花生品质及制油工艺对毛油和饼粕中黄曲霉毒素含量的影响

对取自不同地区花生油加工企业的24个花生仁样品中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)和黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2总量(AFT)进行检测,挑选其中AFT高、中、低含量不同的3个花生仁样品分别进行低温压榨、高温焙炒压榨和正己烷溶剂浸出制油,检测不同制油工艺所得花生毛油和饼粕中AFT含量,分析研究花生仁品质及制油工艺对其毛油和饼粕中AFT含量的影响,探讨花生仁中AFT在不同制油过程向毛油和饼粕中的迁移规律。结果表明:23个花生仁样品中AFB_1含量为12. 45～33. 16μg/kg,平均值为20. 54μg/kg,AFT含量为14. 57～40. 48μg/kg,平均值为23. 45μg/kg;从花生仁原料中色选出来的变色霉变花生仁样品中AFB_1含量为91. 22μg/kg,AFT含量为99. 61μg/kg;用AFT含量不同(14. 57、40. 48、99. 61μg/kg)的3个花生仁样品分别制取的热榨、冷榨及浸出毛油中AFT含量分别为0. 48～40. 94μg/kg、0. 51～52. 82μg/kg、0. 34～13. 42μg/kg,平均值分别为13. 97、18. 06、4. 71μg/kg,分别是原料花生仁AFT平均含量的27. 10%、35. 03%、9. 14%,压榨毛油中AFT含量明显高于浸出毛油;用品质较好(AFB_1含量12. 45μg/kg)花生仁所制取的3个毛油中AFB_1平均含量0. 44μg/kg,仅为原料花生仁中AFB_1含量的3. 53%;用变色霉变花生仁所制取的3个毛油中AFB_1平均含量33. 39μg/kg,为花生仁中AFB_1含量的36. 60%,为国标限量1. 70倍。花生仁热榨饼、冷榨饼及浸出粕中AFT含量分别为11. 82～57. 96μg/kg、9. 51～52. 06μg/kg、16. 67～100. 00μg/kg,平均值分别为30. 25、25. 83、54. 62μg/kg,分别是花生仁中AFT平均含量的58. 68%、50. 10%、105. 96%,浸出粕中AFT含量明显高于压榨饼,AFT在花生饼粕中的迁移率和富集程度显著高于花生毛油。在花生油生产中优选花生仁原料并严格进行色选,是防范花生油和花生饼粕中AFB_1超标的关键。     

光化学衍生-高效液相色谱法测定 粮谷类样品中黄曲霉毒素

目的建立光化学衍生-高效液相色谱荧光法测定粮谷类样品中的黄曲霉毒素(AFT)含量。方法样品经Romer Labs免疫亲和柱净化,经SW-3光化学柱后衍生,经高效液相色谱分离和荧光检测器测定,分析其中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的含量。同时对免疫亲和柱洗脱条件、流动相的洗脱程序进行了优化。结果在0.5~10 ng/mL(AFT B_1,G_1)和0.15~3.0 ng/mL(AFT B_2,G_2)线性范围内,所得回归方程的相关系数均大于0.999。黄曲霉毒素B_1、G_1方法检出限为0.15 ng/g,黄曲霉毒素B_2、G_2方法检出限为0.05 ng/g,加标回收率为89.5%~107%,精密度为1.4%~7.2%。采集粮谷类样品222件,其中有5件样品检出AFT,但均未超过国家限值标准。结论该方法灵敏度和准确度较高,可适用于粮谷类食品中黄曲霉毒素的检测。     

