澳门市售即食海产中嗜水气单胞菌的污染情况及其致泻性毒力基因分析

目的 对澳门地区市售即食海产品进行嗜水气单胞菌的分离鉴定及致泻毒力基因检测。方法 从甲壳类、鱼类、贝类、头足纲类共4类80份样本中分离嗜水气单胞菌,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)方法检测菌株16S rRNA基因进行菌株鉴定,使用多重PCR测定分离菌株4种致泻毒力基因。结果 澳门地区市售的80份即食海产品中,有57份样本(71.25%)分离出嗜水气单胞菌,其中6份(10.53%)带有致泻毒力基因。在6株携带毒力基因的嗜水气单胞菌中,4株携带2种毒力基因,其余的只携带1种毒力基因。其中携带alt有4株(7.02%)、aerA 3株(5.36%)、ast 2株(3.51%)及act 1株(1.75%)。即食海产品的4个分类与嗜水气单胞菌检出率,经χ2检验分析差异无统计学意义(P>0.05)。此外,在15个经烹煮过样本中分离鉴定出13株嗜水气单胞菌。结论 嗜水气单胞菌有较高的检出率可能是因不当包装、运输及处理过程中受到交叉污染。致泻性毒力基因检出率不高,但存在嗜水气单胞菌的致病风险。     

上海市浦东新区生鲜食品中食源性致病菌监测

目的了解上海市浦东新区生鲜食品中食源性致病菌污染状况。方法 2015年对9类生鲜食品进行致病菌检测,对分离株进行血清分群(型)。结果 1 202份食品中有494份检出致病菌,检出率为41.10%。分离出致病菌587株,副溶血性弧菌(194株)、气单胞菌(134株)、单核细胞增生李斯特菌(131株)为主要致病菌。第二季度检出率最高(47.85%)。虾类检出率最高(64.71%),不同食品中主要致病菌检出情况存在差异。副溶血性弧菌以O∶1群~O∶5群为主(81.96%),小肠结肠炎耶尔森菌以O∶8群和O∶5群为主(50.00%),气单胞菌以维隆气单胞菌为优势菌型(67.91%),弯曲菌以空肠弯曲菌和结肠弯曲菌为优势菌型(89.29%),沙门菌血清型分布呈多样性。结论上海市浦东新区生鲜食品中食源性致病菌检出率较高,分布呈多样性和典型的季节性特征,存在多种致病菌混合污染。     

齐口裂腹鱼肠道气单胞菌的分离鉴定

本研究从健康齐口裂腹鱼肠道内分离到3株气单胞菌株,采用单重PCR及多重PCR技术进行鉴定。结果表明,16S rRNA扩增长度为350bp,与Gen Bank数据库中的基因序列进行比对发现其与亚洲地区已报道的同类基因片段相似度均达到了90%以上。气单胞菌气溶素基因(aer)和嗜水气单胞菌溶血素基因(AHH)扩增长度分别为300bp和130bp,而温和气单胞菌溶血素基因(ASA)未扩增到条带。通过基因序列比对发现,aer和ASA与已报道的嗜水气单胞菌的对应的基因片段相似度均达到90%以上。结论,从健康齐口裂腹鱼肠道内所分离的3株气单胞菌菌株,均为致病性嗜水性气单胞菌。     

生鲜食品中蜡样芽孢杆菌毒力基因及耐药性研究

目的:研究生鲜食品中蜡样芽孢杆菌的毒力基因及耐药性。方法:在成都市周边农贸市场和路边小摊采集各种生鲜食品共100份,采用MYP选择性培养基初步分离蜡样芽孢杆菌菌株,采用16S rRNA序列比对分析鉴定得到蜡样芽孢杆菌分离菌株,采用PCR检测分离鉴定菌株中蜡样芽孢杆菌13个毒力基因的携带情况,进一步采用纸片扩散法检测菌株对18种抗生素的耐药性。结果:从100份生鲜食品样本中,检出蜡样芽孢杆菌24株,检出率为24%,其中,路边小摊的检出率(70%)高于农贸市场(18.9%)。呕吐型基因ces和cer的检出率较低,仅在1株中发现;腹泻型基因nheC有24株检出;cytK有13株检出;bceT有12株检出;hblA有11株检出;nheB有10株检出;hblC、hblD、nheA各有9株检出;hly-Ⅱ有7株检出;hblB、entFM检出率为0;蜡样芽孢杆菌的4个看家基因rpoB、gyrB、groEL、vrrA在24株分离菌株中检出率为100%。同时发现,生鲜食品来源的蜡样芽孢杆菌分离菌株对杆菌肽B、磺胺甲亚唑、苯唑西林、青霉素表现出较高耐药性,耐药率大于96%;而对阿米卡星、氯霉素、庆大霉素、亚胺培南耐药率小于7%。结论:本研究通过分离鉴定生鲜食品源蜡样芽孢杆菌,研究其毒力基因携带及耐药性,为进一步评价生鲜食品中蜡样芽孢杆菌的安全风险提供参考数据。     

嗜水气单胞菌(Aeromonase hydrophila)引起人类腹泻的流行病学意义

为了预防和控制嗜水气单胞菌引起疾病的暴发流行，对567例散发性肠道门诊腹泻病人粪便标本进行了分析和对一起食物中毒进行了调查。检出嗜水气单胞菌51株，其中检出含有气溶毒素Aero基因的菌株18株，占35．3％。用流行病学方法对其病原学进行分析，同时针对近几年来腹泻病人嗜水气单胞菌检出率增高的趋势，开展嗜水气单胞菌对人类致病性的研究和疫情监测，提出进一步认识和评价嗜水气单胞菌引起人类腹泻的流行病学意义，以指导对该病的防治工作。     

