羊乳酪蛋白酶解物对秀丽线虫衰老的改善作用

该研究利用秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）模型研究了羊乳酪蛋白酶解物（Goat Milk Casein Hydrolysates,GMCH）的抗衰老及体内外抗氧化作用。通过对比GMCH实验组和大肠杆菌对照组秀丽线虫的寿命、运动能力、脂褐素水平等指标来研究GMCH的抗衰老作用,通过自由基清除实验以及测定线虫体内抗氧化酶活性评价GMCH的体内外抗氧化活力,同时测定秀丽线虫在过氧化氢、百草枯及热应激条件下的寿命。结果表明,与对照组相比,喂食0.1 mg/mL羊乳酪蛋白酶解物的线虫的平均寿命延长9.33%,体内脂褐素水平降低了65.00%,同时GMCH对线虫的生殖能力和运动能力没有负面影响,对线虫氧化应激和热应激有一定的保护作用;GMCH具有一定的体外抗氧化能力并且能够提高线虫体内抗氧化酶活力,与对照组相比,实验组SOD活力提高43.30%、CAT活力提高124.40%、GSH活力提高176.90%、MDA含量降低78.70%。综上所述,GMCH能够延长线虫的寿命,降低线虫体内脂褐素积累,提高线虫在应激条件下的抵抗能力和体内抗氧化酶活力,具有较好的抗衰老活性。     

赤芍多糖延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用及机制研究

目的 基于模式生物秀丽隐杆线虫(简称线虫)探究赤芍多糖延缓衰老的作用。方法 将线虫随机分为空白组和不同质量浓度的赤芍多糖组(100、200、400μg/mL),观察赤芍多糖对线虫寿命、运动能力和应激能力的影响,测定线虫体内脂褐素、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、活性氧(reactive oxygen species, ROS)的含量以及相关抗氧化酶的活力,分析赤芍多糖对线虫体内抗氧化能力的影响;运用实时荧光定量酶链式反应技术检测赤芍多糖对线虫衰老相关基因mRNA表达的影响。结果 与空白组相比,赤芍多糖高剂量组(400μg/mL)能够显著延长线虫寿命,增强线虫运动能力和应激能力,明显降低线虫体内脂褐素、MDA、ROS的含量,显著提高过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活力;同时,赤芍多糖能够显著上调daf-16、skn-1、sod-3 mRNA的表达,下调daf-2、age-1 mRNA的表达。结论 赤芍多糖能够通过提高线虫应激能力、增强抗氧化酶活力以及调控胰岛素/类胰岛素生长因子信号通路(IIS)相...     

铁皮石斛多糖调控线虫寿命及抗氧化作用的研究

摘 要: 目的 基于秀丽隐杆线虫自然衰老模型, 探讨铁皮石斛多糖(Dendrobium candidum polysaccharides, DOP)抗衰老作用及其机制。方法 将秀丽隐杆线虫野生型N2随机分为对照组和铁皮石斛多糖组(低、中、高), 观察铁皮石斛多糖对线虫N2寿命、运动能力和咽泵能力的影响; 通过检测氧化应激、抗氧化酶试剂盒以及活性氧评估铁皮石斛多糖对N2线虫抗氧化能力的影响。基于skn-1基因缺陷型突变株(EU1)线虫及带有荧光标记的转基因线虫CL2166分析铁皮石斛多糖延长健康寿限的可能作用途径; 采用实时荧光定量聚合酶链反应技术测定铁皮石斛多糖作用下线虫抗氧化、胰岛素信号途径相关基因转录水平。结果 铁皮石斛多糖中剂量组(250 μg/mL)可显著延长线虫N2的寿命, 平均延寿率达12.73%, 可显著提高运动、咽泵、抗氧化应激能力; 显著提高过氧化氢酶(catalase, CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide disumutase, SOD)活性和谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量, 降低活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量; 铁皮石斛多糖干预处理对skn-1基因缺陷线虫的延寿效果缺失; 但能够增强CL2166线虫的荧光强度; 同时上调sod-5、sod-3、ctl-1、ctl-2、daf-16和skn-1基因的表达水平, 下调daf-2基因的表达水平。结论 铁皮石斛多糖可能通过激活Nrf2/SKN-1和DAF-16途径拮抗氧化应激从而延缓线虫衰老。     

