虎杖活性成分的提取与分离

通过实验研究确定了虎杖活性成分的提取和分离条件：用质量8倍于虎杖粗粉,浓度为80%乙醇,温度60 ℃,浸渍3次,每次2 h,提取率为96.3%.再经硅胶柱层析分离虎杖乙醇的提取物,氯仿-甲醇梯度洗脱[V（氯仿）：V（甲醇）=9.8 ： 0.2 ～ 7.0 ： 3.0].薄层层析检测得到5种单体：大黄素甲醚、大黄素、大黄酸、白藜芦醇和白藜芦醇苷.以虎杖饮片为基准,得率分别为0.03%、0.92%、1.56%、2.0%和1.41%.     

虎杖中白藜芦醇、白藜芦醇苷、大黄素等有效成分的提取

对虎杖中的有效成分白藜芦醇、白藜芦醇苷、大黄素等进行了提取,提取液经有机溶剂萃取分离后,用紫外分光光度法测定吸光度,确定了各有效成分的含量.考察了乙醇体积分数、提取温度、提取时间,物料比对各有效成分提取率的影响,通过正交实验确定最佳工艺为:乙醇浓度80%,提取温度70℃,料液比1:20,提取时间2 h.提取得率白藜芦醇为5.57%,白藜芦醇苷为10.74%、大黄素为2.67%、未知物1为8.87%、未知物2为7.13%.使用邻苯三酚自氧化法,对各有效成分的抗氧化性进行了测定.     

洗脱剂极性对硅胶柱分离人参皂苷C-K的影响

酶转化后的人参皂苷C-K含有杂质及其他少量皂苷,因此要得到纯度较高的人参皂苷C-K,要对其进行除杂与分离。以酶转化人参皂苷C-K为原料,采用石油醚除杂,除杂后利用硅胶柱层析进行分离得到人参皂苷C-K,并研究了洗脱剂极性对硅胶柱分离人参皂苷C-K的影响。石油醚除杂率为15%。采用3种不同极性洗脱剂分别对30 g人参皂苷C-K进行分离比较,发现V(氯仿)∶V(甲醇)=9.5∶0.5作为洗脱剂时,得到人参皂苷C-K 11.25 g,得率为37.5%,分离效果较好;V(氯仿)∶V(甲醇)=9.0∶1.0作为洗脱剂时,仅得到人参皂苷C-K 3.02 g,得率为10.07%,分离效果较差;采用V(氯仿)∶V(甲醇)=(9.5∶0.5)+[V(氯仿)∶V(甲醇)=(9.0∶1.0)]联合作为洗脱剂时,得到人参皂苷C-K 6.40 g,得率为21.33%,分离效果一般。V(氯仿)∶V(甲醇)=9.5∶0.5洗脱得到的产物经高效液相色谱检测,发现稀有人参皂苷C-K的纯度可达98%以上。     

决明子中蒽醌类物质的提取和TLC检测

通过实验确定了水煎煮法和乙醇提取法对决明子有效成分提取率的影响。实验结果表明:15倍量70%乙醇50℃提取4 h,经3次提取蒽醌得率为0.061%。通过TLC法检测决明子有效成分,发现展开剂为V(氯仿)∶V(甲醇)∶V(水)=5∶3∶1提取效果较好。     

虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的提取工艺研究

研究同时提取虎杖中虎杖苷和白藜芦醇的最佳工艺. 采用正交设计法优选提取分离条件,借助HPLC法测定虎杖苷和白藜芦醇的含量. 以乙醇为提取溶剂,超声波辅助提取,最优条件为:80%乙醇,料液比为1:20,提取温度为60 ℃,提取时间为40 min,虎杖苷和白藜芦醇的提取含量分别为2.42%和0.41%. 研究结果表明,所选工艺稳定性好,操作简单.     

