微生物发酵法生产去氢表雄酮检测方法的建立

建立了一个微生物发酵生产去氢表雄酮(DHEA)的检测方法,采用气相色谱法同时测定发酵液中雄甾-4-烯-3,17-二酮(4-AD)、去氢表雄酮甲氧基甲基醚和DHEA含量。发酵液经乙酸乙酯萃取,可直接进样分析。气相色谱条件为:FID检测器,DB-1型(30 m×0.53 mm×0.25 m)毛细管柱;柱温280℃,进样口280℃,检测器310℃;载气为高纯N2,流速1 m L/min。在实验室条件下,发酵液中各主要成分分离情况良好。结果表明:4-AD、去氢表雄酮甲氧基甲基醚和DHEA的浓度线性范围分别为:4-AD为0.2~1.0 g/L(R2=0.996);去氢表雄酮甲氧基甲基醚为0.1~0.9 g/L(R2=0.992);DHEA为0.2~1.0 g/L(R2=0.998),平均回收率依次为(97.88±0.74)%,(99.39±1.07)%和(98.91±1.09)%。该方法具有步骤简单,重现性好,准确度和灵敏度高的特点。     

HPLC检测发酵液中二羟基丙酮和甘油的含量

应用高效液相色谱法检测发酵过程中发酵产物二羟基丙酮和底物甘油浓度。在流动相乙腈、纯净水的比例为85∶15(v∶v),流速为1mL/min,色谱柱为Hedera-NH2的条件下,用紫外检测器在271nm处检测DHA,用示差折光检测器检测甘油。高效液相色谱法检测DHA的线性范围为2.0-12.0mg/mL,相关系数(r)为0.9996,检测甘油的线性范围为0.1-1.0mg/mL,相关系数(r)为0.9998。该方法应用于二羟基丙酮发酵过程中底物和产物的检测,该方法不受培养基中不同碳源(葡萄糖、蔗糖、山梨醇、乳糖、甘油),不同氮源(蛋白胨、酵母膏、酵母粉、营养肉汤)以及菌体未完全利用的培养基成分、菌体生长过程中产生的其它代谢产物的影响,该方法具有较好的通用性。     

HPLC-示差折光检测法测定白酒中三氯蔗糖的方法研究

该研究采用高效液相色谱-示差折光检测法测定白酒中的三氯蔗糖含量,从流动相比例、流速、进样量、柱温、示差检测池温度五个方面进行考察,确定最佳色谱条件。结果表明,在流动相为乙腈∶水（20∶80,V/V）、流速1.0 mL/min、进样量20 μL、柱温35 ℃、示差折光检测器温度35 ℃条件下,三氯蔗糖在质量浓度0.01～0.40 mg/mL范围内,线性关系好,相关系数R2=0.999 94,检出限为3.538 μg/mL,定量限为11.79 μg/mL,平均加标回收率为96.3%～103.4%,精密度试验结果相对标准偏差在0.6%～6.6%之间,均能满足检测要求。该方法操作简单、方便快捷、定量准确,适用于白酒中三氯蔗糖含量的大规模、大批量快速检测分析。     

高效液相-示差折光法测定米酒中3种糖的含量

建立应用高效液相-示差折光法同时测定米酒中葡萄糖、蔗糖和麦芽糖含量的方法。结果表明当检测器为示差折光检测器,Inert Sustain NH_2氨基色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相中乙腈和水的体积比为75∶25,流速1.0 mL/min,进样量10μL,检测器和色谱柱温度均为35℃时,混标及米酒样品中的3种糖在10 min内均达到基线分离,最低检测限为0.006 g/100 g,精密性试验相对标准偏差值为0.115%、0.045%和0.220%,重复性试验相对标准偏差值为0.670%、0.429%和0.723%,平均回收率为99.65%、100.85%和99.43%。由此可见,高效液相-示差折光法结果准确可靠,适用于米酒中糖的快速分析。     

高效液相色谱法测定饮料中防腐剂和甜味剂

建立了高效液相色谱-示差折光检测器法同时测定碳酸饮料中苯甲酸、山梨酸、糖精钠、甜蜜素的分析方法,考察了流动相配比、缓冲溶液的浓度、柱温、检测器的温度及灵敏度设置对测定的影响,确定了最佳色谱条件:Novo pak-C18柱,示差折光检测器(RID),流动相为甲醇-0.010mol/L乙酸铵溶液(3:97,V/V),等度洗脱方式,柱温及RID检测器温度30℃,RID检测器灵敏度设置64.结果显示,线性范围为2.0～200μg/ml,相关系数为0.9995～0.9999,检出限依次为0.2、0.2、0.2、1.3μg/ml,相对标准偏差2.1%～3.5%,平均回收率89.0%～104.5%,实现了min内对碳酸饮料中苯甲酸、山梨酸、糖精钠、甜蜜素的同时测定.     

