱脂,固液提取,离心破乳,液液萃取,旋蒸浓缩及氮气吹干,超纯水定容等步骤,经Kromasil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分离.HPLC检测用甲醇-水(5:95,体积比)为流动相洗脱,VWD检测器检测波长210 nm.方法在0.2/mL～1.0μg/mL浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.9998),检出限为4.4ng/mL,RSD为0.37％;定量限14.5 ng/mL,RSD为7.4％,加标回收率在81.6％～101.3％之间.本方法定量准确,操作简单,适用于曲奇饼干中丙烯酰胺的测定.     

反相高效液相色谱法测定嗜碱微生物发酵液中的有机酸

建立了采用反相高效液相色谱检测嗜碱微生物Lp3-3发酵液中有机酸的方法。采用Sinochrom ODS-BP色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以2.5mmol/L NH4H2PO4(含1%甲醇)溶液(pH2.5)为流动相,流速为0.5mL/min,柱温30℃,紫外检测器检测波长为210nm。在此色谱条件下,7种有机酸得到很好分离,方法重现性好,精密度高,有机酸浓度在1~500μg/mL范围内,线性相关系数均大于0.999,加标回收率为96%~110%,各有机酸检出限≤0.12μg/mL。运用该方法测定嗜碱微生物Lp3-3发酵液中的有机酸,得到发酵液中主成分乳酸及副产物乙酸、丙酮酸在发酵不同时间的变化趋势。     

乙酰丙酮分光光度法测定啤酒中甲醛含量

在酸性条件下将溶解于水中的游离甲醛随水蒸出,并与乙酰丙酮作用,建立分光光度计测定啤酒中甲醛含量的方法。结果表明,方法检出限为3.31×10-9g/mL,线性范围为0～4.20μg/10 mL,变异系数RSD=0.78%。该方法操作简便,灵敏度高,重现性好。     

氧化钙黄绿素光度法测定酒中的微量锰

建立测定酒中微量锰的新方法-氧化钙黄绿素光度法。在硫酸介质中,钙黄绿素能够被锰(Ⅶ)氧化而褪色,且褪色程度和高锰酸钾的质量浓度呈线性关系。用铋酸钠将样品中的锰元素全部转化为锰(Ⅶ),从而采用分光光度法对锰进行测定。在最大吸收波长480nm处,锰的质量浓度在0～2.7μg/mL范围内符合朗伯比尔定律,方法的检出限为0.014μg/mL,表观摩尔吸光系数为1.74×104L/(mol ·cm)。将此方法用于几种酒中锰的测定,结果与原子吸收分光光度法(AAS)的测定结果一致,加标回收率在97.0%～102.7%之间。     

LLE-UPLC-FLD法测定橄榄油中羟基酪醇和酪醇的含量

建立了液液萃取-超高效液相色谱串联荧光检测器(LLE-UPLC-FLD)快速分离和测定橄榄油中羟基酪醇和酪醇含量的方法。橄榄油样品经乙醇提取后,以0.2%(v/v)甲酸乙腈溶液和0.2%(v/v)甲酸水为流动相,梯度洗脱,采用BEH(50 mm×1.0 mm,1.7 μm)色谱柱,柱温为35 ℃,流速为0.15 mL/min,进样量为2.0 μL,使用荧光检测器在激发波长为300 nm,发射波长为350 nm下进行检测,整个分析过程仅需10 min。羟基酪醇和酪醇的检出限(S/N=3)及定量限(S/N=10)分别为0.11,0.13和0.31,0.39 μg/g,2种组分按高、中、低3个浓度水平加标回收率均高于89.52%;在最优条件下,对20批不同产地橄榄油中的羟基酪醇和酪醇进行检测,羟基酪醇和酪醇的含量范围分别在1.28~20.34及1.03~21.22 μg/g之间;该法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于橄榄油中酪醇和羟基酪醇含量的测定。     

高效液相色谱法测定乳酸菌发酵液中γ-氨基丁酸

通过对衍生试剂浓度、衍生时间、衍生温度、检测波长、流动相比例与柱温条件的选择,建立了一种高效液相色谱（HPLC）法灵敏检测发酵液中γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。以邻苯二甲醛为衍生化试剂,衍生时间5 min,衍生温度为室温,色谱条件为：检测波长228 nm,流动相为乙腈-20 mmol/L结晶乙酸钠溶液（21∶79,V/V）,柱温30 ℃,流速0.8 mL/min。结果表明,在γ-氨基丁酸含量0.05 μg/mL～0.50 mg/mL范围内线性关系良好（相关系数R2=0.999 4）,平均加标回收率为91.87%～105.58%,精密度试验结果相对标准偏差（RSD）为0.55%～3.74%（n=5）,检出限为0.02 μg/mL。采用该方法检测发酵液中γ-氨基丁酸含量,其含量范围在0.157～0.369 mg/mL之间。该方法操作简单、灵敏、准确可靠,适用于发酵液中γ-氨基丁酸含量的检测。     

双波长法测定薯芋类农产品中直链淀粉和支链淀粉的含量

目的:建立薯芋类农产品中直链淀粉和支链淀粉的双波长测定法,为品种选育、品质分级、加工应用和标准制定等提供基础数据。方法:研究了直链淀粉和支链淀粉的吸收光谱图,确定二者的最大吸收波长及参比波长。优化了分散剂、乙酸加入量等显色条件及测定条件。结果:直链淀粉标准曲线方程为:y=0.0259x?0.0051,R2=0.9994,线性范围0~33 μg/mL;支链淀粉标准曲线方程为:y=0.0031x+0.0167,R2=0.9965,线性范围0~111 μg/mL。直链淀粉的检出限为0.093 μg/mL,定量限0.28 μg/mL;支链淀粉的检出限为0.079 μg/mL,定量限0.24 μg/mL,直链淀粉回收率为90.0%~100.0%;支链淀粉回收率为88.0%~108.0%。结论:双波长法简单易行,结果准确可靠,适用于薯芋类农产品中直链淀粉和支链淀粉的分析检测。     

当归胶囊中三种有效成分含量测定的方法学验证

目的:建立当归胶囊中三种有效成分藁本内酯、阿魏酸、粗多糖的含量测定方法,并对检测方法进行方法学验证。方法:藁本内酯、阿魏酸采用高效液相色谱法,粗多糖采用紫外分光光度法,进行系统适应性、专属性、线性、检出限、准确度、精密度、重复性、稳定性等的方法学考察。结果:藁本内酯在20~60 μg/mL线性良好,r=0.9996,平均加样回收率为99.72%(RSD=2.99%),精密度、重复性、稳定性RSD均≤1%;阿魏酸在6~18 μg/mL线性良好,r=0.9990,平均加样回收率为96.11%(RSD=4.18%),精密度、重复性、稳定性RSD均≤2%;粗多糖在0.05~0.15 mg线性良好,r=0.9987,平均加样回收率为103.52%(RSD=4.79%),精密度、重复性、稳定性RSD均≤5%。结论:三种方法准确、可靠,可用于当归胶囊中三种有效成分藁本内酯、阿魏酸、粗多糖的含量测定。