高效液相色谱法测定玉米蛋白粉中游离氨基酸含量

建立高效液相色谱法同时测定玉米蛋白粉中17种游离氨基酸含量的方法。样品用盐酸溶液(0.1 mol/L)提取,采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)为衍生剂衍生。应用Nova-PakTM C_(18)柱,以10 mmol/L醋酸铵缓冲液、乙腈和超纯水为流动相进行梯度洗脱,柱温为37℃,检测波长为248 nm,外标法定量。结果表明,17种游离氨基酸线性关系良好,其中16种游离氨基酸在0.002 5~0.5μmol/mL范围内具有良好的线性关系,胱氨酸浓度在0.006 3~1.25μmol/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.999 1~0.999 9之间,回收率为95.10%~105.21%,RSD为1.36%~4.39%。该方法灵敏度高、重现性好、操作简单,可用于检测玉米蛋白粉中游离氨基酸含量。     

6种葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸含量测定及比较

以异硫氰酸苯酯为柱前衍生试剂,采用Thermo Acclaim~(TM) 120 C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相A为pH 6.5的乙酸钠缓冲溶液,流动相B为甲醇—乙腈—水(体积比20:60:20),在流速1.0mL/min,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长254nm的条件下,建立了高效液相色谱法测定葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量。结果表明,在试验浓度范围内,17种氨基酸的R~2均0.999 0;水解氨基酸的加样回收率为92.0%～104.6%,RSD为0.83%～4.07%;游离氨基酸的加样回收率为95.2%～102.4%,RSD为1.06%～3.98%。同时,6种葡萄籽中水解氨基酸的含量为130.46～163.24 mg/g,游离氨基酸的含量为2.04～5.13mg/g;用于酿造白葡萄酒的雷司令、赛美容和贵人香3种葡萄籽中游离氨基酸含量较高,用于酿造红葡萄酒的黑皮诺、蛇龙珠和赤霞珠3种葡萄籽中水解氨基酸含量较高。该方法稳定可靠,可用于葡萄籽中水解氨基酸和游离氨基酸的含量测定。     

啤酒中α-氨基酸含量的分析

采用茚三酮吸光光度法测定啤酒中的α-氨基酸含量.结果表明,在一定条件下,α-氨基酸含量(以氨基态氮表示)在0～0.32μg/mL范围内遵守朗伯比耳定律,方法的精密度(RSD)在1.2%～2.6%之间时,回收率在95%～108%之内,检出限为2.9μg/L,表观摩尔吸光系数为1.1×104L/mol·cm.本方法经用于啤酒样品分析,结果符合要求.     

柱前衍生RP-HPLC测定杨树花中氨基酸含量

【摘要】目的 建立一种采用柱前衍生-反相高效液相色谱法检测杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸含量的方法。方法 以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生, 采用高效液相色谱法检测杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸含量。结果 21种氨基酸线性范围为0.0019～2.7000 μmol?mL－1, R2均＞0.9990; 21种游离氨基酸的平均加样回收率在88.25％～100.04%之间、RSD 为0.57％～2.73％(n=6), 水解氨基酸的平均加样回收率在90.21％～100.01％之间、RSD 为0.52％～2.32％(n=6)。结论 该方法稳定、快速、精密度高、线性范围宽, 适合杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸的含量测定。     

柱前衍生HPLC法测定烟叶中20种游离氨基酸含量

建立了以2,4-二硝基氟苯(DNFB)作衍生化试剂,0.015 mol/L磷酸氢二钠和磷酸二氢钾缓冲液和50%乙腈水溶液为流动相,采用反相HPLC法测定烟叶中20种游离氨基酸含量的方法,并采用该法测定了7个烟叶样品.结果表明:①20种氨基酸的平均回收率在94.2%～118.4%之间;相对偏差小于3%;②4个烤烟样品中均未检出甲硫氨酸和异亮氨酸,均是脯氨酸含量最高,且2个上部烟叶样品中的游离氨基酸总量都大于2个中部烟叶样品;③7个烟叶样品中,唯有巴西白肋烟BCRA总氨基酸含量最高,其天门冬氨酸的含量显著地高于其他烟叶样品;④马里兰烟苯丙氨酸的含量在7个烟叶样品中是最高的,且其天门冬酰胺和脯氨酸含量显著地高于其它6个烟叶样品;希腊香料烟样品中的脯氨酸略低于马里兰烟.     

