不同菌种发酵对铁皮石斛多糖及其生物活性的影响

为筛选出可增强铁皮石斛活性的菌种,以铁皮石斛粗多糖水提液为原料,采用6种常用菌种进行纯种发酵。测定发酵前后多糖含量、还原糖含量、多糖分子量、还原糖分子量4个指标并追踪发酵过程中发酵液的体外抗氧化活性和体外降血糖活性。结果显示:发酵可以提高铁皮石斛的抗氧化活性和体外降血糖活性,还原糖含量降低,除曲霉外,其余菌种发酵后多糖含量和多糖分子量均有所下降。面包酵母发酵后,发酵液抗氧化活性最强,对DPPH、OH、ABTS自由基的清除率依次为29.5%、38.2%和31.2%,相比未发酵空白分别提高了56.9%、60.5%和63.4%。红曲霉发酵后其发酵液对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制活性最强,依次为26.3%和22.6%,相对发酵空白分别提高了78.9%和86.8%。     

超高压提取铁皮石斛多糖工艺优化及其抗氧化活性分析

目的:优化超高压提取铁皮石斛多糖工艺条件,并分析其基本性质及体外抗氧化活性。方法:以铁皮石斛干粉为原料,优化超高压技术提取铁皮石斛多糖工艺条件,分析传统热水浸提法、超高压法两种提取方法下的铁皮石斛多糖的相对分子量与单糖组成,并比较其体外抗氧化活性。结果:超高压提取铁皮石斛多糖的最佳工艺条件为超高压压力200 MPa,料液比1:25 (g/mL),保压时间5 min,此时铁皮石斛多糖得率为33.3%,比传统热水浸提法提高了128%,且超高压法提取的多糖蛋白含量和相对分子量下降,甘露糖含量提高,对DPPH自由基的清除能力提高。结论:超高压提取的铁皮石斛多糖得率高,体外抗氧化活性较好。     

铁皮石斛低温干燥抑制其水溶性多糖的聚合反应

本研究旨在探明干燥温度对铁皮石斛中多糖分子结构和抗氧化活性的影响。分别以新鲜铁皮石斛、以及60、100和140℃热风干燥铁皮石斛为实验材料,通过提取和纯化制备水溶性石斛多糖FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP,然后对石斛多糖进行分子结构分析和抗氧化活性测定。FDOP和60 DOP的还原端含量分别为1.82%、1.70%。然而,100 DOP和140 DOP的还原端含量分别降低至1.42%、1.10%。各铁皮石斛多糖主要由甘露糖和葡萄糖组成,单糖摩尔比与干燥温度之间无明显的关联。随着干燥温度的升高,石斛多糖的分子量分布曲线向大分子量方向偏移。FDOP、60 DOP、100 DOP和140 DOP中分子量103～106 u的多糖组分质量比分别为70.68%、67.70%、62.24%和58.11%。在UV光谱的280 nm处,FDOP、60 DOP、100 DOP没有吸收峰,而140 DOP有吸收峰。分子量103～106 u的多糖组分、还原端较多的铁皮石斛多糖具有较大的自由基清除能力和还原力。在铁皮石斛干燥中,60℃的温度有利于抑制多糖的聚合反应,保持多糖的抗氧化活性。本研究为石斛功能食品的生产及利用提供了技术数据和理论依据。     

铁皮石斛多糖液态发酵工艺及其抗氧化活性研究

探讨液态发酵铁皮石斛多糖的最佳工艺及其抗氧化活性。采用单因素及正交实验研究了发酵温度、转速、p H和发酵时间对发酵工艺的影响,得到了液态发酵的最优条件:发酵温度28℃,p H4.5,转速170 r/min,发酵时间54 h;发酵后铁皮石斛水提多糖的总抗氧化能力、清除DPPH及ABTS自由基能力均有所提高,而且均具有很强的量效关系;发酵后石斛多糖的平均分子量由4.234×10~5降为1.077×10~5,推测发酵多糖抗氧化能力的提高可能与微生物发酵过程导致石斛多糖分子量的减小有关。     

