建立快速分离鉴定新疆番茄酱腐败菌的方法

采用国家相应的检测标准,根据番茄酱属酸性罐头食品(pH<4.6)的特点以及按照外方提出的要求,分离、鉴定引起番茄酱腐败变质的目标菌。通过对大量不同类型培养基的筛选,对培养出的微生物进行菌体形态、菌落特征及其生理生化等特性进行鉴定。实验结果表明,平酸菌增菌培养基为枯草芽孢杆菌生长的最适培养基,麦芽浸膏汤培养基为栖稻黄色单胞菌的最适培养基;分离得到的2株菌经VITEK-32生化鉴定仪鉴定为枯草芽孢杆菌和栖稻黄色单胞菌。通过本次实验为建立对引起番茄酱腐败变质微生物的快速筛选方法打下一定的基础。     

建立快速分离鉴定新疆番茄酱腐败菌的方法

采用国家相应的检测标准,根据番茄酱属酸性罐头食品(pH＜4.6)的特点以及按照外方提出的要求,分离、鉴定引起番茄酱腐败变质的目标菌.通过对大量不同类型培养基的筛选,对培养出的微生物进行菌体形态、菌落特征及其生理生化等特性进行鉴定.实验结果表明,平酸菌增菌培养基为枯草芽孢杆菌生长的最适培养基,麦芽浸青汤培养基为栖稻黄色单胞菌的最适培养基;分离得到的2株菌经VITEK-32生化鉴定仪鉴定为枯草芽孢杆菌和栖稻黄色单胞菌.通过本次实验为建立对引起番茄酱腐败变质微生物的快速筛选方法打下一定的基础.     

真空包装熟肉制品中的特定腐败微生物及其控制

真空包装低温熟肉制品的腐败变质主要是由乳酸菌引起的,腐败突出表现在出汁、产酸、产气、发粘4种感官腐败.主导腐败的微生物由清酒乳杆菌、弯曲乳杆菌、异型发酵的肠膜明串珠菌以及绿色魏斯菌等乳酸菌组成.在蒸煮阶段能够杀灭绝大多数微生物,腐败菌污染主要是在于后续的冷却、切片和真空包装阶段.采用超高压处理以及应用生物保护培养物,可以有效控制该类肉制品中的腐败微生物及部分致病微生物.     

黄酒酸败组分的基源微生物初步研究

为了追踪导致黄酒原酒酸败的基源微生物,为探讨黄酒酸败的可能机制及预防酸败提供参考依据,采用高效毛细管电泳技术分析酸败黄酒原酒与黄酒原酒的组分,建立酸败黄酒原酒中酸败组分的检出方法。在此基础上,采用PDA-黄酒培养基分离培养酸败黄酒原酒中微生物,运用建立的HPCE检测方法,检测分离菌株的发酵液,追踪产生黄酒酸败组分的微生物。结果表明,从酸败黄酒中共分离获得8种微生物OM-1^OM-8,其中,OM-5菌株的PDA-黄酒培养基发酵液中检出酸败组分特征峰。菌株OM-5可能是导致黄酒原酒酸败的微生物之一。该研究为黄酒生产中采取针对性灭菌或预防措施、抑制有害微生物侵入或生长、降低酸败的发生等后续研究奠定了基础。     

即食海蜇中特定腐败菌的分离及PCR检测

利用传统的微生物检测方法及PCR技术快速检测即食海蜇中的优势腐败菌,检测结果显示:PCR检测与传统方法鉴定出的结果一致,即食海蜇的特定腐败菌为芽孢杆菌、假单胞菌以及腐败希瓦氏菌。     

成品黄酒的污染微生物研究进展

黄酒污染微生物的研究有利于制订针对性的控制措施。目前从成品黄酒检测出的污染微生物有乳酸杆菌、乳链球菌、戊糖片球菌、醋酸菌、短芽孢杆菌、类芽胞杆菌、霉菌、酵母等,其中大多数微生物会引起酒的酸败、浑浊、产生醭膜或白花。     

冷却猪肉中腐败微生物鉴定及其消长规律的研究

目的对冷却猪肉中腐败微生物进行鉴定,研究其在0～4℃条件下贮藏时的消长规律。方法采用选择性培养基对冷却猪肉中的腐败微生物进行分离培养,利用Biolog微生物自动鉴定系统对菌株进行鉴定。结果共鉴定出11株具有代表性的细菌:肠杆菌4株,假单胞菌1株,热杀索丝菌1株,不动杆菌1株,乳酸菌2株,葡萄球菌2株。冷却猪肉中腐败微生物初始菌相结构为:热杀索丝菌54.9%,肠杆菌科8.7%,假单胞菌属3.6%,乳酸菌属29.5%,葡萄球菌/微球菌0.6%,霉菌/酵母菌2.7%。在0～4℃条件下贮藏时,热杀索丝菌、肠杆菌科和假单胞菌属是冷却猪肉中的优势腐败菌,假单胞菌属和肠杆菌科在菌相结构中的比例增长最高,特别是假单胞菌属的数量增长最快。结论鉴定出了冷却猪肉中的主要腐败微生物,确定了其初始菌相和优势腐败菌。     