免疫亲和柱-液相色谱法测定麦麸中黄曲霉毒素含量

为测定麦麸中黄曲霉毒素含量,试验建立了免疫亲和柱-高效液相色谱法。通过对10批样品检测结果的分析,初步考察了麦麸在黄曲霉毒素污染方面的安全性问题。样品经提取后,用免疫亲和柱净化,采用Syncronis C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-水(体积比30︰13︰57)为流动相,采用柱后碘衍生化法,用荧光检测器检测,激发波长为360 nm,发射波长为450 nm。黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1分别在0.004～0.019μg·kg~(-1)(r=0.999 9),0.011～0.053μg·kg~(-1)(r=0.999 9),0.004～0.022μg·kg~(-1)(r=0.999 9)和0.010～0.051μg·kg~(-1)(r=0.999 9)范围内线性关系良好,AFB~4_1、AFB_2、AFG_1、AFG_2最低检出限分别为5.6×10~-,2.3×10~(-4),1.08×10~(-3)和4.3×10~(-4)μg·kg~(-1)。高中低不同浓度的黄曲霉毒素的加样回收率平均值分别为95.23,94.24和93.23μg·kg~(-1)。RSD(n=6)在0.54%～1.41%之间。10批样品中均检出黄曲霉毒素G_2,含量低于0.1μg·kg~(-1),有2批样品检出黄曲霉毒素G_2、B_2、B_1,黄曲霉毒素总量低于0.16μg·kg~(-1)。该方法经方法学验证,可用于麦麸中黄曲霉毒素检测。     

免疫亲和柱层析-超高效液相色谱法测定动物性食品中6种黄曲霉毒素

目的建立一种快速、灵敏的超高效液相色谱法,同时测定动物性食品中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2、M_1和M_2。方法甲醇-水(80∶20,V/V)提取粉碎或匀浆动物性食品中的黄曲霉毒素,取部分样液经过免疫亲和柱层析净化,经C_(18)色谱柱(3.0 mm×50 mm,1.7μm)分离,荧光检测器检测。保留时间定性,峰面积定量。结果5 min内完成分离,黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2、M_1和M_2检出限分别为0.038、0.010、0.062、0.010、0.110、0.016μg/kg。标准曲线线性范围分别为AFB_1:1.28~20.4μg/L;AFB_2:0.32~5.08μg/L;AFG_1:1.26~20.2μg/L;AFG2:0.31~5.00μg/L;AFM_1:1.25~20.0μg/L;AFM_2:1.25~20.0μg/L,相关性在0.999 7~0.999 9之间。不同浓度水平6种黄曲霉毒素平均加标回收率在73.2%~94.1%之间,精密度在0.2%~3.8%之间。结论该方法可同时、快速、高效、准确测定动物性食品中6种黄曲霉毒素的含量。     

粮食中黄曲霉毒素和镰刀菌毒素共同污染的调

采集上海郊县1988年玉米样品50份、1989年玉米49份和小麦样品50份,用气相色谱分析法检测镰刀菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和雪腐镰刀菌烯醇(NIV)用酶联免疫测定法测定样品中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)。样本中 DON、NIV 和 AFB_1污染量中位数:1988年玉米样本分别为25.90ppb、12.70ppb 和0.15ppb;1989年玉米分别为36.40ppb、13.70ppb 和0.15ppb;1989年小麦分别为6.25、5.00和0.12ppb。1988年玉米样品中有26份同时检出 AFB_1、DON和 NIV,共同污染率为52.0%;89年玉米样品的 AFB_1、DON 和 NIV 共同污染率为59.2%(29/49);89年小麦为14.0%(7/50),可见黄曲霉毒素和镰刀菌毒素可共同污染粮食。另外,本调查分析中发现小麦和玉米中的 DON 和 NIV 污染量之间存在相关关系,而AFB_1与这两种毒素间不存在相关关系。     

液相色谱串联质谱法检测食品中的黄曲霉毒素分析

为提升黄曲霉毒素(AFT)检测的灵敏度,采用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法检测食品内4种AFT(B_1、B_2、G_1和G_2)。发现4种组分于5 min内整体分离,且该方法具有良好的线性相关性,B_1、B_2、G_1和G_2的检出限依次是0.11、0.009、0.012 μg/㎏和0.008 μg/㎏,加标回收率均值为80.0%～94.5%,RSD5.0%。用LC-MS/MS检测食品AFT,有速度快、灵敏度高、精确可靠等优势,有推广价值。     

