高效液相色谱法分析食品中多环芳香类物质(PAHs)

荧蒽,苯并(k)荧蒽,苯并(b)荧蒽,苯并芘(BaP),苯并(g,h,i)芘具有致癌或者致突变效应,为测定这5种多环芳香类物质在食品中的含量,本研究建立了高效液相色谱同时分析5种的多环芳香类物质的方法.荧蒽,苯并(k)荧蒽,苯并(b)荧蒽,苯并芘(BaP),苯并(g,h,i)芘的检测限分别为0.12,0.0128,0.0214,0.0412,0.126ng/mL(进样量5μL),定量限分别为0.4,0.0428,0.0713,0.137,0.42ng/mL回收率在85%～100%以内.该方法灵敏度高、操作简单、定量准确.     

高风险食品中多环芳烃含量调查与分析

目的 通过对河北省11地市136份煎炸与熏烤食品中多环芳烃的（PAHs）含量的检测,考察不同食物种类、食物的来源渠道等因素对食品中PAHs含量的影响,。提示相关暴露风险。方法 样品经环己烷：乙酸乙酯(1:1, V:V)溶液超声提取后,通过凝胶色谱进行净化处理,采用高效液相色谱-荧光检测法进行检测。结果 市售的136份样品中, 均检出不同种类不同含量的PAHs, 检出率为100.0%,其中菲、蒽、荧蒽、芘及苯并(a)芘检出率较高;苯并(a)蒽、屈、苯并(b)荧蒽及苯并(k)荧蒽检出率相对较低。结论 高温、长时间反复使用的非正规散装食用油、直接使用明火煎炸与熏烤的食品中PAHs含量更高;正规厂家生产的此类食品中PAHs含量相对较低。     

高效液相色谱-荧光检测法检测植物性食品中14种欧盟优控多环芳烃

目的 建立准确测定蔬菜、水果及粮食中多环芳烃含量,了解河北省内上述食品中14种欧盟优控多环芳烃(苯并(c)芴、苯并(a)蒽、?、5-甲基?、苯并(j)荧蒽、苯并(b)荧蒽、苯并(k)荧蒽、苯并(a)芘、二苯并(a,l)芘、二苯并(a, h)蒽、苯并(g,h,i)苝、茚并(1,2,3-cd)(a)芘、二苯并(a,e)芘、二苯并(a,i)芘、二苯并(a,h)芘)的实际污染状况。方法 样品经环己烷：乙酸乙酯(1:1, V:V)溶液超声提取后,浓缩至近干,经正己烷复溶后通过多环芳烃专用固相萃取柱进行净化处理,洗脱液经浓缩后用乙腈定容,采用液相色谱-荧光检测法进行检测。结果 14种化合物的线性范围为1.00~18.0μg/kg;方法回收率为60.9%~125.4%,相对标准偏差为2.2%~7.6%;苯并(c)芴、苯并(a)蒽、?、5-甲基-1,2-苯并菲、苯并(j)荧蒽、苯并(b)荧蒽、苯并(k)荧蒽、苯并(a)芘、二苯并(a,e)芘、二苯并(a,i)芘、二苯并(a,h)芘检出限为0.15μg/kg;二苯并(a,l)芘、二苯并(a, h)蒽、苯并(g,h,i)苝、茚并(1,2,3-cd)芘检出限为0.3μg/kg。市售的96份样品中, 检出不同种类不同含量的多环芳烃类化合物, 检出率为51.0%。结论 本方法重现性好,检测灵敏度高,可用于水果、蔬菜及粮食中14种多环芳烃的检测。     

纸浆蒽酮及蒽醌的HPLC分析中色谱条件的优化

对反相高效液相色谱测定纸浆中最难分离的蒽酮及蒽醌的色谱条件进行了优化。研究表明,采用ArcusRP-18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇/水(体积比85/15,pH 5.2),流速1.0 mL·min-1,UV紫外检测器,检测波长254 nm,蒽酮及蒽醌的峰形和分离度得到明显改善,精密度和回收率分析表明,该方法操作快速、准确。     

