单萜醇类在啤酒发酵过程中的变化及对酒花香气的贡献

啤酒中的里那醇、香叶醇和β-香茅醇等单萜醇类物质是贡献啤酒酒花香气的重要成分,其在发酵过程中的变化对啤酒香气质量产生直接影响。结合感官品评和数理统计手段,发现在4%(v/v)乙醇溶液中,不同浓度的里那醇、香叶醇和β-香茅醇的单一物质香气及其协同作用香气呈现出的特性均不同。当含量不高于50μg/L时,混合不同浓度的3种物质,发现并非3者的浓度越高啤酒获得的香气强度就越大,且当里那醇浓度为12.5μg/L,香叶醇浓度为12.5μg/L,β-香茅醇浓度为25μg/L时,3者的协同作用可促使啤酒获得最突出的酒花香气。此外,里那醇、香叶醇和β-香茅醇在发酵过程中发生了生物化学变化,其中里那醇主要转化为α-萜品醇;香叶醇主要转化为β-香茅醇;β-香茅醇主要转化为乙酸香茅酯。3者总体损失率分别为36.6%、45.1%和38.1%。结合上述两方面研究,在采用发酵罐添加酒花的方式进行酿造时,控制好酒花的添加量,促使啤酒中里那醇、香叶醇和β-香茅醇的最终含量在12.5μg/L,12.5μg/L和25μg/L即可达到合理利用酒花香气资源的目的。     

酒花萜烯醇及其立体异构体在啤酒酿造中的检测及其变化研究

采用顶空固相微萃取-气相色谱质谱技术(HS-SPME/GC-MS),跟踪检测了啤酒酿造过程中(R)-(-)-里那醇、S-(+)-里那醇、(R)-(+)-β-香茅醇、(S)-(-)-β-香茅醇、(+)-α-萜品醇、(-)-α-萜品醇、香叶醇、橙花叔醇等12种香气化合物。通过控制酿造过程中不同的香花添加工艺,发现在煮沸结束、回旋沉淀槽及主酵结束后添加香花工艺较煮沸结束前10 min添加工艺,能显著提高萜烯醇及其立体异构体保留在啤酒中的含量,其中对酒花香气具有重要贡献的四种萜烯醇:R-(-)-里那醇、香叶醇、R-(+)-β-香茅醇及橙花叔醇在啤酒中的含量范围分别为1.94¹4.39μg/L、9.8314.39μg/L、9.83¹2.10μg/L、2.9112.10μg/L、2.91⁶.79μg/L、5.346.79μg/L、5.34⁶.81μg/L,它们的风味强度OAV值范围在0.296.81μg/L,它们的风味强度OAV值范围在0.29⁶.54,并对上述4种物质在啤酒发酵过程中的变化规律展开了进一步探究。结合感官评品结果显示,发现回旋沉淀槽添加香花工艺最好,主酵结束后添加香花工艺次之。     

酒花香气成分的检测及富含典型酒花香气啤酒的试验研究

单萜类物质是贡献啤酒酒花香气的重要成分。本研究在100L中试规模,原麦汁浓度为14°P,苦味质为20BU的条件下,从不同酒花添加工艺、添加量和品种三方面分析了啤酒中8种单萜类酒花香气物质的含量,并进行感官品评,发现在发酵罐中添加l％o香花的效果最好,啤酒风格因酒花品种不同而有异。8种酒花香气物质中里那醇、香叶醇、口．香茅醇和α-萜品醇最为重要,其啤酒中的含量与酒花中里那醇和香叶醇含量密切相关,前三者与前人研究-致,但本研究发现“α-萜品醇”也是重要香气物质之-。但啤酒中的酒花香气物质含量高,酒花香味不-定强,这可能与其构型有关,因此,又研究了三种酒花在啤酒酿造过程中酒花香气物质的同分异构体,包括（R）-（-）-里那醇、（S）-（＋）-里那醇、（-）-α-萜品醇、（十）-α-萜品醇、（R]-（＋）-卢-香茅醇、（S）-（-）-卢-香茅醇的含量。研究发现酒花品种的差异会引起同分异构体含量及比例的显著差异,加上其阈值的变化。进-步验证了同分异构体对啤酒中酒花香味的影响。     