多功能净化柱-高效液相色谱法同时检测食用油中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A

目的:研究并建立高效液相色谱法同时检测20批食用油中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2和赭曲霉毒素A的定量方法。方法:样品经涡旋、离心提取后,采用多功能净化柱对目标毒素净化富集,采用SHIMADZU Inertsil ODS-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),FLD检测器,以甲醇-0.5%乙酸水为流动相进行梯度洗脱,进样量为10μL,流速为0.8 m L/min,柱温为35℃,改变波长荧光检测并对方法学进行考察。结果:AFB_1在0.25~40.6 ng/m L(r=0.9999),AFG1在0.5~40.4 ng/m L(r=0.9997),AFB_2在0.06~10.06 ng/m L(r=0.9999),AFG_2在0.06~10.08 ng/m L(r=0.9999),OTA在1.01~50.5 ng/m L(r=1.00)范围内呈良好线性关系,5种毒素的加标平均回收率为91.40%~109.36%。样品检测结果表明,20批食用油样品中有4批样品检测结果呈阳性,均受到黄曲霉毒素G_1、G_2的污染。结论:该方法准确、快速,能够广泛用于食用油中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2和赭曲霉毒素A的定量检测。     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱柱后光化学衍生- 荧光检测器检测食品中黄曲霉毒素

目的建立一种免疫亲和固相萃取柱净化-高效液相色谱柱后光化学衍生-荧光检测器同时测定食品中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1和G_2的方法。方法以甲醇-水(70:30,V:V)为提取溶剂,采用高速均质提取,并经过黄曲霉毒素免疫亲和柱净化。结果经月旭公司Welch Ultimate~XB-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离后使用光化学衍生器进行柱后衍生,并采用带荧光检测器的高效液相色谱仪检测,流动相为甲醇/水(45:55,V:V)。黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1和G_2线性范围在0.3~50.0μg/L之间,线性相关系数均大于0.999,B_1、B_2、G_1和G_2检出限分别为0.15μg/kg、0.05μg/kg、0.15μg/kg、0.05μg/kg。在3个加标浓度下大米、花生和瓜子等试样的回收率在80.7%~92.6%之间;相对标准偏差(RSD)在2.04~3.87%之间。结论该方法的灵敏度、准确度和精密度均符合黄曲霉毒素的检测技术要求,且简便快速,适用于食品中黄曲霉毒素B_1,B_2,G_1和G_2的准确测定。     

柱前衍生高效液相色谱法检测酱醪中黄曲霉毒素的研究

目的:建立了一种基于柱前衍生的高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)检测酱醪中黄曲霉毒素(AFT)的方法。方法:通过利用免疫亲和柱净化后,经三氟乙酸(TFA)柱前衍生,建立了HPLC-FLD检测酱醪中AFT的方法,并对10种酱醪样品中AFT的含量进行了检测。结果:该方法中AFB_1,AFB_2,AFG_1,AFG_2的定量检测限(LOQ)分别为0.32,0.35,1.10,0.35ng/mL,且这4种AFT在0.5~50ng/mL之间线性关系良好,方法稳定。不同类型样品的检测结果表明:该方法可有效克服样品中脂肪、蛋白质等杂质的干扰,同时可用于检测AFB_1,AFB_2,AFG_1,AFG_24种黄曲霉毒素。结论:该方法灵敏度高,简单快捷,适用于酱醪中AFT的检测。     

