灵芝多糖提取工艺的改良

灵芝（Ganodernlalucidum）是担子菌门,非褶菌目,灵芝科,灵芝属真菌（Alexopolus,1979,Mims;2002）,具有极高的营养、保健、医疗价值。本课题以灵芝孢子粉为主要原料,以多糖提取量为考察指标,改进灵芝的提取工艺。本论文使用热水浸提,连续冷冻,酶解等方法对灵芝进行多糖的提取;并采用Sevage法除蛋白、减压蒸馏浓缩粗样、乙醇分级沉淀等操作对灵芝多糖提纯。结果表明：料液比l：20,在70cC下浸提2h,并加入碳酸钠,使溶液pH为10的条件下,多糖的提取最佳。连续冷冻法多糖的得率6．68％,热水浸提法得率是2．6％,酶解法粗多糖的提取率达7．11％。本课题优化了实验的条件,灵芝多糖的提取率大大提高,为工艺生产提供了有利的条件,为进一步研究提供了思路。     

灵芝茵丝体多糖的超滤提取及其抗氧化活性的研究

考察了超滤浓缩醇沉法提取发酵灵芝茵丝体多糖,与减压浓缩法相比,多糖含量、多糖得率均高于后者,所得多糖的品质得到提高,减轻了后续多糖纯化的负担.灵芝菌丝体粗多糖对羟自由基·OH(HFR)有较好的清除能力,在一定范围内清除率与多糖浓度呈正相关,超滤浓缩醇沉法提取灵芝茵丝多糖的·OH清除率高于减压浓缩醇沉法.     

灵芝菌丝体多糖的超滤提取及其抗氧化活性的研究

考察了超滤浓缩醇沉法提取发酵灵芝菌丝体多糖,与减压浓缩法相比,多糖含量、多糖得率均高于后者,所得多糖的品质得到提高,减轻了后续多糖纯化的负担。灵芝菌丝体粗多糖对羟自由基.OH(HFR)有较好的清除能力,在一定范围内清除率与多糖浓度呈正相关,超滤浓缩醇沉法提取灵芝菌丝多糖的.OH清除率高于减压浓缩醇沉法。     

均匀设计法优化灵芝多糖提取工艺

采用苯酚-硫酸法测定灵芝多糖含量,以灵芝多糖得率为评价指标,考察提取时间、提取次数和料液比三个因素,按照均匀设计法优化热水回流提取工艺。研究结果表明,灵芝热水浸提最佳条件为:提取时间180 min,水料比为50∶1(m L/g),提取5次,多糖得率为1. 28%。方法学验证结果显示均匀设计法优化的提取工艺稳定可行,可用于灵芝多糖的高效提取,为灵芝多糖资源进一步开发利用提供参考。     

灵芝多糖精粉制备技术的研究

该项目进行了灵芝液体深层培养和多糖分离提取工艺的研究,并开展了灵芝多糖精粉制备技术的研究.通过动物实验对从灵芝菌丝培养物提取和制备的灵芝多糖精粉的免疫功能和抗肿瘤活性进行了研究,实验结果表明灵芝多糖精粉作为刺激源,可促进巨噬细胞和B淋巴细胞的免疫功能;与抗癌药物环磷酰胺合用时,还可增强其抑制肿瘤的效能.     

灵芝多糖精粉制备技术的研究

该项目进行了灵芝液体深层培养和多糖分离提取工艺的研究,并开展了灵芝多糖精粉制备技术的研究。通过动物实验对从灵芝菌丝培养物提取和制备的灵芝多糖精粉的免疫功能和抗肿瘤活性进行了研究,实验结果表明:灵芝多糖精粉作为刺激源,可促进巨噬细胞和B淋巴细胞的免疫功能;与抗癌药物环磷酰胺合用时,还可增强其抑制肿瘤的效能。     

灵芝多糖精粉制备技术的研究

该项目进行了灵芝液体深层培养和多糖分离提取工艺的研究,并开展了灵芝多糖精粉制备技术的研究.通过动物实验对从灵芝菌丝培养物提取和制备的灵芝多糖精粉的免疫功能和抗肿瘤活性进行了研究,实验结果表明:灵芝多糖精粉作为刺激源,可促进巨噬细胞和B淋巴细胞的免疫功能;与抗癌药物环磷酰胺合用时,还可增强其抑制肿瘤的效能.     

