同位素稀释质谱法测定人绒毛促性腺激素的含量

建立了水解后同位素稀释质谱准确测定人绒毛促性腺激素（ hCG）含量的方法,在hCG水解定量实验中优化了人绒毛促性腺激素的完全水解时间。水解后的样品经高效液相色谱分离,采用串联质谱检测,以多离子监测模式分别检测苯丙氨酸（m/z＝166→120）,标记苯丙氨酸（m/z＝174→128）;脯氨酸（m/z＝116→70）,标记脯氨酸（m/z＝121→74）;缬氨酸（m/z＝118→72）,标记缬氨酸（m/z＝123→76）。根据的三种氨基酸含量分别计算出人绒毛促性腺激素的含量。并对测定结果进行了不确定度评估,相对扩展不确定度3.0％。     

人转铁蛋白含量同位素稀释质谱测定方法研究

建立一种人转铁蛋白(hTRF)纯品含量同位素稀释质谱测定方法.人转铁蛋白经酸水解后,以水(含0.8mmoI/L全氟庚酸和0.1％三氟乙酸)和乙腈为流动相,以氨基酸国家标准物质为标准,同位素标记氨基酸为内标,采用高效液相色谱-同位素稀释联用法对水解液中的脯氨酸、缬氨酸和苯丙氨酸进行测定,并进一步计算得出蛋白纯品的含量.同时采用质量平衡法测定人转铁蛋白的含量,验证所建方法的可行性.在优化的条件下,人转铁蛋白含量测定结果为0.830 g/g,相对标准偏差为0.6％,扩展不确定度为0.014 g/g(k=2),检出限和定量限分别为3.78×10-5 g/g和1.26×10-4 g/g.所建方法准确度高、溯源清晰,可作为人转铁蛋白纯品标准物质的定值方法,对于建立我国人转铁蛋白测定结果的量值溯源传递体系具有积极的意义.     

人血清白蛋白纯品含量的同位素稀释质谱方法研究

同时建立了人血清白蛋白(:HSA)纯品含量质量平衡测定方法和同位素稀释质谱测定方法。质量平衡法首先采用高效液相色谱法测定了人血清白蛋白的纯度,然后分别采用卡尔费休法和灼烧残渣法测定其水分和灰分,计算得到HSA的含量为0.861 g/g。在同位素稀释质谱法中,HSA经酸水解后,采用液相色谱-同位素稀释质谱联用法测定了水解液中的Pro、Val和Phe3种氨基酸,进一步计算得出HSA纯品的含量。在最优条件下,HSA含量测定结果为0.853 g/g,相对标准偏差为0.8%,扩展不确定度为0.015 g/g(k=2),检出限和定量限分别为1.37×10~(-5)g/g和4.55×10~(-5)g/g。与质量平衡法测定结果相比,同位素稀释质谱方法测定结果只有0.9%的相对偏差。     

重组人白介素-2标准品的表征及同位素稀释质谱法定量测定

人白介素-2(HuIL-2)为免疫增强剂。重组人白介素-2(rHIL-2)是基因重组生物制品,生物活性与天然IL-2相同,含有133个氨基酸残基。为了对白介素-2类药品进行有效的质量控制,文章研制了重组人白介素-2标准品,采用高效液相色谱法对白介素-2的纯度进行表征,采用飞行时间质谱对相对分子质量进行测定,采用飞行时间质谱和高分辨质谱方法对肽图、二硫键进行表征,同时利用氨基酸同位素稀释串联质谱方法对标准品含量进行了准确测定。结果表明,重组人白介素-2溶液标准品纯度为99.1%,实测相对分子质量为15415.78 Da,与理论分子量15415.82 Da一致,二硫键链接方式为Cys58-Cys105,氨基酸覆盖率为100%。同位素稀释串联质谱定量测定标准品含量的结果为0.0947 mg/g。     

UPLC-Q-TOF快速测定常见氨基酸含量

结合外标法或同位素稀释质谱法,建立UPLC-Q-TOF快速定量氨基酸分析方法。在无离子对试剂及衍生化情况下,实现对样品中氨基酸的快速测定。采用外标法测定时,14种常见氨基酸在其相应线性范围内,r2为0.953~0.999,LOD为0.001~0.080 mg/g,CV为1.4%~9.8%;采用Q-TOF外标法定量时,CV为1.5%~8.0%,误差为-9.1%~40%;采用同位素稀释质谱法测定各氨基酸浓度时,CV为1.4%~3.8%,误差为-3.4%~3.7%。本方法可在2min之内完成14种氨基酸的分离和定量,大大缩短分析时间。同时由于采用高分辨的飞行时间质谱,避免检测时离子间的相互干扰,提高测定结果的准确性,可用于蛋白质标准物质均匀性、稳定性检验及定量。     

同位素稀释质谱法测定茶叶中的铜

采用同位素稀释质谱法(ID-ICP-MS)测定了茶叶中的Cu.将65Cu同位素稀释剂与样品混合,以HNO3-H2O2体系对混合样品进行微波消解,通过测定63Cu/65Cu丰度比计算样品中的Cu含量,并对测定结果的不确定度进行了评定.测定结果与NIST标准物质符合的很好,该方法较传统方法准确度高,适合标准物质的定值.     

