高效液相色谱法测定强化面粉中VA

建立了高效液相色谱(HPLC)测定强化面粉中维生素A含量的方法.样品用水-甲醇(5 10)提取,提取液用正己烷萃取,萃取液直接用于色谱测定.实验以Chrosorb-60硅胶柱作为分离柱,经对色谱分离条件优化,最佳色谱分离条件为流动相为正己烷-异丙醇-乙酸比例为194∶5∶1(V/V/V);流速为1.0mL/min;检测波长为326nm.实验结果表明,方法三水平样品回收率(n=5)为98.18%～100.72%;八次重复性实验相对标准偏差(RSD)为1.26%;检出限(S/N=3)为5ng.     

柱层析法分离万寿菊叶黄素

本试验研究了万寿菊叶黄素的分离方法及分离条件。采用高效液相色谱法(HPLC)测定叶黄素的含量,色谱柱为岛津VP-ODSC18柱(150mm×4.6mm,5μm),检测波长454nm;以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0mL/m in;柱温30℃;进样量10μL;校准曲线法定量,在0.6~2.0μg范围内具有良好的线性关系,回归方程为Y=1.16×107C+4.99×104,相关系数r=0.9984。采用柱层析法分离万寿菊叶黄素的皂化液,实验结果表明:固定相采用硅胶G(100~200目);胡萝卜素洗脱剂为V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=5∶1;叶黄素洗脱剂为V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=1∶1;层析柱规格为Φ26×510mm;使用皂化液直接湿法上样;吸附时间为30m in;上样量为0.4mL皂化液/g硅胶;柱温为常温;皂化液可直接上样;在以上条件下,经分离回收溶剂后得到含量为83.3%的叶黄素产品。该方法有良好的分离能力,便于操作,产品纯度稳定。硅胶在重复使用5次以内,对分离效果的影响不明显。     

反相高效液相色谱法测定果蔬中的β-胡萝卜素

从检测波长、流动相、柱温等方面优化了反相高效液相色谱测定果蔬中的β-胡萝卜素的色谱条件,并对方法的应用性进行了评价。用单因子实验方法优化得到的反相高效液相色谱分析果蔬中β-胡萝卜素的条件为:采用1:1 (V/V)丙酮-石油醚混合液直接提取,提取液减压蒸干后,用丙酮溶解,经NOVA-PAK(150mm×3.9mm,4μ, Waters)C18色谱柱,以乙腈-甲醇(20:80)为流动相进行洗脱,用2487紫外检测器在450nm下进行检测。在此条件下,β-胡萝卜素标准曲线的回归方程为Y=45739X- 19784,相关系数大于0.999,线性范围为0-50mg/L,最小检出限为0.10mg/L,加标样品回收率为91.7%-99.7%,变异系数CV(%)为4.4%-5.0%。该方法能简便、快速、准确地测定果蔬样品中的β-胡萝卜素。     

食品中虾青素的C18-HPLC-PDA分离与鉴定

在装备了二极管阵列检测器(PDA)的高压液相色谱(HPLC)上,应用C18柱,冰凉花和虾中的主要酮基类胡萝卜素-虾青素可以被分离。分离条件为:色谱柱为DiamonsilTM(5μm,4.6mm×25cm,DikmaTechnology);流动相A为乙腈-水(90∶10,V/V),用磷酸调pH3.0;流动相B为乙酸乙酯;线性梯度洗脱:B在15min内由0%增加至70%;15～25min内B维持在70%;流速=1.0mL/min;检测波长=480nm;PDA波长范围=280～580nm;进样量=20mL。根据其与参比样品的色谱行为和光谱特征比较,样品中的虾青素可被鉴定。它在C18-HPLC-PDA上的定量亦成为可能。     

酸水解-柱前衍生法测定鲍鱼中氨基酸含量

优化测定三亚鲍鱼氨基酸试验条件。运用酸水解法处理样品,2,4-二硝基氟苯柱前衍生化,辅以高效液相色谱(HPLC)测定氨基酸含量;色谱条件为:色谱柱,Inertsil ODS-3 C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相A,含1%N,N-二甲基酰胺的0.05 mol/L醋酸钠-醋酸缓冲液(pH 6.4);流动相B,乙腈-水(1︰1,V/V),流动相A︰流动相B为70︰30(V/V);检测波长360 nm;流速1 mL/min;柱温33℃。结果发现,样品氨基酸总含量为808.73 mg/g。此方法样品处理充分彻底,操作简单,各氨基酸分离良好;与常规方法相比,HPLC法测定简便快速,精密度高,检出限低,回收率高,准确性好,结果令人满意。     

