右旋糖酐酸解与酶解产物比较

目前工业生产药用右旋糖酐常用酸解法,能耗高,污染大,而酶解法反应条件温和,反应速度快,可以在右旋糖酐发酵的同时进行,可大大降低能耗,减轻污染.本文通过对右旋糖酐酸水解和酶水解产物的成分和分子量分布的研究,为酶解法生产药用右旋糖酐新工艺打好基础.实验结果表明:酸水解的终产物基本上为葡萄糖,而酶水解终产物为异麦芽寡糖;水解到重均分子量为20000 Da以上时,2种水解方法对右旋糖酐含量和分布系数影响不大;水解到重均分子量小于20000 Da之后,酶解产物右旋糖酐含量下降.     

HPGPC检测固定化肠膜明串珠菌产葡聚糖的研究

葡聚糖是蔗糖经肠膜明串珠菌发酵所得产物,经水解纯化处理后具有一定分子量且均一度较高的小分子葡聚糖(又叫右旋糖酐)是国际公认的优质代用血浆。然而现行右旋糖酐制备工艺较难达到医药临床的相关要求,因此,探索能定向合成特定分子量分布右旋糖酐的新途径,具有十分明显的现实意义和理论价值。通过HPGPC在线检测固定化肠膜明串珠菌发酵产物——葡聚糖的重均分子量,发现可通过固定化技术实现对肠膜明串珠菌发酵产物的分子量控制;并且发现在相同发酵时间内,固定化菌发酵产生的葡聚糖含量比游离菌发酵略多;固定化菌发酵产生的葡聚糖重均分子量比游离菌发酵产生的葡聚糖重均分子量低。     

碳源、氮源对固定化肠膜明串珠菌产葡聚糖分子量的影响

葡聚糖是蔗糖经肠膜明串珠菌发酵所得产物,经水解纯化处理后具有一定分子量且均一度较高的小分子葡聚糖(又叫右旋糖酐)是国际公认的优质代用血浆。然而现行右旋糖酐制备工艺较难达到医药临床的相关要求,因此,探索能定向合成特定分子量分布右旋糖酐的新途径,具有十分明显的现实意义和理论价值。本研究采用固定化肠膜明串珠菌发酵产葡聚糖,以期定向控制其重均分子量,本实验通过HPGPC在线检测碳源、氮源对固定化发酵产物的重均分子量的影响,发现碳源含量和氮源含量越少,可转化生成的葡聚糖的分子量越小,为固定化技术定向合成葡聚糖提供理论依据,适当减少培养基中碳源和氮源含量或可定向获得较低分子量或特定分子量的葡聚糖。     

酶法合成右旋糖酐过程规律的研究

右旋糖酐蔗糖酶可催化蔗糖产生D-葡萄糖基,并将其转移到糖链上聚合形成不同分子量的右旋糖酐,应用于食品、医药和化工等行业。区别于菌发酵,酶法合成右旋糖酐具有高效、绿色、反应体系简单等优点。文章通过构建单酶和双酶体系,探索右旋糖酐蔗糖酶及协同右旋糖酐酶催化蔗糖制备右旋糖酐的过程规律。结果表明:在单酶体系条件下,产物右旋糖酐分子量均处于百万级别以上;同时引入右旋糖酐酶构建双酶体系,反应趋向于合成低聚右旋糖酐;随着右旋糖酐酶加入时间的延长,中等分子量片段(10~5 DaMw10~6 Da)和大分子量片段(Mw10~6 Da)右旋糖酐所占比例越大,而低分子量片段(10~4 DaMw10~5 Da)右旋糖酐所占比例降低;且当蔗糖浓度一定时,整体上右旋糖酐分子量随着双酶酶活比的增大而减小,通过调控双酶酶活比可以制备不同分子量的右旋糖酐产品,为其在不同领域的应用提供了坚实的理论基础。     