酒花香气物质检测方法的建立及评估

本文主要建立及评估了酒花油和啤酒中酒花香气的检测方法。采用蒸馏法-气相色谱仪测定酒花油中香气组分,酒花样品采用酒花蒸馏装置蒸馏后,将酒花油共定量了香叶烯、里那醇、香叶醇、石竹烯、草烯5种酒花香气组分;为检测值更为准确,采用多点校正内标法定量,内标物为十四烷,所得曲线的相关系数均大于0.995,5种酒花香气组分的RSD值在4.34%-9.45%之间,而回收率在87.50%-111.95%之间。本文另采用顶空固相微萃取-气质联用法测定啤酒中酒花香气组分,啤酒样品采用85μm PA萃取头萃取,在45℃水浴保温45min,共定量了里那醇、香茅醇、香叶醇、香叶酸甲酯、乙酸香茅酯、乙酸香叶酯、反式橙花叔醇等7种酒花香气组分,为减少基体干扰,采用啤酒为基体建立标准曲线,所得曲线的相关系数均大于0.995,7种酒花香气组分的RSD值在4.63%-9.82%之间,而回收率在80.63%-119.38%之间。在以上两种检测方法的基础上,检测了20种酒花和38种啤酒的酒花香气,发现不同品种其酒花香气含量差异较大。     

里那醇在啤酒酒花风味建模中的作用

里那醇是公认的影响啤酒酒花香气的成分之一,研究人员曾将其作为测量啤酒中酒花香气的一种指标,并建模来跟踪酿造过程中酒花香气的改变。由于近年来对里那醇的广泛关注,其重要性已远远超过其真正的意义。本文通过此课题的研究给出了更为精确的关于里那醇对啤酒酒花风味的评估方法。     

啤酒酿造过程中萜烯醇类化合物变化规律

采用基于顶空固相微萃取-气相色谱质谱技术(HS-SPME/GC-MS)建立的啤酒中酒花物质的检测方法,跟踪了啤酒酿造过程中源自酒花的5种萜烯醇类香气化合物的变化规律,初步为啤酒厂酒花配方及工艺调整奠定了理论基础。通过对糖化过程中不同酒花配方、不同煮沸方式及酒花添加工艺对冷麦汁中萜烯醇类化合物含量影响的研究,发现冷麦汁中的萜烯醇类化合物主要受最后一次添加酒花的添加量和添加时机影响,最后一次酒花在煮终回旋前添加较煮终前10 min添加,更利于萜烯醇类化合物在冷麦汁中的保留,这与国外的late-hopping工艺相一致;与煮终前10 min最后一次添加相比,在煮终回旋前最后一次添加酒花能使冷麦汁中里那醇含量提高209.4%,α-萜品醇为91.2%,香叶醇为31.4%,橙花醇175.0%。通过研究发酵过程中萜烯醇类化合物的变化规律,发现5种萜烯在发酵过程中呈上升趋势,且它们之间可能被酵母相互转化。     

酒花中萜烯醇类化合物的研究进展

酒酒花添加可赋予啤酒特有的风味,使酒体丰满协调。萜类物质对酒花风味的贡献发挥着重要作用。其中,萜烯醇类物质（如里那醇、香叶醇、β-香茅醇、α-萜品醇、橙花醇等）是影响酒花香气的关键性成分,其在发酵过程中含量的微小变化对啤酒的品质及感官评价影响很大。啤酒中的萜烯醇类物质不仅与酒花品种有关,还与发酵过程中的生物转化有关,甚至在储存时期也有变化。了解酒花中的萜烯醇类香气化合物在啤酒酿造过程中的含量及变化规律与控制和稳定啤酒的风味质量密切相关。该文就酒花中萜烯醇类物质的国内外研究现状做一综述。     

