菜籽多肽体外和细胞内抗氧化性评价及氨基酸分析

本研究以Alcalase 2.4L酶解“双低”油菜籽宁杂19号得到的菜籽蛋白酶解物（rapeseed protein hydrolysate,RPH）为原料。通过超滤和凝胶色谱分离其活性肽组分,对酶解液及各分离组分进行抗氧化活性研究,并对抗氧化能力最高的组分进行氨基酸分析。结果表明：通过超滤将RPH分离成4 组不同分子质量范围的多肽组分,其中RPH-P4（分子质量＜3 kD）具有最高的抗氧化活性;RPH-P4经Sephadex G-15凝胶柱分离后得到3 个洗脱峰,收集并测定其活性,研究发现RPH-P4-S3抗氧化能力远高于其他2 个组分（P＜0.05）,氧自由基吸收能力（oxygenradical absorbance capacity,ORAC）、细胞抗氧化活性（cellular antioxidant activity,CAA）、细胞内CAA实验的EC50值分别为（1 951.90±20.35） μmol TE/g、（143.38±4.11） μmol QE/g、（45.63±3.67） μg/mL;对RPH-P4-S3进行了氨基酸分析,发现其抗氧化性氨基酸含量达到72.90%,必需氨基酸含量为53.52%。研究认为,菜籽蛋白Alcalase 2.4L酶解物分离组分RPH-P4-S3具有较高的抗氧化活性及营养价值,可以作为功能性成分用于抗氧化相关的功能食品和保健品的开发。     

苦荞麸皮黄酮抗氧化及抗肿瘤活性

以西南地区的两种苦荞麸皮为实验材料（重庆酉阳苦荞麸皮（T1）;四川西昌苦荞麸皮（T2））,通过氧化自由基吸收能力实验（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）测定苦荞麸皮黄酮的化学抗氧化能力,采用人肝癌细胞HepG2为细胞模型,研究苦荞麸皮黄酮的细胞抗氧化活性（cellular antioxidant activity,CAA）及对He pG2 细胞抗增殖活性。结果表明： T 1 和T 2 苦荞麸皮黄酮的ORAC值分别为（ 5 7 . 0±3 . 5 ） 、（73.6±6.3）μmol TE/g。T1和T2苦荞麸皮黄酮的细胞抗氧化值分别为（44.4±5.2）、（52.5±2.7）μmolQE/100 g（PBS清洗）;（32.9±3.2）、（30.9±2.2）μmol QE/100 g（不经PBS清洗）。在对HepG2细胞体外抗增殖活性研究实验中,通过与对照组细胞相比,发现当苦荞麸皮黄酮的质量浓度为21.9 mg/mL时,T1和T2苦荞麸皮黄酮对HepG2细胞增殖的抑制率分别约为51%和82%（P＜0.01）,二者相应的EC50值分别为（23.0±0.5）mg/mL和（13.7±0.1）mg/mL。因此,苦荞麸皮黄酮具有一定的体外细胞抗氧化和抗增殖的能力,可将苦荞麸皮作为此类功能性食品开发的原料资源。     

菜籽肽的ACE、肾素抑制活性及抗氧化性研究

本研究采用1、3、5、10 ku的超滤膜分离菜籽蛋白嗜热菌蛋白酶水解物(TPH),得到了4种不同分子质量的菜籽肽,研究了各菜籽肽的血管紧张素转化酶-Ⅰ(ACE)抑制活性、肾素抑制活性、氧自由基吸附能力(ORAC)和细胞抗氧化(CAA)活性。结果表明,菜籽肽的分子质量与其ACE抑制活性、肾素抑制活性以及ORAC值有明显的正相关性(P0.05);1 ku的菜籽肽的ORAC值远高于TPH的,其ORAC值(Trolox)高达(4 363.53±45.87)μmol TE/g,是谷胱甘肽(GSH)的2.4倍,其中2个菜籽肽的ORAC值与GSH相当(p0.05);细胞抗氧化试验表明TPH的CAA值最高,为(26.53±1.71)μmol QE/g,其次是1 ku组分,其CAA值是(23.91±0.69)μmol QE/g。研究认为,菜籽蛋白酶水解物及各菜籽肽不仅具有ACE和肾素双重抑制活性,还有一定的氧自由基吸收能力。因此,菜籽蛋白可用于开发降血压制剂或相关功能性产品。     