超高效液相色谱法测定不同黄酒中17种氨基酸的分析研究

建立一种快速准确的柱前衍生-超高效液相色谱法,同时测定黄酒中17种游离氨基酸含量。黄酒样以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)衍生化处理,以流速为0.7 mL/min经Waters AccQ·TagTM Ultra C_(18)(1.7μm,2.1×100 mm)的色谱柱梯度洗脱,利用二极管阵列检测器,在260 nm波长处检测。结果显示,17种游离氨基酸浓度在25～400μmol/L范围内,峰面积与浓度之间具有良好的线性关系(R~2≥0.9993),回收率在94.21%～104.82%。该方法可在11 min内将17种游离氨基酸完全分离,具有准确、快速、重复性好的特点,可用于黄酒中游离氨基酸含量的测定。     

流动分析法测定白肋烟烟叶中的氨态氮

根据烟叶总氮的测定原理,采用蒸馏水提取和流动分析法测定了白肋烟烟叶中的氨态氮.结果表明:在0.010-0.050 g/L浓度范围内,该法的工作曲线线性良好(相关系数为0.9999),回收率在94%～108%之间,RSD为0.28%.该法适用于批量白肋烟烟叶中氨态氮的快速分析.     

越橘提取物中花色苷及游离花青素的测定

目的研究建立越橘提取物中花色苷及游离花青素的检测标准。方法采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定花色苷类成分及游离花青素的含量。结果游离花青素的含量以矢车菊素为对照测定,其在4.75～475.24ng的范围内线性关系良好(r=1.0000),加样回收率为101.7%,RSD为1.3%(n=9)。花色苷的含量以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为对照测定,其在51.03～5103.24ng的范围内线性关系良好(r=1.0000),加样回收率为99.4%,RSD为0.5%(n=9)。结论本文建立的游离花青素检查方法及花色苷类成分含量测定方法简便、准确,可作为越橘提取物的质量控制标准。     

超高效液相色谱法测定烟叶中的茄尼醇含量

为了更简便高效地分析烟叶中游离茄尼醇的含量,建立了一种超高效液相色谱(UPLC)快速分析方法。将烟叶样品用甲醇超声提取10 min,经膜过滤直接进行超高效液相色谱分析;在1.7μm BEH C18色谱柱上用甲醇洗脱,在5 min内实现了茄尼醇的快速分离,并用电喷雾四级杆-飞行时间质谱(Q-TOF-MS)对m/z 613.57和631.58进行了定性分析。结果表明,茄尼醇的质量浓度范围为0.765～76.5μg/mL时,峰面积与质量浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.99924,方法的检出限7.65 ng/mL,RSD为2.62%,平均回收率为91.1%。该方法适合于烟叶中游离茄尼醇含量的快速准确测定。     

香料烟中游离氨基酸含量随施肥量的变化

对依兹密尔香料烟3个部位烟叶中的游离氨基酸含量随施肥量的变化进行了研究,结果表明:(1)在同等施肥量条件下,成熟鲜烟叶中总游离氨基酸的含量随烟叶着生部位的升高而增加,但每一种氨基酸的表现又有所不同;(2)不同部位烟叶总游离氨基酸的含量与施肥量的关系规律表现不明显;(3)在施肥量较低(纯氮30～37.5kg/hm2)时各部位烟叶中苯丙氨酸、脯氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸的含量总体表现较高,这有利于提高烟株的抗病性和烟叶质量。     

福建烟叶游离氨基酸等主要含氮化合物与感官质量的关系

  目的  为明确烟叶游离氨基酸等主要含氮化合物与感官质量的关系。  方法  以烤烟品种云烟87为试验材料,测定不同施氮量和留叶数对初烤烟叶各叶位的烟碱、总氮、蛋白质、20种游离氨基酸含量的影响,通过感官质量评价分析主要含氮化合物与感官质量的关系。  结果  1）不同部位烟叶游离氨基酸总量差异显著,依次为下部叶＞上部叶＞中部叶;2）简单相关分析表明,总氮、蛋白质、游离氨基酸总量以及非烟碱氮占总氮含量的比例,与感官质量呈极显著的负相关关系;脯氨酸占游离氨基酸总量的比例,与感官质量呈极显著的正相关关系;3）逐步回归分析表明,在烟碱、蛋白质和20种游离氨基酸中,谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸对感官质量的负面效应大于烟碱、蛋白质以及其它游离氨基酸。4）在8个处理中,施氮量127.5 kg/hm2、留叶数14片/株处理的烟叶,非烟碱氮、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸含量以及游离氨基酸总量最低,感官质量较好。  结论  控制烟叶非烟碱氮含量,尤其是降低谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸以及游离氨基酸总量,有利于提高烟叶品质。      