煎炸油中多环芳烃污染情况及其健康风险评估

目的 了解煎炸油中多环芳烃(PAHs)污染水平,并评估其对人群造成的健康风险。方法 利用2015年和2017年PAHs专项监测中158份煎炸油样品的8种PAHs污染水平数据,以及其中76份样品14种PAHs污染水平数据,结合我国普通人群植物油消费量,采用暴露情景假设的方法,计算膳食暴露量和暴露限值(MOE),评估其健康风险。结果 煎炸油样品中14种PAHs化合物的检出率范围为0.0%～100.0%,其中苯并(a)芘的检出率为83.5%(132/158)。二苯并(a,h)蒽污染水平最高,均值为3.33 μg/kg,其次分别为苯并(a)蒽、艹屈、苯并(a)芘,均值分别为2.25、2.21、1.91 μg/kg。艹屈 是14种PAHs中最主要的化合物,占14种PAHs的比例为18.6%。经煎炸油摄入的苯并(a)芘、苯并(a)芘+艹屈 、苯并(a)芘+艹屈 +苯并(a)蒽+苯并(b)荧蒽、苯并(a)芘+艹屈 +苯并(a)蒽+苯并(b)荧蒽+苯并(k)荧蒽+二苯并(a,h)蒽+苯并(g,h,i)芘+茚并(1,2,3-cd)芘的平均暴露量分别为0.99、2.13、4.36、7.90 ng/kg BW,其MOE值分别为70 707、79 812、77 982、62 025,均远大于10 000。结论 基于当前监测的煎炸油中PAHs污染水平,我国普通人群经煎炸油摄入PAHs的健康风险在极端暴露的情况下较低。     

高温处理对羊肉中主要有害物质的影响

为研究煎、炸、烤3种高温处理对羊肉中有害物质的影响,试验选用横山羊肉,通过调控其高温处理时间和温度,采用分光光度法、气相色谱-质谱(GC-MS)外标法和高效液相色谱(HPLC)外标法分别测定高温处理后羊肉中的亚硝酸盐、反式油酸(C18:1 trans-9)及多环芳烃(PAHs)。结果表明:煎制2 min和3 min处理的羊肉中亚硝酸盐含量较低(p0.05);处理时长对C18:1 trans-9含量影响差异不显著(p0.05);2 min和3 min处理的羊肉中菲、芘和二苯并[a,h]蒽含量均较低(p0.05);炸制3 min处理的羊肉中亚硝酸盐,C18:1 trans-9,芘、苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘和二苯并[a,h]蒽、苯并[a]蒽5种PAHs含量均最低(p0.05);160℃烤制处理的羊肉中亚硝酸盐含量最低(p0.05);160℃和180℃处理的羊肉中C18:1 trans-9含量较低(p0.05);160℃处理的羊肉中萘、菲和苯并[a]芘含量低于180℃,菲、苣、苯并[k]荧蒽和苯并[a]芘含量低于200℃(p0.05)。综合分析,3种高温处理对羊肉中有害物质有较大影响,羊肉在226～228℃下煎制2～3 min、炸制3 min、在160℃下烤制40 min时3类有害物质含量相对较低。     

远红外烤制对烤鱼品质及多环芳烃含量的影响

为了改善烤鱼的质构特性等食用品质,减少多环芳烃的形成,以草鱼为对象,研究传统炭烤和远红外烤制方式对烤鱼质构特性及多环芳烃含量的影响。结果表明：传统炭烤和远红外烤制对烤鱼的食用品质有不同影响,与传统炭烤鱼肉相比,远红外烤制鱼肉硬度显著降低（P＜0.05）,且剪切力均显著低于传统炭烤组（P＜0.05）,能够显著改善烤制鱼肉的嫩度;相对而言,远红外烤制鱼肉具有更优的质构特性;远红外烤制能显著降低烤鱼肉中PAH4（苯并(a)蒽、?、苯并(k)荧蒽、苯并(a)芘）和PAH16（萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并(a)蒽、?、苯并(b)荧蒽、苯并(k)荧蒽、苯并(a)芘、茚苯(1,2,3-c,d)芘、二苯并(a,h)蒽、苯并(g,h,i)芘）的生成量（P＜0.05）,与传统炭烤鱼肉相比,PAH4和PAH16总生成量分别下降39.07%和44.07%。     

