一株降解石油烃假单胞菌的鉴定及降解特性

从松原油田石油污染土壤中筛选、分离出一株降解石油烃的菌株,观察其菌落形态,通过16S rDNA 序列分析对其进行鉴定。结果表明：该菌株的菌落呈白色不规则状、表面粗糙、边缘不整齐。16S rDNA序列分析鉴定为类产碱假单胞菌（Pseudomonas pseudoalcaligenes strain）。在温度为35℃、pH值为8时菌株对石油烃降解效果最好,降解率为75.4%。     

高效石油烃降解菌的分离鉴定及降解特性

为获得更为丰富的石油降解微生物资源,从沈抚污灌区石油污染土壤和实验室高浓度柴油胁迫土壤中筛选出了4株高效石油烃降解菌SF-422、SF-428、SF-433和SYS-1.这4株菌总石油烃(Total petroleum hydrocarbon/TPH)生物降解率为67.4%~73.6%.经过16项生理生化特性实验和16S rDNA序列分析鉴定,SF-433,SF-428,SF-422和SYS-1分别为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),木糖氧化无色杆菌(Achromobacter xylosoxidans),施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)和洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia).纯烃降解定性实验表明所筛选出的4株高效降解菌均能够利用正十六烷、苯、菲和环己烷为唯一碳源生长,其中菌株SF-428和SYS-1显示了对芳烃及环烷烃较强的利用能力.     

假单胞菌中聚羟基脂肪酸酯合成酶基因的克隆与分析

大多数二型聚羟基脂肪酸酯（Polyhydroxyalkanoates,PHA）合成酶（PhaC）发现于假单胞菌中，其基因组成形式为两个PhaC基因中间有一个PAH降解酶PhaZ基因，根据已知的假单胞菌PHA合成酶基因区域的特殊结构，设计了采用PCR方法从假单胞菌中克隆PHA合成酶基因的克隆方案，并成功地对一株硝基还原假单胞菌（Pseudomonas nitroreducens）和一株石竹伯克霍尔德氏菌（Burkholderia caryophylli）中的PHA合成酶基因进行了克隆。将克隆得到的phaC1，phaZ和phaC2 3个基因所编码的氨基酸序列与其他6株已知PHA合成酶基因的假单胞菌的相应序列进行比较，发现这3个蛋白质在假单胞菌中的相似性很高，由phaC1,phaZ和phaC2 3个基因所组成的基因区域在假单胞菌中非常保守，从对PhaC1,PhaZ和PhaC2的系统进化树分析可以发现，这3个蛋白质与整个PHA合成酶基因区域的系统进化树有着一致的结构。这表明假单胞菌中的PHA合成酶基因区域可能起源于共同的祖先，而其形成可能经历了一次PHA合成酶基因加倍的过程。     

石油污染物生物降解的机理研究

通过测定石油生物降解过程中的产物,分析探寻假单胞菌属的Pseudomonas sp.StrainSY2对石油的降解机理,为解决海洋石油污染问题提供理论依据。利用色质谱分析手段测定假单胞菌属的Pseudomonas sp.Strain SY2对石油和正十四烷降解产物,对菌株SY2的降解机理进行分析研究。研究结果表明：菌株SY2对石油中的正烷烃有较好的降解效果,其中正十四烷、正十五烷和正十六烷的降解率较高,分别为：73.4%、49.3%、48.9%;根据正十四烷降解产物推测：菌株SY2对正十四烷的降解有单末端氧化、双末端氧化、次末端氧化和直接脱氢等多种途径,产生酯类、烯烃类、烷烃类及羧酸类等物质,与文献报道的烷烃降解途径相符合。     

石油高效降解菌的筛选及其降解特性

从石油污染土壤中筛选、分离得到三株高效石油降解菌GX1、GX2、GX3,初步鉴定分别为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、邻单胞菌属(Plesionmonas sp.)和动胶菌属(Zoogloea sp.).同时还研究了pH值、营养物质、油质量浓度对菌体生长和降油率的影响.结果表明,这三株菌在初始pH值为7-9对石油的降解率分别为86.7%,72.9%,64.7%;最佳氮源为NH4NO3,氮磷比大约控制在4∶1左右时,降解效果较好.在原油初始浓度较低时,降解率随石油浓度的升高而略有提高.不同菌株耐油程度不同.     