烟叶烘烤过程中蛋白质的降解及相关酶活性的变化

  目的  明确不同成熟度烤烟烘烤过程中蛋白质降解规律。  方法  以K326为材料,分析烟叶蛋白质、游离氨基酸含量,内肽酶、氨肽酶和羧肽酶活性变化情况。  结果  1）烘烤过程中,烟叶蛋白质含量持续下降;2）蛋白质的降解幅度与内肽酶活性密切相关。与尚熟烟叶相比,适熟和过熟烟叶在变黄前期内肽酶活性最高,蛋白质含量降解幅度大。3）游离氨基酸含量升高幅度与氨肽酶和羧肽酶活性有关。与适熟和过熟烟叶相比,尚熟烟叶在变黄后期,氨肽酶和羧肽酶活性较高。  结论  适当延长变黄期（36~38℃）烘烤时间,有利于保持烟叶内肽酶的活性,减少不同成熟度烘烤烟叶中蛋白质的含量。      

烤烟游离氨基酸与感官品质的关联及烘烤过程的变化规律研究

为明确烤烟游离氨基酸与感官品质的关联性及烘烤过程的变化规律,连续2年制备了我国3类香型6个产区335份不同质量特征烟叶样品,系统研究了游离氨基酸与感官品质的相关性,并跟踪分析了烘烤过程游离氨基酸含量和组成的变化。结果表明:（1）烟叶游离氨基酸含量与感官品质总体呈负相关,碱性、芳香族和γ-ABA等氨基酸的关联规律在不同产区、年份表现稳定。（2）Lys、Phe等多数游离氨基酸含量在烘烤过程存在先上升后下降的变化趋势,碱性、芳香族氨基酸和γ-ABA在烘烤中后期的相对下降趋势强于其他种类氨基酸。（3）结合品质关联和烘烤过程变化分析结果,游离氨基酸与烟叶感官品质的稳定负关联规律可能与烘烤过程参与美拉德反应有关。游离氨基酸指标在烤后烟叶品质评价中具有较好应用前景,烘烤过程针对性降低游离氨基酸含量有利于烤后烟叶感官品质提升。      

烟叶中游离态和结合态有机酸含量分析

  目的  烟叶中有机酸是卷烟香气质量和风格特征的重要组成部分,本文的目的是考察烟叶中不同形态有机酸含量差异。  方法  采用调整pH值后萃取然后硅烷化-GC-MS/MS测定的方法,测定33种有机酸的游离态和盐类结合态总量。采用皂化然后硅烷化-GC-MS/MS测定的方法,测定有机酸游离态、有机酸盐类和酯类的总量。  结果  ① 所建方法测定了烟叶中33种有机酸的皂化总量和萃取量,回收率、日内及日间精密度较好、灵敏度高;②部分有机酸皂化前后含量变化很大,其中2-甲基丁酸、3-甲基戊酸、4-甲基戊酸皂化总量为萃取量的10倍以上,说明这些酸在烟叶中主要以酯的形式存在;③四种类型烟叶中（烤烟、白肋烟、香料烟、晒红烟）,香料烟的短链脂肪酸皂化总量是最高的,且皂化总量与萃取量比值均大于50（除己酸外）。烤烟中长链脂肪酸和其他有机酸皂化总量最高,且皂化总量与萃取量比值均大于5。      

砍收期与白肋烟游离氨基酸含量变化及品质的关系

用日立835-50 型氨基酸自动分析仪,探索白肋烟砍收期游离氨基酸变化及对烟叶品质的影响。结果表明,检测的 16 种氨基酸中,谷氨酸、天冬氨酸、脯氨酸含量较高,三者合计占总量的63.6%～74.33%,其它13 种较低合计占25.67%～ 36.40%。不同砍收期各部位叶总游离氨基酸含量差异较大,下部叶以3 周时最高,5 周时最低,中部叶、上部叶分别是4 周、 5 周最高,均以6 周时最低,三部位平均以4 周最高,5 周最低。砍收期对各部位氨基酸含量的影响为下部叶>上部叶>中部 叶,对丝氨酸、组氨酸、异亮氨酸的影响较大,而对苯丙氨酸、谷氨酸、总游离氨基酸的影响较小。以打顶后下部3 周、中 部4 周（或全整株收晾）、上部5 周收晾,更有利于各部位烟叶品质的提高。     

