利用赤星病菌毒素快速高通量鉴定烟草抗性种质的方法研究

为寻求一种快速高通量筛选鉴定烟草抗赤星病种质或材料的方法,本研究以烟草（Nicotiana tobacum L.）种质净叶黄、Beinhart1000-1、NC89 和G140 作为供试材料,利用烟草赤星病菌毒素就烟草种质对赤星病的抗病性鉴定方法进行研究,试验设计3 种鉴定方法：毒素液浸根法、毒素液浸种法和毒素培养基法.为验证毒素培养基法鉴定结果的可靠性,对烟草种质材料净叶黄、Beinhart1000-1、NC89、G140、K326、G28 和中烟100 的室内鉴定结果,与其对烟草赤星病的田间抗性鉴定结果进行了相关性分析.结果表明,室内鉴定结果与田间鉴定结果之间极显著相关（r=-0.9588）,室内鉴定结果可准确反映烟草种质对赤星病的抗病性.     

一个与净叶黄抗赤星病基因紧密连锁的SSR标记

为了在分子水平上弄清烟草赤星病抗性的遗传规律,并进行遗传定位,以抗赤星病品种净叶黄和感赤星病品种NC82为亲本,构建了F₁、F₂、BC₁ 代群体。通过对该群体进行赤星病接种鉴定和抗性遗传分析,发现净叶黄对赤星病的抗性由显性多基因控制。通过分子标记群体扩增,在第M号连锁群上,筛选到一个与净叶黄的赤星病抗性基因紧密连锁的SSR标记,它与抗性基因间的遗传距离为4 cM。该标记可用于抗赤星病育种的辅助选择。     

不同抗性烟草品种内源激素对赤星病胁迫的响应差异

为进一步明确烟株内源激素与赤星病抗性的关系,以抗赤星病烟草品种净叶黄和感病品种长脖黄为研究对象,通过盆栽种植并接种赤星病菌,比较不同抗性品种内源激素含量对赤星病胁迫的响应差异。研究结果显示,在赤星病胁迫下,净叶黄、长脖黄的脱落酸（ABA）含量和乙烯（ET）释放量均呈上升趋势,而生长素（IAA）以及细胞分裂素（CTK）含量表现为降低。同时,赤星病胁迫导致净叶黄的赤霉素（GA）、茉莉酸（JA）含量增加,引起长脖黄的JA含量降低,GA含量则先增加后降低。与净叶黄相比,长脖黄的ABA含量增幅较小,而GA、IAA、CTK与JA含量降幅较大,并且ET释放量较高。综上,在赤星病胁迫下,内源激素的含量差异以及变化幅度可以反映不同品种的抗病能力。     

利用细胞工程筛选烟草抗赤星病突变体的研究——一种双层培养基筛选系统的建立

为有效筛选烟草抗赤星病细胞突变体,本研究建立了一种双层培养基筛选系统。即在下层培养基中接种烟草赤星病(Alternaria alternata),在上层培养基中接种烤烟品种 NC89和净叶黄的花药(NC89高感赤星病,净叶黄高抗赤星病)。在26±1℃培养40天后发现,NC89的花药出苗率和花药平均出苗数与对照(不接种赤星病的培养基)相比,分别由30%和53颗降到2%和12颗,而净叶黄的花药出苗率和平均出苗数基本没有变化。对筛选出来的 NC89花培突变体进行了田间赤星病抗性鉴定,其中80%对赤星病抗性较 NC89有所提高,甚至部分接近高抗。这说明该双层培养基系统可以有效地对抗烟草赤星病的细胞突变体进行筛选。本系统尤其适应于(1)需长期培养;(2)毒素不易制备或易失活的病原菌的抗性筛选。     

烤烟新品种中烟86通过鉴定

中国农业科学院烟草研究所1974年用国外引进烤烟品种Speight G—28作母本,以国内育成的抗赤星病品种净叶黄为父本进行杂交,至1988年育成烤烟优良品系8504。受中国农业科学院委托,1988年8月7日—9日由中国农     