体外模拟3 种消化液对铁皮石斛多糖的消化作用

本实验采用人体胃肠道模拟系统,体外模拟3 种消化液对铁皮石斛多糖的消化行为。通过高效凝胶液相色谱、铁氰化钾法和高效离子交换色谱分别测定消化后多糖分子质量变化、还原糖含量和单糖组成的情况。结果表明：唾液不能改变铁皮石斛多糖的分子质量;模拟胃液和模拟胃肠液可以降低多糖的分子质量,同时提高多糖溶液中的还原糖含量,但没有检测到单糖。结论：在体外模拟胃肠道的消化体系中,铁皮石斛多糖的分子质量减小,糖苷键发生断裂,但没有游离单糖的释放。     

铁皮石斛不同部位多糖含量及其抗氧化活性研究

目的测定铁皮石斛茎、叶、花中多糖含量,并对多糖的体外抗氧化活性进行比较,为更充分地开发利用铁皮石斛资源提供实验依据。方法采用苯酚-硫酸法测定铁皮石斛不同部位多糖含量,分别采用DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法和超氧阴离子清除法测定铁皮石斛不同部位多糖的体外抗氧化活性。结果铁皮石斛茎、叶、花中多糖含量分别为34.61%,23.51%,13.47%。茎多糖对DPPH自由基的清除率最高,达87.41%;叶中多糖对羟基自由基的清除率最高,达85.39%;茎、叶、花中多糖对超氧阴离子的清除率均不高。结论铁皮石斛茎、叶、花多糖含量丰富,其多糖有良好的抗氧化活性,具有一定的开发价值。     

铁皮石斛多糖多肽的发酵法提取及其抗氧化活性分析

目的 研究一种有效的铁皮石斛多糖多肽提取方法,并分析其基本性质及体外抗氧化活性。方法 以铁皮石斛为研究对象,采用芽孢杆菌发酵法对铁皮石斛进行提取,用蒽酮-硫酸法和双缩脲法分别测定铁皮石斛提取液的多糖和多肽含量,以传统热水浸提法和超声波辅助提取法为对照,通过提取液对自由基清除能力、螯合金属离子能力、抑制亚油酸自氧化能力、抑制红细胞溶血能力、保湿能力等指标,评价芽孢杆菌发酵提取液的抗氧化活性。结果 芽孢杆菌发酵提取法工艺参数为投料比例1:25(g/mL),发酵pH6,发酵温度33.5 ℃,发酵时间46 h,此时多糖提取率为37.21%,多肽含量高达4.43 mg/ kg,分子量主要分布在2000 Da以下,占84.95 %。提取液对羟基自由基(.OH)、DPPH自由基(DPPH.)和 ABTS自由基(ABTS₊^.)有较强的清除能力,Fe₂₊^螯合能力67%、亚油酸抑制率53%、H₂O₂诱导溶血抑制率64.34%、皮肤含水量提高33.57 %。结论 芽孢杆菌发酵法提取铁皮石斛,提取液多糖多肽含量高,具有较好抗氧化性和保湿性,为铁皮石斛在食品和化妆品领域的开发利用提供了一定的理论指导和实验数据参考。     

铁皮石斛复配花茶制作工艺及其功能性研究

以铁皮石斛花为主要原料,将其与菊花、茉莉花进行复配,采用混料设计,以多糖、黄酮、多酚含量为考察指标,结合感官评价进行权重分析,确定铁皮石斛花复配茶的最佳复配比例并研究其体外抗氧化、降血糖活性。试验结果表明,m(铁皮石斛花)∶m(茉莉花)∶m(菊花)=5∶1∶4为最佳复配比例,多糖、多酚、黄酮含量分别为18.89、30.85、51.27 mg/100mL。铁皮石斛花茶与铁皮石斛复配花茶水提物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基、ABTS自由基清除率IC 50分别为:石斛花茶0.89、3.51、8.76、1.34 mg/mL,石斛花复配茶0.49、4.20、5.70、0.78 mg/mL;铁还原能力测定最大吸光值分别为0.88、1.28。对α-葡萄糖苷酶及α-淀粉酶的抑制活性IC 50值分别为:铁皮石斛花茶4.47、3.26 mg/mL;铁皮石斛花复配茶5.86、5.50 mg/mL,制备得到的铁皮石斛花复配茶具有良好的抗氧化能力及一定的降血糖效果。研究结果为铁皮石斛花资源的有效利用及多元化产品开发提供了理论依据,最终得到兼具口感与功能性的铁皮石斛复配花茶,为铁皮石斛复配花茶的规模标准化加工提供理论支撑。     

