灵芝多糖的提取方法及其功能特性研究进展

首先对灵芝多糖的初级结构和高级结构进行了介绍;其次对近年来研究灵芝多糖的热水提取法、超声波提取法、微波提取法、酶提取法等提取方法进行了综述和比较;最后对灵芝多糖的抗氧化、抗肿瘤、降血糖等功能特性进行了阐述。     

灵芝菌丝体多糖的超滤提取及其抗氧化活性的研究

考察了超滤浓缩醇沉法提取发酵灵芝菌丝体多糖,与减压浓缩法相比,多糖含量、多糖得率均高于后者,所得多糖的品质得到提高,减轻了后续多糖纯化的负担。灵芝菌丝体粗多糖对羟自由基.OH(HFR)有较好的清除能力,在一定范围内清除率与多糖浓度呈正相关,超滤浓缩醇沉法提取灵芝菌丝多糖的.OH清除率高于减压浓缩醇沉法。     

灵芝茵丝体多糖的超滤提取及其抗氧化活性的研究

考察了超滤浓缩醇沉法提取发酵灵芝茵丝体多糖,与减压浓缩法相比,多糖含量、多糖得率均高于后者,所得多糖的品质得到提高,减轻了后续多糖纯化的负担.灵芝菌丝体粗多糖对羟自由基·OH(HFR)有较好的清除能力,在一定范围内清除率与多糖浓度呈正相关,超滤浓缩醇沉法提取灵芝茵丝多糖的·OH清除率高于减压浓缩醇沉法.     

倒卵叶五加多糖脱蛋白工艺研究

以蛋白质脱除率和多糖保留率为评价指标,考察了Sevage法和三氯乙酸法对倒卵叶五加多糖的脱蛋白效果。在单因素实验的基础上,通过正交实验对三氯乙酸法脱蛋白工艺进行了优化,确定最佳工艺条件为:三氯乙酸用量7.5%、三氯乙酸处理次数3次、三氯乙酸处理时间30 min,在此条件下,蛋白质脱除率达到80.32%,多糖保留率为83.12%。与Sevage法相比,三氯乙酸法是一种较优的倒卵叶五加多糖脱蛋白方法。     

核磁共振波谱法在双价痢疾多糖结合疫苗中的初步应用

目的探讨核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance,NMR)法在福氏宋内双价痢疾多糖结合疫苗生产工艺中的应用。方法利用Agilent 600 MHz核磁共振仪分别对福氏2a痢疾多糖和宋内痢疾多糖重复结构单元进行1H NMR和13C NMR质量分析,并对生产工艺中的多糖、多糖衍生物及多糖结合物重复结构单元进行了1H NMR结构解析和对比。结果多糖的1H NMR和13C NMR数据及图谱与文献高度一致;结合工艺中各步多糖的1H NMR分析证实了双价痢疾多糖结合工艺的反应机理。结论在双价痢疾多糖结合疫苗的研发过程中,NMR法可直接地检测多糖化学结构,对原料多糖及整个衍生过程中多糖的结构及修饰程度实施质控。     

十二烷基多糖苷合成体系中多糖含量测定方法的研究

采用无水乙醇提取法分离正十二醇与无水葡萄糖反应后混合物中的多糖,再用水提取法从无水乙醇不溶物中回收分离出的多糖,然后用苯酚-硫酸法对多糖含量进行测定。研究了苯酚-硫酸法的精密度、回收率以及无水乙醇提取时间和水提取时间对检测结果的影响,结果表明,方法回收率高,无水乙醇提取时间和水提取时间分别为4和3 h时足以保证多糖的完全分离和回收,并利用此分析方法测定了不同催化合成体系中多糖的含量,以此验证此方法的可行性。     