赤星病抗源的抗性比较

国外赤星病抗源Ｂｅｉｎｈａｒｔ１０００－１和国内抗病品种净叶黄及许金４号的抗病性分属两种不同的类型。本文对７个赤星病抗感程度不同的烟草品种的抗病性分别进行了以下测定：１．通过观察病斑数量和病斑大小测定抗侵入和抗扩展能力；２．测定各品种对两种Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ毒素、ＡＴ毒素和细交链格孢酮酸（ＴＡ）处理的反应；３．双列杂交法分析抗性遗传规律。重点对Ｂｅｉｎ－ｈａｒｔ１０００－１和净叶黄的抗性特点进行比较。结果表明：供试品种的抗性特点差异显著，为多基因控制的水平抗性。Ｂｅｉｎｈａｒｔ１０００－１的抗病性是由显性基因控制的，主要表现为抗侵入，病斑数少，但病斑面积却显著大于净叶黄和许金４号。国内抗病品种抗扩展的能力强，同时也较抗侵入，它们的抗性基因大部分是隐性的。各品种对ＡＴ毒素和ＴＡ的敏感程度分别与其抗病菌侵入和抗病斑扩展的能力高度相关。文中还就真菌毒素在致病过程中的作用以及它们在赤星病抗性研究中的应用做了讨论。同时，就不同抗性类型的抗源在烟草抗病育种中应用的可能性进行了分析     

两个烟草赤星病抗源的遗传分析

以高抗赤星病烟草品种净叶黄(JYH)、Beinhart1000-1(Beinhart)和感病品种NC82为材料分别构建了2个杂交组合的P₁、P₂、F₁、F₂四世代群体,成熟期赤星病菌人工接种鉴定后,采用主基因+多基因混合遗传模型对JYH和Beinhart两个材料进行抗性分析,结果表明,两者的赤星病抗性均受两对加性-完全显性主基因+加性-显性多基因控制。组合1的加性效应以第1对主基因为主,且多基因的加性效应大于显性效应;组合2的两对主基因负向加性效应相等,且多基因的显性效应大于加性效应;2个组合F₂群体主基因遗传率分别为64.72%和63.88%,表明赤星病的抗性遗传以主基因效应为主,并且受环境影响较大。     

烟草赤星病发生与钾肥水平及品种间钾吸收能力的关系

本文调查了两个地点5个不同的钾肥用量水平的赤星病病情指数,分析了7个抗病性不同品种的含钾量,结果表明:(1)随钾肥用量水平增加,赤星病发病程度渐轻;高钾肥用量水平的烟株赤星病的发病程度显著低于低钾肥用量水平,但高钾肥用量水平间赤星病发生程度差异不明显;在根部施肥基础上于团探期、旺长期、平顶期喷施3次1%磷酸二氢钾,对于赤星病的减轻作用相当于高钾肥用量水平。(2)初步分析了7个对赤星病抗性不同的品种净叶黄、许金四号、Beinhart1000-1、G28、金星6007、G140、NC82烟叶含钾量,发现3个对赤星病抗性较强的品种烟叶中钾含量显著高于感病的3个品种,品种的抗性与钾含量间的相关系数R=0.8236,说明品种的抗赤星病能力与其对钾的吸收能力间可能有较强的相关性。      

烤烟品种和打顶时期对赤星病抗性的作用

对生产上主要栽培的烤烟品种和抗源材料进行抗病性比较 ,结果表明 ,中烟 90、净叶黄、许金 4号抗病性较强 ,K32 6、G2 8属中抗品种 ,G140、NC89、红花大金元等为感病品种。通过烟株不同时期打顶试验 ,表明现蕾期打顶较盛花期打顶烟草赤星病发病重 ,差异达到极显著水平     

烟草赤星病胁迫对不同抗性品种光合特性和渗透调节的影响

以抗烟草赤星病品种净叶黄(JYH)和感病品种长脖黄(CBH)为材料,在盆栽试验条件下,研究不同烟草赤星病胁迫程度(轻度胁迫、中度胁迫和重度胁迫)对光合特性和渗透调节的影响。结果显示:⑴烟草赤星病胁迫导致2 个品种的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素含量均呈下降趋势,且JYH 的降幅小于CBH。⑵ JYH、CBH 的净光合速率、气孔导度因烟草赤星病胁迫而降低。2 个品种的胞间CO₂ 浓度、气孔限制值变化具有明显差异,烟草赤星病胁迫导致CBH 的胞间CO₂ 浓度上升,气孔限制值则明显下降,这与JYH 在重度胁迫下的变化趋势一致。而JYH 的胞间CO₂ 浓度在轻度、中度胁迫降低,气孔限制值则呈上升趋势。⑶与CBH 相比,JYH 在烟草赤星病胁迫下具有较高的脯氨酸和可溶性总糖含量,较低的MDA 含量。研究结果表明,JYH 具有较强的光合作用和渗透物质调节能力,是对烟草赤星病胁迫具有较强抗性的生理基础。      