酶联免疫吸附法测定云南铁皮石斛中黄曲霉毒素B1

目的建立酶联免疫吸附法测定铁皮石斛中黄曲霉毒素B_1(afatoxin B_1, AFB_1)的分析方法,并研究酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)和高效液相色谱法(highperformanceliquid chromatography, HPLC)测定云南铁皮石斛中AFB_1的结果差异性。方法用甲醇+水溶液(50+50, V/V)提取石斛中AFB_1,采用酶联免疫吸附法和高效液相色谱法同时检测云南铁皮石斛(铁皮枫斗)中AFB_1,进行准确性、精密度和回收率等方法学实验,比较2种方法的差异性。结果 ELISA法在测定范围内AFB_1与其对应的吸光度值之间呈良好的线性关系,回归方程Y=-34.798X+18.134,相关系数r~2为0.9967;添加1.0、4.0、10.0μg/kg3个浓度的平均加标回收率为85.3%～94.7%,相对标准偏差为2.57%～4.88%。2种方法的结果符合率为93.2%～117%,相对标准偏差均小于10%。结论 ELISA法具有操作简单、检测速度快、灵敏、特异性好等优点,可同时检测大批量样品中AFB_1的含量。     

富含色素类中药材中黄曲霉毒素的高效液相色谱-荧光检测方法研究

目的采用免疫亲和净化手段和高效液相色谱(HPLC)检测技术,建立富含色素类中药材中黄曲霉毒素(AFT)的测定方法,为中药材中AFT的检测和污染调查提供技术支撑。方法中药材样品经过高速粉碎均匀后,粉末状样品经80%甲醇水高速均质提取,提取液以磷酸盐缓冲液(PBS)稀释后,用免疫亲和柱(IAC)净化,以含吐温-20的PBS淋洗柱子后,用甲醇洗脱AFT,洗脱液经三氟乙酸衍生后用HPLC分析,C18反相色谱柱分离,用荧光检测器(FLD)测定,外标法定量。结果黄曲霉毒素G1、B1、G2和B2的最低检出限(LOD,S/N=3)分别为0.1、0.02、0.05和0.05μg/kg;以不含AFT、色素含量较高的枳实、绞股蓝、枇杷叶、鱼腥草和乌梅为基质,进行加标回收试验,加标水平为6.0~24μg/kg(以AFT总量计),AFT的平均回收率在62.3%~115%之间,RSD在0.92%~15.9%之间(n=3)。结论 IAC净化技术和HPLC-FLD相结合,用于4种AFT的检测可取得较为满意的结果,方法的准确度高、精密度好,各项指标均满足欧盟对食品中AFT检测的要求,方法可满足色素含量较高的中药材中4种黄曲霉毒素(AFT)的测定。     

碱液处理花生脱除花生油中黄曲霉毒素B1的研究

用碱液处理花生,检测压榨花生油中的黄曲霉毒素B_1(AFB_1)的含量及花生油质量指标。研究表明:碱液处理花生对脱除花生油中黄曲霉毒素B_1具有良好的效果。采用碱液pH 13. 40、碱液加入量10%的条件处理四级花生15 min,压榨花生油中AFB_1脱除率达93. 3%,采用p H 13. 44、碱液加入量7. 5%的条件处理三级花生25 min,压榨花生油中AFB_1脱除率达98. 0%。碱液处理对花生油的酸价有一定影响但在标准规定范围内,对过氧化值、碘值及脂肪酸组成无确定影响关系。     

低温射频等离子体降解农产品中黄曲霉毒素B1效果的研究

研究采用低温射频等离子体技术处理农产品中的黄曲霉毒素B_1(AFB_1),并通过HPLC分析其中黄曲霉毒素的降解率。结果表明,等离子体降解农产品中AFB_1效果显著,150 W等离子处理500 s,花生中AFB_1的降解率达到88.3%,玉米中AFB_1的降解率达到92.2%。等离子体功率越大,处理时间越长,AFB_1的降解率越大。在相同降解条件下,不同细度样品中AFB_1降解率有显著差异。花生、玉米粗粉试样中AFB_1的降解率低于花生、玉米细粉试样。     