固液分散萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中甘油残留量

目的 建立一种固液萃取-示差折光高效液相色谱法测定中蜂蜜中甘油残留量的方法。方法 样品经乙醇溶解,用微粉硅胶吸附,使蜂蜜均匀分散成细微颗粒,水浴蒸干水分和乙醇,以乙腈为溶剂超声萃取,样液用带示差折光检测器的高效液相色谱仪测定。采用shodex Asahipak NH2P-50 4E色谱柱分离,以赤藓糖醇为内标,以阴性样品为基质绘制标准曲线进行内标法定量,流速为1.0 mL/min,流动相为乙腈水溶液。结果 此方法能在6.5min内快速分离甘油,甘油在50mg/kg-1000mg/kg范围内线性良好,相关系数为R2=0.9996。甘油回收率在94.8%-102.9%,相对标准偏差为2.9%-5.3%。结论 该方法可用于蜂蜜中甘油的检测,具有简单、快速、灵敏度高等特点。     

反相液相色谱法同时测定大豆制品中的功能性低聚糖--水苏糖和棉籽糖

建立了同时测定大豆制品中水苏糖和棉籽糖含量的反相液相色谱法(RP-HPLC)。采用2410示差折光检测器,色谱柱WATERS-NH2,柱温35℃,流动相乙腈∶水(68∶32),流速1·0mL/min,检测波长280nm。水苏糖和棉籽糖的线性范围分别为0~0·75g/L和0~1·0g/L;最低检测浓度分别为4·91×10~(-6)g/L和5·76×10~(-6)g/L。     

高效液相色谱法检测奶糖中海藻糖等糖含量的研究

用高效液相色谱法(HPLC)检测奶糖食品中的海藻糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖。色谱柱为Xbridge-NH2,检测柱温定为35℃,流动相为乙腈∶水=4∶1,按0.1%的量加氨水,检测流速为1.0m L/min,检测器为示差检测器,此条件下,葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和海藻糖能完全的分开,其精密度实验RSD分别为1.6%、1.7%、1%、2.1%;其质量浓度在0~4g/100m L范围内的峰面积与质量浓度成良好线性关系,相关系数R2在0.9997~0.9999之间,回收率在98.4%~99.9%之间。使用该方法测定喔喔奶糖中葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和海藻糖的质量分数分别为1.0%、23.0%、15.1%和2.64%。     

LLE-UPLC-FLD法测定橄榄油中羟基酪醇和酪醇的含量

建立了液液萃取-超高效液相色谱串联荧光检测器(LLE-UPLC-FLD)快速分离和测定橄榄油中羟基酪醇和酪醇含量的方法。橄榄油样品经乙醇提取后,以0.2%(v/v)甲酸乙腈溶液和0.2%(v/v)甲酸水为流动相,梯度洗脱,采用BEH(50 mm×1.0 mm,1.7 μm)色谱柱,柱温为35 ℃,流速为0.15 mL/min,进样量为2.0 μL,使用荧光检测器在激发波长为300 nm,发射波长为350 nm下进行检测,整个分析过程仅需10 min。羟基酪醇和酪醇的检出限(S/N=3)及定量限(S/N=10)分别为0.11,0.13和0.31,0.39 μg/g,2种组分按高、中、低3个浓度水平加标回收率均高于89.52%;在最优条件下,对20批不同产地橄榄油中的羟基酪醇和酪醇进行检测,羟基酪醇和酪醇的含量范围分别在1.28~20.34及1.03~21.22 μg/g之间;该法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于橄榄油中酪醇和羟基酪醇含量的测定。     

高效液相色谱法测定发酵液中3-羟基丁酮

针对生物法制备3-羟基丁酮的微生物发酵体系,研究了利用高效液相色谱法测定3-羟基丁酮的方法。发酵液高速离心后经0.22μm微孔滤膜过滤,以Hypersil NH2(300 mm×4.6 mm,5μm)为分离柱,乙腈-水(90:10,V/V)为流动相,流速为1 m L/min,检测器为示差折光检测器,柱温和检测器温度均为35℃,在25 min内可以完成色谱检测。方法回收率为95.96%~101.2%;RSD为1.69%~2.09%。实验结果证明,该方法是测定发酵液中3-羟基丁酮的快速、有效的定量分析方法,具有样品预处理简单,灵敏度高的优点,适合于指导整个发酵过程中条件的优化及发酵产物的实时监控。