假单胞菌产弹性蛋白酶基因的克隆与表达

从假单胞菌(Pseudomonas sp.)XZG36中克隆弹性蛋白酶基因,构建原核表达载体,实现其在大肠杆菌(Escherichia coli)中的高效表达,并对表达产物进行酶学性质分析,为微生物发酵生产弹性蛋白酶奠定基础.以假单胞菌基因组DNA为模板,PCR扩增弹性蛋白酶基因,并将其开放阅读框(ORF)克隆至融合表达载体pET30a(+)进一步IPTG诱导表达;表达产物经His·Bind亲和层析纯化后对弹性蛋白酶进行酶学性质分析.实验成功克隆了弹性蛋白酶基因,DNA基因片段为1672bp、编码497个氨基酸残基的多肽,与预计长度相符合;实现了其在E.coli中的高效表达,表达量约占菌体总蛋白的20%;经SDS-PAGE分析,相对分子质量为48 000,与预期的一致;提纯后的表达蛋白SDS-PAGE分析可见单一条带,纯度可达92%以上.表达蛋白具有良好活性.     

产壳聚糖酶菌株的筛选、鉴定及其产酶条件研究

利用以壳聚糖为唯一碳源的培养基从土壤中分离出两株具有产壳聚糖酶能力的菌株,采用平板分离初筛和摇瓶培养复筛,确定了菌种Y4为产壳聚糖酶较好的菌株.通过对菌株Y4生理生化试验、菌株形态特征和生物学特性研究,发现菌株Y4与<伯杰细菌鉴定手册>(第8版)上施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)相符,可以判断菌株Y4为施氏假单胞菌,同时,对菌株Y4产酶条件进行了研究,结果发现在pH为6.5,温度为40℃,培养时间为24 h时酶活力达到最大.筛选出来的施氏假单胞菌菌株Y4具有较好的壳聚糖酶活力,为壳聚糖的降解提供了一条新途径.     

除油好氧降解菌的筛选与除油效果初探

为筛选降解含油废水中石油烃的好氧降解菌株，选用炼油厂石油废水处理站曝气池活性污泥作为菌源，采用平板分离，得到39株菌。利用得到的菌株对含油废水中的CODcr和油进行降解效果试验，并进行混合菌的联合试验，确定出混合菌中假单胞菌（Pseudomonas sp）和芽孢杆菌（Bacillus sp）为优势菌属。通过单株菌与混合菌降解试验的比较，结果表明全混合菌的降解效果明显优于单株菌，从而说明共代谢作用增强了微生物的降解能力。试验表明，经过驯化后的混合菌，其降解效率稳定。     

降解菌处理多菌灵农药废水的SBR工艺研究

从土壤中分离得到以多菌灵生产农药废水为唯一碳源生长的13株菌,经鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).采用SBR工艺,将13株菌混合接入反应器中,运用正交试验确定SBR工艺最佳运行条件,表明13株菌具有良好的降解能力,SBR工艺在多菌灵农药废水处理中有明显优势.     

一株海洋细菌高汞抗性及高富集能力的分析

为探究一株海洋类产碱假单胞菌A1高汞抗性和高富集能力的机制,从分子水平出发,对汞胁迫(或无汞胁迫)条件下的A1进行转录组学分析,得到差异表达基因427个.从中筛选出差异表达倍数较大且与重金属抗性相关的基因Unigene97-All,经Blast分析和构建系统进化树,并构建基因工程菌进行抗性和生物富集性能验证.结果表明,Unigene97-All为Mer A汞还原酶编码基因,其编码的氨基酸序列与同样来自假单胞菌的Mer A(KJU79639.1)序列具有90%的相似性.构建成功的重组菌U97具有一定的抗汞能力,在Hg2+质量浓度为6.0 mg/L的培养基中能正常生长,但重组菌U97和对照组大肠杆菌的汞富集量无明显差异,说明细菌的汞富集量与抗性没有必然的联系.     