烤烟新品种秦烟96 的选育及其特征特性

秦烟96(QY96)是以G-28 为母本,净叶黄为父本杂交选育而成。该品种遗传性状稳定,群体整齐一致,抗旱性强,抗黑胫病,中抗赤星病、PVY 和青枯病,综合抗病性优于对照NC89;烤后原烟多橘黄,油分多,色度强,化学成分含量适宜、比例协调,吸食品质较好,烟叶品质综合评价优于对照;陕西省区试和全国区试结果表明,秦烟96 的烟叶产量、均价、上等烟比例、产值等均明显高于对照;是一个集品质、抗性、产量、适应性等方面能够较好兼顾的优良品种,适宜于陕西、河南、山东、甘肃和山西等黄淮烟区种植。     

烤烟赤星病的药剂防治试验

本试验以多抗霉素、代森锌、代森锰锌、菌核净和甲霜灵锰锌对烤烟赤星病进行抑制病菌孢子萌发及菌丝生长测定、温室盆栽接种及田间自然发病防治。结果表明对烤烟赤星病的防治以４０％的菌核净防效较好，田间防效可达９０％以上，生产上可推广应用。     

庆胜2号

庆胜2号是河南省农科院烟草研究所于1974—1977年从净叶黄品种中系统选育而成的高抗赤星病、产量较高、品质较好的新品种。1977年后连续于烟区多点试种表现良好,1980年在河南省西部烟区推广。特征特性:庆胜2号植株为圆筒形,株高1.9米左右,叶数较多,移栽期晚时可达50片,在清明移栽可收叶数35片左右。烟株茎杆较粗,节距较短,     

一种苗期鉴定烟草赤星病抗性的新方法

烟草赤星病抗性的高通量鉴定是快速筛选和培育烟草抗赤星病品种的前提条件。以15份对赤星病表现不同抗性水平的烟草种质为材料,采用链格孢菌菌饼接种苗期离体叶片,以发病叶片病斑面积作为抗性评价指标,对15份烟草种质的抗性进行评价,并与其田间成株期赤星病抗性进行比较分析。结果表明,采用苗期菌饼接种,供试15份烟草种质的病斑面积差异显著,感病品种病斑平均面积明显大于抗病品种;各品种苗期赤星病鉴定结果与成株期抗性鉴定结果基本一致,且苗期病斑面积大小与3个不同年份、同一地点的成株期平均病级指数间相关性均达到显著水平,分别为0.78、0.74和0.66。表明本研究探讨的苗期离体叶片菌饼鉴定法可以用于烟草赤星病早期鉴定,病斑面积可以作为评价指标准确反映不同烟草品种间赤星病的抗性差异。     

烟草对赤星病田间抗性的遗传研究

本文选用赤星病（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａａｌｔｅｒｎａｔａ）抗感程度不同的７个烟草品种，采用双亲交和双列交的交配设计，于１９９４～１９９６年间对其田间抗性的遗传进行了分析。结果表明，品种间抗病性差异显著，尽管环境因素对发病程度影响很大，各抗病品种的抗性基本稳定。双列分析和世代方差分析结果表明，抗病性呈部分显性，受多基因控制。基因表达的加性效应和显性效应同时存在，以加性为主。各抗性亲本的抗病基因的显隐性方向不同。遗传分析和配合力分析表明，狭义遗传率变幅为２１．２％～７８．１％，所有的抗性亲本均表现出较高的负效应一般配合力，具有较好的特殊配合力的组合有：宾哈特１０００－１×ＮＣ８２、宾哈特１０００－１×Ｇ－１４０、宾哈特１０００－１×金星６００７、净叶黄×ＮＣ８２、许金４号×ＮＣ８２、Ｇ－２８×Ｇ－１４０、Ｇ－２８×金星６００７。在进一步深入了解其抗性机制的基础上，这些材料都可以在赤星病抗病育种中加以利用。     