牡蛎多肽组分OE-I抗氧化活性及其对秀丽隐杆线虫抗衰老作用

采用超滤对牡蛎酶解液（oyster enzymatic hydrolysate,OE）进行分级,获得OE-I（＜5 kDa）、OE-II（5～10 kDa）与OE-III（＞10 kDa）3 个多肽组分。以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力和亚铁离子螯合能力为指标,评价牡蛎多肽3 个组分的体外抗氧化活性。以秀丽隐杆线虫为模型,研究不同剂量牡蛎多肽组分OE-I对线虫寿命、急性氧化应激、热应激、体内抗氧化酶活力、体内活性氧和细胞凋亡的影响,测定线虫寿命相关基因的表达水平并分析其抗衰老机制。结果发现,牡蛎多肽组分OE-I的抗氧化活性最强,且与空白组相比,OE-I高剂量组线虫的寿命极显著延长（P＜0.01）;线虫体内3 种主要抗氧化酶中超氧化物歧化酶活力显著提高（P＜0.05）,过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力极显著提高（P＜0.01）,线虫体内活性氧的积累和细胞凋亡减少;此外,组分OE-I通过上调skn-1、daf-16、sod-3和mtl-1基因的表达,下调daf-2和age-1基因的表达,提高了线虫的应激抵抗能力。综上,牡蛎多肽组分OE-I可作为抗氧化和抗衰老的功能性食品基料。     

贵州铁皮石斛叶多糖鉴定及降脂功能研究

目的:对贵州铁皮石斛叶中的多糖进行提取鉴定,并初步探究铁皮石斛叶多糖的降脂功能,为贵州铁皮石斛叶的开发利用提供实验依据。方法:以干燥粉碎后的铁皮石斛叶粉为原料,采用水提醇沉法提取多糖。利用高效液相色谱法鉴定铁皮石斛叶多糖的分子质量及单糖组成,并通过体内外实验初步探究其降血脂功能。结果:高效液相色谱分析表明:铁皮石斛叶多糖有2个主要组分,分子质量分别为54012 ku和210 ku,且其多糖由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖组成,摩尔比为0.26:0.16:0.01:0.06:0.51;体内斑马幼鱼降脂实验结果表明:与模型对照组相比,1.0、1.5、2.0 mg/mL剂量的铁皮石斛叶多糖能显著降低斑马幼鱼体内血脂含量(P<0.05);体外胆固醇酯酶和胰脂酶抑制实验表明:铁皮石斛叶多糖能显著降低胆固醇酯酶和胰脂酶活性,且抑制率呈浓度依赖关系(P<0.05)。结论:铁皮石斛叶中多糖含量丰富,有较好的降低血脂的效果。     

烘干温度对铁皮石斛叶多糖抗氧化活性影响的研究

本论文主要探讨不同烘干温度对铁皮石斛叶多糖得率和抗氧化活性的影响。结果表明:不同实验温度下,40℃烘箱烘干后铁皮石斛叶多糖得率最高,达到26.93%且抗氧化能力最强。该条件下多糖提取液浓度为2.5 mg/mL时,对羟自由基消除率、超氧自由基消除率、DPPH自由基消除率分别为48.9%、21.9%、35.9%。说明烘干温度会显著影响铁皮石斛叶多糖的得率和抗氧化活性,随着烘干温度的升高,多糖的得率和抗氧化活性均会随之降低。研究结果可为铁皮石斛叶进一步开发利用提供参考依据。     

根皮素对秀丽隐杆线虫寿命的影响

目的：研究根皮素对秀丽隐杆线虫延长寿命作用及其作用机制。方法：给予秀丽隐杆线虫一定质量浓度的根皮素（25、50、75 μg/mL）,分析根皮素对线虫寿命、运动能力、吞咽能力、抵抗应激能力、活性氧和脂褐素水平的调控作用,通过测定正常及突变体线虫的抗氧化酶活力、相关基因表达水平,对根皮素延长寿命的潜在机理进行了初步探讨。结果：根皮素能够显著延长线虫的寿命并抑制衰老相关的运动能力下降,增强抵抗应激能力（双氧水、紫外和高温）,提高抗氧化酶活力（超氧化物歧化酶和过氧化氢酶）和自由基清除能力,减少脂褐素堆积和丙二醛的生成。采用根皮素喂养线虫后,daf-2和age-1 mRNA表达水平显著下降（P＜0.05,P＜0.01）,daf-16和sir-2.1 mRNA表达水平显著升高（P＜0.05,P＜0.01）。突变体线虫经根皮素处理后,daf-2（e1370）、daf-16（mu86）和sir-2.1（ok434）突变体线虫寿命无显著延长;eat-2（ad1116）突变体线虫寿命显著延长（P＜0.05）;且促进了DAF-16的核定位,并激活了其下游靶基因sod-3、ctl-1和hsp-16.2 mRNA的表达。结论：根皮素可以通过胰岛素信号通路和SIR-2.1信号通路,促进DAF-16的核定位,提高机体应激抵抗能力和抗氧化能力,延长线虫寿命。     