高效液相色谱-荧光法测定油炸型膨化食品中4种多环芳烃

建立了高效液相色谱-荧光法(HPLC-FLD)测定油炸型膨化食品中苯并[a]蒽(BaA)、(CHR)、苯并[b]荧蒽(BbF)、苯并[a]芘(BaP)4种多环芳烃(PAHs)的分析方法。样品经饱和氯化钠分散后,采用正己烷萃取,经BAP-3分子印迹柱净化,Waters PAH C₁₈色谱柱分离,荧光检测器进行测定,外标法定量。在0.5~40 μg/L浓度范围内4种PAHs均有良好的线性(r>0.999),定量限为(LOQ)0.3~0.5 μg/kg。在空白样品中进行1、5、25 μg/kg 3个水平的加标回收实验,方法的平均回收率在90.3%~107.4%之间,精密度在6.5%以下。该方法简单、快速、灵敏、重现性好,可用于油炸型膨化食品中4种PAHs的定量测定。     

固相萃取-高效液相色谱联用测定食用油中的4种多环芳烃

采用固相萃取与高效液相色谱-荧光检测联用技术,建立了食用油中4种多环芳烃(PAHs),即(Chr)、苯并(a)蒽(Ba A)、苯并(b)荧蒽(Bb F)和苯并(a)芘(Ba P)的快速分析方法。自制固相萃取小柱,并优化了固相萃取条件。结果表明,食用油样品经异丙醇稀释后可直接进行固相萃取分析。固相萃取优化条件为:BenzoⅡSPE填料1.0 g,洗脱液丙酮8 m L,清洗液异丙醇4 m L,上样液为2 m L 0.2 g/m L的异丙醇稀释油样。4种PAHs在1~50 ng/m L(苯并(b)荧蒽为2~50 ng/m L)质量浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数在0.999 2~0.999 8之间,检出限为0.14~0.76ng/g,日内、日间相对标准偏差在2.7%~9.9%之间。对中国计量科学研究院提供的3份橄榄油样品PAHs测定的结果与所给参考值(1号油样Ba P含量)相差10.3%。建立的方法可用于多种食用油中4种PAHs的分析检测,具有耗时短、有机溶剂消耗少、简便快速等优点。     

气体射流冲击烤制"北京烤鸭"不同加工技术与鸭皮中多环芳烃含量变化的研究

采用气体射流冲击加热新技术烤制"北京烤鸭",在保证烤鸭品质的前提下,改变烤制温度,运用高效液相荧光检测技术研究不同烤制温度的烤鸭鸭皮中高致癌性多环芳烃(PAHs)含量的变化.结果显示,在170、190、2100C三种不同烤制温度下,苯并[a]芘含量在0.13～0.451xg/kg,二苯并[a,h]蒽含量在0.48～2.01μg/kg,7,12一二甲基苯并[a]蒽含量为1.28～3.19μg/kg,苯并[a]芘含量远远低于国家标准5μg/kg.高烤制温度下(210%)各PAHs的产生量要显著高于低温(170、190℃)烤制产生的量,在此技术下低温烤制产品安全性更高于高温烤制产品.     

溶菌酶与Nisin生物保鲜剂对缢蛏保鲜效果的研究

实验研究了冷藏条件下用Nisin与溶菌酶复合生物保鲜剂对缢蛏的保鲜效果,研究结果表明:Nisin和溶菌酶单独使用或混合添加与单纯冷藏(对照组)相比均具有明显的保鲜效果,混合添加保鲜效果更佳,该研究对于延长缢蛏的冷藏期具有一定的实际意义。     