红参对乳酸菌体外增菌的影响

采用比浊法和活菌计数法研究在基础培养基/菊芋汁基础培养基中添加不同量低聚木糖、低聚果糖、红参提取液及其酸水解物对鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T/保加利亚乳杆菌ATCC 11842生长情况的影响。结果表明:不同添加物对鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T的增菌效果为红参提取液>红参酸水解物>低聚木糖>低聚果糖。当红参提取液添加量为12.50%时,鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T的最大OD600值为1.172,活菌数为2.72×10^8 CFU/mL,比基础培养基中最大活菌数7.75×10^7 CFU/mL增加1个数量级。对保加利亚乳杆菌ATCC 11842的增菌效果为红参提取液>低聚木糖>红参酸水解物>低聚果糖。当红参提取液添加量为6.25%时,保加利亚乳杆菌ATCC 11842的最大OD600值为0.627,活菌数为4.43×10^8 CFU/mL,比菊芋汁基础培养基中最大活菌数1.48×10^7 CFU/mL增加1个数量级。红参提取液比低聚木糖、低聚果糖具有较好的增菌效果,将红参作为益生元研究其益生功能,为研究红参对肠道微生物的影响提供试验依据。     

真空包装牛肉冰温贮藏过程中优势腐败菌的分离鉴定

为确定导致真空包装牛肉腐败的优势致腐菌,将牛肉真空包装后在冰温(-1±1)℃条件下贮藏,利用选择性培养基(CFC培养基、STAA培养基、MRS培养基、VRBDA培养基)分离筛选各类腐败菌,并通过分离纯化、形态学鉴定、16S r DNA序列分析等手段,对冰温贮藏真空包装牛肉的优势腐败菌进行鉴定。结果表明:真空包装牛肉在冰温条件下贮藏至15 d时优势腐败菌为乳酸菌(8.54 lg cfu/g)、假单胞菌(8.28 lg cfu/g),热死环丝菌和肠杆菌也是腐败菌,数量分别为6.51 lg cfu/g和5.31 lg cfu/g。形态和分子学鉴定证实,真空包装牛肉的优势腐败菌株包括变形斑沙雷菌(Serratia proteamaculans)、水生拉恩氏菌(Rahnella aquatilis)、热死环丝菌(Brochothrix thermosphacta)、干酪乳杆菌(Lactobacillus sakei)、分叉肉毒杆菌(Carnobacterium divergens)和脆假单胞菌(Pseudomonas fragi),以及未能鉴定到种的沙雷氏菌属、肉食杆菌属的菌株。     

引起陈酿黄酒酸败乳酸杆菌的检测方法和培养基研究及初步鉴定

通过加可溶性淀粉的量、培养温度、加"X"物质的量三因素三水平对酸败成品黄酒中乳酸杆菌培养基配方和培养方法的正交试验研究,性能的测定和初步鉴定研究,以及对原酒培养基(加饭酒培养基:坛装加饭酒加水稀释至酒精度17.0%vol或不稀释)培养、检测试验研究,结果表明:酸败成品黄酒中乳酸杆菌培养、分离的培养基配方和培养方法为:加饭酒稀释至酒精度17.0%voL、加"X"物质的量0.3%、加可溶性淀粉0.5%或不加、培养温度18℃或30℃、压盖密封培养;酸败成品黄酒主要菌种,在上述培养基中18℃生长良好,25℃以上生长不良或生长极慢,初步鉴定为乳酸杆菌的新种,命名为黄酒乳酸杆菌Ⅲ-1(Lactobacillus chinese-rice-wineⅢ-1)。酸败成品黄酒的部分菌种,在上述培养基中30℃生长良好,20℃或以下生长缓慢,初步鉴定为乳酸杆菌的新种,命名为黄酒乳酸杆菌Ⅲ-2(Lactobacillus chinese-rice-wineⅢ-2)。原酒培养基(加饭酒培养基)也能检测部分贮存黄酒酸败乳酸杆菌。     