地龙抗炎有效部位的分离筛选

报道了在生物活性试验指导下对地龙抗炎有效部位的分离纯化方法的实验研究。采用70%乙醇粗提取、大孔树脂吸附、硅胶柱层析依次对地龙分离,大孔树脂采用流动相V(乙醇)∶V(水)=6∶4时,硅胶柱层析当流动相V(氯仿)∶V(甲醇)=9∶1时,可得到较为纯净的地龙抗炎有效部位。根据红外光谱测定的结果,初步认定该有效部位属于具有苯环结构的化合物。其具体结构的鉴定有待于进一步研究。     

薄层层析分离鲟鱼胆汁

为了综合利用鲟鱼加工下脚料,提高鲟鱼附加值和中药产业临床应用价值,提出了采用不同的溶剂系统作展开剂分离鲟鱼胆汁的有效成分的方法.实验过程中,分别以单元溶剂、二元溶剂以及三元溶剂体系作展开剂,考察了不同体系的展开剂对鲟鱼胆汁分离效果的影响.结果表明:单元溶剂中甲苯和氯仿分离效果好,二元溶剂体系中氯仿/乙醇、氯仿/甲醇、石油醚/丙酮以及三元溶剂体系中石油醚/丙酮/甲苯(3∶1∶1,体积比)、氯仿/甲醇/甲苯(5∶1∶1,体积比)分离效果较佳.筛选出二元溶剂氯仿/甲醇(10∶1,体积比)最适宜后续的柱层析分离鲟鱼胆汁.     

决明子中蒽醌类物质的提取和TLC检测

通过实验确定了水煎煮法和乙醇提取法对决明子有效成分提取率的影响.实验结果表明：15倍量70%乙醇50 ℃提取4 h,经3次提取蒽醌得率为0.061%.通过TLC法检测决明子有效成分,发现展开剂为V（氯仿）∶V（甲醇）∶V（水）=5∶3∶1提取效果较好.     

不同产地虎杖药材中有效成分及其抑菌活性的比较

考察不同产地虎杖药材中主要有效成分的含量及其抑菌活性。采用乙醇加热回流法提取虎杖药材中的有效成分,分别测定白藜芦醇苷、大黄素含量,并测定了提取液的抑菌活性。结果发现,不同产地虎杖药材中白藜芦醇苷的含量有显著性差异,其中安徽产的含量最高,各地虎杖药材对金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的抑菌活性均较强。     

绞股蓝皂苷酶转化产物的分离纯化及鉴定

利用硅胶柱层析法对本实验室自制的绞股蓝皂苷的酶解产物进行了分离纯化,采用氯仿-甲醇系统进行梯度洗脱,在V(氯仿)∶V(甲醇)=8∶2时洗脱出一种单体绞股蓝皂苷,其得率为25.3%。经高效液相色谱法检测,这种单体皂苷在色谱中的保留时间与人参皂苷Rd的保留时间相同,初步确定其为人参皂苷Rd。     

虎杖愈伤组织的诱导及其白藜芦醇含量的变化

为了利用细胞工程开发虎杖悬浮细胞培养、积累白藜芦醇,必须探索虎杖松散型愈伤组织的培养基及其培养条件．以灭菌虎杖茎段、叶片、茎尖等为外植体,探讨9种激素组合在琼脂和珍珠岩固体培养基上诱导愈伤组织的出愈时间、出愈率、在继代培养中分化状况和白藜芦醇含量变化．结果表明：珍珠岩作为支撑物,诱导的愈伤组织比琼脂好;含有NAA或KT的培养基,诱导形成的愈伤组织在继代中均可分化;①号培养基（MS＋2,4-D4．0rag／L＋6-BA2．0mg／L＋3％蔗糖）对幼叶、茎段和茎尖等都有出愈时间早、出愈率高和愈伤组织生长速度快、松散,适宜于悬浮细胞的培养;愈伤组织白藜芦醇的含量与其外植体来源呈正相关,其中,由幼茎形成的愈伤组织白藜芦醇含量（鲜重）最高,达到160μg／g．     

34种中药对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

测定34种中药水提物的α 葡萄糖苷酶抑制活性。结果显示,药液浓度为50mg/mL时,巴戟天、牛膝、黄精、白芍、何首乌、五味子、川芎、虎杖、穿山龙对α 葡萄糖苷酶活性的抑制率达50%以上。进一步研究发现五味子、川芎和虎杖对α 葡萄糖苷酶的抑制活性较强。虎杖抑制α 葡萄糖苷酶活性的IC50约为27.5mg/mL,属非竞争性抑制。     

正交实验法优选虎杖茎中白藜芦醇的提取工艺

以干浸膏中白藜芦醇含量作为主要评价指标,采用正交实验方法优化虎杖茎中白藜芦醇的最佳提取工艺条件.实验结果表明最佳提取工艺条件为溶剂浓度60%、提取时间2 h、提取温度80℃、料液比1 15.工艺验证结果表明最佳工艺条件稳定可靠、重现性好.     

