白酒酒醅中纤维素酶产生菌的产酶活力与其生理生化特性的研究

以白酒酒醅中筛选出的产纤维素酶的细菌为研究对象,利用相关分析和通径分析研究了纤维素酶产生菌的生理生化特性与其产酶活力之间的关系.相关分析和通经分析结果表明:细胞长宽比和葡萄糖产酸指标与纤维素酶活力具有明显的负相关性;淀粉水解实验指标与纤维素酶活力具有明显的正相关性;细胞长宽比对细菌产纤维素酶的负向直接作用最大;葡萄糖产酸指标对纤维素酶活力有较强的负向直接作用;葡萄糖产气和酪蛋白实验指标对纤维素酶具有较强的正向直接作用;同时各个指标还通过其他指标对纤维素酶活力具有间接作用.     

白酒发酵副产物黄水中两株产纤维素酶芽孢杆菌的分离鉴定

利用羧甲基纤维钠（CMCNa）平板筛选法,从白酒发酵副产物黄水中分离得到12株产纤维素酶菌株,其中菌株M34和菌株N2的比酶活最大,被选为后续研究对象。根据细菌形态特征观察,生理生化特性分析并结合16SrRNA序列分析,鉴定菌株M34和菌株N2分别为环状芽孢杆菌（Bacilluscirculans）和内生芽孢杆菌（Bacillusendophyticus）。菌株经液态发酵培养,运用DNS法测定纤维素酶系酶活力,结果表明菌株N2的各酶活均高于菌株M34,其羧甲基纤维素酶活为0. 132U/mL,微晶纤维素酶活为0. 012U/mL,滤纸酶活为0. 041U/mL,β-葡萄糖苷酶活为0. 158U/mL。     

酸水解麸皮对斜卧青霉产纤维素酶的影响

通过对麸皮进行各种条件的酸水解试验，发现经酸水解的麸皮对发酵产纤维素酶有不同程度的提高，而且酶活与糖含量有一定的相关性。     

酒曲中产凝乳酶微生物菌株的分离筛选及鉴定

针对酒曲中的微生物进行分离纯化,得到11株细菌和2株真菌,并采用酪蛋白平板法和Arima时间法筛选出了1株产凝乳酶的细菌菌株编号为LB-51。通过形态学观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌,将该产凝乳酶菌株命名为解淀粉芽孢杆菌GSBa-1。该菌株在液体LB培养基中发酵72 h产凝乳酶的凝乳活力为(431.53±15.89)SU/mL,蛋白水解活力为(5.05±0.59)U/mL,所产凝乳酶凝乳活力高而蛋白水解活力低,凝乳酶粗酶单位酶活力为1.54×10~5SU/g。解淀粉芽孢杆菌GSBa-1是分离筛选自酒曲中的一株高产凝乳酶细菌,因此其来源安全,可作为工业化候选菌株进一步研究开发。     

巴里坤草原西伯利亚蝗虫肠道内高产纤维素酶菌株筛选

从采集到的新疆巴里坤草原西伯利亚蝗虫活体标本肠道内分离筛选高产纤维素酶细菌菌株并对其进行初步鉴定。采用常规方法分离肠道菌；利用羧甲基纤维素钠刚果红（CMC-Na）改良培养基初筛分解纤维素菌株，选取透明水解圈较大的菌株测其纤维素酶活力进行复筛；利用VITEK-32生化鉴定仪（法国梅里埃公司）对复筛菌进行鉴定。实验结果表明以羧甲基纤维素钠刚果红（CMC-Na）培养基作为初筛培养基效果较好，初筛到30株菌，选取水解圈较大的10株菌进行复筛，复筛得到4株产纤维素酶活性较高的菌株。经初步鉴定其中一株菌可能是干燥棒杆菌；另一株菌可能是耳葡萄球菌，两株菌未鉴定出。     

固态混菌发酵优化纤维素酶系技术

纤维素生物资源是世界上最丰富的可再生有机原料,纤维素的有效降解需要纤维素酶酶系间协同作用,采用单菌产纤维素酶存在酶系不完整和酶活力不高的缺陷。固体发酵生产纤维素酶具有能耗小,成本低等优点,利用产纤维素酶微生物的混菌发酵建立新的发酵工艺,可优化纤维素酶系结构组成,提高水解纤维素糖化率。介绍了固态混菌产纤维素酶的进展和主要趋势,并对其存在的问题进行了分析和展望。     