添加老化酒花的啤酒中酒花衍生的风味成分增加

在先前的研究中,使用气相色谱——嗅觉测量法（GC-O）以及感官品评分析对添加浓酒花啤酒和未添加酒花啤酒进行分析比较,鉴别出约30种酒花香气成分。本研究中对添加老化酒花的啤酒和添加4℃储存酒花的啤酒进行比较,检测萜类化合物以及酯含量的变化并调查其来源。添加老化酒花的啤酒具有桔皮／酯香味的特点,而添加冷藏酒花具有青草味和类似酒花颗粒的风味特点。使用溶剂辅助香料蒸发（SAFE）的方法提取的香味物质中没有检测到酒花老化过程中有香味物质的合成。添加老化酒花的啤酒中,3-甲基-2-丁烯-1-硫醇（MBT）、紫罗兰酮、2-甲基丁酸乙酯、3-甲基丁酸乙酯、4-甲基戊酸乙酯、3-甲基丁酸2-苯乙酯和4-（4-羟苯基）-2-丁酮含量增加。我们认为这些酯中短碳链的酸有-部分来自獐草酮和蛇麻酮的分解。相反,添加老化酒花啤酒中里哪醇、香叶烯以及（Z）-3-己烯-1-醇的含量减少。依据多维GC／MS的分析结果,发现酒花老化过程中存在里哪醇对映体过量现象。我们推断这些成分含量的变化是导致老化酒花啤酒形成独特特征的原因。     

顶空固相微萃取-气相色谱-氢火焰离子化法检测啤酒中的酒化香气成分

来自酒花的微量香气成分会影响啤酒的感官评价和质量。为评价酒花香气对啤酒的影响,本文采用顶空固相微萃取（Hs—SPME）对啤酒前处理后,使用常见且低成本维护的气相色谱一氢火焰离子化法fGC—FID）进行定性定量。以2一壬醇为内标,测定出里那醇、乙酸香茅酯、仪一萜品醇、B一香茅醇、香叶醇5种酒花香气成分。此法的精密度为4．69％～13．41％,回收率为74．95％～106．09％,检出限为0．005～O．028μg·L-1。通过此法进行啤酒检测,结果显示：啤酒中这5种酒花香气含量均〈10μg·L-1,大部分在0．10～5．00μg·L-1之间。研究表明：该法测定准确可靠;与已有方法如顶空固相微萃取一气质联用法（HS—SPME—GC—Ms）相比,该法的仪器常见,维护成本更低,更适合啤酒厂推广使用。     

啤酒中酒花萜类化合物的分析及GC/MS搅拌棒吸附萃取方法的评价

酒花香味组分主要是萜类化合物,赋予啤酒特有的香气。由于这些萜类化合物的痕量水平和啤酒的复杂基体,分析前必须进行预处理。目前,搅拌棒一吸附萃取（SBSE）法已用于从少量样品中定性、定量多种萜类化合物的分析。这一简单技术具有低变异系数,准确度高和低检出限的优点。对萜类化合物的研究表明,在麦汁煮沸期间萜类化合物的浓度有两种不同的下降模式,一种是香叶烯和里哪醇,呈二次方曲线快速下降,另一种是β-桉叶油醇、律草烯、律草烯环氧化物Ⅰ、β-法呢烯、石竹烯和香叶醇,呈线性缓慢下降。相反的是,β-大马酮的浓度在煮沸后增加。酒花香气组分取决于酒花品种,我们同时研究了萜类化合物的含量与啤酒感官分析之间的对应关系。     

基于超临界CO2萃取和旋转锥体柱法的啤酒花提取物香气特征比较

目的 比较两种冷萃取啤酒花香气提取物的香气特征差异及其物质基础。方法 采用超临界CO2萃取和旋转锥体柱提取分别制备了酒花提取物,利用风味剖面定量描述分析对比研究了两种酒花提取物的香气特征;采用溶剂辅助风味蒸发-气相色谱-嗅觉检测-质谱联用法结合香气提取物稀释分析解析了两种提取物中关键香气物质构成。结果 超临界CO2萃取的浸膏草药香、木香突出,旋转锥体柱提取物橘香、果香明显。芳樟醇、β-月桂烯、顺-3-己烯-1-醇为两种酒花提取物的共有关键香气化合物。邻伞花烃、辛酸甲酯、2-壬酮是超临界CO2萃取浸膏的特有关键香气化合物,2-甲基丁醇、卞醇和壬醛为SCC提取物的特征香气物质。超临界CO2萃取擅长提取单萜烯化合物,SCC对脂肪醇类、脂肪酮类、单萜烯醇类化合物的富集率较高。结论 两种酒花提取物的香气风格特征相差较大,研究结果可为酒花拓展应用研究提供数据支撑和理论指导。     