镍（Ⅱ）-吡嗪-2，3-二羧酸配合物的结构及其生物活性

在常温下用吡嗪-2,3-二羧酸（C4N2H2（COOH）2,简称Pyzdc与金属镍反应制得新颖的吡嗪-2-3-二羧酸镍（Ⅱ）的配合物Ni[Pyzdc（COO）COOH]：·2H2O单晶,采用红外光谱、元素分析对化合物进行表征,应用X-射线单晶衍射技术测定配合物的晶体结构,配合物属于单斜晶系,P21／n空间群,2个吡嗪-2,3-二羧酸配体以氮原子和氧原子与镍（Ⅱ）离子反式螯合配位,2个H2O分子则以氧原子与镍（Ⅱ）离子轴向配位,形成八面体配合物,配合物分子之间通过氢键的弱相互作用构筑成一维、二维的空间结构,与此同时,应用紫外光谱法和荧光光谱法,初步研究配合物与核酸的作用方式,研究结果表明配合物与DNA主要以插入作用方式为主,进一步通过凝胶电泳法测定配合物对pBR322质粒DNA的断裂能力。     

嗜酸乳杆菌AS1.1854亚油酸异构酶基因的克隆与序列分析

将GenBank中已报道的罗伊氏乳杆菌亚油酸异构酶基因对已公布的嗜酸乳杆菌NCFM基因组全序列做tblast,找到一个同源编码框.参照此编码框的核苷酸序列及pQE30质粒图谱特性设计上、下游引物,利用PCR法扩增嗜酸乳杆菌AS1.1854亚油酸异构酶基因,并克隆到pQE30质粒载体上进行测序.分析测序结果表明,扩增得到的目的DNA全长1 776 bp,G C含量为37.5%,共编码591个氨基酸,理论相对分子质量67.5kDa.用Signal P3.0对其N端前70个氨基酸序列进行分析,结果表明,第20~40位氨基酸有较强的疏水性.不过,N端前70个氨基酸的C值、S值和Y值并不高,最有可能的酶切位点位于第45位与第46位氨基酸之间,但预测其被切割的可能性概率低于1%.可以推断,在嗜酸乳杆菌AS1.1854亚油酸异构酶的N端氨基酸序列中不存在信号肽序列.     

蛋白质增敏钼-邻苯二酚紫体系的研究及应用

在pH=2.8的clark-lubs缓冲介质中,牛血清白蛋白能显著增敏钼-邻苯二酚紫的显色体系,据此建立了分光光度法测定钼的新方法。仔细考察了反应酸度、邻苯二酚紫浓度、牛血清白蛋白浓度及反应时间等因素对测定的影响。最大吸收波长在680 nm处,与钼-邻苯二酚紫体系相比,红移了120 nm。10 mL溶液中,钼质量在0～40μg范围内服从比尔定律,测定的表观摩尔吸光系数为2.11×104L/(mol.cm)。所拟方法简便、快速、灵敏度高,用于合金钢样品中微量钼的测定,结果与认定值一致。     

Hydrothermal synthesis,crystal structure and properties of inorganic-organic hybrid materials based on diphosphopentamolybdate

The compound of diphosphopentamolybdate { [Cu（en）（Hen）]2[P2Mo5O23] }·3H2O [en=ethylenediamine] had been obtained from the hydrothermal method and characterized by single crystal X-ray diffraction, elemental analysis, FT-IR, and thermogravimetric analysis The structure consist of [P2Mo5O23]^6- clusters anions, complex [Cu（en）（Hen）]^3＋ cations and crystallization water molecules, which are held together to a two-dimensional framework The most interesting feature of the compound is that two nitrogen atoms are both coordinated with Cu（ Ⅱ ） in one ethylenediamine molecule, for the other ethylenediamine molecule, only one nitrogen atom is towards Cu（ Ⅱ） and the other nitrogen atom is protonated and formed Hen^＋.     

脱硫过程中VO~（2＋）与栲胶络合位点的研究

通过测定苯酚、对苯二酚、间苯二酚、邻苯二酚、水杨酸和没食子酸等小分子模型化合物与硫酸氧钒混合溶液的吸光度,分析得出了四价钒离子只与栲胶分子结构中邻位酚羟基发生络合,而不与羧基络合;并通过邻苯二酚、没食子酸、单宁酸及橡椀栲胶的加质子常数和离解常数进一步说明了这一结论的合理性。     