Optimization of extraction and determination of emodin from Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. products by HPLC-DAD

A uniform experimental design procedure was used to investigate the effects of some operating parameters on the extraction of emodin from Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. products. Variables tested were volume ratio of material to solvent, size of material, extraction time and temperature and composition of extraction solvent （mixtures of acetone-water）. Each variable was tested at seven levels; 7 experiments were performed in random order. Analyses of the extracts were performed by high-performance liquid chromatography with diode array detection（HPLC-DAD）. Analytical responses were processed by using a forward regression analysis, in order to find polynomial function describing the relationship between variables and responses. For all the analytes the experimental conditions for providing the highest extraction yield inside the experimental domain considered were found. Finally, a simple, rapid and accurate analytical method was developed for the determination of emodin by high performance liquid chromatography. The separation is achieved within 25 rain on an ODS column using methanol and water as gradient mobiles. Emodin can be quantified by using external standard method detecting at 436 nm. Good linearity is obtained with correlation coefficient exceeding 0.9986 and the detection limit and the quantification limit are 1.53 and 3.23 mg/L respectively. This method shows good reproducibility for the quantification of the emodin with intra-day and inter-day relative standard deviation less than 2.3% and 5.6% respectively. Under optimized extraction conditions, the recovery of the standard is 96.5%. The validated method is successfully applied to quantify the emodin in seven Polygonum cuspidatum sieb. Et zucc. products, which provided an idea for the pre-treatment of determination of active compounds in traditional Chinese medicines.     

虎杖主要提取物半仿生提取条件的优选

采用半仿生法提取虎杖并优选了其提取条件。以提取时溶剂pH值以及总提取时间为考察因素,使用4因素3水平的正交试验,加热回流提取虎杖,以白藜芦醇苷、大黄素含量为考察指标选择最优条件。实验结果显示,当第一煎pH2.2、第二煎pH6.0、第三煎pH9.0、总提取时间4 h时,药液中白藜芦醇苷的含量最大;当第一煎pH 1.8、第二煎pH 7.0、第三煎pH 8.0、总提取时间4 h时,药液中大黄素的含量最大。该实验得到的最佳半仿生提取条件稳定性好,简便易行。     

超声波-微波协同萃取虎杖中大黄素

以大黄素含量为指标对虎杖中有效成分进行了超声波-微波协同萃取。采用正交设计法优化了萃取条件。试验结果表明在超声波功率内置为50 W的仪器条件下影响大黄素萃取的主要因素依次是：乙醇浓度、提取时间、乙醇用量、微波功率。大黄素的最佳萃取条件是：乙醇浓度为90%,乙醇用量为75 mL,提取时间为5 min,微波功率为30 W。正交优化条件下,大黄素得率可达1.26%。萃取效果明显优于传统的溶剂回流方法和超临界流体萃取。     

何首乌对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

目前已经发现许多中药具有高效抑制α-葡萄糖苷酶活性成分,能有效的治疗糖尿病。通过测定30种中药水提物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,发现何首乌抑制活性最强。本文报道对何首乌抑制成分的分离与鉴定实验。经sephadex G-100凝胶过滤分离纯化,初步鉴定何首乌的抑制剂为多糖类物质,相对分子质量约为4.79×104。双倒数曲线表明,何首乌抑制剂对α-葡萄糖苷酶的作用属于非竞争性抑制。     

虎杖中白藜芦醇苷水提取工艺的优化设计

考察了虎杖中白藜芦醇苷的水提取工艺条件。采用正交试验设计法,优选虎杖水提取工艺,采用薄层色谱-紫外分光光度法测定白藜芦醇苷含量。最佳水提条件为:10倍量水,加热回流提取2次,每次1.5 h。实验结果表明,该实验确定的最佳提取条件简便经济,稳定性好。