铁皮石斛多糖不同分级组分对小鼠免疫调节及肠道健康的影响

目的：研究铁皮石斛多糖不同分级组分对小鼠免疫调节及肠道健康的影响。方法：利用梯度醇沉法对铁皮石斛精多糖进行相对分子质量的分级处理。以环磷酰胺诱导免疫抑制小鼠模型,通过灌胃铁皮石斛多糖不同分级组分,比较灌胃前、后小鼠胸腺指数、血清和脾脏细胞因子分泌量的变化,探究铁皮石斛多糖不同分级组分对小鼠的免疫调节作用。同时测定模型组与多糖分级组的粪便含水量、pH值和短链脂肪酸含量水平,研究铁皮石斛多糖分级组分对肠道健康的影响。结果：与模型组相比,DOP组和F50S组均能显著提高小鼠胸腺指数,促进IFN-γ、TNF-α、IL-6的分泌,抑制IgE的分泌,在一定程度上引导免疫类型向Th1型偏移,提高小鼠的免疫功能;并能降低粪便pH,提高粪便含水量和SCFAs含量水平,从而促进肠道健康。结论：铁皮石斛多糖不同分级组分均能有效增强免疫低下小鼠的免疫调节作用,并改善其肠道健康,DOP比各分级组分的作用效果好;各分级组分中,相对分子质量最小的F50S作用效果较其它组分更为明显。     

铁皮石斛多糖化学修饰及其对免疫活性的影响

采用水提醇沉法结合冻融制备高纯度铁皮石斛多糖,并利用硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰方法对铁皮石斛多糖进行化学修饰,探讨不同方法修饰的铁皮石斛多糖对RAW264.7巨噬细胞免疫活性影响。结果表明,铁皮石斛纯多糖(purified polysaccharides of Dendrobium officinale,DOP)的中性糖含量较高,而糖醛酸及蛋白质含量则较低,分别为87.37%、3.19%和0.51%,羧甲基化及硫酸化显著降低了铁皮石斛多糖的中性糖含量。红外分析结果显示硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰衍生物均已成功制备。高性能凝胶渗透色谱法测定铁皮石斛多糖分子质量为960 k D,硫酸化及羧甲基化修饰显著增加了其分子质量。体外实验研究发现,硫酸化和脱乙酰化修饰的铁皮石斛多糖能够增强RAW264.7巨噬细胞的免疫活性,而羧甲基化修饰则表现为显著的抑制作用,表明不是所有的官能团接枝改性都可以改善铁皮石斛多糖对免疫活性的影响。     

铁皮石斛低温干燥抑制其水溶性多糖的聚合反应

本研究旨在探明干燥温度对铁皮石斛中多糖分子结构和抗氧化活性的影响。分别以新鲜铁皮石斛、以及60、100和140℃热风干燥铁皮石斛为实验材料,通过提取和纯化制备水溶性石斛多糖FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP,然后对石斛多糖进行分子结构分析和抗氧化活性测定。FDOP和60 DOP的还原端含量分别为1.82%、1.70%。然而,100 DOP和140 DOP的还原端含量分别降低至1.42%、1.10%。各铁皮石斛多糖主要由甘露糖和葡萄糖组成,单糖摩尔比与干燥温度之间无明显的关联。随着干燥温度的升高,石斛多糖的分子量分布曲线向大分子量方向偏移。FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP中分子量103～106 u的多糖组分质量比分别为70.68%、67.70%、62.24%和58.11%。在UV光谱的280 nm处,FDOP、60 DOP、100 DOP没有吸收峰,而140 DOP有吸收峰。分子量103～106 u的多糖组分、还原端较多的铁皮石斛多糖具有较大的自由基清除能力和还原力。在铁皮石斛干燥中,60℃的温度有利于抑制多糖的聚合反应,保持多糖的抗氧化活性。本研究为石斛功能食品的生产及利用提供了技术数据和理论依据。     