酵母菌发酵啤酒生产废水产微生物油脂和菌体蛋白的研究

为探索啤酒生产废水综合利用的方法和途径,采用液体发酵的方法,从7个酵母菌株中筛选出既能产微生物油脂和菌体蛋白,又能有效降解COD的菌株。考察了优良酵母菌株的发酵周期,并对其所产油脂的脂肪酸组成和菌体蛋白的氨基酸组成进行分析。结果表明:6#菌株——Trichosporon porosum D02、1#菌株——斯达油脂酵母Lipomyces starkeyi 1809对废水的资源化利用程度最高,6#和1#2个优良酵母菌株在发酵120 h时的油脂产量、菌体粗蛋白产量、COD降解率分别达到8.93 g/L、6.1 g/L、89.09%和4.62 g/L、4.42 g/L、81.47%。2个优良酵母菌株所产油脂的脂肪酸组成均以C_(16)和C_(18)系为主,含量最高的为油酸(C_(18∶1))和棕榈酸(C_(16∶0)),不饱和脂肪酸指数(IUFA)分别达到80.33%和61.57%。除脯氨酸未检出外,2个优良酵母菌株菌体蛋白均含有17种氨基酸,其中8种必需氨基酸占氨基酸总量的比例分别为44.14%和44.23%,可完全充当动物蛋白饲料。     

两株降油菌株的分离及其降油特性

从华庆石油污染的仁壤rf-筛选出2株能够对原油进行高效降解的微生物菌株A1和A2。通过菌种降解特性的甲．因素实验可得菌种生长和降解的优化条件为：温度28℃、pH=8．0、盐度2g／L条件下,A1和A2菌株的石油降解率均达到95％以上。     

三种光敏剂介导的光动力对水体中8种多环芳烃的降解作用

为了探究不同光敏剂(姜黄素、核黄素、金丝桃素)介导的光动力对水体中多环芳烃的降解作用,以含有8种多环芳烃的水体为研究对象,在光敏剂浓度为10μM,光照时间为15 min的条件下,采用光动力方法处理并通过同步荧光法测定水体中的各种多环芳烃。结果表明,姜黄素介导的光动力对多环芳烃的降解效果明显优于核黄素和金丝桃素介导的光动力组。经姜黄素光动力处理后,水体中的8种多环芳烃均发生一定程度的降解,其中,荧蒽和菲的降解率分别为77.07%和78.31%,苯并[k]荧蒽和?的降解率分别为80.10%和85.95%,苯并[a]芘、萘、苯并[a]蒽和蒽的降解率达到95%以上。以上研究表明,与其他两种光敏剂相比,姜黄素介导的光动力对水溶液中的8种多环芳烃均具有显著的降解效果,为该技术在生活用水以及养殖水体污染治理方面的推广应用提供理论依据。     

水产品中多环芳烃菲的检测及生物降解的研究

多环芳烃是以非极性、中性分子形式存在的一类持久性有机污染物。菲是一种含有3个苯环的多环芳烃,广泛存在于煤焦油中,能够通过生物链行为在水体和水产品中积聚。选择菲作为主要研究对象,建立了一种从水产品中高效提取菲的方法,利用高效液相色谱(HPLC)法对市售花蛤、田螺中提取的菲进行分析检测,并且利用不同浓度的菲处理后进行富集度比较。结果表明:在田螺中发现了菲的富集,其含量为56.9 ng/g;低浓度处理反而比高浓度处理富集度高。选用8种能够降解芳香环类化合物的天然菌株开展对菲降解的研究,并且对其降解条件进行初步优化。结果显示:这8种菌株均能降解菲,其中P14菌株在27 ℃条件下,震荡培养2 d,pH值为9,添加浓度为10 mg/L的钙离子,对0.1 mmol/L菲的降解效率最高。     

Simultaneous detection by PCR of Escherichia coli, Listeria monocytogenes and Salmonella typhimurium in artificially inoculated wheat grain

A multiplex PCR procedure was established to detect Escherichia coli, Listeria monocytogenes and Salmonella typhimurium in artificially inoculated wheat grain. The PCR protocol with an enrichment step successfully detected all three organisms inoculated together in non-autoclaved wheat grain. After a one day enrichment, E. coli, L. monocytogenes and S. typhimurium were detected at levels of 56, 1800 and <54 CFU/mL, respectively, in the initial sample. For L. monocytogenes, an improved detection limit of <62 CFU/mL was achieved using singleplex PCR. For autoclaved wheat grain inoculated with the three bacterial strains individually, a detection limit of 3 CFU/mL was achieved after an enrichment step. The ability to test for the three bacteria simultaneously will save time and increase the ability to assure grain quality.     