黄酒发酵醪中特有乳酸杆菌检测和培养基的研究及初步鉴定

通过可溶性淀粉的添加量、培养温度、"X"物质的添加量三因素三水平对黄酒发酵醪中乳酸杆菌培养基配方和培养方法的正交试验研究,以及性能的测定和初步鉴定,表明:黄酒发酵醪中乳酸杆菌培养、分离的培养基配方和培养方法为:加饭酒稀释至酒精度14.5%voL、加"X"物质的量1.3%、加可溶性淀粉0.5%或不加、培养温度18℃或30℃、压盖密封培养;黄酒后发酵醪中的优势菌,在上述培养基中18℃生长良好,25℃及以上生长不良或生长极慢,初步鉴定为乳酸杆菌的新种,命名为黄酒乳酸杆菌Ⅱ-1(Lactobacillus chinese-rice-wineⅡ-1)。黄酒前发酵醪中的优势菌,在上述培养基中30℃生长良好,20℃及以下生长缓慢,初步鉴定为乳酸杆菌的新种,命名为黄酒乳酸杆菌Ⅱ-2(Lactobacillus chinese-rice-wineⅡ-2)。     

孝感米酒中乳酸菌的分离及其对黄酒品质的影响

目的:探明孝感米酒中乳酸菌的种类及其对黄酒品质的影响。方法:采用传统可培养方法使用MRS培养基、厌氧工作站,对孝感米酒中乳酸菌进行分离,并接入黄酒对黄酒发酵过程进行干预,进而通过分析黄酒有机酸与滋味等理化特征来评价乳酸菌的发酵特性。结果:从孝感米酒中分离到9株乳酸菌,基于16S rDNA基因对乳酸菌分离株进行了系统发育分析,结果显示它们属于魏斯氏菌属(Weissella)、片球菌属(Pediococcus),种水平上分为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、融合魏斯氏菌(Weissella confusa)、食窦魏斯氏菌(Weissell acibaria)。将这9株菌应用于黄酒发酵制作,在菌株融合魏斯氏菌MJ3-1与MJ4-1、戊糖片球菌MJ6-1、食窦魏斯氏菌MJ8-1干预下,黄酒中乳酸含量显著增加(p<0.05),苹果酸含量显著减少(p<0.05);同时黄酒的滋味中咸味和丰度有显著增加(p<0.05)。总体上来说,乳酸菌对黄酒滋味的影响由酸味、鲜味与丰度引起。结论:融合魏斯氏菌MJ4-1能增加黄酒乳酸,并降低苹果酸含量作用最强,适用于黄酒复合型发酵剂的研发。     

代县黄酒风味劣变与微生物之间的关系研究

黄酒储存过程中微生物污染会引起黄酒腐败,对黄酒风味产生了极大的影响,解析黄酒主要腐败微生物与风味的关系对黄酒品质控制具有重要意义。该研究首先利用高通量测序技术分析了腐败黄酒中细菌菌群结构,然后通过固相微萃取结合气相色谱质谱联用（HS-SPME-GC-MS）仪对正常黄酒及腐败黄酒的风味化合物进行了对比分析,并对微生物和风味化合物进行了相关性分析,最后通过感官分析对比正常黄酒和腐败黄酒的香气特征。结果表明,乳酸菌是导致黄酒腐败的主要微生物,L（-）-乳酸乙酯在腐败黄酒中含量较大,是导致黄酒风味不协调的主要风味化合物。腐败的黄酒酸味、腐臭味和霉味明显。该研究结果揭示了黄酒风味劣变与微生物之间潜在相关性,为黄酒腐败控制提供了依据。     

An improved plate culture procedure for the rapid detection of beer‐spoilage lactic acid bacteria

Lactic acid bacteria (LAB) are the most frequently encountered beer‐spoilage bacteria, and they can render beer undrinkable owing to the production of lactic acid, diacetyl and turbidity. Three beer‐spoilage strains, 2011–6, 2011–8 and 2011–11, were isolated from finished beers. Based on the 16S rRNA sequence analysis, these three isolates were identified as Lactobacillus acetotolerans. Only the horA homologue was detected in these strains, while the horC homologue was not detected. In addition, an improved plate culture method for the rapid detection of beer‐spoilage LAB by the addition of catalase was evaluated. Supplementation with catalase enhanced the growth and colony sizes of the spoilage LAB investigated. These beer‐spoilage bacteria, including some slowly growing strains, were detected within five days of incubation using the modified method. Taken together, the modified procedure could be a rapid countermeasure against beer‐spoilage LAB, and it compared favourably with the conventional plate culture method. Copyright © 2014 The Institute of Brewing & Distilling     

