甘草次酸差向异构体的高效液相色谱分离分析

应用整体化色谱柱,反相条件下对18H-甘草次酸差向异构体的拆分进行了探讨。采用Chromolith RP-18e整体化色谱柱,乙酸铵-乙腈-甲醇三元流动相体系,考察了乙酸铵浓度、有机添加剂含量、柱温等因素对甘草次酸差向异构体拆分的影响,在优化的色谱条件下,甘草次酸差向异构体达到了基线分离,分离度可达5.30。18α-甘草次酸与18β-甘草次酸分别在2.16~23.76μg/mL与4.24~46.64μg/mL范围内呈良好的线性关系。建立的方法简便快速,可应用于甘草次酸类药物的质量监测与控制,以及甘草次酸异构体的转化评价。     

绿茶、甘草提取物口腔护理功效的实验研究

采用抑菌、抗细菌产酸和表面黏附等实验,初步探讨绿茶及甘草提取物对口腔条件致病菌变异链球菌及牙龈卟啉单胞菌的抑菌、抗产酸及抗细菌黏附等口腔护理功效,结果表明:绿茶提取物能有效对抗以上两种细菌黏附作用,对牙龈卟啉单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.78 mg/mL;甘草提取物在质量浓度为1.56 mg/mL时能有效抑制变异链球菌的增殖、产酸及发挥抗黏附作用,对牙龈卟啉单胞菌的MIC为0.195 mg/mL,同时它具有抗牙龈卟啉单胞菌黏附作用。研究结果可为这两种成分在口腔护理品中的应用提供一定的实验依据。     

人参皂苷Rg1诱导人红白血病K562细胞株衰老与p16-Rb信号通路的相关性

目的探讨人参皂苷Rg1(以下简称Rg1)诱导人红白血病K562细胞株衰老与p16-Rb信号通路的相关性。方法以不同浓度的Rg1(0、5、10、20、40和80μmol/L)作用于K562细胞不同时间(24、48、72 h),MTT法筛选Rg1抑制K562细胞增殖的最佳作用浓度及作用时间,以该浓度干预K562细胞不同时间,流式细胞术检测细胞的细胞周期;以最佳浓度Rg1干预K562细胞最佳时间,集落培养法检测细胞集落形成能力;衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测阳性细胞百分率;透射电镜观察细胞的超微结构;Southern blot检测细胞的端粒长度;Western blot检测细胞中P16和RB蛋白的表达。结果 Rg1在体外可明显抑制K562细胞增殖,其最佳作用浓度及作用时间分别为20μmol/L和48 h;经20μmol/L Rg1诱导48 h的K562细胞与常规培养对照组相比,细胞出现G2/M期阻滞(P<0.05),集落形成能力明显减弱(P<0.05),SA-β-Gal染色阳性率增加(P<0.01),细胞体积增大,且溶酶体,线粒体体积增大,数目增多,端粒缩短加速(P<0.05),P16和RB蛋白表达上调(P<0.05)。结论 Rg1能诱导人红白血病K562细胞株衰老,可能与Rg1激活了p16-Rb信号通路有关。     

茶麸黄酮促进毛乳头细胞增殖和VEGF分泌的研究

以脱脂茶麸为原料,通过乙醇水溶液超声波辅助提取脱脂茶麸中的黄酮,探究其生物活性。用不同质量浓度含茶麸黄酮溶液作用于体外培养的人毛乳头细胞(HDPCs),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞活性,并通过流式细胞术检测茶麸黄酮对细胞凋亡、周期的影响以及ELISA法检测细胞培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的变化。结果表明,茶麸黄酮富集产物对HDPCs具有增殖作用,质量浓度20μg/mL时增殖效果最佳,比10μg/mL米诺地尔阳性对照效果显著(**P<0.01)。茶麸中黄酮可能是通过减少HDPCs的早凋,促进HDPCs的有丝分裂从而对细胞的增殖发生作用。茶麸黄酮富集产物对HDPCs的VEGF分泌呈现浓度依赖性。     