烟草赤星病菌AT-毒素胁迫处理对种子萌发的影响及抗病性鉴定

为建立一种高效、准确鉴定烟草品种抗赤星病的方法,以4种不同抗赤星病的烟草品种为材料,研究了在不同浓度赤星病菌AT-毒素培养基上处理10、15、20 d对烟草种子萌发和根系生长的影响。结果表明,制备的AT-毒素原液中蛋白质、可溶性糖质量浓度分别为80.52μg/mL和23.39 mg/mL。随AT-毒素胁迫浓度的增大,烟草种子的发芽率和根系扎进培养基的株数比率均呈下降趋势。在一定AT-毒素浓度和胁迫时间范围内,不同品种对AT-毒素胁迫的耐受力表现出显著差异。在50%AT-毒素胁迫15和20 d时,抗病品种净叶黄根系扎进培养基中的株数比率分别为G28、YN116、红花大金元的1.18、1.75、6.02倍和1.02、1.75、5.52倍。综合分析,以烟草种子根系扎进培养基的株数比率作为鉴定烟草品种是否抗赤星病比发芽率更为准确,其最佳AT-毒素浓度为50%、最佳胁迫时间为15～20 d。     

烤烟化学成分的遗传效应分析

为科学合理地进行烤烟育种中的亲本筛选与组合配制,选育出化学成分协调的烤烟新品种(系),利用6个烤烟品种(K326、6388、RG17、K8、净叶黄和南江3号)按Griffing方法(Ⅱ)完全双列杂交配制出30个杂交组合,并对烟叶的烟碱、总氮、总糖、钾、氯、氮碱比、糖碱比和钾氯比等8个化学成分指标进行了初步遗传效应分析。结果表明,组合间的所有性状差异均达到了极显著水平,亲本间的一般配合力(GCA)和组合间的特殊配合力(SCA)均存在极显著差异,而且除氮碱比指标外的其他化学成分指标GCA方差均大于SCA方差,表明对本试验中烤烟绝大部分化学成分指标性状而言,亲本选择比组合配制更重要。对于GCA效应,RG17和南江3号品种分别具有提高钾和钾氯比的潜力,而6388则具有降低氯含量的潜力。基于烤烟化学品质目标分析SCA效应,30个组合中以K326×南江3号、净叶黄×南江3号和K8×净叶黄3个组合表现最佳,其次是K326×净叶黄和K8×RG17两个组合。化学成分指标性状间的遗传力存在较大差异,狭义遗传力以钾最大(33.82%),总糖最小(1.37%),而广义遗传力以氯和钾最大,分别为51.84%和50.04%,总糖最小(15.08%),只有钾的狭义遗传力占广义遗传力的比例超过了50%,说明钾的遗传以加性效应为主,这有利于培育高钾品种,且适宜进行早代选择,对于其他化学成分指标性状,在性状基本稳定的时期进行株系选择比较适宜。     

六种农药对烟草赤星病防效的研究

１９９３～１９９４年６种农药对烟草赤星病防效的研究结果表明：菌核净４００倍平均防效８１．４％，居第一位；ＴＬ灭菌液１００倍平均防效７６．３％，居第二位；０．３％的科生霉素平均防效７１．３％，居第三位。这３种农药防治效果较好。经方差分析证实各处理对赤星病的防治效果差异达极显著水平。     

烤烟新品种CV09-2的选育

烤烟新品种 CV09-2是中国农科院烟草研究所于1983～1988年以创新抗源 CV58[CV58为复交育种材料,组合为(单育2号×革新3号)F1×(净叶黄×G-28)F3]与 G-28杂交选育而成。1989～1991年由中国农科院烟草研究所同吉林省延边烟草研究所和延边州烟叶公司协作进行了品种比较、区域试验和生产示范诸程序育成的新品种。1992年1月25日在长春     

烟草赤星病的药剂防治

进行了３种农药田间试验，结果表明，４０％菌核净５００倍液平均防效为９０．５％，４０％新星１００００倍液的平均防效为６１．５％，８０％大生—Ｍ４５８００倍液的平均防效为５２．７％。４０％菌核净５００倍液防治烟草赤星病效果最佳，其增产增质较为显著。