冬凌草硒多糖的制备、表征及抗氧化活性分析

本研究以济源冬凌草多糖为原料，选用化学合成方法对多糖进行结构修饰。采用UV、FT-IR、SEM、TGA、HPLC等方法对冬凌草多糖以及硒多糖结构特征进行了表征；通过DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）自由基法、羟自由基法等4种方法对其抗氧化活性进行了探究。结果：制备的硒多糖中硒质量分数为1.35 mg/g。硒化修饰后，冬凌草多糖的基本骨架得到保留，单糖种类未发生改变，但其分解温度降低、稳定性下降，多糖形貌也发生明显变化，球状与条状形貌增多，片状形貌减少。此外，在体外抗氧化性实验中，当硒多糖质量浓度为1.6mg/mL时，对DPPH自由基、ABTS自由基、羟自由基清除率分别为68.68%、86.69%、45.12%，均强于冬凌草多糖。     

层析法纯化C群脑膜炎球菌多糖及其制备的多糖蛋白结合物的安全性和免疫原性

目的采用层析法纯化C群脑膜炎球菌多糖,以替代冷酚抽提法,并对制备的多糖蛋白结合物进行初步安全性和免疫原性评价。方法采用温和的表面活性剂去氧胆酸钠对C群脑膜炎球菌多糖进行前处理,并用Capto adhere和Capto DEAE阴离子交换凝胶柱串联,对多糖进行柱层析纯化,再通过脱盐去除残留的去氧胆酸钠,获得精制多糖。对缓冲液中的去氧胆酸钠浓度、缓冲液pH值、样品的前处理时间及离子交换流速进行优化,并对建立的层析纯化工艺进行放大,纯化3批多糖,按照《中国药典》三部(2010版)要求检测各项质控指标,并通过核磁共振-氢谱检测纯化后的多糖结构。将层析法和苯酚法纯化的多糖分别与破伤风类毒素结合,制备多糖蛋白结合物,对结合物进行异常毒性、小鼠急性毒性试验和免疫原性检测。结果经优化,确定缓冲液的去氧胆酸钠浓度为1.0%,pH值为8.0,样品前处理时间为6 h,离子交换流速为2.0 ml/min。放大工艺制备的3批C群脑膜炎球菌多糖各项检测指标均合格,多糖回收率均大于70%,明显高于苯酚法制备的多糖。核磁共振-氢谱显示,层析法与苯酚法纯化的多糖主要峰基本一致,层析法未改变多糖结构。层析法纯化的多糖制备的多糖蛋白结合物异常毒性试验合格,小鼠急性毒性试验结果与苯酚法纯化多糖制备的多糖蛋白结合物比较,差异无统计学意义(P>0.05),免疫小鼠后均具有良好的免疫原性。结论层析法分离杂蛋白操作简便,省时省力,工艺易于放大,且减少了对环境的污染,可替代苯酚抽提法用于C群脑膜炎球菌多糖的纯化。     

红禾麻多糖除蛋白除色素方法研究

本实验采用水提醇沉法提取红禾麻粗多糖,采用Sevage法、TCA法和酶-Sevage法对红禾麻粗多糖进行脱蛋白比较;用活性炭法和过氧化氢法对红禾麻粗多糖进行脱色比较,筛选红禾麻粗多糖的纯化工艺。结果表明,酶-Sevage法脱蛋白效果最好,蛋白清除率为70. 60%,多糖损失率为19. 65%;活性炭法除色素效果较好,脱色率为55. 60%,多糖损失率为27. 84%,因此,酶-Sevage法和活性炭法可作为红禾麻粗多糖纯化的手段之一。     

响应面法优化枸杞多糖的超声辅助提取工艺

枸杞中的多糖非常有价值，值得开发利用。采用超声波法对枸杞多糖进行提取，采用单一变量的方法，选取4个影响枸杞多糖提取率的因素逐一进行研究，得到的实验结果应用Origin作图，之后选取三个影响较大的因素结合响应面法中的Box-Behnken试验设计对多糖提取操作过程进行优化。实验表明，枸杞多糖的最佳提取工艺条件：乙醇百分含量60.44%，超声时间41.38 min，超声温度40.30℃，吸光度值为0.599，枸杞多糖提取率达到了8.40%。应用响应面法对枸杞多糖进行优化，其最佳工艺参数是稳定、可行的。     