乳酸菌发酵前后铁皮石斛汁中功能活性物质与风味成分的比较

为研究乳酸菌发酵对石斛汁中功能活性物质及风味成分的影响。以铁皮石斛汁为原料，采用嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus，La）与副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei，Lp）混合液态发酵，分析石斛汁中多糖、乙酸乙酯萃取成分、挥发性成分、游离氨基酸及有机酸的变化。结果表明，铁皮石斛汁发酵后，多糖平均分子量由184.40 ku减小至91.27 ku，多糖含量极显著降低21.91%（P<0.01）；试验鉴定发酵前后乙酸乙酯萃取成分分别为20种和16种，相同成分11种，差异成分14种；挥发性成分由发酵前的21种增至发酵后的26种，发酵后酚类与醇类物质相对含量增多，花香香气物质相对含量增多；发酵后检测出15种游离氨基酸，游离氨基酸种类较发酵前增加6种，赋予发酵汁甜味和鲜味，除天冬氨酸外，其他种类游离氨基酸含量均极显著升高（P<0.01）；发酵前后分别含有3种和4种有机酸，乳酸仅在发酵后检出，其含量占比有机酸总含量的76.11%，赋予发酵汁柔润的口感。由此可见，La与Lp混合发酵可使铁皮石斛汁中产生丰富的活性物质与风味成分。     

铁皮石斛多糖分离纯化及其药理活性研究进展

铁皮石斛是我国名贵的药食同源资源,具有较高的保健价值。铁皮石斛多糖是铁皮石斛中重要的活性成分之一。本文对铁皮石斛多糖的提取、分离纯化、分子量、单糖组成进行总结归纳,并对铁皮石斛多糖的降血糖及改善糖尿病并发症、保护胃黏膜损伤、抗肿瘤、调节微生态的最新研究进展进行综述。针对目前铁皮石斛多糖含量影响因素较多、分离纯化重复性差、结构分析不够清晰、构效关系的研究不够深入等现状,提出未来研究的展望,以期为铁皮石斛的开发利用提供有益参考。     

铁皮石斛花化学成分及抗氧化活性研究

通过HPLC-MS/MSQQQ液相色谱串联质谱联合仪检测分析了铁皮石斛花中的氨基酸组成,并分别采用苯酚硫酸法、NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色体系、Folin-Cioealteau显色法测定铁皮石斛茎和花的多糖、总黄酮、总酚含量;结合清除DPPH自由基能力、还原力评价铁皮石斛花的抗氧化作用,并与铁皮石斛的茎条进行比较。研究结果表明:铁皮石斛花的氨基酸中主要以精氨酸为主、其次为脯氨酸;铁皮石斛茎条的多糖含量高于铁皮石斛花,而铁皮石斛花的总酚和总黄酮高于铁皮石斛茎;铁皮石斛花的还原力强于铁皮石斛茎。铁皮石斛花有广阔的开发前景。     

铁皮石斛多糖化学修饰及其对免疫活性的影响

采用水提醇沉法结合冻融制备高纯度铁皮石斛多糖,并利用硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰方法对铁皮石斛多糖进行化学修饰,探讨不同方法修饰的铁皮石斛多糖对RAW264.7巨噬细胞免疫活性影响。结果表明,铁皮石斛纯多糖(purified polysaccharides of Dendrobium officinale,DOP)的中性糖含量较高,而糖醛酸及蛋白质含量则较低,分别为87.37%、3.19%和0.51%,羧甲基化及硫酸化显著降低了铁皮石斛多糖的中性糖含量。红外分析结果显示硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰衍生物均已成功制备。高性能凝胶渗透色谱法测定铁皮石斛多糖分子质量为960 k D,硫酸化及羧甲基化修饰显著增加了其分子质量。体外实验研究发现,硫酸化和脱乙酰化修饰的铁皮石斛多糖能够增强RAW264.7巨噬细胞的免疫活性,而羧甲基化修饰则表现为显著的抑制作用,表明不是所有的官能团接枝改性都可以改善铁皮石斛多糖对免疫活性的影响。     