黄酒中不产生物胺乳酸菌的筛选及应用

为筛选不产生物胺的乳酸菌菌株,对黄酒发酵醪液及米浆水中的微生物进行培养及与分离纯化,发现3株菌不具有氨基酸脱羧酶活性,但具有一定的生物胺降解能力。使用黄酒发酵液培养该3株菌,发现在2.50%Vol的黄酒培养液中,3株菌能正常生长;在8.80%Vol黄酒培养液中,菌株5-4和8-3生长能力明显弱于14-2-1;在15.70%Vol黄酒培养液中,3株菌均受到严重抑制。菌株14-2-1生长速率最快,繁殖最旺,经鉴定为植物乳杆菌,同时菌株产酸能力较强,产酸速率也较快,表现出一定的优越性,应用于黄酒酿造中,能有效降低黄酒中生物胺的含量。     

Analysis and comparison of bacterial communities in two types of ‘wheat Qu’, the starter culture of Shaoxing rice wine,using nested PCR‐DGGE

Shaoxing rice wine, manufactured in Shaoxing region of Zhejiang Province, is the best‐known Chinese rice wine. In the current study, the bacterial communities associated with two types of ‘wheat Qu’, the Shaoxing rice wine starter cultures, were identified and compared using nested PCR–denaturing gradient gel electrophoresis analysis. DNA sequencing of the highly variable V3 or V9 regions of the 16S rRNA genes obtained from PCR–DGGE fingerprints identified common species related to Saccharopolyspora hordei, S. rectivirgula, Bacillus subtilis, B. amyloliquefaciens and so on. Some sequences associated with a particular type were also identified. For example, Clavibacter michiganensis and Saccharopolyspora sp. were found in the machine‐ but not in the human‐made type, while Curtobacterium plantarum, Thermoactinomyces intermedius, T. vulqaris, B. licheniformis and Bacillus sp. were found in human‐ but not in machine‐made type of wheat Qu. The information gathered from the present research enriches the present knowledge of Shaoxing rice wine‐related bacteria, and will also facilitate the long‐term objective of selecting bacterial combinations to be used as starter cultures that will more tightly regulate the fermentation process, as well as improve the quality and safety of wheat Qu. Copyright © 2012 The Institute of Brewing & Distilling     

高效液相色谱法测定黄酒中的β-苯乙醇

建立一种采用反相高效液相色谱法测定黄酒中β- 苯乙醇的方法。采用反相C18 色谱柱Synergi Hrdro-RP C18(4.6mm × 250mm,4μm),以甲醇- 水为流动相(50:50,V/V),流速1ml/min,紫外检测器,检测波长210nm,对黄酒中的β- 苯乙醇进行检测。结果表明,在5.00～30.00mg/L 添加量范围内,回收率水平在99.5%～99.8% 之间,相对标准偏差为0.6% (n = 6),方法的检出限为0.05mg/L,线性范围为0.5～50mg/L(r = 0.9999),测定结果与标准气相色谱方法基本相同。所建立的方法可以作为黄酒中β- 苯乙醇的检测方法。     

Citrulline production by lactic acid bacteria in Chinese rice wine

Ethyl carbamate (EC) is a carcinogenic compound derived from the spontaneous reaction of ethanol with urea or citrulline in Chinese rice wine. Polymerase chain reaction–denaturing gradient gel electrophoresis showed that five species, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus brevis, Lactococcus lactis and Lactobacillus coryniformis were the most abundant bacteria in the Chinese rice wine production process. Five strains belonging to these species can degrade arginine primarily in the exponential growth phase and accumulate citrulline in MRS‐Arg medium. In addition, an L. brevis strain was shown to be capable of assimilating citrulline, indicating the potential of this strain suggesting a potential route to reduce citrulline content and ethyl carbamate formation in Chinese rice wine fermentation. Copyright © 2018 The Institute of Brewing & Distilling     

固相萃取-气相色谱法测定黄酒中β-苯乙醇含量

目的:建立黄酒中β-苯乙醇的固相萃取-气相色谱检测方法。方法:HLB型固相萃取小柱经活化、平衡后,对3.0 mL黄酒样品中的β-苯乙醇进行富集,依次以3.0 mL水、3.0 mL体积分数40%甲醇溶液淋洗小柱,用3.0 mL甲醇洗脱样品,用气相色谱-氢火焰离子化检测器对目标物进行检测,外标法定量。结果:β-苯乙醇在10.1~202.0 mg/L质量浓度范围内,线性相关系数(r)为0.999 9,检出限(RSN=3)和定量限(RSN=10)分别为0.9 mg/L和3.0 mg/L,回收率在95.5%~98.5%之间,相对标准偏差为1.1%~1.4%。结论:该方法具有操作便捷、结果准确的优点,同时有效降低了黄酒基质对气相色谱系统的污染,避免了酒样中水分对毛细管色谱柱的危害,适用于黄酒中β-苯乙醇的检测。