不溶性酵母多糖分析方法的研究

以废啤酒酵母中的葡聚糖为原料,以多糖含量为指标,在单因素实验的基础上,采用正交试验,得出碱-酶法提取废啤酒酵母中葡聚糖的最佳分析条件。影响葡聚糖含量测定各因素的顺序依次为：预水解硫酸浓度〉水解温度〉水解硫酸浓度〉水解时间;水解参数为：预水解硫酸浓度12mol／L、水解硫酸浓度2．00mol／L、水解温度100℃、水解时间24h。不溶性酵母多糖测定含量为83．1％。     

酵母β-1,3-D-葡聚糖硫酸酯制备工艺的研究

研究了酵母β-1,3-D-葡聚糖硫酸酯制备工艺,通过单因素实验和正交实验,确定了制备高取代度的酵母β-1,3-D-葡聚糖硫酸酯的最佳工艺条件为:0.3g酵母β-1,3-D-葡聚糖分散于10mL二甲基甲酰胺中,磁力搅拌使其充分悬浮,加入浓度为15%氯磺酸的酯化剂15mL,在60℃水溶下反应3h.制备出取代度高达0.88的酵母β-1,3-D-葡聚糖硫酸酯,且红外光谱表明,酵母β-1,3-D-葡聚糖分子中已经成功引入了硫酸基基团.     

从酵母细胞壁提取β-1,3-D-葡聚糖的研究

分别采用酸法、碱法来提取酵母细胞壁中的β-1，3-D-葡聚糖。用紫外光谱法、纸层析法法和红外光谱法分析多糖成分。结果发现：经酸法（醋酸溶液浓度为0．5mol／L）提取的β-1，3-D-葡聚糖产品中除含有葡聚糖外，还含有一定量的甘露聚糖和蛋白质成分；而用碱法（氢氧化钠溶液浓度为1．0mol/L）提取时，产品为高纯度的β-1，3-D-葡聚糖。本文从其水解机理上探讨了产生上述两种不同结果的原因，指出碱法提取是从酵母中提取β-1，3-D-葡聚糖的高效方法。     

酸酶水解-HPLC法检测香菇多糖中β-D-葡聚糖含量

为了更有效地监控食品和医药行业中香菇多糖制品的质量,建立了一种香菇多糖中主要活性成分β-D-葡聚糖含量测定的新方法:香菇多糖样品经酸部分水解后用β-1,3-葡聚糖外切酶和β-葡糖苷酶进一步完全水解以测定总葡聚糖含量;另用淀粉葡萄糖苷酶水解样品中α-葡聚糖;根据HPLC测定的总葡聚糖与α-葡聚糖含量之差计得β-D-葡聚糖含量。分别用该方法和苯酚硫酸法及刚果红法测定已知含量的β-D-葡聚糖对照样品的结果表明:该方法最接近于对照品标示值,且重复性好,可用作为香菇多糖产品中β-D-葡聚糖含量测定的专属方法。     

泡盛曲霉液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的条件优化

从土壤样品中筛选得到一株高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的真菌,经鉴定为泡盛曲霉(Aspergillus awamori),命名为Aspergillus awamori CAU33。依次采用单因素试验和响应面分析法优化了其液体发酵产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的条件,得到该菌株产酶的最适条件为:玉米芯质量浓度55 g/L、大豆蛋白胨质量浓度25 g/L、曲拉通X-114质量浓度23 g/L、初始pH 4.5、培养温度35℃、培养时间6 d。在此条件下β-1,3-1,4-葡聚糖酶活力达到8 447 U/m L,为优化前的17.6倍。     

刚果红法测定乳酸发酵液中的β-葡聚糖类物质

在利用凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)进行以葡萄糖为基质的乳酸发酵过程中通过外加商品纤维素酶可以显著增加乳酸产量。为探讨其中原因,用羧甲基纤维素(CMC)作为β-葡聚糖标品,建立了刚果红分光光度法测定乳酸发酵提取液中β-葡聚糖的稳定体系,用以测定乳酸发酵液中的β-葡聚糖含量。实验证明当Na+浓度为0.025～0.175mol/L,Ca2+浓度为0.001～0.005mol/L,蛋白质质量浓度为0～40mg/L时,这几种杂质对β-葡聚糖测定的干扰可以忽略。刚果红法测定β-葡聚糖的最佳条件为:最大吸收波长550nm、pH8.0磷酸缓冲液、测定时间15min。实验结果显示乳酸发酵液中β-葡聚糖含量很低,纤维素酶水解发酵液中的β-葡聚糖类物质不足于显著增加乳酸产量,其增产作用一定另有原因。     