铁皮石斛保健黄酒发酵工艺优化及成分变化规律

以铁皮石斛和糯米为主要原料制备半干型铁皮石斛保健黄酒。通过单因素试验和正交试验优化铁皮石斛保健黄酒主发酵条件,对其理化指标进行测定,并研究其发酵过程中理化成分的变化规律。结果表明,铁皮石斛保健黄酒最佳主发酵条件为：铁皮石斛添加量9%,主发酵温度26℃,主发酵时间7 d,接种量0.4%。在此优化发酵条件下,铁皮石斛保健黄酒感官评分为92.1分,其总糖含量为15.52 g/L、总酸含量为8.51 g/L、酒精度为15.02%vol、氨基酸态氮含量为0.60 g/L、多糖含量为12.12 g/L。铁皮石斛保健黄酒主发酵过程中,随发酵时间的推移,总糖含量先增多后减少,在第4天时达到最高值,为16.82 g/L;酒精度呈上升趋势;总酸和氨基酸态氮含量呈先增加后稳定的趋势,发酵第5天时,其含量分别为8.50 g/L、0.58 g/L。     

铁皮石斛多糖超声-微波协同提取条件优化及其抗氧化活性

以铁皮石斛为原料,采用超声-微波协同法提取铁皮石斛多糖。选择液料比、微波时间、微波功率、超声时间为单因素,以铁皮石斛多糖提取率为评价指标,通过响应面试验对超声-微波协同法提取铁皮石斛多糖进行优化。确定最佳工艺参数为液料比50∶1（mL/g）、微波时间120 s、微波功率370 W、超声时间30 min,在此条件下铁皮石斛多糖提取率为30.56% 。根据体外抗氧化活性评价表明,铁皮石斛多糖对羟自由基的清除能力低于维生素C,对α-葡萄糖苷酶表现出明显的抑制能力,具有较好的体外降血糖作用;另外,铁皮石斛多糖对α-淀粉酶也有一定的抑制作用。     

铁皮石斛多糖提取及抗氧化活性研究

从铁皮石斛中提取多糖。以铁皮石斛多糖提取得率为评价指标,在单因素试验的基础上通过正交试验优化提取条件,得到最佳提取条件:提取时间2h,料液比1∶80,提取温度80℃,提取次数3次。此条件下铁皮石斛多糖提取得率为19.01%±0.49%。通过测定铁皮石斛多糖对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)、超氧阴离子自由基(O~(2-))和羟基自由基(-OH)的清除能力及铁皮石斛多糖对三价铁的还原能力,对铁皮石斛多糖进行抗氧化活性研究。结果表明,铁皮石斛多糖对三种自由基均有较高的清除能力,且清除能力随多糖浓度的增加而增大,在多糖浓度为3mg/mL时,自由基清除率分别达到38.83%、56.25%、56.58%。同时铁皮石斛多糖具有较高的还原能力。铁皮石斛多糖具有较强的抗氧化活性。     

铁皮石斛茎、叶、花功能性成分、抗氧化活性及其相关性

目的：探索铁皮石斛茎、叶、花主要功能性成分的差异性、抗氧化能力大小及抗氧化活性的主要贡献成分。方法：以铁皮石斛茎、叶、花为试验材料,分别采用苯酚—硫酸法、NaNO₂-Al₃+NaOH法、福林酚法和酸性染料比色法对其多糖、总黄酮、总多酚和总生物碱含量进行测定比较,研究茎、叶、花的抗氧化能力,并通过相关性分析确定其主要抗氧化活性成分。结果：铁皮石斛茎、叶、花中均含有多糖、黄酮、多酚和生物碱类成分,但含量差异极显著（P<0.01）,其中多糖含量为茎（31.00%）＞叶（15.04%）＞花（8.11%）;总黄酮和总多酚含量均以花中最高,分别为2.133%和15.71%,叶中次之;总生物碱含量以花中最高,达0.022 3%,为茎中的近4倍;铁皮石斛茎、叶、花均具有较高抗氧化活性,且随着浓度的增大,其对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力逐渐增强,其中花的水提物和醇提物清除DPPH自由基和ABTS自由基的IC₅₀均最小,说明其氧化活性最大,较接近于维生素C的。相关性分析发现,铁皮石斛茎、叶、花抗氧化活性与总黄酮、总多酚和总生物碱含量呈正相关,与多糖含量无明显相关性,说明总黄酮和总多酚含量对铁皮石斛茎、叶、花的抗氧化活性贡献最大,总生物碱含量的贡献显著。结论：铁皮石斛叶和花同样具有广阔的应用价值和开发前景。     

