柱前衍生-手性固定相HPLC法拆分去甲乌药碱对映体

以二碳酸二叔丁酯((Boc)2O)作为衍生化试剂,建立了柱前非手性衍生化反相高效液相色谱法拆分去甲乌药碱对映体的方法.在氢氧化钠碱性介质中,去甲乌药碱与(Boc)2O反应生成N-叔丁氧羰基-去甲乌药碱.分离检测N-叔丁氧羰基-去甲乌药碱对映体的最佳色谱条件为:手性固定相Chiral PAKR AD-RH(150mm×4.6mm,5μm),乙醇-水为流动相(体积比为1∶1),流速为0.5mL/min,检测波长为284nm.该条件下的分离度(Rs)达到2.0,这表明该方法可为快速制备光学纯的手性药物提供一种有效的分离手段.     

两种列汀类药物在壳聚糖手性固定相上的拆分

基于壳聚糖-二(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)-(环丙基甲酰胺)涂敷型手性色谱柱,在高效液相色谱的正相分离模式下,以维格列汀和磷酸西他列汀作为拆分对象,考察了流动相中有机改性剂的种类和比例、碱性改性剂的种类和柱温对对映体分离的影响,建立了这2种手性对映体拆分的方法。最终维格列汀和酸西他列汀手性对映体分别在Ⅴ(异丙醇)∶Ⅴ(正己烷)∶Ⅴ(二乙胺)=80∶20∶0.1和Ⅴ(乙醇)∶Ⅴ(正己烷)∶Ⅴ(二乙胺)=60∶40∶0.1为流动相,流速为0.5 m L/min的色谱分离条件下,两者获得分离度分别为4.74和6.41,结果对手性对映体的有效拆分具有一定的参考价值。     

柱前衍生化ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定Ｌ－叔亮氨酸含量

以２,３,４,６－四－Ｏ－乙酰基－β－Ｄ－吡喃葡萄糖异硫氰酸酯（ＧＩＴＣ）为手性衍生化试剂,建立一种 反相高效液相色谱测定Ｌ－叔亮氨酸的方法．以ＧＩＴＣ为衍生化试剂对Ｌ－叔亮氨酸进行衍生化,优 化衍生化试剂用量和衍生化时间等反应条件．使用岛津Ｃ１８ 色谱柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ,５μｍ）分离 衍生化产物,流动相为Ｖ（甲醇）∶Ｖ（磷酸盐）＝５８∶４２的缓冲溶液（ｐＨ＝２．８）,流速为０．６ｍＬ／ ｍｉｎ,检测波长为２５４ｎｍ,柱温３０℃,进样量１０μＬ,结果表明叔亮氨酸两个对映异构体的衍生化 产物分离良好,在０．２～１．０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内呈现良好的线性关系（ｒ＝０．９９９　６）．该方法准确可靠, 重现性好,适用于Ｌ－叔亮氨酸的含量测定．     

液相色谱柱串联技术高效分离酒样中的手性芳香氨基酸

建立C18柱串联CR-I(+)手性冠醚柱的反相高效液相色谱分离方法,用于同时拆分三种芳香氨基酸对映体.研究了流动相比例、流速、柱温以及色谱柱的串联次序对三种芳香氨基酸对映体拆分的影响.实验结果表明:当流动相为pH 2.0的高氯酸溶液-乙腈(85∶15,体积比),流速为0.4 mL/min,柱温为21℃,串联顺序为手性冠醚柱在前、C18柱在后时三种芳香氨基酸对映体分离效果最优.在最优色谱条件下,分离并测定了米酒和啤酒样品中的三类芳香氨基酸对映体.     