同位素稀释质谱法测定聚丙烯塑料中Pb的含量

采用同位素稀释电感耦合等离子体质谱法（ID—ICP-MS）测定了聚丙烯塑料中Pb元素的含量。样品处理采用高压密封焖罐酸溶样技术,将样品与^207Pb稀释剂混合,通过所加稀释剂的量和测量混合样品中^208Pb/^307Pb的丰度比,准确计算出样品中Pb元素的含量,同时对测量结果的不确定度进行了分析和评定。该方法与传统方法相比具有准确性高、不确定度小、受外界污染及样品损失影响小等优势,适用于国家计量单位对标准物质进行定值。     

多维元素片中维生素B1基体标准物质的研制

建立了多维元素片中维生素B1基体标准物质的定值方法。以酸水解与离心的方法处理样品,使用高准确性的同位素稀释质谱法与高效液相色谱法2种分析方法定值。选用美国国家标准技术研究院SRM 3280多维元素片标准物质对方法进行了确认;同时该标准物质经过2个实验室的试用,进一步验证了其定值的准确性。研制的多维元素片中维生素B1的标准值为2.76mg/g,扩展不确定度为0.22mg/g(k=2)。     

牛血清白蛋白溶液标准物质定值结果的不确定度评定

一、概述 牛血清白蛋白第V组分（BSA）是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量约为66430,等电点为4.7。牛血清白蛋白广泛应用于生化实验中,也是最常用的蛋白质定量的标准。为了保证我国蛋白质含量测定结果的准确、可比与可溯源,中国计量科学研究院率先采用同位素稀释质谱法和纯度扣除法研制了牛血清白蛋白固体国家一级标准物质,定值结果为（0.963±0.038）g/g。     

血清孕酮测定的国际比对CCQM-P77b

2006年国际计量局物质量咨询委员会(CCQM)组织了血清孕酮测定的国际比对CCQM-P77b,中国计量科学研究院化学计量与分析研究所代表我国参加了此次比对.利用同位素稀释气相色谱/质谱分析原理,以[3,4-13C2]孕酮为内标,建立了的血清孕酮准确定量方法.根据公布的结果显示,我国的测定结果与参加各国的结果达到等效一致,取得良好成绩.     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中ET-26盐酸盐及其代谢产物ET-acid

该文通过建立LC-MS/MS方法,采用全扫描离子(MRM)检测方式,测定静脉注射给药后Beagle犬中ET-26盐酸盐及其代谢产物依托咪酯酸的含量。采用色谱柱Agilent Extend-C18(3.0 mm×100 mm,3.5μm),流动相为水(0.01%NH3,用乙酸调pH至9.0)-乙腈,体积比35:65,采用ESI离子源,正离子模式下定量分析碎片离子质荷比(m/z)有ET-26盐酸盐275.3/105.1,依托咪酯酸m/z 217.0/113.1,依托咪酯杂质C(内标)m/z 259.0/155.1。ET-26盐酸盐与依托咪酯酸分别在3.225~2 090 ng/mL、3.253~2 108 ng/mL范围内,线性关系良好;定量限分别为3.225 ng/mL、3.253 ng/mL;检测限分别为0.97 ng/mL、1.00 ng/mL;日内、日间精密度RSD均小于15%;回收率分别在86.57%~105.03%、95.94%~98.27%范围内。该方法成功应用于Beagle犬中ET-26盐酸盐的药代动力学参数测定。结果表明该方法可以灵敏、有效地测定Beagle犬血浆中ET-26盐酸盐及其代谢产物依托咪酯酸的含量。     

同位素稀释质谱法测定聚丙烯塑料中Pb的含量

采用同位素稀释电感耦合等离子体质谱法(ID-ICP-MS)测定了聚丙烯塑料中Pb元素的含量.样品处理采用高压密封焖罐酸溶样技术,将样品与307Pb稀释剂混合,通过所加稀释剂的量和测量混合样品中308Pb/307Pb的丰度比,准确计算出样品中Pb元素的含量,同时对测量结果的不确定度进行了分析和评定.该方法与传统方法相比具有准确性高、不确定度小、受外界污染及样品损失影响小等优势,适用于国家计量单位对标准物质进行定值.     