实验教学中苯酚硫酸法检测灵芝多糖的探索

多糖提取实验是生物工程实验教学中重要内容,其分析检测是该实验的主要部分。利用苯酚-硫酸法对灵芝多糖进行检测是教科书中常用方法之一。本研究用酶标仪替代传统的分光光度仪检测多糖,优化了苯酚-硫酸法检测多糖的相关参数(试剂比例、温度、时间等),评价了用酶标仪分析灵芝多糖的方法。在实验教学实践中使用酶标仪能节约实验时间、节省危化品试剂、减少废弃物。     

灵芝提取灵芝多糖的中间试验研究

灵芝,作为药物有2000多年的历史,临床和药理研究表明,灵芝具有多种生理活性与药理作用;而灵芝多糖(Ganoderma Lucidum Polysaccharide)是其主要活性成分,具有免疫调节功能和明显抗癌和抗衰老功能。本文就灵芝多糖的超声波工业化生产的工艺进行了中间试验研究。试验结果表明:超声波提取灵芝多糖工艺条件:料液比为:1:18,提取时间1h,提取3次,为工业化生产提供了试验基础。     

灵芝多糖的提取和测定

报道了灵芝多糖的提取及其含量的测定，灵芝多糖直接从灵芝中提取，并经茉酚硫酸显色，应用比色法于４９０ｎｍ处对灵芝中的多糖含量进行测定，其与葡萄糖的换算系数为６．１，测定回收率为１０１．２％。     

雪灵芝多糖提取条件的研究

利用正交实验设计研究雪灵芝中多糖的最佳提取条件,考察了温度、浸提时间、浸提次数和固液比对实验的影响。运用苯酚-硫酸法测量多糖的含量。并利用方差分析确定了雪灵芝中多糖的最佳提取条件为:在固液比为1∶80,提取温度为90℃,提取时间为180 min,乙醇浓度95%时,多糖提取率为0.38%。     

苯酚-硫酸法测定灵芝多糖含量的研究

以灵芝子实体为样品,对利用苯酚-硫酸法测定灵芝多糖含量时的多糖提取和测定条件进行了较为详细、系统的研究,最终找到了一个多糖提取和测定的最佳条件,即用5%苯酚溶液1.0mL,硫酸5.0mL,于室温下放置30min,在490nm波长处测定吸收度.以此作为灵芝多糖含量的测定方法,结果更加准确和稳定.利用本实验的提取工艺,多糖含量超过60%.     

灵芝多糖提取及纯化工艺研究

为了优化制备高纯度灵芝多糖的提取及纯化工艺,获得高纯度的灵芝多糖药学研究用样品。以灵芝子实体为原料,药用纯化水为溶剂,以固形物含量和多糖含量为考察指标,通过对比研究确定灵芝水提物生产的最优工艺条件。灵芝水提物制备的最佳工艺条件为:料液比1︰15、提取两次、第一次提取时间为4 h、第二次提取时间为3 h,得到水提物收率6.54%,多糖含量9.1%。灵芝水提物通过分级醇沉方法纯化分离灵芝多糖,以多糖含量为考察指标,对比两组不同梯度的体积分数醇沉工艺,确定灵芝多糖分级醇沉的的最佳工艺条件。灵芝水提物分级醇沉的最优工艺条件为30%、60%和90%三个醇沉体积分数,通过分级醇沉可以将水提物中80%以上的灵芝多糖纯化分离出来,其中60%、90%体积分数醇沉得到的灵芝多糖2#、灵芝多糖3#的多糖含量达到25%以上。     

灵芝中水溶性多糖测定方法的研究

着重对灵芝中水溶性多糖含量进行测定,利用乙醇溶液和铜试剂分离出灵芝中具有葡聚糖结构的水溶性多糖,用苯酚-硫酸法对其含量进行测定.该方法操作简单,重现性好,其回收率在95.4%-110.8%之间,结果令人满意.     