菜籽蛋白水解物及其分离组分抗氧化性研究

本文采用超滤和凝胶过滤色谱技术分离菜籽蛋白的胃蛋白酶和胰蛋白酶混合水解物(PPH),并通过分析其Fe~(2+)螯合能力、Fe~(3+)还原力、DPPH自由基清除能力和氧自由基吸附能力(ORAC),评价了PPH及其分离组分的抗氧化性。结果表明:菜籽蛋白酶水解物中F3组分的Fe~(2+)螯合能力、Fe~(3+)还原力以及DPPH清除能力和ORAC值都最高,F3组分的ORAC值为(2 118.891±77.782)μmol TE/g,是GSH的1.6倍左右,说明F3组分的抗氧化性最强,其余组分也都表现出一定的抗氧化性,其抗氧化性强弱为:F3F4F2F1F5。研究认为,胃蛋白酶和胰蛋白酶组合可有效水解菜籽蛋白获得抗氧化肽,获得的分离组分(尤其是F3)可以作为抗氧剂开发相关功能性食品。     

乳清蛋白源铜螯合肽抗氧化活性评价

对以脱盐乳清蛋白粉为原料的乳杆菌A-2代谢产物中铜离子螯合活性多肽进行分离纯化并进行其抗氧化活性的评价。采用铜离子固定化金属离子亲和层析柱分离,筛选具有铜离子螯合活性多肽,得组分F1、F2、F3,分别经Sephadex G-15凝胶过滤柱层析经进行脱盐分离,得到组分F1-1、F1-2、F2-1、F2-2、F3-1、F3-2,采用ABTS法与抗氧化指数（oxygen radical absorbance capacity, ORAC）法进行抗氧化活性测定,组分F2-1的清除ABTS阳离子自由基能力IC₅₀值为（3.068±0.15） g/L,组分F3-1的清除ABTS阳离子自由基能力IC₅₀值为（5.510±1.56） g/L;组分F2-1的相对ORAC值为（1 246.59±0.72）μmol TE/g,组分F3-1的相对ORAC值为（518.83±1.15）μmol TE/g。组分F2-1、F3-1与铜离子螯合率分别为（59±1.45）%和（6±0.32）%。结果表明,组分F2-1、F3-1具有铜螯合活性组分,具有良好的抗氧化活性。该实验为...     

不同产地尖顶羊肚菌多酚组成及抗氧化活性研究

为研究不同产地羊肚菌多酚的抗氧化活性及组成,以3 种不同产地（云南、西藏、新疆）尖顶羊肚菌为原料,提取羊肚菌游离酚和结合酚,测定其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力、还原力、2,2’-联苯-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate）,ABTS）自由基清除能力和抗氧化能力指数（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）值,并通过高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）分析其组分。结果表明,3 种尖顶羊肚菌平均总酚含量为5.958 mg GAE/g,游离酚约为结合酚的25 倍;云南尖顶羊肚菌游离酚、结合酚含量最高（（6.157±0.192）、（0.250±0.018） mg GAE/g）,西藏尖顶羊肚菌游离酚、结合酚含量最低（（4.928±0.045）、（0.188±0.026） mg GAE/g）。3 种尖顶羊肚菌多酚组分主要为酚酸和黄酮,组成较一致,但含量差异显著。体外抗氧化结果表明：3 种尖顶羊肚菌多酚均具有一定的抗氧化活性,其中对DPPH自由基的清除能力最强;西藏尖顶羊肚菌多酚的DPPH自由基清除能力和还原力最强;新疆尖顶羊肚菌多酚的ABTS＋·清除能力最强,ORAC值也最高。     

昆仑雪菊结合型黄酮类化合物的分离与鉴定

昆仑雪菊结合型黄酮类化合物因与细胞壁以共价键结合,难以直接用溶剂萃取出来。本研究采用碱降解法使结合型化合物释放出来并优化降解条件,在此基础上,利用不同溶剂对降解产物进行提取筛选出最佳的溶剂得到粗提物,利用常压硅胶柱层析和SepdexLH-20凝胶柱层析对粗提物中的黄酮类化合物进行分离纯化得到单体化合物,采用Fe3+还原/抗氧化能力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-（2,4,6-trinitrophenyl）hydrazyl,DPPH）法及2,2’-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐（2,2’-Azinobis-（3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate）,ABTS）法对单体化合物进行抗氧化活性评价。结果表明：最佳的碱降解时间2 h、温度50 ℃、NaOH浓度2 mol/L,最佳提取溶剂为正丁醇;从粗提物中分离得到2 个单体化合物,采用核磁共振（nuclear magnetic resonance,NMR）和电喷雾质谱（electrosprayionization mass spectra,ESIMS）鉴定其化学结构分别为金鸡菊查尔酮-4’-O-β-D-吡喃葡萄糖（化合物1）、3’,4’,7,8-四羟基二氢黄酮（化合物2）;活性测定结果表明两个化合物的总抗氧化能力均强于阳性对照VE,化合物1与化合物2对DPPH自由基的半数抑制率IC50分别为（17.29±0.17）μmol/L和（70.09±0.09）μmol/L、对ABTS＋·半数抑制率IC50分别为（22.86±0.21）μmol/L和（33.4±0.18）μmol/L,远低于阳性对照VE的IC50值（分别为（78.08±1.63）μmol/L和（38.54±0.42）μmol/L）,说明两个化合物均有很强的抗氧化活性。     