采用分级超滤法精制右旋糖酐

通过采用分级超滤的方法以不同的分子质量范围对右旋糖酐粗品进行分离纯化 ,并分析右旋糖酐在不同分子质量范围内的分布。结果表明 ,分级超滤在不添加有机溶剂的前提下能更有效地控制右旋糖酐产品的分子质量分布 ,能够取代传统的分级乙醇沉淀法。基于质量衡算 ,分级超滤能更准确地反映右旋糖酐粗品的分子质量分布     

酪朊酸钠酶解液的分级膜分离的研究

利用截留不同分子质量(10ku、5ku、3ku和1ku)的超滤膜将水解度为11 5 %的酪朊酸钠水解液按分子质量大小分为5级,利用SDS -PAGE研究了酪朊酸钠水解液的分子质量分布及分级膜的分离效果。结果表明,分级膜分离方法对酪朊酸钠水解液中的混和肽类能按照分子量大小进行有效的分离。     

超滤法分级纯化五味子多糖及其影响因素的研究

运用超滤法先后使用截留分子量为100和10ku的超滤膜对五味子多糖提取液进行分离纯化和浓缩,经进一步处理得到较纯的多糖组分Sp1(分子量100ku以上)得率为6.31%,Sp2(分子量10～100ku)得率为0.93%。100、10ku两次超滤的最佳操作压力分别为0.207、0.138MPa,膜通量稳定所需时间分别为30、15min。温度对于第一次超滤膜通量影响较大。多糖浓缩液稀释3次以上时,截留液中小分子杂质含量处于较低水平。超滤法与传统层析柱法分离多糖相比,在处理速率上有着巨大优势,但所得多糖纯度略低。     

酶解除去蔗汁中的右旋糖酐

右旋糖酐对制糖过程以及糖产品的危害早已在国内外引起高度关注。目前除去蔗汁中存在的右旋糖酐最有效的方法是酶解。在单因素实验基础上,通过响应面法优化,建立回归模型,得到应用右旋糖酐酶催化水解蔗汁中右旋糖酐的最佳反应条件：酶剂量0．05U／mL蔗汁、pH5-3、反应时间15min、反应温度51℃。在该条件下,可将蔗汁中含量为800～900mg／kg°Bx的右旋糖酐完全去除。     

海洋氧化节杆菌KQ11右旋糖酐酶清除甘蔗制糖中右旋糖酐的研究

对海洋氧化节杆菌(Arthrobacter oxydans)KQ11右旋糖酐酶清除甘蔗汁中右旋糖酐进行研究。在单因素试验的基础上,通过正交试验得到右旋糖酐酶水解甘蔗汁中右旋糖酐的最佳工艺条件:酶剂量0.1 U/mL甘蔗汁、pH值6.5、反应温度50℃、反应时间20 min,可清除83%右旋糖酐。超声功率600 W、酶剂量0.1 U/mL甘蔗汁、pH6.5、温度50℃、超声15 min,可清除88.7%的右旋糖酐,同时甘蔗汁的黏度降低20%。     

右旋糖酐的理化性质研究

肠膜明串珠菌酶法发酵产物经乙醇分级醇沉得到5种不同中分子量(Mw:1047200,512000,272680,205900,109300Da)的右旋糖酐,将分子量为109300Da的右旋糖酐(记为Dex-100)与其他4种进行复配,对其单一及4种复配体系进行体外吸湿保湿性、抗氧化性、乳化活性、乳化稳定性研究。结果表明,Dex-100单一及复配体系均具有良好的吸湿保湿性,且复配体系的吸湿性要明显优于单一体系,尤其是与较大分子量进行复配;保湿性则没有太大差别;相比于Dex-100单一体系,复配体系的抗氧化能力有所提高,但与Vc相比仍较弱;右旋糖酐的乳化性及乳化稳定性表现出浓度依赖性,浓度越高,性能越好,且分子量越大,乳化性和乳化稳定性越好,单一和复配体系的乳化活性没有很大区别,但与较高分子量的复配体系乳化稳定性有明显的提升。     

高效凝胶渗透色谱法测量发酵液中右旋糖酐的研究

高效凝胶渗透色谱法方便且重现性好,被广泛用于各种多糖分子量及其分布的测量.研究用高效凝胶渗透色谱法直接测量大分子右旋糖酐水解液和发酵液中右旋糖酐.首先,选择出0.7%Na2SO4水溶液(内合0.02%NaN3作流动相,用已知分子量右旋糖酐作标准品,回归获得右旋糖酐分子量与保留时间方程为v=6.6811× 46.511,R2=0.9969.在流速1.0 mL/min,进样量20μL,柱温23℃.检测器温度23℃的色谱条件下,该方程用于测量发酵液中右旋糖酐和某厂家大分子右旋糖酐水解产物,可直接计算出发酵液和水解产物中右旋糖酐分子量及分布.     