3种改进液相色谱法测定植物油中黄曲霉毒素的比较研究

对柱后光化学衍生HPLC法、柱后碘衍生HPLC法及无衍生UPLC法测定植物油中4种黄曲霉毒素(AFB_1、AFB_2、AFG_1、AFG_2)含量的样品前处理条件和色谱条件进行改进并进行方法的比较研究。结果发现:样品前处理过程不采用氮吹、用50%甲醇溶液进样,用改进的色谱条件检测,油样中4种黄曲霉毒素均能被较好分离、定量,并简化了前处理过程;柱后光化学衍生HPLC法、柱后碘衍生HPLC法及无衍生UPLC法AFB_1的检出限分别为0. 035、0. 018、0. 045μg/kg,AFB_2的检出限分别为0. 016、0. 014、0. 017μg/kg,AFG1的检出限分别为0. 067、0. 024、0. 080μg/kg,AFG_2的检出限分别为0. 029、0. 026、0. 029μg/kg; 3种分析方法线性关系良好(r~2 0. 99),回收率为90. 7%～116. 1%,相对标准偏差低于12%; 3种分析方法测得花生油样品中4种黄曲霉毒素含量基本一致。3种分析方法均能够满足粮油检测工作的需要,具有实际应用价值。     

甜面酱中黄曲霉毒素B_1、B_2检测方法的研究

建立了用液相色谱测定甜面酱中黄曲霉毒素B_1、B_2含量的方法。试验采用C18色谱柱,以水-甲醇(55+45)为流动相,柱温25℃,荧光检测器检测。该方法黄曲霉毒素B_1、B_2检出限0.8μg/kg(进样量为50μL,S/N=30),标准曲线的线性范围分别为5~200μg/L(r=0.999 4,0.999 2)。该方法测定甜面酱中的黄曲霉毒素B_1、B_2,样品加标回收率(3份25.0 g样品,每份加标1,2和4μg)94.0%~98.3%、93.8%~99.4%,相对标准偏差RSD(n=10)0.78%、1.13%。     

SMART柱在线净化-HPLC/UVE荧光同时检测花生中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2

建立了SMART柱在线全自动净化-高效液相串联UVE荧光同时检测食品中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的方法。该方法以甲醇/水(4/1,v/v)提取样品,SMART柱全自动净化处理,以XDB C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为水/甲醇/乙腈溶液(60/30/15,v/v/v),流速1.0mL/min,激发波长365 nm,发射波长460 nm,柱温度36℃。结果表明,4种目标物在各自的线性响应范围内线性关系良好,相关系数(r)≥0.9992,黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的检出限分别是为0.070、0.020、0.068、0.018μg/kg;加标平均回收率(n=3)为82.6%~94.6%,相对标准偏差(RSD)为0.424%~4.879%。该方法前处理简单、净化效果好、灵敏度高、重复性好,适合于花生中痕量黄曲霉素的多残留快速检测。     

我国饲料中的真菌和真菌毒素

从全国各地采集271份样品,包括231份饲料和40份原料。其中205份饲料和29份原料检测了带菌量和菌相;同时还检测了216份饲料和38份原料中的四种真菌毒素。分离鉴定出25属83种真菌,包括毛霉目11种、青霉属28种、曲霉属23种、镰刀菌属2种和其它真菌19种。正常粉状饲料带菌量为10~3～10~4个/克;颗粒饲料带菌量为10~1～10~3个/克;霉变粉状饲料带菌量为10~6～10~7个/克;霉变颗粒料带菌量为10~4个/克以上。有92%的样品检出曲霉属;有73%的样品检出青霉属:有37%的样品检出串珠镰刀菌;有33%的样品检出毛霉属。在曲霉属中灰绿曲霉群,黄曲霉群和白曲霉群的检出频率分别达到75.9%、72.2%和67.5%。在青霉属中主要有产黄青霉、桔青霉、纯绿青霉和圆弧青霉。在饲料和原料中,黄曲霉毒素 B_1(AFB_1)的检出率分别为2.8%、28%,最高含量分别为220ppb、1756.6ppb;黄曲霉毒素 G_1(AFG_1)的检出率分别为0.4%、5.3%,最高含量分别为16.4ppb、34.4ppb;棕曲霉毒素 A(OA)的检出率分别为4.2%、2.6%,最高含量为1512ppb、19.4ppb;脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的检出率分别为12%、13.2%,最高含量为1044ppb、1111.2ppb。黄曲霉毒素主要污染广西和广东的样品。脱氧雪腐镰刀菌烯醇的污染较广泛。     