艾纳香油中有效成分的定性检测及含量测定

通过化学反应鉴别方法和泡沫试验方法定性检测艾纳香油中有效成分;采用UV比色法对有效成分进行含量测定。结果表明,艾纳香油中含有黄酮、有机酸和蒽醌类成分,但无生物碱、皂苷及多糖类成分。黄酮、有机酸和蒽醌类成分质量浓度分别在3.680～18.400μg/mL(R²=0.999 6),4.190～20.950μg/mL(R2=0.999 6),4.190～20.950μg/mL(R²=0.999 4),2.590～12.950μg/mL(R2=0.999 4),2.590～12.950μg/mL(R²=0.998 7)范围内具有良好线性关系,平均回收率(n=3)分别为99.80%(RSD=1.33%),99.37%(RSD=0.56%),99.81%(RSD=0.58%)。     

基于网络药理探讨甘草及甘草次酸药效/副作用的分子作用机制研究

目的:探讨基于网络药理探讨甘草及甘草次酸药效/副作用的分子作用机制,为临床合理用药提供依据.方法:基于网络药理,从药理学分析平台(TCMSP)中寻找甘草及其中甘草次酸相关化学成分.根据二者的性质、药效,选择口服生物利用度(OB)≥50.0％(甘草)/OB≥17.0％(甘草次酸),类药效(DL)≥0.18作为筛选条件,寻找与候选化合物相关的潜在靶点,构建其成分-靶点,靶点-疾病及副作用的网络图.结果:选择OB≥50.0％(甘草),OB≥17.0％(甘草次酸),DL≥0.18作为筛选条件,结果表明:共43个候选化合物均具有良好的OB、DL特性;43个候选化合物与潜在的靶标之间构建相互作用网络图,图中共计结点136个,潜在靶标93个,网络线合计744条,甘草次酸具有6个潜在靶标,说明甘草及甘草次酸的成分与靶点蛋白的分子良好的结合能力.靶点-疾病相互作用网络图中,甘草及甘草次酸合计结点102个,其中44中相关疾病,58个靶标,合计边57个,一个靶蛋白能与多个疾病相互作用.罗列甘草次酸常见的不良反应绘制网络图,不良反应共有13种.结论:基于网络药理,验证了甘草及甘草次酸的基本药理作用及相关机制,以及甘草次酸的副作用,能为临床合理用药提供参考和依据.     

艾纳香油中有效成分的定性检测及含量测定

通过化学反应鉴别方法和泡沫试验方法定性检测艾纳香油中有效成分;采用UV比色法对有效成分进行含量测定。结果表明,艾纳香油中含有黄酮、有机酸和蒽醌类成分,但无生物碱、皂苷及多糖类成分。黄酮、有机酸和蒽醌类成分质量浓度分别在3.680～18.400μg/mL(R~2=0.999 6),4.190～20.950μg/mL(R~2=0.999 4),2.590～12.950μg/mL(R~2=0.998 7)范围内具有良好线性关系,平均回收率(n=3)分别为99.80%(RSD=1.33%),99.37%(RSD=0.56%),99.81%(RSD=0.58%)。     

海参肽对成纤维细胞的作用及与其他抗皱成分的比较

皮肤老化问题越来越受到人们的重视,而伴随着蓝色经济的发展,海洋生物资源也得到了开发利用。在前期研究的基础上以混合酶解方法制备海参肽,通过MTT(噻唑蓝)方法研究海参肽对NIH/3T3细胞及胶原蛋白分泌量的作用,并与其他抗皱成分进行比较:其中海参肽质量浓度为200μg/m L时可以显著促进NIH/3T3细胞生长,增殖率为33.9%±13.8%;海参肽质量浓度为800μg/m L时,对NIH/3T3细胞胶原蛋白的分泌有显著的作用,羟脯氨酸含量为(1.96±0.16)μg/m L;燕麦多肽、蜗牛原液、多效亮肤混合液对NIH/3T3细胞的最大增殖率依次为14.2%±8.3%、26.7%±12.0%、26.2%±12.1%;表明海参肽较其他三种成分有更明显的促进NIH/3T3细胞增殖的作用。     