厚朴多糖提取工艺及其体外抗氧化活性

通过Box-Behnken试验优化提取厚朴多糖的工艺;以超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-二苦基肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）（ABTS＋•）清除能力,Fe2＋螯合力、铁离子还原抗氧化力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）为指标,探究厚朴多糖的体外抗氧化活性。结果表明,提取厚朴多糖的最佳工艺条件为pH 7.3、液固比32∶1（mL/g）、提取温度78 ℃、提取时间139 min,此条件下多糖提取率达3.35%～3.52%。体外抗氧化活性结果表明,厚朴多糖超氧阴离子自由基清除力为（18.72±2.12） μmol VC/mg,DPPH自由基清除能力达（0.59±0.05） μmol Trolox/mg,ABTS＋•清除能力为（0.57±0.04） μmol Trolox/mg,Fe2＋螯合力为（0.38±0.02） μmol EDTA/mg,FRAP值为（2.19±0.31） μmol Trolox/mg。     

ORAC法评价16种茶叶的抗氧化能力

目的评价4类不同发酵类型16种茶叶样品总抗氧化能力。方法采用氧自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity,ORAC)法。结果闽红茶样品ORAC值最高,为1379.1μmol TE/g,其次为乌龙茶水仙,其ORAC值为1270.7μmol TE/g,第三位绿茶品种的古丈毛尖,其ORAC值为1247.1μmol TE/g。绿茶样品整体均具有较高的ORAC值,但4类茶叶的ORAC值无统计学差异(P0.05)。结论 4类茶叶样品均具有一定的抗氧化活性,但尚不能认为不同种类茶叶的ORAC值不同。     

基于HepG2细胞模型的香菇柄粉多酚抗氧化及抗增殖活性

以人肝癌细胞HepG2为细胞模型,经过不同粉碎条件处理香菇柄粉后,研究香菇柄粉游离酚的细胞抗氧化及多酚抗增殖活性。结果表明：香菇柄粉游离酚的细胞抗氧化活性（cellular antioxidant activity,CAA）值为9.90～24.22 μmol QE/100 g,普通粉碎组最高,纳米超微粉碎组最低,CAA值随粉体粒径减小而降低（不经磷酸盐缓冲液（phosphate buffer saline,PBS）清洗）;气流超微粉碎组CAA值为0.65 μmol QE/100 g,普通粉碎组和纳米超微粉碎组未表现出细胞抗氧化活性（PBS清洗）。香菇柄粉游离酚的抗增殖活性（半数有效浓度（medianeffective concentration,EC50）值）为1.888～5.213 mg/mL,结合酚的抗增殖活性（EC50值）为2.225～4.751 mg/mL,气流超微粉碎处理对香菇柄粉结合酚的抗增殖活性有增强作用。     

基于体外模拟消化的黑脉羊肚菌多酚细胞抗氧化及抗增殖活性

以黑脉羊肚菌多酚提取物为研究对象,通过体外模拟消化实验,研究消化过程中消化液多酚含量及氧自由基吸收能力的变化;研究体外模拟胃、肠消化对人肝癌细胞（HepG2细胞）和人结肠癌细胞（Caco-2细胞）的毒性及抗增殖活性的影响;并以HepG2细胞为模型对细胞抗氧化活性（cellular antioxidant activity,CAA）进行评价。结果表明：体外模拟消化后,黑脉羊肚菌多酚释放及氧自由基吸收能力均有提高,模拟胃、肠消化过程中多酚释放分别在1 h和0.5 h达到最高并保持稳定。细胞实验表明,在不产生细胞毒性的范围内,胃0 h、胃液1 h、肠液0.5 h对HepG2的抑制率分别为41%、45%、91%;对Caco-2细胞的抑制率分别为73%、96%、90%。CAA结果显示,胃消化处理的样品表现出促氧化的作用,肠消化处理的样品表现出抗氧化的作用,肠液0.5 h的CAA值为（70.506±0.011）μmol QE/100 g（以干质量计）。由此可见,体外模拟消化处理黑脉羊肚菌具有一定的抗氧化及抗增殖活性,为羊肚菌功能活性的开发提供了理论依据。     