阿里红多糖组分对RAW264.7巨噬细胞免疫功能的影响

目的研究阿里红多糖(Fomes Officinals polysaccharide,FOPS)及其组分FOPS-a、FOPS-b对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用。方法以小鼠RAW264.7巨噬细胞为研究对象,不同浓度(50~1600μg/m L)FOPS、FOPS-a、FOPS-b干预后,用cck-8试剂盒测定细胞活力,中性红法测定其吞噬活性,NO试剂盒测定NO的含量,ELISA试剂盒测定TNF-α和IL-1β释放能力。结果 FOPS、FOPS-a、FOPS-b在一定的浓度范围内可以提高RAW264.7巨噬细胞的增殖活性、吞噬活性、一氧化氮以及TNF-α、IL-1β的释放量。结论 FOPS、FOPS-a、FOPS-b一定浓度范围内具有良好的增强RAW264.7巨噬细胞免疫功能的作用。     

大苞鞘石斛和铁皮石斛多糖提取及其免疫调节作用比较

为比较大苞鞘石斛与铁皮石斛多糖对机体免疫调节作用的差异,经提取纯化,分别得到2种石斛不同纯度的粗多糖、精多糖和多糖水洗组分。对昆明小鼠灌胃上述6种纯度的多糖,观察其对小鼠免疫器官指数、迟发性变态反应、抗体积数和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力等免疫学指标的影响。结果表明,纯度最高的大苞鞘石斛多糖水洗组分与铁皮石斛多糖水洗组分含有7种单糖,其中甘露糖和葡萄糖的含量均最高。两种石斛同等纯度多糖的各指标值相近,且随多糖纯度的提高,各指标值逐渐增大,免疫活性逐渐增强。经两种石斛的多糖水洗组分灌胃后,两组小鼠的胸腺指数和脾脏指数相近,耳肿胀率、抗体积数和腹腔巨噬细胞对鸡红细胞吞噬指数差异虽不显著,但均显著高于对照。上述结果表明,与铁皮石斛多糖相比,大苞鞘石斛多糖具有与其相近的免疫调节作用,因而具有良好的药用开发价值。     

草珊瑚多糖对经脂多糖刺激的RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用研究

为研究草珊瑚多糖对RAW264.7巨噬细胞的免疫调节作用,建立LPS刺激的RAW264.7细胞模型,通过MTT法测定,观察草珊瑚多糖对RAW264.7细胞增殖影响并评价细胞毒性。同时,对草珊瑚多糖抑制模型细胞炎症因子一氧化氮(NO)表达及吞噬活性进行研究。结果表明,草珊瑚多糖可显著抑制RAW264.7细胞增殖水平,其细胞毒性分级为1级或以下。同时,草珊瑚多糖可显著抑制模型细胞NO表达及巨噬细胞吞噬活性。此研究将为深入研究草珊瑚抗炎活性作用机制及草珊瑚资源开发提供理论依据。     

铁皮石斛发酵前后主要成分、活性和多糖分子量的变化

为研究面包酵母发酵对铁皮石斛主要成分、生理活性和多糖分子量的影响,以铁皮石斛水提取液为原料,探讨发酵过程中总糖含量、还原糖含量、体外抗氧化活性和体外降血糖活性的变化,并测定发酵前后多糖的分子量。研究结果显示,面包酵母发酵后,总糖和还原糖含量降低,多糖分子量降低,发酵液体外抗氧化能力和体外降血糖活性增强。因此,发酵有利于提高石斛生理活性,可能是由于发酵后石斛中小分子多糖和酸性多糖含量增加。     

