酶法耦合分级膜制备右旋糖酐的研究

右旋糖酐酶按2.5 U/300 m L与肠膜明串珠菌种子液同时加入发酵培养基,反应24 h后可定向合成重均分子量集中在10~100 ku之间的右旋糖酐。发酵液经0.45μm和100、50、30、10 ku分级膜滤可分别获得符合药用级别要求的重均相对分子质量为67、42、20 ku的右旋糖酐产品。与传统方法相比,酶法耦合分级膜法可有效控制右旋糖酐分子量分布,产品纯度高、产率高、反应条件温和,能耗低、成本低、易于实现工业化。     

双酶法制备水解明胶

以明胶为原料,水解度和多肽含量为指标,研究酶解法制备水解明胶。在单因素基础上,通过正交试验优化温度、pH和时间对水解明胶制备的影响,并分析产品的分子量分布。结果表明,酶解效果对等电点影响不大,在温度50℃,pH 7.0,时间45min,酶添加量4 000U/g时明胶的水解度为15.79%,多肽含量为56.87%,分子量主要集中在500~2 000Da(80.04%),平均分子量为1 276.704Da左右。     

酸解法与酶解法调控右旋糖酐分子质量的比较

为得到特定分子质量的右旋糖酐,采用右旋糖酐酶对右旋糖酐的分子质量和分子质量分布进行调控,并与传统的酸解法进行对比。结果表明:酶解法和酸解法均可调控右旋糖酐的分子质量,产物分布系数都在合理的范围,产物均一性较好;酶解法反应温度为50℃左右,反应条件温和,反应速率快,无氯离子残留;酸解法反应温度在90℃左右,反应速率快,但需耗费酸碱,能耗高,污染大,氯离子残留达到5.89%。因此右旋糖酐酶法与酸法相比能耗低,污染小,无氯离子残留,这为酶法代替酸法生产特定分子质量的右旋糖酐提供了有力的依据。     

酶解胶原蛋白多肽的制备与分析

以牛碱皮边角废料为原料 ,用两步酶解法提取胶原蛋白多肽 ,对影响酶水解过程的各个因素进行了分析 ;通过对水解产物分子量分布和等电点等指标的测定 ,发现分子量呈不连续分布 ,主要集中在某些分子量处 ,分子量的分布主要与水解方式和所用酶的种类有关     

酶解胶原蛋白产物分子量的控制研究

以胶原蛋白粉为原料,采用木瓜蛋白酶、复合蛋白酶对其进行水解,对影响胶原蛋白水解物分子量和水解度的各种因素进行了研究,以期对胶原水解产物的应用提供依据。研究表明,两种酶的反应时间和加酶量对胶原蛋白水解的影响情况大致相同,都是随着反应时间和加酶量的延长或增加,水解度增大,产物分子量变小。其中酶的用量,尤其是复合蛋白酶用量在控制胶原蛋白水解产物分子量方面作用更为明显。此外,对木瓜蛋白酶而言,反应pH为5.0时水解度最高,反应温度在40～60℃之间时可将胶原水解产物的分子量控制在6500～20000Da之间。对于复合蛋白酶而言,虽然较高的pH有利于水解,但差异不明显,反应温度在40～50℃之间时水解效果较好。     

酶法合成右旋糖酐过程规律的研究

右旋糖酐蔗糖酶可催化蔗糖产生D-葡萄糖基,并将其转移到糖链上聚合形成不同分子量的右旋糖酐,应用于食品、医药和化工等行业。区别于菌发酵,酶法合成右旋糖酐具有高效、绿色、反应体系简单等优点。文章通过构建单酶和双酶体系,探索右旋糖酐蔗糖酶及协同右旋糖酐酶催化蔗糖制备右旋糖酐的过程规律。结果表明:在单酶体系条件下,产物右旋糖酐分子量均处于百万级别以上;同时引入右旋糖酐酶构建双酶体系,反应趋向于合成低聚右旋糖酐;随着右旋糖酐酶加入时间的延长,中等分子量片段(10~5 DaMw10~6 Da)和大分子量片段(Mw10~6 Da)右旋糖酐所占比例越大,而低分子量片段(10~4 DaMw10~5 Da)右旋糖酐所占比例降低;且当蔗糖浓度一定时,整体上右旋糖酐分子量随着双酶酶活比的增大而减小,通过调控双酶酶活比可以制备不同分子量的右旋糖酐产品,为其在不同领域的应用提供了坚实的理论基础。     