赊店老酒酒醅中高产纤维素酶菌种的分离鉴定及产酶条件优化

从赊店老酒酒醅中采用透明圈法筛选产纤维素酶的菌株,经过酶活力测定筛选出产纤维素酶能力最强的菌株,对其进行了形态学观察、生理生化试验和分子生物学鉴定,并通过单因素和响应面试验考察了不同条件对该菌株产纤维素酶能力的影响。结果表明,筛选得到产纤维素酶能力最强的菌株4-2,并被鉴定为特基拉芽孢杆菌（Bacillus tequilensis）。在液体发酵培养基中,该菌株最优产纤维素酶的条件为淀粉添加量3.5%,酵母粉添加量0.6%,初始pH 5.8,培养时间5 d,培养温度34 ℃。此优化条件下,该菌株产纤维素酶活力达3 101.83 U/mL,是优化前的20.69倍。     

一株产凝乳酶细菌的分离与鉴定

利用酪蛋白和麸皮培养基从奶牛场土壤中分离出高凝乳活力,低蛋白水解力的细菌.获得22株产凝乳酶细菌,其中菌株BB-23产凝乳酶活力高而蛋白水解活力低,经形态观察、生理生化和16S rRNA鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subalis),该菌株在麸皮培养基发酵72h后产凝乳酶活力达73.80SU/mL,蛋白水解力为16.01U.     

响应面法优化厌氧细菌产纤维素酶发酵培养基

通过单因素试验确定了厌氧纤维素降解细菌—溶纤维丁酸弧菌WHQ产纤维素酶的最佳培养条件,结果表明,最适产酶条件为培养时间48h,接种量10％,初始pH值8.5,温度37℃.在此基础上,应用响应面法优化该菌株产纤维素酶培养基.在初期研究中,葡萄糖和尿素确定为最佳的碳氮源,利用Plackett-Burman设计从10种培养基成分中筛选出对WHQ产内切纤维素酶有重要性的因素,结果表明葡萄糖、NaHCO,和MgSO4·7H2O对WHQ产内切纤维素酶有重要影响,利用Box-Behnken设计研究这3种因素对WHQ产内切纤维素酶的综合效应,结果表明3种因素的最佳值为MgSO4·7H2O 0.14g/L、葡萄糖14.3g/L、NaHCO3 6.92g/L,此时的内切酶酶活力最大值为206.548μg/(mL.min),与实验值相接近199.324μg/(mL·min),比未优化前的内切纤维素酶活力71.254μg/(mL·min)提高179％.     

天祝放牧牦牛生活环境土壤中一株产凝乳酶细菌的分离与鉴定

筛选高产凝乳酶细菌,并对其进行鉴定和产凝乳酶活力测定。利用酪蛋白培养基从天祝放牧牦牛生活环境土壤中筛选高产凝乳酶细菌,利用形态观察、生理生化检测、16S rDNA 序列分析对其进行鉴定,并采用Arima法和福林法分别测定凝乳酶活力和蛋白水解活力。获得18 株产凝乳酶细菌,其中菌株D3.11 产凝乳酶活力相对最高,鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),其在麸皮培养基中发酵72 h 产凝乳酶活力高达89.56 SU/ml,蛋白水解力为21.27U/ml。菌株D3.11 是一株高产凝乳酶细菌,可作为候选菌株进行进一步研究。     

低温纤维素酶产生菌的筛选、鉴定及酶学性质初步研究

从连云港高公岛海域采集海水和海泥样品,通过2216E平板初筛和摇瓶发酵复筛,得到一株产纤维素酶的菌株Z6。对该菌生物学特性进行研究,菌株Z6为革兰氏阴性杆状细菌、有荚膜、无芽孢。菌的生长温度范围为4～35℃,最适生长温度为25℃;最适生长pH为8;最适NaCl浓度为3%。根据其形态特征、生理生化特性和16SrRNA序列分析结果,初步鉴定为交替假单孢菌属(Pseudoalteromonassp.)。根据菌株16SrRNA同源性和系统进化树分析进一步鉴定菌株Z6属于Pseudoalteromonas carrageenovora。目前尚无Pseudoalteromonas carrageenovora产生低温纤维素酶的报道。菌株Z6所产纤维素酶的最适作用温度和pH分别为30℃和pH8,在10℃仍具有较高活性,具有较大的潜在工业应用价值。     

里氏木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的条件优化

为提高纤维素酶酶解秸秆产糖效果,以碱性双氧水处理过的玉米秸秆为发酵基质,进行里氏木霉与黑曲霉混合发酵的研究。通过单因素试验确定黑曲霉延迟接种时间、里氏木霉与黑曲霉接种比例 、发酵时间和固液比4个因素的最优水平。在此基础上,采用Box-Behnken响应面设计对混合发酵产酶条件进行优化,获得最佳产酶条件：黑曲霉延迟接种时间 36h,里氏木霉与黑曲霉接种比例 5:1、发酵时间7d、固液比2:50(m/V)、吐温-80体积分数0.4%、pH 5.0和装液量50mL/250mL。此时,滤纸酶力(FPA)可达1.224 IU/mL,β-葡萄糖苷酶活力(β-GA)可达0.315 IU/mL。采用高效液相色谱法,对最佳条件下的纤维素酶酶解秸秆的水解液进行检测。结果表明,两菌株混合发酵较单菌株发酵的纤维素酶系更加完整,且降解木质纤维素类原料产可发酵性糖的能力增强。     