蔓三七叶多糖的理化性质及免疫调节活性研究

以蔓三七叶为实验材料,采用水提醇沉法获得蔓三七叶多糖(GPLP),测定了其总糖、糖醛酸、硫酸根以及蛋白质的含量和单糖组成,并对其抗氧化活性和免疫调节活性进行了研究。采用苯酚-硫酸法测定总糖含量,硫酸-间羟基苯酚法测定糖醛酸含量,Ba Cl2-明胶法测定硫酸根含量,气相色谱法测定单糖组分和红外光谱测定多糖的结构。通过总抗氧化能力、DPPH自由基、OH自由基的清除能力评价GPLP的体外抗氧化能力,并探讨其对脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7巨噬细胞免疫调节活性。结果表明,所得GPLP的得率为15.56%,粗多糖中的总糖含量为52.32±1.56 g/100 g;单糖组成为阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为1.39:8.70:3.17:1。体外抗氧化实验结果表明GPLP的总抗氧化能力、DPPH和OH自由基清除效果明显。GPLP可显著提高RAW 264.7细胞内一氧化氮(NO)的浓度,在给药浓度为25.0μg/mL时,NO的分泌量达到最大,为31.24±2.30μM。GPLP可以提高免疫力,在功能食品的开发中,可以作为一个潜在的免疫调节剂。     

榆黄菇多糖提取工艺优化及其免疫调节活性评价

以榆黄菇为研究对象,对榆黄菇多糖（PCP）提取工艺进行优化、纯化、测定单糖组成和分子量,再对其体外免疫活性进行评价。在单因素基础上通过响应面法确定榆黄菇多糖最优提取工艺为：提取温度59.81 ℃,提取时间2.40 h,液料比29.91 mL/g,在此条件下,预测得率为18.82%,实际得率为18.60%。经DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析从榆黄菇多糖中分离纯化出3个多糖组分（PCP-1、PCP-2、PCP-3）,采用离子色谱法和高效凝胶渗透色谱法分析多糖成分和分子量,得出PCP-1由半乳糖组成,分子量为 1.90×104 u;PCP-2由半乳糖和葡萄糖组成,摩尔比为4.36:5.64,分子量2.76×104 u;PCP-3由岩藻糖、盐酸氨基葡萄糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸组成,其摩尔比为0.07:0.11:0.51:7.46:1.85,分子量为4.81×104 u。通过体外试验评估PCP对巨噬细胞RAW264.7免疫调节活性。结果表明,PCP-1、PCP-2和PCP-3多糖质量浓度在25~200 g/mL范围内对巨噬细胞RAW264.7无毒性并具有一定增殖作用、显著提高了NO释放量并增强了巨噬细胞RAW264.7的吞噬能力。当PCP-1、PCP-2和PCP-3多糖质量浓度为200 g/mL时,巨噬细胞RAW264.7 NO释放量达到最大值,分别为11.40、11.56、11.76 moL/L。该研究结果可为榆黄菇的精深加工综合利用提供理论依据。     

超高压提取铁皮石斛多糖工艺优化及其抗氧化活性分析

目的:优化超高压提取铁皮石斛多糖工艺条件,并分析其基本性质及体外抗氧化活性。方法:以铁皮石斛干粉为原料,优化超高压技术提取铁皮石斛多糖工艺条件,分析传统热水浸提法、超高压法两种提取方法下的铁皮石斛多糖的相对分子量与单糖组成,并比较其体外抗氧化活性。结果:超高压提取铁皮石斛多糖的最佳工艺条件为超高压压力200 MPa,料液比1:25 (g/mL),保压时间5 min,此时铁皮石斛多糖得率为33.3%,比传统热水浸提法提高了128%,且超高压法提取的多糖蛋白含量和相对分子量下降,甘露糖含量提高,对DPPH自由基的清除能力提高。结论:超高压提取的铁皮石斛多糖得率高,体外抗氧化活性较好。     

铁皮石斛多糖分离纯化及其药理活性研究进展

铁皮石斛是我国名贵的药食同源资源,具有较高的保健价值。铁皮石斛多糖是铁皮石斛中重要的活性成分之一。本文对铁皮石斛多糖的提取、分离纯化、分子量、单糖组成进行总结归纳,并对铁皮石斛多糖的降血糖及改善糖尿病并发症、保护胃黏膜损伤、抗肿瘤、调节微生态的最新研究进展进行综述。针对目前铁皮石斛多糖含量影响因素较多、分离纯化重复性差、结构分析不够清晰、构效关系的研究不够深入等现状,提出未来研究的展望,以期为铁皮石斛的开发利用提供有益参考。     