β—环糊精流动相添加剂法拆分特非那丁对映体

以β-环糊精为手性流动相添加剂,于C18反相柱上建立了特非那丁手性对映体的拆分方法。在流动相为高氯酸钠溶液（0．1M）：乙醇：二已胺＝70：30：0．5,pH6．3,含β-环糊精25mmol/L时特非那丁对映体达到基线分离。并讨论了有机修饰剂含量、种类、尿素、PH值等拆分因素对特非那丁对映体拆分的影响。     

氟西汀在二甲基环糊精手性固定相上的拆分

为了直接拆分盐酸氟西汀对映体，提出了二甲基-β-环糊精手性固定相高效液相色谱（HPLC）分离方法.采用Φ4.6 mm × 250 mm的色谱柱，以质量分数为0.1%的醋酸三乙胺(TEAA)缓冲液为流动相，以乙腈或甲醇为改性剂，紫外检测波长采用226 nm.考察了流动相的组成、缓冲液pH值、体积流量及柱温对氟西汀分离的影响.结果表明，以乙腈和pH 4.5缓冲液质量比为12.1∶87.9的溶液为流动相，在柱温35 ℃和体积流量为1.0 mL/min下，氟西汀分离度为1.81.以甲醇和pH 3.8缓冲液质量比为25.3∶74.7的溶液为流动相，在柱温20 ℃和体积流量为0.8 mL/min下，氟西汀分离度为2.22.二甲基-β-环糊精手性固定相可很好地分离氟西汀对映体.     

β-环糊精流动相添加剂法拆分特非那丁对映体

以β-环糊精为手性流动相添加剂,于C18反相柱上建立了特非那丁手性对映体的拆分方法。在流动相为高氯酸钠溶液(0.1M)乙醇二已胺=70300.5,pH6.3,含β-环糊精25mmol/L时特非那丁对映体达到基线分离。并讨论了有机修饰剂含量、种类、尿素、PH值等拆分因素对特非那丁对映体拆分的影响。     

多氯联苯在纤维素和直链淀粉衍生物类手性色谱柱上的拆分

由于多氯联苯(Polychlorinated biphenyls)的纯对映体样品非常难得,国内外大多数的研究工作仅局限于外消旋体,而较少对其对映体的环境行为、生物毒性进行研究.采用三种不同的手性色谱柱对21种手性多氯联苯在不同流动相体系进行了拆分.最终有17种手性多氯联苯达到基线或部分分离,在纯正己烷流动相体系的拆分效果最佳.直链淀粉-三(5-氯-2-甲基苯基氨基甲酸酯)固定相具有很强的手性识别能力,Lux 3u Amylose-2柱可以作为Lux 3u Cellulose-1柱手性拆分的很好补充.当手性多氯联苯分子只含一个4号位氯代或同时含有5,5,号位氯代时,三种手性色谱柱较难对其分离完全.该方法分离速度快,可以作为纯对映体样品的制备方法.     

纤维素—三（3，5—二甲基苯基氨基甲酸酯）手性固定相的制备及其对对映体化合物的拆分

以微晶纤维素和（3,5-二甲基）异氰酸苯酯为原料,合成了纤维素-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）（CDMPC）,并涂敷于氨丙基硅胶上,制备成手性固定相（CSP）。用高效液相色谱法,在此手性固定相上,正相条件下分离了6种有机膦酸酯对映体,考察了流动相正己烷-异丙醇配比、色谱柱柱温、样品分子结构对对映体分离的影响,发现异丙醇含量的变化不能引起容量固子（k′）和分离因子（α）的规律性变化,但柱温的影响却是规律的,另外,样品分析结构的细微变化也能引起分离结果的较大差别。     

卡那霉素键合固定相的制备及手性拆分研究

将氨基多糖类抗生素卡那霉素（Kanamycin）键合在环氧硅胶上，作为高效液相手性固定相（HPLC-CSP）并被应用于HPLC手性拆分．通过对卡那霉素CSP的制备、表征及在正相条件下对异博定、黄皮酰胺、萘乙醇等三种物质的手性拆分研究，探讨其手性拆分机理．研究结果表明，卡那霉素键合CSP对含有羟基、氨基、羰基等极性基团的手性物质在正相条件下有较好的分离能力．结论：氢键作用是手性分离机制的最主要的因素，流动相极性对溶质的保留和拆分有一定的影响，极性增加，保留减小且分离因子减小．此类CSP极性很强，在反相下会失去活性．     