三个国家Cascade酒花香气对比分析

采用顶空固相微萃取气相色谱-质谱（HS-SPME-GC-MS）联用的方法分析测定中国、美国和新西兰Cascade颗粒酒花中香气化合物的组成,分别与Cascade酒花在麦汁煮沸时添加酒花的酒样香气化合物和在啤酒储存期干投酒花的酒样香气化合物进行对比分析,同时分别进行感官品评。结果表明,三个国家Cascade酒花的香气化合物相比较,新西兰Cascade酒花在麦汁煮沸过程中添加,香气化合物减少17种,增加3种,在啤酒储存期干投香气物质减少19种,增加12种;美国Cascade酒花在麦汁煮沸过程中添加,香气化合物减少18种,增加2种,在啤酒储存期干投香气物质减少12种,增加12种;中国Cascade酒花在麦汁煮沸过程中添加,香气化合物减少12种,增加5种,在啤酒储存期干投香气物质减少11种,增加14种。减少的主要是萜烯类物质,增加的主要是醇和酯类物质。感官品评方面,在麦汁煮沸过程中添加Cascade酒花,中国的Cascade酒花具有突出的柑橘、柠檬、苹果或桃子的香味;在啤酒储存期干投Cascade酒花,生成较多的醇类物质,酒花的利用率较高。     

气相色谱法分析酒花油的主要香气物质研究

建立了用气相色谱法测定酒花油中香叶烯、里那醇、石竹烯、法尼烯和律草烯含量的方法，并对4种酒花油样品进行了捡测：采用水蒸气回流提取法进行样品前处理．以十四烷作为内标物，色谱条件为：载气流速2.0ml/min、柱温为程序升温，100℃（Omin）-10℃/min-160℃（Omin）-30℃/min-210℃（5min），分流比25：1，进样量0．5℃L；分析时间短．12分钟内即可完成。内标法定量测得相对标准偏差为0．0120％～1．0707％，回收率在95．18％～102．25％之间，具有操作简便快捷、精密度好、准确度高的特点。检测结果表明，不同品种酒花油样品在主要香气物质上有较大差异，可以据此对酒花油及相应酒花的品质进行监控。     

番茄酒香气成分的气相色谱-质谱分析

为弄清番茄酒中的主要香气成分,采用溶剂萃取法对番茄酒中的香气成分进行了提取,然后用气相色谱-质谱联用仪对提取物进行了分析。共鉴定出11种香气化合物,包括醇、酯、酸等3类化合物。醇类物质在香气成分中含量最高,占香气成分总含量的91.42%,其中最主要的是1-戊醇和苯乙醇,其含量分别占香气成分总含量的69%和22.42%。酯类在香气成分中种类最多,共8种,其总含量占香气成分总含量的7.86%。酸类仅检测出1种D-(+)-甘油酸,占香气成分总含量的0.71%。与番茄米酒相比,大部分香气成分相同,说明番茄汁中的成分对番茄酒和番茄米酒香气的形成起了非常重要的作用。     

酒花与啤酒中单萜化合物的研究进展

单萜化合物是酒花和啤酒中香气化合物的重要组成部分,具有典型的酒花香气特征,在自然界中以游离态和糖苷结合态两种形式存在。本文重点阐述了酒花中单萜化合物的生物合成途径、控制其合成的关键酶和基因以及酒花中单萜醇化合物相互转化关键酶的研究进展。此外,本文还综述了酒花与啤酒中单萜化合物的变化及其影响因素,糖苷结合态单萜化合物的结构、含量及其分析方法,并对单萜化合物在啤酒中的研究前景进行展望。     

国产酒花香气成分及酿造特性的研究

为探究国产酒花在啤酒酿造中的酿造价值,将7种中国本土种植和培育的啤酒花（卡斯卡特、D1号、拿盖特、柯密特、青岛大花、哥伦布、哈拉道）在模拟啤酒酿造过程中添加,并在关键酿造节点取样,使用气相色谱-质谱（GC-MS）技术分析酒花在啤酒酿造过程中不同时期香气成分,并通过感官品评综合评估其酿造价值。结果表明,7种国产酒花香气成分均能满足啤酒酿造要求,除哥伦布为高α-酸酒花,青岛大花为苦型酒花外,其余品种均为苦香兼优型酒花,该类酒花既可煮沸时添加也可用于后期酒花干投,其中,卡斯卡特酒花与D1号酒花干投样品中月桂烯含量分别为0.458 μg/L、0.324 μg/L,远高于一般酒花,非常适合印度淡色艾尔啤酒（IPA）酿造。     