铁皮石斛多糖复合酶法提取工艺及其抗氧化性

探讨复合酶法提取铁皮石斛多糖的最佳工艺以及酶解多糖的抗氧化活性。利用单因素及L₁₈(37)正交实验研究了酶配比、酶浓度、酶解温度、酶解时间、料液比及pH对多糖得率的影响,并通过清除DPPH、ABTS自由基研究酶解多糖的抗氧化活性。结果显示酶解最优条件:中性蛋白酶与纤维素酶比例为2:1,酶浓度为10%,料液比为1:120,酶解温度为55 ℃,pH6.0,酶解时间为3 h,在此条件下多糖得率为43.85%±1.8%;酶解多糖对DPPH、ABTS自由基的IC₅₀分别为1.331、0.467 mg/mL,说明酶解石斛多糖具有较好的抗氧化活性。     

三个不同种源的铁皮石斛多糖比较及其初步的药理活性评价

本文通过对云南、丹霞、浙江三个不同种源的铁皮石斛多糖进行了同样的提取、分离、纯化,分别对其分子量、单糖组成、红外光谱进行比较,以及初步的药理活性评价,来讨论不同产地的铁皮石斛差异.采用高效凝胶渗透色谱法(High Performance Gel Permeation Chromatography,HPGPC)对纯化的多...     

体外模拟3 种消化液对铁皮石斛多糖的消化作用

本实验采用人体胃肠道模拟系统,体外模拟3 种消化液对铁皮石斛多糖的消化行为。通过高效凝胶液相色谱、铁氰化钾法和高效离子交换色谱分别测定消化后多糖分子质量变化、还原糖含量和单糖组成的情况。结果表明：唾液不能改变铁皮石斛多糖的分子质量;模拟胃液和模拟胃肠液可以降低多糖的分子质量,同时提高多糖溶液中的还原糖含量,但没有检测到单糖。结论：在体外模拟胃肠道的消化体系中,铁皮石斛多糖的分子质量减小,糖苷键发生断裂,但没有游离单糖的释放。     

铁皮石斛多糖水解工艺优化及甘露糖含量的测定

优化高温高压辅助硫酸水解铁皮石斛多糖工艺,测定了不同栽培方式的铁皮石斛不同部位多糖及甘露糖含量。利用苯酚-硫酸法测定3种栽培方式的铁皮石斛茎、叶、花多糖的含量;以单因素实验为依据,固定料液比、硫酸浓度,根据中心组合试验设计（Central Composite Design,CCD）原理建立两因素五水平响应面法优化硫酸水解铁皮石斛多糖的温度及时间,采用柱前衍生化-高效液相色谱法测定甘露糖含量。结果表明,以1 mol/L的硫酸溶液为催化剂,料液比1:1.5、水解温度112 ℃（压强0.15 MPa）,水解44 min,甘露糖含量达64.35%±0.76%;同一栽培方式的铁皮石斛茎、叶、花多糖、甘露糖含量表现出极显著差异（P<0.01,茎>叶>花）,茎的多糖及甘露糖含量分别在29.32%~33.78%、18.17%~21.05%;叶分别在15.91%~17.31%、10.28%~11.11%,花分别在8.37%~8.68%、5.30%~5.75%之间。高温高压辅助硫酸水解铁皮石斛多糖工艺高效可行,铁皮石斛茎、叶、花是制备甘露糖的优质天然资源。     

霍山石斛多糖理化性质与生物活性的年动态变化研究

为分析霍山石斛多糖理化性质与生物活性的年动态变化规律来确定霍山石斛的适宜采收期,本文利用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、红外光谱、乌氏黏度计、分光光度法等方法分析霍山石斛多糖的理化性质,并通过体外细胞实验检测了霍山石斛多糖的肠黏膜免疫调节活性和抗食管癌活性。结果表明,霍山石斛多糖主要由甘露糖和葡萄糖组成的两组分子量不同的组分构成,多糖含量和高分子量组分的分子量在全年呈现降-升-降-升的变化,多糖黏度、乙酰基含量和单糖摩尔比呈现降-升-降的变化,低分子量组分则在5~9月期间消失。霍山石斛多糖具有一定的肠黏膜免疫调节活性和抗食管癌活性,其免疫调节活性在9月至翌年4月优于5~8月,而多糖抑制食管癌细胞生长的作用在秋冬季好于春夏季。由霍山石斛多糖理化性质与生物活性变化之间的关系,可初步确定霍山石斛的最佳采收期为秋冬季。     