美藤果叶醇提物对延缓秀丽隐杆线虫衰老的影响

本文以美藤果叶醇提物(Sacha inchi leaf alcohol extract,SILAE)为研究对象,通过构建秀丽隐杆线虫(以下简称线虫)衰老模型,探究了不同质量浓度(5、10、15 mg/mL)SILAE对线虫寿命、运动能力、生殖能力、抗氧化应激能力与体内ROS、脂褐质和丙二醛(MDA)水平的作用效果,以及SILAE对线虫体内酶和非酶抗氧化剂的影响,旨为美藤果叶的进一步研究和应用提供一定的理论参考。结果表明：与空白组相比,5、10 mg/mL的SILAE能显著延长线虫寿命(P<0.05),分别提高了59.3%、30.2%,15 mg/mL SILAE也能延长其寿命但无显著性差异。与此同时,SILAE还能有效提高其生殖能力和运动能力。在氧化应激环境中,SILAE使线虫的H₂O₂应激寿命分别延长了约2、4、5倍,5、10 mg/mL的SILAE也显著提高了线虫的胡桃醌应激寿命(P<0.05)。SILAE能不同程度地降低线虫体内的ROS和脂褐质(P<0.001),以及MDA(P<0.05)的积累量。此外,15 m...     

侧向流动型重组酶聚合酶扩增技术检测食品中大肠埃希氏菌O157

研究内容基于侧向流动型重组酶聚合酶扩增(Lateral flow-based recombinase polymerase amplification,LF-RPA)技术原理,建立大肠埃希氏菌O157(Escherichia coli O157)的LF-RPA快速检测方法。应用该方法对3株大肠埃希氏菌O157和27株非大肠埃希氏菌O157进行检测,结果表明该方法具有良好的特异性。分别以10倍浓度梯度稀释插入靶基因序列的质粒pUC57-rfbE和大肠埃希氏菌O157菌液DNA作为模板进行LF-RPA检测。结果表明LF-RPA方法可检出1.0×10²拷贝/μL的pUC57-rfbE质粒和1.2×10⁴ cfu/mL的大肠埃希氏菌O157菌液。以大肠埃希氏菌O157污染食品样品,增菌4 h后,大肠埃希氏菌O157初始浓度为1.2×10¹ cfu/mL的食品增菌液可以被LF-RPA检出阳性信号。该研究建立的方法可快速、准确、灵敏地检测食品中大肠埃希氏菌O157,无需专业设备,在食品生产企业和基层检测机构具有一定的应用前景。     

桉叶多酚提取物体内外抗氧化活性评价

桉叶资源丰富且生物活性高,但少有研究对桉叶多酚提取物进行系统的抗氧化活性评价。本实验旨在研究纯化后桉叶多酚提取物体内外抗氧化活性。以化学法、RAW264.7巨噬细胞模型、秀丽隐杆线虫（以下简称线虫）模型为评价方法,以自由基清除率、抗氧化酶活力及线虫寿命等为指标,评价桉叶多酚提取物的抗氧化能力。结果表明,桉叶多酚提取物具有良好的自由基清除能力和还原能力,在一定质量浓度下效果接近抗坏血酸。桉叶多酚提取物能显著提高氧化损伤RAW264.7巨噬细胞内抗氧化酶（超氧化物歧化酶、过氧化氢酶）活力和谷胱甘肽含量,并显著降低丙二醛含量（P＜0.05）,呈量效关系。此外,桉叶多酚提取物显著降低常规培养和氧化损伤条件下线虫体内活性氧积累量（P＜0.05）,提高线虫抗氧化能力,起到延长线虫寿命的作用。桉叶多酚提取物在体内外均表现出良好的抗氧化活性,具备开发食品抗氧化剂或功能食品的潜力。     

菌菇复合多糖对秀丽线虫氧化胁迫抗性的影响

目的:研究菌菇复合多糖(FHP)的抗氧化效果及作用机制.方法:用化学方法评价FHP体外自由基清除效率,通过秀丽线虫的氧化胁迫存活率试验评价FHP体内抗氧化效果;通过线虫体内氧化胁迫水平检测,胁迫应激关键转录因子活性及其效应基因表达检测和抗氧化酶活性试验等研究FHP的抗氧化活性;通过线虫的寿命试验及脂褐素水平检测研究FH...     