铁皮石斛多糖不同级分的制备、性质分析及免疫调节活性比较

目的:制备铁皮石斛多糖(DOP)的不同分级组分,比较其理化性质及体外免疫调节活性的差异,并对多糖结构特征与活性的关系进行初探。方法:采用分级醇沉的方法获得铁皮石斛多糖不同分级组分,并对各组分的糖、糖醛酸、蛋白质含量、单糖组成、分子量进行分析。以巨噬细胞RAW264.7为研究模型,比较DOP不同分级组分的体外免疫调节活性。结果:DOP和四个组分(F30、F40、F50和F50S)均为中性糖,各组分糖醛酸含量较DOP均有所降低,F50S蛋白质含量最高。DOP、F30、F40、F50和F50S的平均分子量分别为262.4、314.5、248.3、202.9和136.2 kDa。DOP、F30、F40、F50和F50S均主要由甘露糖和葡萄糖组成,其摩尔比分别为5.16:1、3.67:1、4.16:1、5.62:1和5.86:1。DOP和各分级组分均可显著(p<0.05)增强RAW264.7巨噬细胞的增殖能力、NO的释放以及TNF-α和IL-1β的分泌。结论:铁皮石斛多糖及其分级组分均有免疫调节活性,且分子量较小的免疫调节活性较强。     

烘干温度对铁皮石斛茎多糖抗氧化活性影响的研究

本实验主要研究了不同烘干温度对铁皮石斛茎多糖得率和抗氧化活性的影响。结果表明:不同温度条件下,40℃热风烘干后铁皮石斛茎多糖得率最高,达到45.93%且抗氧化能力最强,当溶液浓度为2.5 mg/mL时,对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的消除率分别为46.88%、56.44%、49.02%。说明烘干温度会显著影响铁皮石斛茎多糖的得率和抗氧化活性,随着烘干温度的升高,多糖的得率和抗氧化活性均会随之降低。本实验研究结果为铁皮石斛茎的进一步开发应用提供参考。     

霍山铁皮石斛提取物不同极性部位抗氧化活性研究

目的:研究霍山铁皮石斛提取物不同极性部位的体外抗氧化活性,为霍山铁皮石斛抗氧化产品开发应用提供科学依据。方法:采用清除DPPH自由基、清除·OH自由基以及测定总抗氧化能力3个指标评价霍山铁皮石斛提取物不同极性部位的抗氧化能力。结果:霍山铁皮石斛提取物正丁醇部位在DPPH自由基清除能力、·OH自由基清除能力以及总抗氧化能力上都有比较明显的抗氧化作用。结论:霍山铁皮石斛提取物正丁醇部位抗氧化活性较强。研究为进一步研究霍山铁皮石斛活性成分提供参考,为霍山铁皮石斛抗氧化产品开发应用提供科学依据。     

基于膜技术的桑葚多糖分级分离及生物活性组分筛选

采用了膜技术分级分离桑葚多糖（Mori fructus polysaccharide,MFP）,并探究了不同分子量桑葚多糖的抗氧化、降血糖、抗过敏和体外乙醇脱氢酶活性。以桑葚为原料,通过热水浸提后采用300、50、5和1 kDa超滤膜对桑葚多糖进行分级分离,分别记为MFP300、MFP50、MFP5和MFP1。比较4种孔径的超滤膜分离的桑葚多糖组分主要成分、抗氧化活性、降血糖活性、抗过敏活性和体外乙醇脱氢酶活性的差异。结果表明,4种多糖的主要成分和生物活性表现出一定的差异。MFP1、MFP5、MFP50和MFP300的总糖含量分别为46.34%、68.45%、48.60%和66.32%,糖醛酸含量分别为3.34%、22.78%、16.11%和21.48%,还原糖含量分别为16.51%、6.03%、7.90%和6.67%。生物活性筛选表明,MFP300清除DPPH自由基和ABTS+自由基的IC₅₀值分别为0.2235和0.2979 mg·mL?1,抑制透明质酸酶能力的IC₅₀值为0.6634 mg·mL?1,激活体外乙醇脱氢酶能力的IC₅₀值为10.2646 mg·mL?1,表现出最好的抗氧化、抗过敏和体外乙醇脱氢酶活性。MFP1抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶能力的IC₅₀值分别为0.7944和4.6419 mg·mL?1,表现出最好的降血糖活性。综上所述,经膜技术分级分离得到的不同分子量范围的桑葚多糖在主要成分和生物活性方面有一定差异,为桑葚多糖分级技术的改进升级和桑葚多糖“构-效”关系研究提供理论基础。