不同铁皮石斛红鑫品种品质的对比研究

本研究比较不同铁皮石斛红鑫品种(红鑫1号青杆、红鑫1号红杆、红鑫5号)的品质,对比了三种红鑫铁皮石斛的硬度、剪切力和剪切位移、粘度和稠度、感官评分、色差值;多糖含量、分子量、单糖组分,黄酮类物质含量和生物碱含量,同时探究了打浆前后石斛品质与质构的关系。结果表明:三种石斛样品的硬度、剪切力、多糖分子量,打浆后稠度、色差值有显著性差异。多糖为非均一组分,是杂多糖,其中红鑫1号红杆多糖含量最高,其次是红鑫1号青杆、红鑫5号。多糖的单糖组成基本相同,主要由4种六碳糖(甘露糖、葡萄糖、半乳糖、鼠李糖)和3种五碳糖(核糖、阿拉伯糖、木糖)组成,其中甘露糖和葡萄糖含量最高,其次是阿拉伯糖,但相对含量有所不同。其中红鑫1号红杆的甘露糖相对含量最高,含量为46.71%,红鑫1号青杆是36.52%,最小的是红鑫5号为35.92%。三种石斛样品的水分含量、剪切位移、感官评分等无显著差异。打浆前干品石斛多糖的含量与其质构(硬度、剪切力、剪切位移)呈正相关,而石斛浆多糖含量与其稠度呈正相关。表明同产地、同系列、不同红鑫品种的铁皮石斛品质存在显著性差异,红鑫1号红杆在感官综合评分、多糖含量、单糖组成上优于红鑫1号青杆、红鑫5号,研究结果为铁皮石斛优良种源的选育及科学评价提供参考。     

白芍多糖提取工艺优化、分子特性分析及其对巨噬细胞的增殖作用

本文采用水提醇沉法提取白芍多糖,通过正交试验确定白芍多糖提取工艺参数并分析其化学组成,使用高效尺寸排阻色谱-紫外检测器-多角度激光光散射仪-示差折光检测器联机系统检测多糖分子量,利用气相色谱-质谱联用仪分析多糖的单糖组成和链接方式,采用WST法检测白芍多糖对巨噬细胞RAW264.7增殖率的影响。结果表明:白芍多糖的最佳提取工艺参数为液料比25:1 mL/g、提取温度85 ℃、提取时间3.0 h,得率12.40%。白芍多糖含有96.2%±1.2%总糖和5.5%±0.6%蛋白质,未检出硫酸根和糖醛酸,其分子质量和回转半径分别为2.3×106 u和234.9 nm。白芍多糖主要含葡萄糖,大部分是通过（1→4）糖苷键链接的。同时,白芍多糖可以在2、5、10 μg/mL浓度范围促进RAW264.7细胞增殖。其中,10 μg/mL处理组的细胞增殖率得到大幅提升,且与其他组别的细胞增殖率存在显著性差异（P<0.05）。     

不同生长年限铁皮石斛多糖含量与特性分析

采用凝胶渗透色谱方法测定多糖分子质量,柱前衍生化高效液相色谱法测定多糖的单糖组成,研究不同种植年限铁皮石斛多糖结构组成的差异及抗氧化能力。结果表明,5?a生铁皮石斛多糖含量最高,为238.60?mg/g,3?a生次之,为232.74?mg/g;4?a生铁皮石斛主要多糖分子质量高达1?383?kDa,3?a生次之,为1?046?kDa;1?a生铁皮石斛多糖的甘露糖比例最大,3?a生次之;3?a生铁皮石斛多糖的Fe3＋还原能力、羟自由基清除能力和总抗氧化能力最高。综合多糖含量和抗氧化活性测定结果得出,3?a生铁皮石斛品质最佳。