冬凌草硒多糖的制备及其抗氧化活性分析

以济源冬凌草为原料,水提得到冬凌草多糖,对多糖进行结构修饰制得冬凌草硒多糖.采用UV、FTIR、SEM、TGA、HPLC对冬凌草多糖以及硒多糖结构进行表征;通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基法、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基法、羟基自由基法以及还原能力测定4种方法对冬凌草多糖及其硒多糖的抗氧化活性进行探究.结果表明,冬凌草硒多糖中硒含量为1.35 mg/g.硒化修饰后,冬凌草多糖的基本骨架得到保留,单糖种类未发生改变,但分解温度降低、稳定性下降,多糖形貌也发生明显变化,球状与条状形貌增多,片状形貌减少.在体外抗氧化性实验中,当冬凌草硒多糖质量浓度为1.6 g/L时,对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基清除率分别为68.69％、86.90％、45.12％,均强于冬凌草多糖.     

硒多糖的提取和制备研究进展

硒多糖是一种新型的有机硒化合物,兼具硒和多糖的功能,具有提高免疫力、降血糖、抗氧化、抗肿瘤等多种功能,天然硒多糖种类少、含量低、结构复杂.硒多糖的合成方法主要包括微生物转化法、植物转化法、人工合成法等.硒多糖提取一般采用热水浸提法、碱提法、微波法、超声法和酶解法等.本文对硒多糖的来源、提取和制备等研究进行综述,期望为研究硒多糖提供理论依据.     

微波辐射法在多糖接枝共聚中的应用

多糖是一种可用于合成高性能高分子材料的天然可再生资源,在自然界中蕴藏丰富。天然多糖接枝合成聚合物是制备多糖基材料的一种简便通用的方法。对目前天然多糖研究中存在的问题,接枝共聚的概念和目的,微波辐射法原理进行了介绍。同时对微波辐射法在壳聚糖、藻酸钠、纤维素、淀粉、黄原胶、瓜尔胶等多糖分子接枝中的实际应用进行了综述。     

灰树花多糖Sevage法除蛋白工艺的研究

研究了灰树花多糖Sevage法除蛋白的工艺,采用单因素实验确定Sevage试剂添加量、氯仿与正丁醇体积比、脱蛋白次数以及振摇时间对灰树花多糖除蛋白效果的影响,并在单因素实验基础上采用响应面法确定了灰树花多糖Sevage法除蛋白的工艺条件:多糖溶液与Sevag试剂体积比3.073∶1,氯仿正丁醇体积比4.016∶1,振摇时间25.59min,脱蛋白率为37.95%,多糖含量为78.32%。     

黄芪多糖的提取、化学修饰和清除自由基作用

黄芪经沸水浴提取、用Sevag法去蛋白纯化、经50%乙醇多糖分级、离心,得沉淀即H_1,浓缩上清液,沉淀即H_2;对H_1进行化学修饰得甲基化多糖;用DPPH·法对三种多糖进行抗氧化性测试,三种多糖抗自由基能力:H_2甲基化多糖H_1。它们对自由基的清除作用与其浓度呈正相关性。用水煮醇沉法提取多糖,并进行分级和化学修饰,来研究它们对自由基的清除作用,为更好地研究黄芪药用机理,扩大黄芪资源综合利用提供依据。     