右旋糖酐酶调控右旋糖酐分子质量条件研究

小分子质量右旋糖酐在医学、化工、食品等领域有广泛的应用,为了得到特定分子质量的右旋糖酐,采用酶解法对大分子质量右旋糖酐的分子质量及分子质量分布进行调控。实验结果表明:在酶解过程,通过控制右旋糖酐酶浓度、底物浓度和反应温度、pH值及时间,可有效调控右旋糖酐的分子质量,且产物均一性较好。较适宜酶解条件:酶浓度为10 U/mL、反应温度为50 ℃、pH值为5.0、底物浓度为30 mg/mL。右旋糖酐酶解前后结构未发生改变,但是其构象从球形链变为柔顺链,右旋糖酐产物分子质量约为5000 u时,在溶液中为较紧凑的球形链构象。酶解法降解右旋糖酐速度快、反应条件温和、能耗低且无污染,在生产特定分子质量的右旋糖酐方面具有良好的应用前景。     

复合蛋白酶水解玉米谷蛋白产物的抗氧化活性研究

以玉米谷蛋白为原料,利用复合蛋白酶对其进行限制水解,探讨不同水解时间所获得的谷蛋白酶解物的分子量分布和抗氧化活性。结果表明:不同水解时间获得的酶解物分子量分布差异较大。水解时间为120min的酶解物中,分子量分布为6 511.51~307.32Da的肽段占94.36%,此时获得的酶解物的抗氧化活性最高,其对DPPH自由基、O-2·、·OH的清除率分别为58.86%,82.64%,37.21%;还原力为0.236;与亚铁离子的螯合能力为29.92%。     

复合酶水解蚕蛹蛋白制备功能性寡肽的工艺研究

为了制备分子量低、肽含量高的蚕蛹功能性寡肽,本文采用单素实验与响应面分析法,对不同蛋白酶及其不同组合、温度、pH值、底物浓度、酶的添加量等因素对蚕蛹分离蛋白水解工艺的影响进行了研究.研究结果表明,多酶复合水解可显著提高蚕蛹蛋白的水解度和寡肽得率,其中胰酶、风味蛋白酶与中性蛋白酶是最佳多酶组合,其最佳水解条件为底物浓度7.33％、酶添加量[E]/[S]3.62％、pH7.38、水解温度54.6℃、水解时间6h.在此条件下,蚕蛹蛋白的水解度高达29.2％,寡肽得率高达为81.14％.酶解后产品数均分子量为665.5 Da,重均分子量为726.9 Da,肽含量高达74.6％,而游离氨基酸含量仅为7.33％,表明复合酶解虽然提高了蚕蛹蛋白的水解度,但主要产物仍然是低分子寡肽,并没有大量生成游离氨基酸.     

复合酶法制备小麦低聚肽的工艺研究

以小麦蛋白为原料,采用酶解法水解小麦蛋白制备小麦低聚肽。筛选出水解度最佳的单酶以及复合酶。通过单因素试验以及正交试验优化小麦蛋白的水解工艺的条件可以得出:胰蛋白酶与碱性蛋白酶复合水解时,小麦蛋白的水解度最高,水解度可达到37.72%。最佳条件为:先采用胰蛋白酶进行水解,水解温度40℃、p H为10、酶添加量7%、水解时间4 h;再利用碱性蛋白酶水解小麦蛋白,水解温度65℃、p H为8、酶添加量7%、水解时间3 h。采用高效液相色谱测出水解产物分子量大部分集中在1374~445 Da,且由峰面积计算含量为52.03%。