兴城市致病性弧菌的分布与食物中毒关系的探讨

用 TCBA 琼脂从84例腹泻患者的粪便中检出了4种45株弧菌,有副溶血弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、嗜水气单胞菌检出率为53%,其中以付溶血弧菌为最高构成比为 82%。其中神奈川溶血试验阳性率可达到96.5%,与文献报导的结果(97%)基本一致。付溶血弧菌能使 Vero 细胞产生病变,其阳     

滤纸片法筛选抑制嗜水气单胞菌群体感应的乳酸菌及抑制作用分析

采用滤纸片法从传统发酵蔬菜中筛选抑制嗜水气单胞菌群体感应的乳酸菌菌株,应用96?孔板法测定其对生物膜的抑制率,光学显微镜和扫描电镜观察其对嗜水气单胞菌生物膜形成的影响,同时以蛋白酶、嗜铁素、群集及泳动为指标研究其对嗜水气单胞菌毒力作用的影响。结果表明：来源于辽宁锦州酸菜的乳酸菌菌株SCT-2对嗜水气单胞菌群体感应有明显抑制作用,当其代谢产物粗提物质量浓度为8?mg/mL时,对嗜水气单胞菌生物膜抑制率为45.16%,光学显微镜下显示菌株SCT-2粗提物可有效抑制嗜水气单胞菌生物膜的形成,扫描电镜结果进一步表明菌株SCT-2粗提物不仅降低了嗜水气单胞菌生物膜的生成量,而且使其生物膜断裂。8?mg/mL的SCT-2粗提物可使嗜水气单胞菌蛋白酶和嗜铁素的分泌量分别减少27.18%和22.11%,对信号分子的降解率为32.27%,且对嗜水气单胞菌的群集和泳动现象抑制明显。经生理生化和16S?rRNA鉴定菌株SCT-2为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。从传统东北酸菜中获得对嗜水气单胞菌群体感应有抑制作用的植物乳杆菌SCT-2,为开发一种抑制嗜水气单胞菌群体感应的乳酸菌生物制剂提供了理论支持。     

一株鲢鱼肠道中嗜水气单胞菌拮抗菌株的筛选、鉴定及特性

从鲢鱼肠道中筛选嗜水气单胞菌的拮抗菌株,并对生长培养条件进行研究,以期为鲢鱼养殖过程中嗜水气单胞菌病的生物防治提供理论依据。通过对鲢鱼肠道中嗜水气单胞菌拮抗菌株的分离、筛选,并对其中拮抗作用较稳定的菌株进行生理生化、分子鉴定以及生长培养特性优化。经过多次筛选得到了15株拮抗效果较好的目标菌株,其中拮抗作用较稳定的S4为气单胞菌属,是偏碱性革兰氏阴性短杆菌;通过单因素和正交实验表明,S4最佳生长培养条件为1.5 g/d L淀粉,1.5 g/d L牛肉膏,1 g/d L氯化钙,32℃,pH 8.5,接种体积分数3%。研究结果为嗜水气单胞菌的防治及拮抗菌S4的应用提供理论依据。     

生鲜食品中沙门氏菌多重耐药性检测与复合型Ⅰ类整合子的分析

该研究采用纸片扩散法对生鲜食品源沙门氏菌分离株进行耐药表型检测,玻片凝集法测定血清型,MLST方法分析其序列型。用PCR检测结合序列比对,对多重耐药沙门氏菌携带的Ⅰ类整合子及其基因盒、ISCR1及其基因盒进行分析。共筛选出32株多重耐药菌株,多重耐药率为48.48%。多重耐药株中分为11种血清型,优势血清型为S. Thompson(21.88%)和S. Agona(18.75%),MLST的序列分型将多重耐药株分为15种ST型,优势序列型为ST26(21.88%)和ST13(12.50%)。多重耐药菌株中,Ⅰ类整合子的检出率为43.75%(14/32),其中有5株扩出耐药基因盒,检出率为35.71%(5/14);11株检出ISCR1序列,检出率为34.38%(11/32),其中4株扩增出耐药基因盒,检出率为36.36%(4/11);同时含有这两种遗传元件(Ⅰ型复合整合子)的菌株共检测出9株,检出率为28.13%(9/32),检出的基因盒大多包含1~2种耐药基因,与耐药表型具有较好的相关性。通过blast比对,发现28号菌株中的Ⅰ型复合整合子耐药基因盒与沙门氏菌Nsa217质粒和肺炎克雷伯菌的KP15-2-53质粒具有同源性。生鲜制品中沙门氏菌耐药性相对严重,且沙门氏菌多重耐药性与携带的Ⅰ型复合整合子之间具有相关性。     

自消毒餐具中检出嗜水气单胞菌

为了贯彻执行《食品卫生法》,保护学生们的身心健康,了解学校食堂餐具的消毒情况,我们对动力区34所学校6 2件餐具进行了卫生学检查。1　材料与方法样品来源　动力区各类学校共34所,随机抽检餐具6 2件。检验方法　对采集样品分别按GB 14 934—1994、GB 4 789 4 5 6 10 11—1994检验。2　结果与分析此次抽检的34所学校的6 2件餐具中有1份分离出嗜水气单胞菌和弗氏柠檬酸杆菌,检出率为1 5 % ,其中大肠菌群阳性为8份,阳性率为12 9%。经增菌、分离、分纯培养在某职业中学食堂的菜盆中检出2株菌株。分别为嗜水气单胞菌(1号)、弗氏柠檬酸杆…