浓香型白酒糟醅中农药降解菌的筛选及多样性分析

通过富集培养和平板初筛,从浓香型白酒糟醅中分离筛选可降解农药的微生物菌株,并进行16SrRNA基因序列系统发育分析。结果显示:52株分离菌株中,可降解丙环唑、莠去津和2,4D丁酯的菌株分别为25,10,17株,其中51株菌分属于Bacillus、Lysinibacillus、Pseudomonas、Acinetobacter、Brevibacillus和Stenotrophomonas 6个属的22个模式菌株,1株菌与B.thuringiensis的序列相似度为97.3%,可能是该菌株的变种;Bacillus是可以降解3种农药的共有属和优势属(37株,占总菌数的71.2%),Stenotrophomonas和Brevibacillus分别为降解莠去津和2,4D丁酯的特有属。     

产β-甘露聚糖酶菌株的筛选鉴定及产酶条件优化

为获得产β-甘露聚糖酶菌株,取常年种植魔芋的土壤,通过富集培养与筛选鉴定获得目标菌株,并对其产酶条件进行优化。结果表明,分离到6株可以降解魔芋粉的菌株,其中菌株HKS018产生的降解圈最明显,且酶活最高。对菌株HKS018的16S rDNA基因序列和gyrB基因序列进行扩增,通过序列比对及构建系统发育树,结合形态特征、生理生化特征鉴定菌株HKS018为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。其最优发酵条件为：发酵温度30 ℃、发酵时间48 h、初始pH值为7.0、接种量1.0%、装液量50 mL/250 mL、转速180 r/min。在此优化条件下,β-甘露聚糖酶酶活为68.28 U/mL,比优化前酶活力提高了5.29倍。     

阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)分离鉴定及其对蔬菜中甲萘威农药降解作用的研究

目的 从寒地黑土中筛选甲萘威降解菌,并对筛选得到的菌株进行形态学及16S rDNA分子鉴定,将该菌株用于蔬菜样品中甲萘威农药残留降解规律的研究。方法 从土壤样品中用含甲萘威农药的培养基进行平板稀释法初筛、96孔板法复筛,分别在37℃(1 d)、4℃(6 d)下进行培养,筛选在OD₆₀₀ nm处吸光值高的菌株,即为可利用甲萘威生长的菌株。获得OD₆₀₀ nm为0.906的菌株D7,并对该菌株进行形态学以及分子生物学鉴定。结果 菌株D7经鉴定为阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai);菌株D7对所选5种叶菜和5种果菜中残留的甲萘威均有一定降解作用,且对生菜中甲萘威的降解率最高为58.7%。结论 筛选出阿氏芽孢杆菌D7,在低温条件生长良好。为微生物法降解甲萘威提供优良降解菌株,解决蔬菜中甲萘威残留的问题。     

Combined antimicrobial effect of nisin and a listeriophage against Listeria monocytogenes in broth but not in buffer or on raw beef

The effect of nisin and listeriophage LH7, alone and in combination, on the growth and survival of two strains of Listeria monocytogenes in broth and two model food systems, with appropriate controls, was determined. Growth curves for both bacterial strains in tryptic soy broth incubated at 7 or 30 degrees C, and with the addition of nisin and/or listeriophage at lag, mid-exponential or early stationary phase, were obtained by measuring absorbance at 550 nm. Numbers of mixed populations of both L. monocytogenes strains in phosphate buffered saline (pH 5.5) and on vacuum-packaged fresh beef, both stored for 4 weeks at 4 degrees C, and with the addition of nisin and/or listeriophage, were determined. This was achieved by plating appropriately diluted samples on both Tryptic Soy Agar and Modified Oxford Agar to determine both L. monocytogenes numbers and the presence of sub-lethal injury. In broth nisin alone, reduced levels or prevented growth of the two strains under the conditions studied, but regrowth to levels equivalent to those of untreated cells, occurred. Listeriophage LH7 alone, on the other hand, had no effect in broth under the conditions studied. Notably, however, a mixture of nisin and listeriophage displayed a combined effect in broth and reduced levels of cells substantially without regrowth under the conditions studied. In both model food systems only nisin appeared to be active, in a manner consistent with existing literature, and no combined action was apparent. The use of nisin and listeriophage has potential to control L. monocytogenes in foods but a further understanding of the interactions in this complex system needs to be achieved before it could be applied practically.