组氨酸-聚乙二醇-灵芝多糖-甲氨喋呤纳米粒子的制备及表征

将L-组氨酸(His)和聚乙二醇(PEG)通过化学键连接得到L-组氨酸-聚乙二醇化合物,再将L-组氨酸-聚乙二醇和疏水药物甲氨蝶呤(MTX)分别与灵芝多糖(GLP)化学连接,制备得到组氨酸-聚乙二醇-灵芝多糖-甲氨喋呤结合物,然后该结合物在水中自组装制备L-组氨酸-聚乙二醇-灵芝多糖-甲氨蝶呤纳米粒子。采用红外光谱(FT-IR)和核磁共振(NMR)对L-组氨酸-聚乙二醇-灵芝多糖-甲氨蝶呤结合物进行了结构表征;通过透射电镜(TEM)对纳米粒子的形貌和粒径进行了表征。1 HNMR结果表明His通过羧基与PEG的氨基连接,His-PEG结合物和甲氨蝶呤通过羧基与灵芝多糖的羟基连接;FT-IR测试结果进一步验证了上述结构;TEM观测到His-PEG-GLP-MTX纳米粒子呈球形,粒径均一,约为300nm。     

灵芝多糖相对分子量检测及其单糖组分分析

灵芝多糖具有多种药理活性,由于其来源广泛导致其理化特性、分子量、化学结构差异不均。本文利用蒸发光散射检测器的高效液相凝胶渗透色谱(HPGPC-ELSD)对常规制备过程获得的一个主要灵芝多糖纯化组分GLP进行重均分子量分析;同时利用气相分析了该GLP的单糖组分。结果发现:该灵芝多糖纯化组分GLP的分子量为91.6 k D,单糖组分分别为葡萄糖、半乳糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖和甘露糖,其中以葡萄糖和半乳糖为主。本研究为开展科学、合理的灵芝多糖理化特性的分析方法进而开发灵芝多糖具有重要意义。     

超声波法提取麦冬多糖的工艺研究

麦冬多糖是麦冬的主要成分之一,随着中西方医药的发展,麦冬多糖的提取法越来越先进。应用超声波法提取麦冬多糖的工艺研究：用功率超声波单细胞粉碎法提取麦冬多糖、超声波法提取对麦冬多糖结构和抗氧化的分析;     

利用响应面法大幅度提高“BS-1”灵芝菌株的产多糖水平

为了提高赤灵芝BS-1菌株液体发酵产灵芝多糖的能力,采用响应面法对其培养基配方进行了优化。首先,根据以前的生产实践确定了响应面法试验的基础发酵培养基配方。在此基础上,应用Plackett-Burman设计法对影响菌丝体多糖含量的9个相关因素进行筛选,确定了主要影响因子为酵母粉和硫酸镁。然后用最陡爬坡试验、中心组合设计和响应面分析法对影响灵芝多糖含量的显著因素进行优化,建立了以发酵菌丝体中灵芝多糖含量为响应值的二次回归方程模型,最终获得了可以大幅度提高该菌株液体发酵产生的菌丝体中多糖含量的最佳发酵培养基配方。优化后的高产灵芝多糖的培养基配方组成为:1%豆饼粉,1%玉米粉,1%葡萄糖,0.845%酵母粉,0.2%山药,0.2%麸皮,0.1%KH_2PO_4,0.132%Mg SO_4·7H_2O,0.01%VB_1。使用优化后的培养基液体发酵生产的灵芝菌丝体中的多糖含量(3.65%)达到基础培养基生产的灵芝菌丝体多糖含量(1.81%)的2.02倍。     

南瓜多糖提取纯化工艺的研究

为了提高南瓜多糖的提取率,采用冷冻法对南瓜进行前处理,通过正交实验确定了南瓜多糖提取的工艺参数,采用凝胶层析法对南瓜多糖进行了纯化并测定其分子量,采用了红外光谱对南瓜多糖进行了结构分析。实验结果表明,采用冷冻预处理后,南瓜多糖的提取率增加了77%;正交实验确定的南瓜多糖的优化工艺参数为:提取温度65℃,提取时间2 h,料液比1∶16;南瓜粗多糖经SephadexG-200凝胶层析柱后分为2个色谱峰,其平均分子量分别约为21 400和57 500;红外光谱分析显示,南瓜多糖为含有环状结构的多糖。     

灵芝多糖的液态发酵研究

对泰山灵芝液态发酵灵芝多糖的培养基配方、发酵条件进行了优化选择，并通过分批发酵、补料分批发酵的方式获得了灵芝多糖液态发酵的一系列参数。通过60h的补料分批发酵，灵芝多糖的单位产量达到2．208g／L，为灵芝多糖的工业化发酵生产奠定了基础。