低磷胁迫下水稻亲本及其后代遗传分析

在低磷胁迫下,对P1,P2,F1,F2,3等4个世代成熟期单株有效穗、生物产量和经济产量等指标进行了分析,同时利用数量遗传模型对相对单株有效穗、相对单株生物产量和相对单株经济产量3个指标进行了遗传分析。结果表明,单株有效穗符合两对主基因的加性-显性-上位性,主基因遗传率达到54．70％;而单株生物产量和单株经济产量符合两对加性-显性-上位性主基因 多基因的模型,主基因遗传率分别达到60．08％和37．70％,多基因遗传率分别达到32．15％和58．90％。     

反硝化聚磷菌菌剂种子液制备条件及除磷机理

为获取高效反硝化聚磷菌（DNPAOs）菌剂种子液以控制水体富营养化,从安徽省天长市污水处理厂氧化沟活性污泥中分离得到1株具有高效脱氮除磷功能的恶臭假单胞菌B8（ Pseudo‐monas putida sp ．）。利用多聚磷酸盐颗粒（Poly‐P）染色得到具有高Poly‐P含量的B8菌剂种子液。其适宜的培养条件为：p H 6.5～7.0,温度30～32℃,溶解氧相当于70％～88％饱和溶解氧（摇床转速120～140 r／min）,培养时间15～20 h。所得的反硝化聚磷菌种子液B8具有良好的同步反硝化除磷效果,对于污水厌氧／缺氧（ A／A ）处理,其聚磷率、硝酸盐氮去除率分别达到89.73％和53.48％,而经厌氧／好氧（A／O）处理磷去除率最高可达94.09％。通过B8胞外聚合物（EPS）提取与磷去除实验表明其对磷酸盐去除源于B8胞内的吸收,而非胞外的生物吸附。     

邻二氯苯混酸绝热硝化制备2，3—二氯硝基苯的工艺研究

系统地研究了邻二氯苯混酸绝热硝化的DVS值、混酸组成及摩尔比等因素对2,3－二氯硝基苯收率的影响,2,3－二氯硝基苯收率达到14．51％,3,4－氯硝基苯与2,3－二氯硝基苯的收率之比f（3,4／2,3）＝5．47。     

透明颤菌血红蛋白基因在恶臭假单胞菌中的克隆及表达

自然界存在一种革兰氏阴性,专性好氧菌透明颤菌1#(Viteroscilla1#),在微氧条件下,可以诱导合成一种类似于血红蛋白的可溶性物质,即透明颤菌血红蛋白(VitereoscillaHemoglbim,VHb)。受体恶臭假单胞菌6-81(Pseudomonas puti-da6-81)具有降解PTA功能。VHb基因在受体6-81中克隆并获得表达。研究了转化子LEY-9与受体6-81在不同供氧条件下对PTA降解率的差异。在供氧条件下,LEY-9对PTA的降解率比6-81高29.6%;在限氧条件下,LEY-9对PTA的降解率比6-81高39%。转化子LEY-9在限氧条件下,对PTA的降解率比在供氧条件下受体6-81,对PTA的降解率高出20.6个百分点。通过将VHb基因克隆入对PTA具有降解功能的受体菌中,可使其在较低的溶解氧环境中,仍具有较高的降解率。对VHb在污水处理系统中的应用作了初步的探索。     

Preparation of LiFePO4 for lithium ion battery using Fe2P2O7 as precursor

In order to obtain a new precursor for LiFePO4, Fe2P2O7 with high purity was prepared through solid phase reaction at 650 ℃ using starting materials of FeC2O4 and NH4H2PO4 in an argon atmosphere. Using the as-prepared Fe2P2O7, Li2CO3 and glucose as raw materials, pure LiFePO4 and LiFePO4/C composite materials were respectively synthesized by solid state reaction at 700 ℃ in an argon atmosphere. X-ray diffractometry and scanning electron microscopy(SEM) were employed to characterize the as-prepared Fe2P2O7, LiFePO4 and LiFePO4/C. The as-prepared Fe2P2O7 crystallizes in the c1 space group and belongs to β-Fe2P2O7 for crystal phase. The particle size distribution of Fe2P2O7 observed by SEM is 0.4-3.0μm. During the Li ion chemical intercalation, radical P2O4-O7 is disrupted into two PO3-4 ions in the presence of O2-, thus providing a feasible technique to dispose this poor dissolvable pyrophosphate. LiFePO4/C composite exhibits initial charge and discharge capacities of 154 and 132 mA·h/g, respectively.