酵母β-1,3-D-葡聚糖提取酶解工艺的研究

采用酶-碱法提取酵母β-1,3-D-葡聚糖,着重研究了提取的酶解工艺,并通过正交实验得出最佳酶解工艺条件为:酶添加量为1600IU/g,酶解时间3h,pH8,温度60℃。沉淀物用2%氢氧化钠在75℃恒温处理6h,即可得到成品葡聚糖,经紫外光谱法和纸层析法进行糖分分析,成品为高纯度的酵母β-1,3-D-葡聚糖。     

酶解法增溶酵母(1→3)-β-D-葡聚糖的研究

以实验室制备的酵母(1→3)-β-D-葡聚糖为原料,通过酶解法制备水溶性酵母(1→3)-β-D-葡聚糖,并对其结构和生物活性进行了研究。以水溶性酵母葡聚糖得率为指标,通过单因素和正交实验,确定了酵母(1→3)-β-D-葡聚糖酶解的工艺条件。优化后的酶解条件为:酶活浓度0.15 U/mL,底物质量浓度0.5 g/100 mL,酶解温度40℃,pH3.5,酶解时间0.5 h,该酶解条件下水溶性酵母葡聚糖得率为80.3%。红外光谱分析表明,水溶性葡聚糖仍具有(1→3)-β-D-葡聚糖分子构型,刚果红实验表明其具有三螺旋结构。活性实验表明,水溶性葡聚糖能有效提高E.coli诱导的患腹膜炎小鼠的存活率。     

啤酒酵母细胞壁中β-(1，3)-D-葡聚糖提取与应用

该文叙述啤酒酵母细胞壁中β-(1,3)-D-葡聚糖结构特点与理化性质,比较5种对β-(1,3) -D-葡聚糖提取方法,并介绍β-(1,3)-D-葡聚糖生物活性及其应用。     

扇贝消化腺β-1,3-葡聚糖酶的分离和性质研究

以扇贝加工废弃物消化腺为原料,经磷酸缓冲液抽提、80%饱和度硫酸铵沉淀、DE52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100分子筛层析等步骤,获得β-1,3葡聚糖酶.经SDS-PAGE检测,扇贝消化腺β-1,3-葡聚糖酶的相对分子质量为157kDa.β-1,3-葡聚糖酶水解木耳多糖(β-1,3-葡聚糖)的最适pH为7.0,最适温度为30℃.通过Lineweaver-Burk作图,得到其米氏常数Km为13mg/mL.     

啤酒废酵母酶促自溶胞壁残渣中葡聚糖的提取

啤洒废酵母酶促自溶制备酵母抽提物后,其残存的胞壁残渣中还存有大量的碱不溶性β-1,3-D-葡聚糖.采用碱一酶法制备碱不溶性β-1,3-D-葡聚糖,以多糖干重和多糖纯度为主要指标,研究了影响葡聚糖提取的外加碱液浓度、作用时间、作用温度、碱性蛋白酶添加量因素,并进行正交试验,同时对中和用酸及洗脱工艺进行优化,使杂多糖干重降低了7.27%,而多糖纯度提高,19.04%,多糖提取率提高了10.41%.     

酶电极法快速测定β(1→3)-D-葡聚糖含量的研究

采用酶电极法测定β(1→3)-D-葡聚糖的含量,结果表明,葡聚糖H2SO4水解的最佳时间为6h,水解液中和过程中产生的盐对测定结果无明显干扰作用,与硫酸-苯酚法相比,该方法具有快速、准确、稳定等优点,是目前测定β(1→3)-D-葡聚糖含量的一种理想方法.     

黄曲霉产胞外β-1 ,3-1 ,4-葡聚糖酶的发酵条件优化

研究发现一株高产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的黄曲霉菌株,优化了其产酶条件并考察了粗酶潜在的工业应用价值。依次采用单因素法和响应面分析法优化该菌发酵产酶条件,得到其优化产酶条件:麸皮19 g/L、磷酸氢二铵30g/L、吐温-60 21 g/L、NaCl 5 g/L、MgSO_4·7H_2O 0. 5 g/L、KH_2PO_40. 75 g/L、培养基初始pH值8. 0、培养温度38℃、培养时间6d。在此条件下,黄曲霉能够分泌的最高胞外β-1, 3-1,4-葡聚糖酶酶活达155.9 U/mL。水解研究发现,该酶能高效降解大麦粉和燕麦粉中的β-葡聚糖,并直接生成葡萄糖。这些结果表明,黄曲霉能高效分泌β-1,3-1,4-葡聚糖酶,且该酶具有较强的工业应用前景。     

酵母不溶性葡聚糖测定方法的研究

对酵母不溶性葡聚糖含量的测定方法进行了研究.葡聚糖的纯度一般由酸水解后的单糖含量表示,水解时酸的浓度、温度和时间是影响单糖含量测定结果的重要因素.分别比较H2SO4和TFA在不同条件下水解酵母不溶性葡聚糖对测定结果的影响.实验表明,采用H2SO4进行水解优于TFA,最佳水解条件为H2SO4浓度2.7 mol/L、水解温度100 ℃、时间3 h.     