基于秀丽隐杆线虫模型探讨白芥子水提物抗氧化作用及机制

摘 要：目的 研究白芥子水提物抗氧化活性,探讨其抗氧化的相关机制。方法 采用2,2-联苯基-1-苦基肼基(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟基自由基、铁离子还原能力3种方法对其体外抗氧化活性进行评价。采用秀丽隐杆线虫野生型N2线虫观察白芥子水提物对线虫寿命、运动能力、生殖能力的影响;通过氧化应激、热应激、脂褐素和活性氧(reactive oxygen species, ROS)评估其对线虫抗氧化能力的影响。采用实时荧光定量技术测定白芥子水提物作用下线虫抗氧化、胰岛素信号途径相关基因表达情况。结果 白芥子水提物具有一定的DPPH·、羟基自由基清除能力。通过氧化应激筛选出最佳给药浓度为10 mg/mL,且该给药浓度对线虫的运动能力和生殖能力无影响(P>0.05),并能够显著延长线虫的平均寿命和中位寿命(P<0.01);10 mg/mL给药组显著提高线虫抗热应激能力,降低脂褐素积累和ROS水平;同时上调daf-16、sod-3、clt-2、skn-1的mRNA表达量,下调daf-2的mRNA的表达量。结论 白芥子具有良好的体内外抗氧化能力,可能与调控胰岛素/胰岛素样生长因子(insulin like growth factor, IGF)-1信号(insulin/IGF-1 signaling, IIS)通路上的基因表达有关。     

鹿鞭醇提物对秀丽隐杆线虫衰老的影响

目的:本文采用秀丽隐杆线虫衰老模型,研究了梅花鹿鞭醇提物（HC）和马鹿鞭醇提物（MC）的抗衰老活性差异及其作用机制,旨在为鹿鞭药材作为医药、保健品开发提供参考依据。方法:给予秀丽隐杆线虫鹿鞭提取物（0.5、1.0、2.0 mg/mL）,测定了花鹿鞭和马鹿鞭醇提物对秀丽隐杆线虫寿命、吐咽能力、运动能力、生殖能力及应激抵御能力以及线虫体内的抗氧化酶活力和丙二醛（MDA）水平的影响,探讨了鹿鞭醇提物的抗衰老作用。结果:与空白组相比,2种鹿鞭在0.5、1.0 mg/mL时显著提高线虫寿命值（P<0.05）,2.0 mg/mL时可极显著提高线虫的寿命值（P<0.01）且不影响生殖能力,显著提高线虫的吐咽、运动能力;对热应激和氧化应激具有显著的防御效果且降低ROS水平;在2.0 mg/mL水平,HC组的各项指标检测结果均显著强于MC。HC组线虫平均寿命为19.98±1.26 d,显著高于MC组的17.26±1.34 d;对热应激和氧化应激,HC组线虫的平均生存时间分别提高44.78%、41.04%,显著高于MC组25.71%、31.45%;运动测试结果显示,在第8 d,HC组运动A状态线虫提升29%,较MC高8.3%;HC使线虫ROS水平降低程度强于MC组;测定显示,HC与MC对线虫的生殖和吐咽能力影响无显著差异。结论:与空白组相比,2种鹿鞭醇提物均可抑制线虫体内ROS累积,增强对高温、百草枯急性氧化应激的抵抗能力、提高抗氧化酶活力,进而延长线虫寿命,具有抗衰老作用,而HC的活性强于MC。     