高效液相色谱法测定2—氯吩噻嗪及有关杂质

以高效液相色谱法检测２ － 氯吩噻嗪及有关杂质。色谱条件： 色谱柱用Ｚｏｒｂａｘ Ｃ１８ 柱, （５ μｍ , ４－６ ×１５０ ｍ ｍ） , 检测波长２５４ ｎｍ , 流动相： 磷酸盐缓冲液（ｐＨ＝ ３－３） － 乙腈（４０∶６０ , Ｖ／ Ｖ） 。杂质分离情况良好。实验表明２ － 氯吩噻嗪易被氧化, 对光具有不稳定性, 应避光操作。     

手性固定相反相高效液相色谱法拆分吲哚洛尔对映体

采用新型商品反相手性色谱柱Chiral PAKR AD-RH,建立了β-受体阻滞剂类药物吲哚洛尔的手性拆分方法.考察了流动相组成、pH、柱温、流速及缓冲盐浓度对吲哚洛尔手性拆分的影响.通过优化实验条件,吲哚洛尔达到基线分离,可用于常规分析.在此基础上,进一步考察了制备条件,取得了满意的结果.     

新型手性毛细管柱的研制及对手性物质的分离

以β-环糊精衍生物为固定相，色谱法分离对映体是现代科学研究的重点之一。研究了合成两种新的β-环糊精衍生物色谱固定相，2，3，6-三-O-三庚基-β-CD(THPCD)和2，6-O-二庚基-3-O-乙酰基-β-CD(DHACD)，以OV-1701为稀释剂，采用动态法，制备了新型毛细管色谱柱，从柱的分离选择性、惰性、柱效、稀释剂的配比等方面作了较为系统的研究，并初步探讨了β-环糊精衍生物固定相可能的手性拆分机理。     

新型手性毛细管柱的研制及对手性物质的分离

以β-环糊精衍生物为固定相,色谱法分离对映体是现代科学研究的重点之一。研究了合成两种新的β-环糊精衍生物色谱固定相,2,3,6-三-O-三庚基-β-CD(THPCD)和2,6-O-二庚基-3-O-乙酰基-β-CD(DHACD),以OV-1701为稀释剂,采用动态法,制备了新型毛细管色谱柱,从柱的分离选择性、惰性、柱效、稀释剂的配比等方面作了较为系统的研究,并初步探讨了β-环糊精衍生物固定相可能的手性拆分机理。     

基于柱前衍生化高效液相色谱法评价骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型

培养Ｃ２Ｃ１２成肌细胞并分化成骨骼肌细胞,取细胞培养液通过柱前衍生化,将葡萄糖与１－苯 基－３－甲基－５－吡唑啉酮（ＰＭＰ）络合,使用Ｕｎｉｓｐｈｅｒｅ　Ａｑｕａ　Ｃ１８色谱柱（２．０ｍｍ×１５０ｍｍ,粒径３．５ μｍ）分离衍生化产物,流动相为Ｖ（１０ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵（ｐＨ＝５．３０））∶Ｖ（乙腈溶液）＝７８∶２２,流速 为１．０ｍＬ／ｍｉｎ,检测波长为２４５ｎｍ,进样量为２０μＬ,柱温３０℃．葡萄糖质量浓度在１００～５００ ｍｇ／Ｌ范围内具有良好的线性,相关系数０．９９８　５;精密度、重复性良好,平均回收率１００．２６％,ＲＳＤ 值为１．０２％．地塞米松孵育处理的骨骼肌细胞在胰岛素刺激下对葡萄糖的摄取量与对照组相比显 著减少．结果显示：柱前衍生化高效液相色谱法可用于评价骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型,为后续胰 岛素抵抗机制探讨及药物筛选打下基础．     