基于交流电动作用的免疫传感器快速高灵敏检测花生油中的黄曲霉毒素B_1

该文建立了花生油中黄曲霉毒素B_1(Aflatoxin B_1,AFB_1)快速准确的检测方法。利用交流电动作用对AFB_1进行加速和富集,然后在敏感元件微芯片上与固定的抗AFB_1单克隆抗体发生免疫反应从而导致电容规律性变化,构建AFB_1免疫传感器。结果表明,该方法可在30 s内完成加样、孵育和检测,实现对食用花生油中AFB_1的高灵敏度定量分析。该方法针对测试液中AFB_1浓度的线性范围为10~(-6)～10~(-2)μg/m L(R~2=0. 993 6);相对标准偏差(n=5)为6. 63%～15. 60%,最低检出限为2. 01×10-7μg/m L(3σ/S),定量限为2. 35×10~(-7)μg/m L(10σ/S),平均加标回收率为85. 20%～97. 70%,对AFB_2、AFM_1、AFG_1、OTA、DON、ZEN等可能共存毒素具有抗干扰性。     

高效液相色谱-质谱联用法测定薏苡仁药材中黄曲霉毒素

目的建立高效液相色谱-质谱联用法(high performance liquid chromatography-masss pectrometer,HPLC-MS)测定薏苡仁中药饮片中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的方法,并对比不同产地薏苡仁中黄曲霉毒素含量。方法样品经过免疫亲合柱处理后,采用HPLC-MS进行测定。分析柱为C18柱(50 mm×2.1 mm, 1.8μm),流动相为10 mmol/L醋酸铵溶液-甲醇溶液,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为25℃。结果黄曲霉毒素B_1在0.26～10.4ng/mL浓度范围内与峰面积值均呈现良好的线性关系(r~2=0.9995),平均加样回收率为75.4%～123.9%,黄曲霉毒素B2在0.0875～3.5 ng/mL浓度范围内与峰面积值均呈现良好的线性关系(r~2=0.9996),平均加样回收率为71.1%～124.2%,黄曲霉毒素G_1在0.295～11.89 ng/mL浓度范围内与峰面积值均呈现良好的线性关系(r~2=0.9995),平均加样回收率为78.9%～112.2%,黄曲霉毒素G2在0.1475～5.9 ng/mL浓度范围内与峰面积值均呈现良好的线性关系(r~2=0.9992),平均加样回收率为73.8%～123.9%。结论该方法准确、可靠、专属性强,通过精确化合物离子监测,可准确的测定薏苡仁中黄曲霉毒素含量。     

HPLC-MS/MS测定八宝粥中8种霉菌毒素

建立了测定八宝粥中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2,T-2毒素,赭曲霉毒素A,玉米赤霉烯酮和杂色曲霉素8种霉菌毒素的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法。样品经乙腈-水(88:12,V/V)超声提取、离心后,用多功能净化柱净化,以乙腈和5 mmol/L甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,经ZORBAX Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)分离,多反应监测(MRM)正离子模式进行检测,外标法定量。在0.5~50.0 ng/mL的浓度范围内,8种霉菌毒素均具有良好的线性关系(r≥0.999 6)。此方法的检出限为0.06~0.18μg/kg,平均回收率为73.5%~97.4%,RSD为4.6%~8.2%(n=7)。该方法简便、准确、灵敏,适用于八宝粥中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2,T-2毒素,赭曲霉毒素A,玉米赤霉烯酮和杂色曲霉素的同时检测。