食品包装纸和纸巾纸中邻苯二甲酸酯类增塑剂的测定

目的建立快速溶剂萃取-气相色谱质谱联用法测定纸张中邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)的含量。方法对本地超市采购的11种食品包装纸和20种纸巾纸中这3种增塑剂的含量进行了测定。纸样前处理条件,萃取剂为正己烷,萃取温度为100℃,静态萃取时间为5 min,循环次数为2次。质谱采用全扫描模式(m/z范围为50~600)用于色谱条件优化,采用选择离子监测模式(SIM)进行定量,各物质定量离子均为149。结果所有纸样均含有增塑剂,22种同时含3种增塑剂。3种增塑剂总含量范围为7.8~1876.8 mg/kg。个别餐巾纸和抽纸DEHP含量高于欧盟对塑料和塑料制品中DEHP的限量。汉堡纸中增塑剂含量最低。结论建立的检测方法快速有效,应当关注市售食品包装纸和纸巾纸中增塑剂的含量。建议制定标准及法规,给出相关纸样增塑剂限量等。纸中还有一些其他未知化合物,其安全性有待进一步研究。     

国际关键比对CCQM-K80血清中肌酐的准确测量

本研究以三个氘原子(原子量为2)标记的肌酐为测量所用的内标,建立了血清中肌酐测量的液相色谱-同位素稀释串联质谱法.采用该方法为2种不同浓度的冰冻人血清肌酐标准物质定值,并参加了国际物质量咨询委员会组织的国际关键比对CCQM-K80血清中肌酐的测定.比对结果表明(与比对组织国家美国NIST):对于低浓度样品相对偏差0.3%,对于高浓度样品相对偏差0.07%,且不确定度是参加本次国际比对的6个国家中最小的.说明该标准物质的研制及其定值方法达到了国际先进水平.     

鱼肉中甲基汞成分标准物质的国际合作研究

甲基汞对人的中枢神经系统有很强的伤害性.海产鱼类是人类饮食中主要的甲基汞来源,对其检测需要用到标准物质进行质量控制和量值溯源.中国计量科学研究院制备了一种新的鱼肉标准物质,并与南开大学化学系、日本国家计量研究院共同合作研究,使用同位素稀释-液相-电感耦合等离子体质谱联用方法(ID-LC-ICPMS)、同位素稀释-气相-电感耦合等离子体质谱联用方法(ID-GC-ICPMS)和高效液相色谱-冷蒸气原子荧光光谱法(HPLC-CVAFS)等多种方法对其中甲基汞成分进行定值.     

冰冻人血清尿酸标准物质的研制

介绍了冰冻人血清尿酸标准物质的研制方法.采用液相色谱/同位素稀释质谱法(LC/ID-MS)对该标准物质进行了定值研究、均匀性检验和稳定性检验.研究结果表明,冰冻人血清尿酸标准物质定值结果为55.88 mg/kg,扩展不确定度为0.74 mg/kg,其均匀性和稳定性检验结果均符合国家一级标准物质的技术要求.     

国际关键比对CCQM-K80血清中肌酐的准确测量

本研究以三个氘原子(原子量为2)标记的肌酐为测量所用的内标,建立了血清中肌酐测量的液相色谱-同位素稀释串联质谱法.采用该方法为2种不同浓度的冰冻人血清肌酐标准物质定值,并参加了国际物质量咨询委员会组织的国际关键比对CCQM-K80血清中肌酐的测定.比对结果表明(与比对组织国家美国NIST):对于低浓度样品相对偏差0.3...     

非衍生-气相色谱串级质谱法测定饲料中三聚氰胺

针对衍生化-气相色谱串联质谱(选择离子监测法)的操作繁琐费时、过程不易控制的状况,利用离子阱气相色谱质谱联用仪,建立了非衍生化-气相色谱串级质谱直接分析饲料中三聚氰胺的方法.利用三聚氰胺二级质谱进行定性,以二级质谱的特征离子峰m/z85进行定量,检测效率大大提高,定性更加直接.方法精密度为5.9%,回收率为87%-98%,满足饲料中三聚氰胺的检测要求.     

蛋白质含量标准物质研究现状及趋势

回顾了近10年来国际国内蛋白质计量和标准物质研究状况.介绍了在蛋白质含量同位素稀释质谱方法研究、国际比对方面开展的工作和取得的成就及目前国际和国内蛋白质含量标准物质研制以及校准测量能力申报情况.根据最近生物分析工作组以及生物和环境标准物质会议的内容,讨论了未来3～5年内国际和国内蛋白质含量标准物质的研究方向.     

防腐剂3,5-二氯苯甲醇标准物质

采用制备色谱法对3,5-二氯苯甲醇原料进行提纯,通过质谱(MS)、核磁共振谱图(NMR)等对其结构进行鉴定。差示扫描量热法(DSC)、液相色谱法(LC)测定该原料纯度达到99.0%。采用重量-容量法制备3,5-二氯苯甲醇溶液标准物质,经F检验法及数学模型验证其均匀性和稳定性。分别采用紫外法和示差法对标准物质特性量值进行验证。该研究成果表明,标准物质的特性量值为99.0μg/m L,不确定度评定结果为U=1.0μg/m L(k=2)。