四种三唑类杀菌剂的超临界色谱手性分离

单一异构体对于研究手性药物的活性及毒性有着重要意义.以二氧化碳为流动相,使用超临界流体色谱,对四种三唑类杀菌剂在Chiralcel OD-H柱上进行对映体分离研究,考察了不同改性剂(甲醇、乙醇、异丙醇)种类及浓度对其对映体分离的影响并获得了最佳改性剂条件,且与Chiralpak IB柱上的分离效果做了比较.随着改性剂浓度的增加,容量因子逐渐减小,分离度总体上逐渐减小,分离因子的变化较为复杂.改性剂洗脱能力大小顺序为:异丙醇乙醇甲醇.硅氟唑、戊菌唑、烯效唑的最佳改性剂条件均为9%乙醇(体积分数),而多效唑则为5%甲醇(体积分数).以Chiralpak IB柱为手性固定相时拆分时间短,但是分离度降低.     

氯菊酯和联苯菊酯的高效液相色谱手性分离

采用高效液相色谱法,在纤维素衍生物手性固定相柱上直接拆分氯菊酯和联苯菊酯,分别得到完全分离的4个氯菊酯异构体和2个联苯菊酯异构体的色谱峰,探讨了不同流动相比例及不同温度对分离结果的影响。结果显示,在流动相比例为正己烷:乙醇=99:1,柱温为25°C的色谱条件下,氯菊酯的4个对映异构体中相邻峰的分离度均达到1.4以上,联苯菊酯的分离度达到2.0以上。     

3，4－二羟基苯甲醛－H_2O_2－HRP伏安酶联免疫分析新体系的研究

首次提出了３，４－二羟基苯甲醛－Ｈ２Ｏ２－ＨＲＰ伏安酶联免疫分析新体系，并用于ＨＲＰ的测定。该方法是将ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧化３，４－二羟基苯甲醛的酶催化反应与３，４－二羟基苯甲醛的氧化产物的电极还原反应相偶合，在－１．０３Ｖ（ＳＣＥ）附近产生一灵敏的示波极谱波，测定ＨＲＰ的检测限为１．０×１０－１０ｇ／ｍＬ，线性范围为１．０×１０－１０～９．０×１０－９ｇ／ｍＬ。     

一种新型手性席夫碱和手性β－氨基醇配体的合成

手性席夫碱和手性β－氨基醇是近年来关注较多且在不对称催化反应中具有很大发展潜力的 优秀配体或催化剂．以天然Ｌ－苯丙氨酸为起始原料,经简单的两步反应生成手性β－氨基醇Ⅲ,再与 实验室自制二茂铁羰基化合物Ⅳ在室温下于二氯甲烷溶剂中反应,高产率（９３．１％）生成新型手性 席夫碱配体Ⅴ,该手性席夫碱配体经三倍当量的硼氢化钠还原生成二茂铁修饰的手性β－氨基醇Ⅵ． 化合物Ⅴ和Ⅵ都未见文献报道．产物及中间体结构均经ＩＲ,１　Ｈ　ＮＭＲ和ＭＳ表征确认．     

壳聚糖-苄基脲衍生物手性固定相的制备与性能

为研制分离性能好且耐受性强的手性分离材料，用粘均分子量为1.4×105的壳聚糖为原料，合成了壳聚糖-二（3，5-二甲基苯甲酸酯）-苄基脲，以FT-IR、1H NMR和元素分析对其进行了表征；将这种壳聚糖衍生物涂覆在大孔3-氨基丙基硅胶上，制备了相应的手性固定相；在3种正相模式下，用高效液相色谱分离19种手性分析物对映体，以此评价固定相的分离性能。结果表明:所制备的固定相能识别13种手性样品对映体，基线分离9种，表现出较好的手性分离性能。