采收时期及调制方式对万源晒烟调制前后氨基酸含量变化的影响

为研究不同采收时期和调制方式对万源晒烟烟叶调制前后氨基酸含量和比例变化的影响,以主栽晒烟品种万毛3号为材料,设计采收时期和调制方式试验,对调制前后的烟叶样品进行检测。结果表明,晒烟鲜烟叶氨基酸总量平均为147.9 mg/g,以谷氨酸和天冬氨酸最高,分别占总量的12.5%和10.7%;受采收期影响,天冬氨酸及氨基酸总量随采收期推迟先减少后增加,谷氨酸含量则先增加后减少。调制后烟叶中氨基酸总量降至104.0 mg/g,降幅29.7%。但天冬氨酸含量显著增加,增幅28.9%,占氨基酸总量比例增至23.6%,谷氨酸及其他多数氨基酸含量显著下降。采收时期和调制方式对调制后烟叶各氨基酸含量均有影响,随采收期推迟,晾制条件下氨基酸总量持续上升,晒制条件下则呈先上升后下降趋势;调制方式对天冬氨酸的含量影响较大,烟叶成熟度低时晒制烟叶天冬氨酸含量高于晾制烟叶,成熟度高时则是晾制烟叶高于晒制烟叶。      

烟叶类型和外加成分对卷烟烟气粒相物pH值的影响

捕集在剑桥滤片上的卷烟主流烟气粒相物用去CO2 的蒸馏水提取 ,用精密 pH值计测量水提取液的 pH值。对于不同的单料烟卷烟 (包括烤烟、白肋烟、香料烟 )和不同类型的卷烟 (包括中式烤烟型、英式烤烟型、美式混合型 )的烟气pH值进行了测定 ,结果分别呈下列顺序 :白肋烟 >香料烟 >烤烟 ,混合型 >英式烤烟型 >中式烤烟型。分别将各种糖类、有机酸类、无机酸类、氨基酸类、生物碱类、盐类、酚类成分加入对照卷烟 ,探讨了这些化学成分对烟气 pH值的影响规律 ,结果表明 ,乳酸、蔗糖等可显著降低烟气pH值 ,烟碱可显著增加烟气pH值。提供了国内外一些卷烟牌号的烟气pH值测定数据。     

烟草中游离氨基酸的自动分析仪测定

以茚三酮为显色剂(溶液流速:0.30mL/min),柠檬酸钠水溶液为缓冲液(流速:0.45/min),在柱温53℃、反应温度138℃及570nm和440nm检测波长下利用氨基酸自动分析仪测定了国产和进口18种白肋烟烟叶和11种混合型卷烟中的游离氨基酸含量。结果表明:①进口白肋烟烟叶的游离氨基酸总量明显高于国产烟叶;②进口白肋烟中的天冬氨酸、谷氨酸含量高于国产烟叶,而国产白肋烟中的脯氨酸含量高于进口烟叶;③进口混合型卷烟的游离氨基酸总量明显高于国产卷烟,尤其是天冬氨酸、白氨酸、酪氨酸和脯氨酸。     

CO2膨胀前后烟丝中游离氨基酸的变化

为了解CO2膨胀前后烟丝化学成分的变化,采用超声波水解提取和反相高效液相色谱法测定了不同产地和不同部位的6种烟丝膨胀前后的游离氨基酸,共测定了16种游离氨基酸.结果表明烟丝经CO2膨胀后,其脯氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸和异亮氨酸等总体呈下降趋势;精氨酸及天冬氨酸等总体呈上升趋势.16种游离氨基酸的总量除福建下部ZO1略有上升外,其余均有所下降,其中福建B3F和福建上部BO1的降幅较为明显.     

主流烟气氨释放量与烟叶中蛋白质和氨基酸含量相关性研究

摘要:运用方差分析法研究了不同产区、不同部位的烟叶中蛋白质、氨基酸的含量和主流烟气中氨的含量的差异。采用描述统计、逐步回归分析、偏相关分析和通径分析研究了烟叶中蛋白质、氨基酸含量与主流烟气中氨含量的关系,建立了多元逐步回归方程。结果表明:烟叶中蛋白质、脯氨酸与主流烟气中氨呈极显著相关;烟叶中蛋白质、脯氨酸与主流烟气中氨含量的相关主要取决于直接作用。