红曲桔霉素高效液相色谱测定条件的优化

对高效液相色谱测定红曲桔霉素的方法进行优化 ,比较不同色谱柱及流动相组成对分离效果的影响 ,确定了采用色谱柱ZORBAXEclipseXDB C1 8( 5 μm ,2 5 0mm× 4 6mm) ,流动相组成为V(乙腈 )∶V(水 ) ( pH2 5 ) =35∶65。在优化条件下分离到的桔霉素色谱图经质谱鉴定为单一组分。在优化的色谱条件下绘制了标准曲线 ,低浓度标准样品的质量浓度与峰面积的线性关系良好 ,R2 =0 9997。标准桔霉素HPLC的最低检测质量浓度为 0 0 5mg/L     

固相萃取-高效液相色谱法快速检测保健品中的枸橼酸西地那非

采用固相萃取-高效液相色谱法对保健品中的枸橼酸西地那非进行测定。样品经Strata X-C固相萃取小柱净化,用Phenomenex Kinetex C18柱分离,乙腈-10mM醋酸铵(V/V=35/65)为流动相,经液相色谱检测。结果表明,枸橼酸西地那非在0.5～80μg/mL的浓度范围之间具有良好的线性关系(R2=0.9995),加标回收率大于90%。该方法简单,快速,精密度和准确度高,适用于保健品中枸橼酸西地那非的测定。     

高效液相色谱法测定甜菜糖蜜中的葡萄糖、蔗糖和棉籽糖

建立了同时测定甜菜糖蜜中葡萄糖、蔗糖和棉籽糖的分析方法,即样品采用C18固相小柱脱色净化,正相色谱分析测定.色谱条件:色谱柱为Agilent Zorbax carbohydrate柱(4.6×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(80:20,V:V),流速1mL/min,柱温35℃,RID检测.实验结果表明:葡萄糖在1～10mg/mL、蔗糖在10～100mg/mL、棉籽糖在1-5mg/mL范围内线性良好,相关系数分别为0.9999、0.9999、0.9994;3种糖的相对标准偏差(RSD)分别为5.79%、0.31%、3.31%(n=5),平均回收率分别为98.3%、97.6%、101.7%.该分析方法简便、准确、灵敏,重现性好,适用于糖蜜中糖类的检测.     

HPLC法测定五加皮保健酒中栀子甙的含量

建立了用高效液相色谱(HPLC)法测定五加皮保健酒中栀子甙的含量的方法,并对实际样品进行了的测定。在甲醇:0.02mol·L~(-1)醋酸铵=35:65(V/V)为流动相,C_(18)柱分离,流速1.0ml/min,检测波长为240nm 的条件下,栀子甙在5.0～80.0μg/ml 浓度范围内,线性关系良好;方法的相对标准偏差(RSD)为0.51%;方法的平均回收率为99.0%。结果表明该方法简便、快速,灵敏度高,重现性好。     

高效液相色谱串联质谱法测定红糖中5-羟甲基糠醛

建立了红糖中5-羟甲基糠醛的高效液相色谱串联质谱检测方法。红糖样品经甲醇-水(V/V=5/95)充分溶解提取,经HLB柱富集净化,氮吹干洗脱液,用乙腈-水(V/V=1/9)复溶,供高效液相色谱串联质谱仪检测。以甲醇和水为流动相梯度洗脱,用Phenomenex Luma Omega C18柱(1.6μm,100 mm×2.1 mm)分离,电喷雾正离子模式(ESI+)扫描,多反应监测模式(MRM)采集数据,外标法定量。该方法在0.5~50.0μg/L范围内线性关系良好(r²=0.9999),检出限为0.44μg/kg,定量限为1.47μg/kg。在2.0、5.0、10.0μg/kg的加标水平下,5-羟甲基糠醛的平均回收率为86.3%~97.8%,相对标准偏差为2.1%~5.0%(n=6)。本方法操作简单、灵敏度高、准确度和净化效果好,适用于红糖中5-羟甲基糠醛的残留量测定。     