纤维素酶和果胶酶对番茄红素提取的影响

以番茄组织为材料,用含体积分数2%二氯甲烷的石油醚为提取溶剂,研究添加果胶酶和纤维素酶提取番茄红素的实验。结果表明,果胶酶和纤维素酶混合使用比单一酶的提取效率高,且果胶酶的提取效果比纤维素酶要好。在果胶酶和纤维素酶混合质量比为2:1时,提取番茄红素的最佳条件为A3B2C2D4,即混合酶用量0.6g/100g、酶解温度35℃、pH5.0、酶解时间5h,然后2%二氯甲烷的石油醚提取20min,4000r/min离心10min。因此,添加果胶酶和纤维素酶,用2%二氯甲烷的石油醚提取,可以提高番茄红素的提取率。     

产纤维素酶细菌的激光诱变及产酶条件的优化

以产纤维素酶枯草芽孢杆菌HAS-8为出发菌株,利用氦—氖激光进行诱变育种。通过透明圈筛选和酶活力测定,筛选得到1株细菌HAS-8D,其纤维素酶活力提高68.2%。遗传稳定性试验证明它具有良好的遗传稳定性。经过正交试验优化,最终得到菌株HAS-8D的最佳发酵条件为麸皮2.0%、玉米粉1.0%,培养时间24h,起始pH为7.0,发酵后活菌数达到1.1×109CFU/mL,酶活力为684.35 U/mL。     

甘薯残渣纤维素酶解工艺研究

研究纤维素酶对甘薯残渣中纤维素降解工艺。以去除淀粉及提取果胶后的甘薯残渣为原料,采用单因素和正交试验方法对甘薯残渣的纤维素酶解工艺进行优化。结果表明,甘薯残渣纤维素酶解最佳工艺为,甘薯残渣固液比1∶25(g/m L),醪液pH 5.0,纤维素酶加入量50 U/g甘薯渣。在50℃下恒温培养16 h。此条件下,甘薯渣中纤维素的转化率可达(4.52±0.14)%。     

双酶改性制备玉米皮水溶性膳食纤维的工艺研究

以玉米皮超声提取天然水溶性膳食纤维后的副产物——不溶性玉米皮渣为试材,应用木聚糖酶和纤维素酶组合酶解制备水溶性膳食纤维,采用单因素和正交试验组合研究确立一套由水不溶性膳食纤维改性制备水溶性膳食纤维制备工艺。结果表明,最佳工艺参数为纤维素酶添加量40mg/g 底物、木聚糖酶添加量40mg/g 底物、料液比1:14(g/ml)、酶解时间90min,水溶性膳食纤维得率为5.96%。     

纤维素酶酶解啤酒糟的工艺研究

该文采取纤维素酶处理啤酒糟,旨在酶解啤酒糟中的纤维素。采用直接滴定法测定啤酒糟酶解液中的还原糖含量,通过单因素试验初步研究不同料液比、酶解时间、反应初始pH值、酶解温度、纤维素酶添加量等因素对酶解液中还原糖含量的影响。在此基础上,采用三因素三水平的正交试验优化其工艺条件。结果表明,纤维素酶酶解啤酒糟的最佳工艺条件为反应初始pH 6.0,酶添加量2.5%,酶解时间4 h。此时,酶解液中的还原糖含量为3.65 mg/mL。     

纤维素酶法提取南瓜多糖的工艺研究

采用纤维素酶法提取南瓜多糖。采用单因素试验设计考察了不同料液比、纤维素酶浓度、提取温度、冷冻时间对南瓜多糖提取率和纯度的影响,并通过正交试验确定了南瓜多糖的最佳纤维素酶法提取工艺为:料液比1∶30,纤维素酶浓度0.7%,提取温度50℃,冷冻时间30 h,在此条件下提取率为12.146%,纯度为36.942%。     

纤维素酶酶解醇葛根素研究

以提取葛粉后的葛根废渣为研究对象,采用微生物和代谢物酶解提制葛根素,通过高效液相色谱法分析葛根素含量,考察影响葛根素溶出的酶解时间、酶量、pH 值、固液比等参数,探索微生物与底物葛渣间的生物交互作用。实验结果表明：葛根废渣5g,纤维素酶量为底物40%,葛根废渣与水的质量比为1:10,pH 值为5,在30℃酶解36h 后,经乙醇浸提3h,可提取葛根素33.54mg,为葛根废渣的资源化再利用提供实验基础。