右旋糖酐酶调控右旋糖酐分子质量条件研究

小分子质量右旋糖酐在医学、化工、食品等领域有广泛的应用,为了得到特定分子质量的右旋糖酐,采用酶解法对大分子质量右旋糖酐的分子质量及分子质量分布进行调控。实验结果表明:在酶解过程,通过控制右旋糖酐酶浓度、底物浓度和反应温度、pH值及时间,可有效调控右旋糖酐的分子质量,且产物均一性较好。较适宜酶解条件:酶浓度为10 U/mL、反应温度为50 ℃、pH值为5.0、底物浓度为30 mg/mL。右旋糖酐酶解前后结构未发生改变,但是其构象从球形链变为柔顺链,右旋糖酐产物分子质量约为5000 u时,在溶液中为较紧凑的球形链构象。酶解法降解右旋糖酐速度快、反应条件温和、能耗低且无污染,在生产特定分子质量的右旋糖酐方面具有良好的应用前景。     

山茱萸美拉德反应产物的超滤分离及其体外抗氧化活性

目的:通过超滤分离中药山茱萸美拉德反应产物的最佳有效部位,并比较各截留产物的理化性质和体外抗氧化作用。方法:以山茱萸为美拉德反应底物,经高温反应后获得反应产物。采用中空纤维膜对反应产物进行分级过滤,过膜级数为0.45、0.22μm、100、50、10、4 ku,对各分级截留产物分别进行冷冻干燥并测定它们的理化特性(紫外吸收和褐变程度);同时观察它们对DPPH自由基的清除能力和对铁氰化钾的还原能力。结果:不同截留产物的紫外吸收曲线基本类同,且在284 nm处均有最大吸收。相比之下,0.45~0.22μm截留产物的褐变程度最大,同时其自由基清除率和还原能力也最高。结论:提示山茱萸美拉德反应产物中抗氧化的最佳活性部位为0.45~0.22μm的超大分子类物质。     

膜分离技求在水溶性大豆多糖提取中的应用

以豆渣为原料提取了水溶性大豆多糖(SSPS),采用膜分离技术得到不同分子量的SSPS,并对其进行凝胶渗透色谱(GPC)检测.结果表明:23.55%大分子SSPS截留在0.5μm无机陶瓷膜外,平均分子量为2719kDa;1.16%SSPS截留在0.5μm无机陶瓷膜与10kDa有机膜之间,平均分子量393kDa;0.23%SSPS截留在10kDa有机膜与复合纳滤膜之间,平均分子量2.5kDa.通过膜分离技术可有效获得SSPS,并可对其分子量进行分级.     

鸡骨蛋白酶解液美拉德产物超滤组分的抗氧化性研究

通过超滤分级鸡骨蛋白酶解液美拉德产物(CBPH-MRPs),得到低组分(CM-I,分子量3ku),中组分[CM-Ⅱ,分子量(3 ku~10 ku)],高组分(CM-Ⅲ,分子量3 ku)。结果表明,褐色物质更多存在于CM-Ⅱ和CM-Ⅲ这些高组分中,而分子量对于中间产物影响不显著,荧光强度由强到弱依次为CM-ⅡCM-ⅢCM-I。经过测量抗氧化活性指标研究得出高分子量的MRPs抗氧化性较好,抗氧化性由强到弱依次为CM-ⅢCM-ⅡCM-I。     