正交试验结合液质法测定乳粉中左旋肉碱

建立了乳粉中左旋肉碱含量的液相色谱串联质谱测定法。样品经20%甲酸水-乙腈(7︰3,V/V)提取,正交试验优化皂化条件,为15%氢氧化钾溶液,按5︰1(提取液︰氢氧化钾)在60℃,皂化20 min。以5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸)-乙腈为流动相,采用CAPCELL PAK CR色谱柱(150 mm×2.0 m(I.d),5μm)进行分离。采用多离子反应监测(MRM)方式,正离子模式电喷雾质谱进行检测,定量定性离子对分别为(m/z)162.2/103.2,162.2/85.1。在优化条件下,样品在5 min之内完成分析。在200~2 000 ng/m L范围内线性良好(R=0.999 8)。左旋肉碱的检出限为97.5μg/kg,定量限为0.33 mg/kg。低、中和高3个水平的加标回收率平均在97.5%~102.5%之间,RSD值为2.4%~3.2%。方法快速简便,灵敏度高,重复性好,已应用于乳粉中左旋肉碱的测定。     

手性液相色谱法直接定量乳粉中RRR-α-生育酚

目的 建立一种乳粉中RRR-α-生育酚的手性液相色谱直接检测方法。方法 样品经氢氧化钾皂化, 石油醚-异丙醚萃取。经小粒径纤维素衍生物型手性柱Daicel Chiralcel OD-3 (2.1 mm×150 mm, 3 μm)直接分离,采用无水乙醇-正己烷(5: 995, V/V) (A)和三乙胺-正己烷(5: 995, V/V) (B) (A:B=10:90)作为流动相进行等度洗脱, 流速为0.2 mL/min, 柱温30 ℃, 检测波长为294 nm, 外标法定量。结果 RRR-α-生育酚和其他α-生育酚异构体的分离度大于1.2。在0.5~50 μg/mL 范围内线性关系良好, 相关系数大于0.999, 检出限为0.20 mg/100 g , 定量限为0.60 mg/100 g, 加标回收率为95%~109%, 相对标准偏差为2.7%。结论 该方法快速、准确、灵敏, 适合测定乳粉中RRR-α-生育酚的含量。     

RP-HPLC以开环形式测定红曲中总Lovastatin含量

建立用反相高效液相色谱(RP-HPLC)以开环形式测定红曲样品中总Lovatatin含量的方法。红曲样品用0.2mol/LNaOH溶解,50℃超声提取转化60min,使样品中的Lovastatin全部转化为开环形式,再用硅胶吸附层析,初步除去样品中的色素及部分杂质。经过前处理后的样品以磷酸缓冲液-乙腈系统(V/V)65∶35为流动相,在1ml/min流速下用反相高效液相色谱分离去除残余色素及其它杂质干扰,开环Lovastatin用紫外检测器在238nm波长下检测。本方法的最低检测限为0.2μg/ml,在0.2～6μg/ml范围内呈良好的线性关系,γ=0.9991。6次重复测定样品加标回收率为96%±3%,变异系数为3%。采用本实验方法测定5种红曲发酵样品中的总Lovastatin含量均取得满意结果。     

白酒中乳酸的离子排斥色谱-直接电导检测分析

建立用直接电导检测的离子排斥色谱分离测定乳酸的方法。以Shim-pack SCR-102H色谱柱为分离柱,用对p-甲苯磺酸为流动相,考察流动相浓度、色谱柱温度及流速对分离和测定乳酸的影响。最佳色谱条件为以2.0mmol/L p-甲苯磺酸为流动相、流速1.0mL/min、柱温50℃。在此条件下,乳酸的保留时间约为8min,其他有机酸(甲酸、乙酸、柠檬酸和苹果酸)不干扰测定。乳酸的检出限为0.36mg/L,工作曲线的线性范围是1.0～100.0mg/L,峰面积的相对标准偏差(n=5)为0.9%。将方法应用于测定白酒中的乳酸,加标回收率为95.8%～98.5%。     

SPE-GC/MS测定辣椒油中14种邻苯二甲酸酯

建立了测定辣椒油中14种邻苯二甲酸酯的气相色谱-质谱(GC-MS)分析方法,5.0g样品经20mL乙腈溶解,提取,离心,上清液旋蒸,3mL甲醇-水(5∶95,V/V)溶解残液,过固相萃取柱分离净化,采用GC-MS对样品进行分析,色谱柱为VF-5MS石英毛细管柱,GC-MS接口温度250°C,EI离子源,选择离子扫描模式(SIM)测定。在该方法条件下,14种邻苯二甲酸酯的检测限为0.5~5.0mg/kg,方法回收率在75%~115%之间,相对标准偏差(n=6)在2.0%~5.0%之间。该方法准确,有很好的灵敏度、回收率,可以用于辣椒油中14种邻苯二甲酸酯的测定。     