国产高α-酸含量酒花的品质研究

以青岛大花作为对照,研究了高α-酸含量酒花品种马可波罗(Marco Polo)和哥伦布(Columbus)的品质和酿造特点,评价高α-酸含量酒花对青岛大花的替代性。结果表明:马可波罗和哥伦布酒花的α-酸含量高,可降低酒花添加量。合葎草酮含量低,苦感柔和。酒花油组分中里那醇和香叶醇含量高,对啤酒的香气贡献大。总多酚及黄腐酚含量较高,但单位α-酸添加的多酚量不足且抗氧化能力略差,可能对啤酒的非生物稳定性、抗氧化性产生影响。从酿造麦汁指标来看,高α-酸含量酒花的使用可达到预期的苦味质,且异构化率高于青岛大花。采用高α-酸含量酒花配合多酚颗粒酒花使用可以改善麦汁的非生物稳定性和抗氧化能力。     

啤酒中酒花香组分分析方法的研究及其在啤酒酒花香气质量评定中的应用

采用顶空固相微萃取-GC／MS技术，建立了啤酒中酒花香组分的分析方法，可以准确测定里哪醇、β-香茅醇、α-萜品醇、香叶醇、反式-橙花叔醇、乙酸香茅酯、香叶酸甲酯、乙酸香叶酯等8种酒花香组分。应用本方法测定了市售不同品牌啤酒的酒花香组分含量，通过统计分析并结合感官评定，评价了不同品牌啤酒的酒花香质量，本方法的建立有助于啤酒酒花香的量化评定。     

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时检测食品中的烟酰胺单核苷酸α、β异构体和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸

目的 基于超高效液相色谱串联质谱法,通过优化色谱/质谱条件和样品前处理条件,建立了同时测定食品中烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)α、β异构体和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)含量的方法。方法 样品经5%甲醇水溶液超声提取,HLB固相萃取柱和混合型阴离子交换固相萃取柱分别净化,采用Waters ACQUITY UPLC?HSS T色谱柱进行分离,流动相为5 mmol/L乙酸铵含0.1% (V/V)甲酸水-甲醇,梯度洗脱;流速0.2 mL/min;柱温30℃;多反应监测模式(multiple reaction monitoring,MRM)定量分析,定量离子对NMN为m/z 335.0/123.0、NAD+为m/z 662.0/540.0。结果 在最优条件下,α-NMN和β-NMN两种异构体的分离度为5.56。该方法中α-NMN、β-NMN和NAD+均在10~1000 ng/mL范围内线性良好,相关系数R2分别为0.9999,0.9998和0.9995。α-NMN、β-NMN和NAD+的方法检出限分别为4.0、2.0和1.0 ng/mL,定量限分别为10.0、5.0和3.0 ng/mL,回收率分别为90.78%～97.90%、96.98%~109.80%、83.78%~101.68%,相对标准偏差分别为2.1%～2.5%、5.0%~5.7%、5.4%~6.5%。结论 该方法灵敏度高,选择性好,结果准确可靠,可同时快速检测各种基质食品中烟酰胺单核苷酸α、β异构体和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的含量。     

HPLC同时测定橄榄油中4种多酚类化合物的含量

建立了HPLC同时测定橄榄油中没食子酸、羟基酪醇、儿茶素和阿魏酸4种多酚类化合物含量的方法。橄榄油先经正己烷溶解,再用60%甲醇两次提取其中的多酚类化合物。色谱条件为ZORBAX SB-C18反相色谱柱(150 mm×4.6 mm,5.0μm);以0.5%乙酸(A)+甲醇(B)+异丙醇(C)为流动相;梯度洗脱顺序为0~14 min,95%~92%A,2.5%~4%B,2.5%~4%C;14~30 min,92%~82%A,4%~9%B,4%~9%C;柱温35℃;流速1.0 m L/min;进样量20μL;DAD检测器波长280 nm。结果表明:在此色谱条件下,4种多酚类化合物在30 min内能较好地分离,且测定结果的重复性好(RSD≤1.890%),精密度高(RSD≤0.023%),加标回收率在82.4%~97.6%之间。该方法能准确地同时测定橄榄油中4种多酚类化合物的含量。