响应面试验优化超声辅助提取连钱草多糖工艺及其体外抗氧化活性

通过中心复合试验优化超声辅助提取连钱草多糖的工艺,以1,1-二苯基-2-苦肼基（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）自由基（2,2’--azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radical,ABTS＋•）清除能力、Fe2＋螯合力、铁离子还原抗氧化力（ferric reducingantioxidant power,FRAP）和N,N-二甲基-对苯二胺（N,N-dimethyl-p-phenylenediamine,DMPD）自由基清除能力为指标,研究连钱草多糖的体外抗氧化活性。结果表明,超声辅助提取连钱草多糖的最优工艺为pH 7.2、液固比32∶1（mL/g）、超声功率270 W、超声时间8 min,此条件下多糖提取率在4.95%～5.12%范围内。体外抗氧化活性结果显示,连钱草多糖DPPH自由基清除能力为（0.51±0.04）μmol Trolox/mg,ABTS＋•清除能力为（0.69±0.04）μmolTrolox/mg,Fe2＋螯合力为（0.51±0.29）μmol EDTA/mg,FRAP值为（3.45±0.03）μmol Trolox/mg,DMPD自由基清除能力为（0.17±0.01）μmol Trolox/mg。     

不同食用菌菌糠多糖的组分分析与抗氧化活性评价

目的：比较茶树菇、香菇、白玉菇、平菇和蛹虫草菌糠多糖的组成与抗氧化性。方法：通过酶解水提、乙醇沉淀和Sevag法脱蛋白步骤获得5 种菌糠多糖,进一步对其组成和抗氧化性进行分析评价。结果：5 种菌糠多糖均具有不同程度的抗氧化性,其中茶树菇菌糠多糖的氧自由基清除能力（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）值和铁离子还原能力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）值最佳,分别达到了1 215 μmol Trolox/g和281 μmol Fe2+/g;而白玉菇与平菇的菌糠多糖对2,2’-联氮基双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis（3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnicacid）diammonium salt,ABTS）自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力较强。     

云南野生翅果藤营养活性成分分析

为研究翅果藤的食用价值,以成熟翅果藤果实为原料,测定其理化、营养活性成分、抗氧化能力。结果表明,翅果藤鲜果中水分含量为90.50%,蛋白质、可溶性蛋白含量分别为（11.29±0.228）、（7.19±0.129）mg/g,脂肪含量为（1.28±0.073）mg/g。翅果藤的矿物质含量略低于韭菜和西葫芦,但高于苹果的矿物质含量。翅果藤干粉的多糖含量高达（36.86±0.73）%,多酚和黄酮的含量分别为（30.52±0.86）、（8.34±0.24）mg/g。抗氧化活性中的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力为（362.24±17.89）mg/g（阿魏酸当量）,铁离子还原能力为（131.49±8.34）mmol/g,总抗氧化能力为（357.12±13.11）mg/g（VE当量）,还原能力为（1 066.67±24.23）μg/g（VC当量）。因此,翅果藤具有一定的营养价值和较高的抗氧化活性,开发和应用前景广阔。     

野生桃金娘主要抗氧化成分及其抗氧化能力

本实验研究了野生桃金娘（Rhodomyrtus tomentosa）的抗氧化能力、总多酚含量、总黄酮含量、抗坏血酸含量和花青素类成分。采用超高效液相串联光电二极管阵列（photo-diode array,PDA）检测器和离子肼质谱法（ultra performance liquid chromatography coupled to photo-diode array and ion-trap mass spectrometry,UPLC-PDAIT-MS）鉴定花青素类化合物,通过高通量的自由基清除方法测定抗氧化能力。结果表明：野生桃金娘具有较高的抗氧化能力。每克桃金娘的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力相当于67.2 μmol的抗坏血酸和28.5 μmol没食子酸;过氧化氢自由基清除能力（PSC单位）相当于23.2 μmol的抗坏血酸和14.3 μmol没食子酸;2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azinobis（3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid） ammonium salt,ABTS）自由基（ABTS+·）清除能力相当于30.4 μmol的抗坏血酸和7.8 μmol没食子酸;对三价铁的还原能力相当于28.7 μmol的抗坏血酸和3.1 μmol没食子酸。野生桃金娘的总多酚含量和总黄酮含量分别是4 976 mg 没食子酸/100 g（以干质量计）和49.7 mg儿茶酚/100 g（以干质量计）,总抗坏血酸含量是9 mg/100 g（以鲜质量计）。总花青素含量相当于414 mg矢车菊素/100 g（以干质量计）,共有飞燕草素3-O-葡萄糖苷等7 种花青素类化合物被鉴别出来。