液相色谱法测定鹿茸中唾液酸含量

建立阳离子交换- 液相色谱测定鹿茸中唾液酸含量的方法。确定用盐酸对试样进行水解处理。色谱条件：色谱柱为Zorbax 300-SCX 阳离子交换柱,流动相为乙腈-0.1% 磷酸水溶液(90:10,V/V),流速1.0mL/min,进样量10.0μL,紫外检测波长205nm。结果表明,鹿茸中的唾液酸质量浓度在5～100μg/mL 范围内与峰面积线性关系良好,最低检测限浓度(RSN = 3)为0.60μg/mL,方法检出限为0.03g/kg,平均加样回收率为83.4%,RSD 为4.9%(n=6)。此法适用于鹿茸及相关产品中唾液酸含量的检测。     

高效液相色谱法测定保健食品中维生素D3的含量

目的建立用半制备型反相高效液相色谱系统纯化、正相高效液相色谱硅胶柱色谱分离测定保健食品中维生素D_3含量的方法。方法通过皂化排除样品中的干扰物质,再经乙醚萃取浓缩,将浓缩后供试品溶液注入反相高效液相色谱仪净化分离去除杂质,排除维生素A的干扰,再用正相分析色谱进行定量分析,以正己烷-正戊醇(997:3,V:V)为流动相,流速为1.0 mL/min,采用色谱柱Waters Nova-Pak?Silia分离,在254 nm检测波长下经紫外或二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果维生素D_3浓度在0.297~9.506μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数为1,平均回收率为100.55%~100.58%,相对标准偏差值为0.44%~0.72%。结论该方法快速准确,可适用于保健食品中维生素D_3含量的测定。     

固相萃取-高效液相色谱法测定鸡肉中氯霉素的残留

本文采用固相萃取-高效液相色谱法对肉食鸡中氯霉素残留进行检测。样品用乙酸乙酯提取,并用正己烷脱酯,经ENVI-18固相萃取小柱净化后,采用C18色谱柱分离,流动相甲醇:水=35:65(V/V),流速为1ml/min液相色谱分析,紫外检测波长为280nm。在1～200μg/ml范围内,峰面积与氯霉素浓度呈良好的线性关系(r=0.9992),精密度(RSD)小于5%,检测限为0.005μg/g,平均回收率为82.4%。     

HPLC测定食品维生素预混料中β-胡萝卜素的含量

从检测波长、流动相、柱温等方面优化了反相高效液相色谱仪测定维生素预混料中β-胡萝卜素(β-carotene),并对该检测方法的适用性进行验证和评价.并用实验方法优化得到的反相高效液相色谱分析维生素预混料分析β-胡萝卜素的条件为:采用1 :1(V/V)乙醇和环己烷混合液直接提取,提取液用纯水洗涤至酚酞溶液近中性.提取液经装有无水硫酸钠的坩埚脱水过滤后,用丙酮溶解,经lichossorb100-RP-8(5um)-250×4.0色谱柱,以甲醇-乙腈-氯仿比81 :15:4为流动相进行洗脱,用紫外双通道可变检测仪Shimadzu SPD-20A在450nm进行检测,在此条件下,beta-胡萝卜素的标准曲线的回归方程是Y=(3.1344e-0.006)x+(0)相关系数R=0.999882>0.999表明线性良好,能满足定量分析要求,在此色谱条件下,以3倍的噪音计算检出限,测得本方法最小检出限为1.0ug/L.加标样品回收率96.18%101.40%.变异系数CV(%)是0.45%.准确度95.31%101.62%该方法能简便、快速、准确地测定维生素预混料中β-胡萝卜素的含量.     

酶法糖基化芦丁的高效液相色谱法测定

对酶法转化芦丁后的酶反应产物糖基化芦丁的高效液相色谱(HPLC)测定方法进行了研究。HPLC法的色谱条件为:色谱柱使用Agilent公司ZORBAX Eclipse XDB-C18(4·5mm×150mm,5μm);流动相为V(乙腈):V(超纯水):V(甲酸)=18:81·9:0·1;流动相流速为0·8mL/min;紫外检测波长为254nm;柱温30℃;进样量5μL。运用该方法,在7min之内可以完成样品糖基化芦丁的测定,并且在HPLC谱图上能将芦丁和葡萄糖基芦丁(转入1个葡萄糖单元)完全分离,从而保证测定的准确性。实验结果表明,利用HPLC方法测定糖基化芦丁不失为一种方便、快速、可靠的测定方法。