微波消解-微波等离子体原子发射光谱法测定石煤钒矿中钒

建立一种石煤钒矿试样经硝酸-氢氟酸-高氯酸三酸体系微波消解,微波等离子体原子发射光谱法(MP-AES)测定石煤钒矿中钒的方法。通过考察微波消解用酸试验条件,分析谱线和共存元素Al、Fe、K、Ca和Mg对测定钒的影响。结果表明:选用5.0 mL硝酸,3.0 mL氢氟酸,2.0 mL高氯酸进行试样处理,溶液清澈,钒溶出效果好;选择437.923 nm次灵敏度分析谱线,光谱干扰少;共存元素Al、Fe、K、Ca和Mg分别在浓度85μg/m L、35μg/mL、40μg/mL、35μg/mL和30μg/mL以下对测定钒基本无影响。钒在0.10～2.50%范围内的质量与相应的发射强度呈线性关系,线性相关系数为0.9999,检出限为0.6μg/g。该方法用于测定石煤钒矿中钒含量相对标准偏差RSD(n=10)均小于2%,具有较高的精密度和准确度。     

几种常用美白剂协同作用研究

利用酪氨酸酶无细胞体系、B16细胞模型2种反应体系探讨了3种常用美白成分(光甘草定、烟酰胺和VC乙基醚)联合应用对酪氨酸酶的抑制活性。结果表明:2种反应体系中,光甘草定均有最佳的酪氨酸酶抑制活性;正交实验得出3种美白成分复配后光甘草定对酪氨酸酶抑制活性影响最大;应用无细胞及B16细胞反应体系进一步证实3.125 mg·L-1光甘草定分别与不同质量浓度的烟酰胺及VC乙基醚联合使用后,可提高各复配物对酪氨酸酶的抑制活性,对比几种复配物,其中以光甘草定与烟酰胺的复配效果最佳;协同作用分析结果表明,光甘草定与烟酰胺合用可起到酪氨酸酶活性抑制增效的作用,烟酰胺可协同增强光甘草定的美白功效。     

甘草甙的分离纯化及鉴定

甘草甙是甘草黄酮类化合物中重要的单体活性成分,具有抗氧化、抗H IV等多种药理作用。该文在无标样条件下对甘草甙的分离纯化进行了研究,并首次采用模拟移动床色谱技术提纯甘草甙。实验表明,原料液固萃取的最佳条件为:水作萃取溶剂,原料质量浓度为40 g/L,90℃恒温水浴中萃取2.0 h。模拟移动床色谱在进样流速0.1 mL/m in;洗脱流速1.5 mL/m in;萃取流速1 mL/m in;切换时间20~21 m in;样品质量浓度0.2 g/mL;流动相V(乙醇)∶V(水)=15∶85;工作模式:1-1-2条件下(即三带模拟移动床色谱中洗脱带、精馏带、吸附带色谱柱数分别为1,1,2),可实现甘草甙的精细分离。重结晶所得产品通过质谱、紫外可见光谱、红外及核磁共振谱图对其结构进行了表征。     

血管生成素-2对人结肠癌细胞SW1116增殖的影响及其机制

目的探讨血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)对人结肠癌细胞SW1116增殖的影响及其机制。方法用不同浓度的Ang-2处理SW1116细胞,MTT法检测其对SW1116细胞增殖的影响;将SW1116细胞分为正常对照、无血清DMEM、Ang-2(1.2 mg/L)及PI3K/Akt阻断剂LY294002(10μmol/L)+Ang-2组,作用24 h后,MTT法检测LY294002对SW1116细胞增殖的影响,Western blot分析Tie-2、PI3K和Akt蛋白的表达。结果 Ang-2在1.2 mg/L时,对SW1116细胞增殖的影响最显著;LY294002能有效抑制由Ang-2引起的SW1116细胞的增殖;Ang-2组与无血清DMEM组比较,Tie-2的表达略有上升,但差异无统计学意义(P>0.05),Akt蛋白的表达显著增强(P<0.01),而PI3K蛋白的表达显著降低(P<0.01),LY294002+Ang-2组中3种蛋白的表达与Ang-2组相比,均明显降低(P均<0.01)。结论 Ang-2能促进SW1116细胞增殖,LY294002可抑制由Ang-2引起的SW1116细胞的增殖,其机制可能与Tie-2/PI3′-kinase/Akt调节的信号通路有关。     