魔芋甘露聚糖肽的分离纯化

以魔芋飞粉发酵所产多肽为原料,采用超滤法将其分离为M200 ku、10 kuM200 ku和M10 ku三个不同分子量区段的多肽;采用Sephadex G-100凝胶层析对10 kuM200 ku分子量区段多肽进一步进行分离,得到N1、N2和N3三个组分。通过对洗脱条件优化,确定了Sephadex G-100凝胶层析的最佳分离条件为:上样浓度150 mg/m L,洗脱流速0.8 m L/min;经高效液相色谱测定,N2组分的氨基酸图谱与甘露聚糖肽标准品相似度最高,确定发酵所产多肽中的甘露聚糖肽主要分布于N2组分,甘露聚糖肽含量为56.78%±2.41%。     

酸碱性和分子量对木耳多糖抗氧化活性及相关性的影响

为研究提取溶剂酸碱性和分子量对黑木耳多糖抗氧化活性的影响及其抗氧化相关性,本试验以野生黑木耳为原料制备黑木耳多糖,采用Labscale TFF System超滤系统对黑木耳多糖进行分子量分级,分别测定黑木耳多糖的得率、纯度和抗氧化活性,并使用SPSS软件分析黑木耳多糖分子量与抗氧化活性之间的相关性。结果表明,酸性未脱色黑木耳多糖的得率最高(12.48%),碱性脱色黑木耳多糖的纯度最高(68.78%),中性未脱色黑木耳多糖体外抗氧化活性最好。不同分子量中性未脱色黑木耳多糖抗氧化试验表明,分子量小于30 ku的黑木耳多糖(Sp3)抗氧化活性最好,抗氧化活性与Vc相近。其次是分子量为30 ku~100 ku的黑木耳多糖(Sp2),最差的是分子量大于100 ku的黑木耳多糖(Sp1),Sp3与抗氧化活性之间存在极显著相关(p0.01),本试验结果为深入开发黑木耳多糖抗氧化产品提供理论依据。     

超滤分离蝙蝠蛾拟青霉胞外多糖工艺优化

为获得超滤膜法分离蝙蝠蛾拟青霉发酵液中胞外多糖的工艺参数,采用切向流超滤比较不同膜组件对该胞外多糖的截留率。结果表明:分别采用0.1μm和100 ku膜组件进行分离,可将发酵液中胞外多糖分为分子质量2 000 ku,100~2 000 ku和100 ku 3部分;通过单因子和正交试验对100 ku膜组件的操作参数如料液比、操作压力、p H进行了优化,得出该膜组件的最佳操作参数为料水比3:2,操作压力0.2 MPa和p H 8.5。在此条件下,膜通量和多糖截留量分别达到19.5 L·m2·h-1和122.47 g·m2·h-1,损失率为2.58%。经HPLC检测,截留液中800 ku多糖组分的纯度达89.7%。与传统的分离方法相比,超滤膜法分离发酵液中胞外多糖具有快速、能耗低和损失率低等优点。     

不同分子量真鲷鱼骨多肽抗氧化活性的研究

以真鲷鱼骨为原料,经胰蛋白酶、风味蛋白酶酶解后,用截留分子量分别为10、5、3ku的超滤膜将其分离成4个分子量段,研究了不同分子量段对·OH、DPPH·和O2-·的清除能力,对Fe3+还原能力以及对油脂的抗氧化性。结果表明:不同分子量多肽组分均具有抗氧化活性,其抗氧化活性强弱为:分子量小于3ku多肽组分>分子量在3~5ku多肽>分子量在5~10ku多肽>分子量大于10ku多肽。     

超滤对石榴汁抗氧化活性的影响

主要探讨不同截留分子量(100、30、10ku)的超滤膜对石榴汁的澄清效果及抗氧化活性的影响,以确定生产高抗氧化活性澄清石榴汁的最适超滤膜。结果表明,30ku超滤膜对石榴汁的澄清效果较好,可保存其酚类化合物、花色苷、VC等抗氧化活性成分80%左右,使DPPH自由基清除活性和FRAP损失在16%以下。因此,建议采用30ku超滤膜澄清石榴汁,以得到具有高抗氧化活性的石榴汁。