啤酒废酵母超声破壁提取食源性β-1,3-D-葡聚糖

以啤酒废酵母为原料,采用Box-Behnken正交析因素试验优化超声破壁工艺,得出破壁参数理想条件为酵母质量浓度200 g/L,超声功率800 W,超声时间80 min,超声温度50℃;制得的酵母β-1,3-D-葡聚糖不含甘露聚糖,纯度达90.63%,得率达10.31%。     

水溶性(1→3)(1→6)-α-D-葡聚糖的酶法合成与结构解析

以蔗糖为底物,利用葡聚糖蔗糖酶的聚合反应来制备(1→3)(1→6)-α-D-葡聚糖,通过探讨优化酶促催化条件参数来合成新型葡聚糖,并采用现代分析仪器解析其结构特征。结果表明,葡聚糖蔗糖酶催化反应条件为:反应温度40℃,蔗糖质量浓度160 mg/m L,加酶量10 U/m L,酶反应时间1 h,反应p H 5.0。分子量分布曲线显示葡聚糖分子质量分布集中并呈单峰,绝对重均分子质量2.4×107g/mol,分散系数为1.07,红外与核磁图谱显示糖链中主要由α-1,3和α-1,6连接的D-吡喃葡萄糖单元组成,且两者的比例约为3∶4。     

酵母β-葡聚糖水解酶的表达及应用

酵母β-葡聚糖是一种具有多种生物功能的细胞壁结构多糖,但天然的酵母β-葡聚糖水溶性较差,影响了其在医疗、保健食品和化妆品行业中的应用。作者通过β-1,3-葡聚糖水解酶Gly5m和β-1,6-葡聚糖水解酶BT3312水解酵母β-葡聚糖制备小分子酵母葡聚糖,提高其水溶性。以大肠杆菌为宿主,异源表达β-1,3-葡聚糖水解酶Gly5m和β-1,6-葡聚糖水解酶BT3312。在25℃条件下,添加0.2 mmol/L IPTG诱导后,Gly5m和BT3312的最高酶活分别为1 086 U/mL和2 355 U/mL。酵母β-葡聚糖经过Gly5m和BT3312水解后,溶解率分别提高了2.6倍和2.4倍。采用Gly5m和BT3312共同水解,酵母β-葡聚糖溶解率提高了3.2倍(水溶性酵母葡聚糖的质量浓度为12.5 g/L)。因此,Gly5m和BT3312在提高酵母葡聚糖的水溶性和制备小分子酵母葡聚糖领域具有重要的应用价值。     

β-葡聚糖复合酶水解大豆分离蛋白的研究

研究了大豆分离蛋白经过加热预处理后用β-葡聚糖复合酶水解的可行性.以水解度(DH)为指标,考察了单因素水解条件,并在此基础上通过正交实验得出水解大豆分离蛋白的优化条件:底物质量浓度30 g/L,酶按底物每克蛋白40 ug加入,反应温度50℃,pH 7.0.在此优化条件下,β一葡聚糖复合酶水解大豆分离蛋白的水解度为5.32%.通过蛋白质的轻度改性,所得产物仍然有很大的相对分子质量,但是在溶液中有较好的溶解度.     

桉木热水预水解过程中木糖反应动力学的研究

研究了桉木热水预水解生成木糖水解液的反应动力学,分别测定了不同热水预水解条件下木糖质量浓度及其降解产物糠醛的质量浓度。研究表明,以木糖质量浓度及糠醛的质量浓度为指标,确定桉木最佳热水预水解条件为:液比1∶8,水解温度170℃,保温时间105 min。此条件下,预水解液中木糖和糠醛质量浓度分别为7. 97 g/L、1. 74 g/L,桉木热水预水解生成木糖的反应活化能为72. 62 kJ/mol。     

碱-酶法提取啤酒酵母粉中β-(1,3)-D-葡聚糖

以啤酒酵母粉为原料,综合考虑提取率、蛋白质含量和多糖含量3个指标,在单因素实验的基础上,采用正交实验,得出碱-酶法提取废啤酒酵母中β-(1,3)-D-葡聚糖的理想工艺条件:酵母粉经过水洗,脱色后,按照150mL∶10g的比例加入3%的NaOH溶液,在80℃水浴条件下水解2h,离心,洗涤,调整pH至8.5～9.0,再加入600U/g碱性蛋白酶(以干酵母粉计),在55℃下水解24h,离心,沉淀,干燥得到成品。β-(1,3)-D-葡聚糖的提取率为13.8%,产品多糖含量85.2%、蛋白质含量1.2%、水分9.2%,产品为乳白色粉状固体,色度为L值83.07、a值2.12、b值8.86。