茶皂素的脱色及控油功效研究

以色泽较深的市售茶皂素为原料,采用H₂O₂氧化脱色法,基于H₂O₂用量、pH值、脱色温度/时间优化,茶皂素溶液脱色率可达91%,并发现脱色后茶皂素起泡/稳泡性能提升、细胞毒性显著下降。采用人永生化皮脂腺细胞（SZ95）模型研究了脱色后茶皂素抑制皮脂分泌的功效。结果显示,茶皂素（4μg/mL）对SZ95细胞脂质合成的抑制率达24.87%;对于油酸/亚油酸刺激条件下的SZ95细胞脂质合成的抑制率达14.96%,且显著抑制了刺激条件下SZ95细胞促炎性细胞因子IL-8表达（抑制率为29.01%）,表明茶皂素不仅能够显著抑制正常及刺激条件下SZ95细胞脂质合成,并且可抑制皮脂可能诱导的细胞炎症反应,有助于维护皮脂腺代谢平衡。进一步对含有2.5%茶皂素的产品进行了人体功效评价,结果显示使用该产品后6 h内志愿者皮肤水分含量和经皮失水无明显变化,而皮脂分泌量显著降低,表明含茶皂素产品可在不影响皮肤水分含量和屏障功能的前提下实现有效控油。本研究不仅有助于推动茶皂素在洗护产品中的实际应用,还发掘了茶皂素的控油新功效...     

高效液相色谱紫外荧光双检测器测定苯并(α)芘

采用紫外-荧光双检测器的高效液相色谱分别测定了不同浓度的苯并(α)芘(Ba P)标准溶液,试验结果表明:紫外检测器(VWD)对0.1~10μg/mL浓度范围的Ba P标准溶液响应较好,在该浓度范围内呈现出良好的线性关系(相关系数r=0.9999),VWD检测器7次重复试验的相对误差范围为-5.0%~2.8%,精密度为2.8%;荧光检测器(FLD)对0.001~0.1μg/mL、0.01~0.0001μg/mL浓度范围的Ba P标准溶液响应较好,在两个范围内均有良好的线性关系(相关系数r均为0.9999),FLD检测器7次重复试验的相对误差范围-5.6%~3.4%,精密度为3.2%。本试验测定中,VWD检测器的检出限为0.0053μg/mL,FLD检测器的检出限为0.00004μg/mL。     

HPLC-DAD波长切换法同时测定逍遥丸中7种化学成分的含量

HPLC-DAD波长切换法同时测定逍遥丸中柴胡皂苷(1)、芍药苷(2)、甘草苷(3)、异甘草素(4)、甘草酸铵(5)、白术内酯Ⅲ(6)、甘草次酸(7)等7种成分的有效成分的含量,为逍遥丸的质量测定与评价提供科学依据。     

高效液相色谱法测定化妆品中光甘草定的含量

建立了高效液相色谱法测定化妆品中光甘草定含量的方法。样品经甲醇超声提取,用高效液相色谱进行定性和定量检测。方法线性浓度范围为0.5~100μg/mL,相关系数r大于0.99,最低检出限为0.15μg/mL(S/N=3),高、中、低3个浓度水平的加标回收率在89.2%~108.4%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)小于10%。     