高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法测定四价脑膜炎球菌多糖疫苗的多糖含量

目的采用高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培法(high performance anion exchange chromatography with pulsed amperometric detector,HPAEC-PAD)测定四价脑膜炎球菌多糖疫苗中A、C、Y、W135群多糖含量,并对该方法进行验证。方法用三氟乙酸对四价脑膜炎球菌结合疫苗进行水解,得到各群多糖的水解产物:唾液酸、葡萄糖、半乳糖、6-磷酸葡萄糖胺(ManN-6-P),采用HPAEC-PAD法,CarboPac PA10分离柱分别测定缓冲提取液中的总唾液酸、葡萄糖、半乳糖、ManN-6-P的含量,利用归一化的峰面积计算相应唾液酸系数,再计算C群脑膜炎球菌唾液酸含量。对HPAEC-PAD法进行验证,并与传统火箭电泳法检测结果进行比较。结果四价脑膜炎球菌结合疫苗水解后得到的4群单糖均呈良好线性,分离度和峰形均良好;HPAEC-PAD法检测4群糖的日内和中间精密性的RSD均小于5%;各群多糖峰面积的回收率均在80%¹20%之间;3批四价脑膜炎球菌多糖疫苗水解后,经HPAEC-PAD法测定的各群多糖含量与传统火箭电泳法测定结果相当。结论 HPAEC-PAD法检测四价脑膜炎球菌多糖疫苗中的A、C、Y、W135群多糖含量准确、简便、快速、可靠,对控制该疫苗的质量具有重要意义。     

Box-Benhnken组合法优化长萼堇菜多糖提取工艺

目的对提取时间、提取温度和提取次数三个因素进行优化实验,研究长萼堇菜多糖提取工艺;方法通过水提醇沉法提取长萼堇菜多糖,并使用响应面法在单因素实验基础上进行Box-Benhnken组合实验;结果通过响应面法拟合回归方程,确定长萼堇菜多糖最佳提取工艺:温度为100oC,提取次数2次,时间为4 h时,多糖得率理论最优值为5.51%;结论经过实验验证最优提取条件,得到实际的平均多糖得率为5.29%,与拟合的数学模型5.51%近似,证明该模型具有可行性,得到了长萼堇菜多糖较佳的提取工艺。     

蓝莓叶中多糖提取工艺的研究

本研究以蓝莓叶为原料,采用水提法、微波提取法、超声波提取法和微波-超声波提取法对蓝莓叶中的多糖进行提取。结果显示,四种试验方法得到的多糖得率分别为0.226%、0.410%、0.425%、0.648%。在此实验过程中通过和前三种提取方法的比较发现在采用微波-超声波提取蓝莓叶多糖过程中时间大大缩短,蓝莓多糖分解减少,进一步增大多糖的提取率。本研究为蓝莓多糖的开发利用提供了很好的参考。     

改性香菇多糖铁(Ⅲ)配合物的制备及其应用研究

采用95%乙醇对香菇粉进行脱脂预处理后,再用超声波法提取香菇多糖(LNT)。为提高其水溶性,采用过氧化氢氧化法对提取的香菇多糖进行化学改性。探究了过氧化氢浓度、pH值、改性时间等因素对改性香菇多糖(MLNT)水溶性的影响。利用傅里叶变换红外光谱和X射线粉末衍射技术对改性香菇多糖进行了结构表征。结果表明,改性后香菇多糖的分子结构发生改变,其水溶性以及与Fe(Ⅲ)的配位能力增强。采用共振散射技术研究了改性香菇多糖与三价铁离子的配位作用,并考察了反应介质、pH值、改性多糖用量等因素的影响。在最优实验条件下,在0.40~6.0μg/mL范围内,体系的共振散射强度变化值ΔI与Fe(Ⅲ)浓度之间有一定的线性关系,其检出限为0.81 ng/mL。据此,分别分析测定了矿渣和布袋灰中的铁含量,相对标准偏差为3.8%和3.4%,回收率为102%和112%。     

百里香多糖提取工艺及抗氧化性研究

以百里香为原料提取多糖,多糖的含量采用硫酸-苯酚法测定。通过单因素法和正交实验的方法确定百里香多糖的最佳提取条件。单因素分别选取了时间、温度、物料比,确定了对百里香多糖提取的最优单因素条件,进行了正交实验,确定了综合因素。确定利用弱酸弱碱进行提取优化,再提取纯化多糖,进行抗氧化性研究。