红米稻过氧化物还原酶OsPrx3增强秀丽隐杆线虫抗氧化功能

目的：红米稻中OsPrx3基因预编码一个过氧化物还原酶，探究该基因原核细胞表达产物能否增强动物抗氧化的功能。方法：分子克隆OsPrx3基因，采用大肠杆菌表达目的蛋白，对摄入目的蛋白的模式动物-秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)，鉴别运动能力、体长、抗氧化应激能力、体内活性氧与脂肪含量以及与氧化相关的基因表达水平等。结果：借助大肠杆菌细胞成功表达红米稻过氧化物还原酶基因OsPrx3，分离目的蛋白，体外实验显示该蛋白具有较高酶活性，5 min内1μg/mL OsPrx3对H₂O₂相对清除率可达40%以上；与对照相比，摄入目的蛋白的秀丽隐杆线虫，运动能力和体长虽无明显变化，但抵抗外部氧化应激的能力却在氧化处理的15 min内明显增强，而且体内活性氧、细胞脂肪含量显著降低；另外，部分调节氧化的关键基因表达明显上调。结论：基因工程策略成功表达红米稻过氧化物还原酶OsPrx3基因，其产物OsPrx3体外具有较高抗氧化活性，秀丽隐杆线虫摄入该蛋白能显著增强抗氧化能力。     

1-脱氧野尻霉素对秀丽隐杆线虫的抗衰老作用

研究1-脱氧野尻霉素(DNJ)对秀丽隐杆线虫的抗氧化、抗衰老作用。考察10、100、1000 mg/L DNJ对秀丽隐杆线虫的寿命、运动能力、排泄周期、吞咽频率、热应激能力的影响,探索DNJ对秀丽隐杆线虫的抗氧化酶活力以及衰老相关基因的作用。结果表明,10、100 mg/L DNJ能够显著(p<0.05)延长秀丽隐杆线虫寿命、极显著(p<0.01)降低肠道氧自由基水平、提高体内抗氧化酶活力、提高运动能力、缩短排泄周期并提高吞咽频率;同时,秀丽隐杆线虫在35℃热激6 h条件下,100 mg/L DNJ处理的线虫也能显著提高热应激能力,延长寿命。结果表明,100 mg/L DNJ处理也能延长突变体daf-2和daf-16的寿命、提高热应激能力、极显著(p<0.01)提高运动能力、缩短排泄周期。然而,突变体与野生型在100 mg/L DNJ处理下,寿命、运动能力、排泄周期、热应激能力各项指标差异不显著(p>0.05)。因此,1-脱氧野尻霉素对秀丽隐杆线虫起到了抗衰老作用,但其作用机制与daf-2和daf-16基因无关。     

发酵祛湿汤体外抗氧化活性及对秀丽隐杆线虫抗衰老作用

利用自由基清除能力评价发酵祛湿汤（Fermented Qushi Decoction,FQD）的体外抗氧化活性;结果显示,与未发酵祛湿汤（Qushi Decoction,QD）相比,高剂量FQD组的总抗氧化能力显著提高,其中1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率、羟自由基清除率和总还原能力分别提高了24.38%、11.98%、11.76%。FQD对线虫总产卵量无显著影响,并能促进线虫的运动;与QD相比,FQD干预后线虫平均寿命延长了8.02%～26.36%;在热应激条件下,FQD组最长存活时间提高了25%,在氧化应激下,FQD组线虫的生存时间较QD提高了16.67%。此外,FQD作用后,线虫体内抗氧化酶活性显著增强（P<0.05）,脂褐质的堆积水平降低。综上,FQD通过提高体外抗氧化能力,延长线虫寿命,提升抵抗应激能力和抗氧化酶活性来延缓线虫的抗衰老作用。该研究初步表明发酵祛湿汤具有抗衰老作用,为保健品开发和利用提供理论基础。     

紫薯提取物对秀丽隐杆线虫抗氧化作用的影响

目的:以秀丽隐杆线虫为对象,研究紫薯提取物(purple sweet potato extract,PSPE)抗氧化作用及其可能的作用机制。方法:将秀丽隐杆线虫饲喂于含有不同质量浓度(70、140、280μg/mL)PSPE的线虫生长培养基,研究PSPE对线虫寿命、抗氧化酶活力以及相关基因表达水平、急性氧化应激的影响。结果:PSPE能明显延长秀丽隐杆线虫的寿命,提高超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力,上调daf-16、ctl-1、sod-3、sir-2.1基因表达水平,下调age-1、daf-2基因表达水平,同时延长在H_2O_2、胡桃醌及百草枯氧化应激的存活时间。结论:PSPE能够有效延缓秀丽隐杆线虫的衰老、抑制脂褐素累积、提高抗氧化酶活力及抗氧化基因表达水平,增强对H_2O_2、胡桃醌及百草枯急性氧化应激的抵抗能力。