胶束增敏光度法测定除臭化妆品中的锌盐

在pH 10.0的NH3-NH4Cl缓冲溶液中,以酸性铬蓝K为显色剂,在阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵存在下,酸性铬蓝K和Zn2 形成稳定的亮红色配合物,其最大吸收波长575 nm,表观摩尔吸光系数为5.5×105L.mol-1.cm-1,锌质量浓度在0~50.0μg/mL内服从朗伯比尔定律,线性方程为ΔA=0.123 0.003 15ρ(μg/mL),检出限为3.05μg/mL。加标回收率为97.4%~100.3%,该方法可用于除臭化妆品中水溶性锌盐的测定。     

甘草抗郁原位凝胶的制备及质量标准研究

研究制备甘草抗郁凝胶,初步制订可行、可控的质量标准。采用正交试验设计法考察凝胶基质比例、保湿剂对凝胶效果的影响,优化处方工艺;采用薄层色谱法、高效液相色谱法对凝胶中的抗郁成分进行定性鉴别及含量测定。结果表明:甘草抗郁凝胶的最佳处方为泊洛沙姆P407、P188分别为16%、4%,甘油3%,磷酸盐缓冲液76.98%,尼泊金乙酯0.01%;平均胶凝温度33.8℃;载药量为99.4μg?mL~(-1);薄层色谱鉴别斑点清晰,阴性无干扰;凝胶p H符合鼻腔黏膜用药要求;甘草查尔酮在10.0～1 000μg?mL~(-1)范围内具有良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为99.8%。建立了准确、有效的甘草抗郁凝胶制备及质量控制分析方法。     

β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响

目的观察β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344对3T3-L1前脂肪细胞分化及相关基因mRNA转录的影响,并探讨其抗肥胖的作用机制。方法将3T3-L1前脂肪细胞分为4组:空白对照组、常规分化组、BRL37344处理组、常规分化+BRL37344组。采用油红O染色法初步判断各组脂肪细胞的分化情况,RT-PCR法检测各组脂肪细胞分化过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(Peroxisome proliferators activated receptorγ2,PPARγ2)、脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(Adipocyte fatty acidbinding protein,aP2)、脂蛋白脂肪酶(Lipoprotein lipase,LPL)基因mRNA的转录水平。结果经不同浓度的BRL37344处理8 d后,3T3-L1前脂肪细胞中PPARγ2、aP2、LPL基因mRNA的转录水平均下调,且呈剂量依赖性,其中10-7mol/L BRL37344作用明显;在不同的分化时间点,经10-7mol/L BRL37344处理后,细胞分化相关基因与相应对照组相比,均呈下调趋势(P<0.05)。结论β3肾上腺素能受体激动剂BRL37344可能通过下调脂肪细胞分化相关基因的转录,抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化。     

灵芝酸单体调控乳腺癌细胞生长及相关基因表达的研究

目的:探讨灵芝酸单体A,B调控乳腺癌细胞生长以及相关基因PI3K,AKT,mTOR,PTEN的表达。方法:采用CCK8试剂盒分别检测对照组和不同浓度灵芝酸A,B(0、1、5、10、20、50、100μmol·L-1)对乳腺癌MDA-MB-231和乳腺癌MCF-7细胞的增殖影响。每组设3个复孔,分别接种于96孔板中,分别于培养24 h和48 h检测其OD值。结果:CCK8法检测,与对照组相比,随着灵芝酸浓度增加,细胞存活率下降,当灵芝酸浓度为100μmol·L-1时,细胞存活率最低(p0.05或p0.01),细胞抑制作用最强。同时随着药物处理时间的增加,对细胞的抑制作用更加明显。表明灵芝酸调控乳腺癌细胞增殖作用与浓度和时间有紧密相关性。灵芝酸A和灵芝酸B处理MCF-7和MDA-MB-231两种细胞24 h、48 h,提取细胞RNA,通过反转录获得c DNA,再经Real-timePCR检测相关基因表达。结果表明灵芝酸单体A,B可以下调两种乳腺癌细胞pi3k、akt、mtor mRNA的表达,上调pten的表达。结论:灵芝酸可以使乳腺癌细胞增殖活性降低,可能通过调控PI3K/AKT/mTOR通路的活性,从而抑制肿瘤细胞的生长。