仙草多糖对HepG2细胞酒精性损伤的保护作用

为研究仙草多糖对肝细胞酒精性损伤的保护作用及机制,选用HepG2细胞,经乙醇诱导,检测仙草多糖处理后细胞的存活率、活性氧水平和脂滴蓄积水平。体外抗氧化水平检测发现,仙草多糖对超氧阴离子自由基和羟自由基有清除作用。与乙醇处理组HepG2细胞相比,100μg/m L和200μg/m L的仙草多糖预处理组细胞的存活率显著上升;同时,仙草多糖处理显著降低了酒精诱导HepG2细胞产生的活性氧水平;另外,用仙草多糖处理酒精诱导的HepG2细胞也显著改善了胞内的脂滴蓄积水平。可见,仙草多糖对HepG2细胞酒精性损伤有保护作用,这作用至少有一部分是因为其具有强抗氧化作用,显著抑制了酒精诱导的活性氧水平的上升。     

蓝莓中花青素的抗氧化活性研究

本研究通过体外抗氧化实验和细胞损伤模型实验，研究蓝莓中花青素抗氧化能力。采用ABTS自由基清除实验、DPPH自由基清除实验、铁离子螯合能力实验和羟基自由基清除能力实验对100～500μg/mL不同浓度的花青素进行体外抗氧化活性评价。在氧化应激细胞模型实验中，通过测定H₂O₂诱导HepG2细胞中MDA含量、SOD活力、GSH含量探究100～500μg/mL不同浓度花青素对HepG2细胞氧化损伤的保护作用。结果表明，随着花青素浓度的增加，ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、铁离子螯合能力和羟基自由基清除能力均随之增加，且比模型组具有显著的抗氧化效果(P<0.05)。花青素可减少H₂O₂诱导HepG2细胞氧化损伤时MDA含量，提高HepG2细胞内SOD活力及GSH含量，减少氧化损伤后细胞凋亡情况的发生，对HepG2细胞氧化损伤有一定保护作用。蓝莓中花青素可用于开发功能性食品以及作为食品添加剂用作抗氧化的良好材料，本研究可为花青素资源的开发利用提供理论基础。     

基于体外化学与细胞模型评价鲍内脏肽粉的抗氧化活性

本文考察了鲍内脏肽粉对二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2-·)的清除能力,结果发现,鲍内脏肽粉对DPPH·、·OH和O_2-·自由基具有一定的清除能力,其IC50值分别为0.87 mg/m L、7.53 mg/m L和19.41 mg/m L。采用H_2O_2建立体外培养人肝癌细胞(HepG2)氧化应激损伤模型,将细胞分为正常对照组,模型组、H_2O_2加低(1.6 mg/m L)、中(3.2mg/m L)、高(6.4 mg/m L)剂量组,检测各组细胞存活率、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量。结果发现,1.6 mg/m L、3.2 mg/m L和6.4 mg/m L 3个剂量水平的鲍内脏肽粉能显著提高HepG2细胞的存活率、T-AOC和SOD活力,显著抑制细胞的MDA含量,且剂量-效应关系明显,对H_2O_2氧化损伤HepG2细胞均具有一定的修复作用。结果表明,鲍内脏肽粉具有较好的抗氧化活性。     

紫薯花青素体外抗氧化及对H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用

目的：研究紫薯花青素的体外抗氧化作用,建立H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤模型,初步评价紫薯花青素的抗氧化应激作用。方法：紫薯干粉经过提取、纯化制得紫薯花青素干粉,分别测定紫薯花青素的总还原力、对羟自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2－•）的清除能力以及对大鼠红细胞溶血的保护作用。建立H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤模型,采用四甲基偶氮唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法检测不同质量浓度紫薯花青素对HepG2细胞氧化损伤的保护作用。结果：紫薯花青素的还原力和VC基本相当;紫薯花青素对·OH有很好的清除效果,在实验浓度范围内有明显的剂量-效应关系;随紫薯花青素浓度的升高,对O2－•的清除作用增强,呈现良好的量-效关系,单位浓度的紫薯花青素对O2－•的清除作用比2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚（butylated hydroxytoluene,BHT）效果好。不同质量浓度的紫薯花青素均可抑制H2O2诱导的大鼠红细胞溶血,且随着紫薯花青素质量浓度的升高,大鼠红细胞的溶血度降低,呈现良好的量-效关系。H2O2诱导的HepG2细胞氧化损伤模型中,50～1 600 μg/mL的紫薯花青素均能够抑制H2O2引起的HepG2细胞凋亡,当紫薯花青素质量浓度达到800 μg/mL时,HepG2细胞存活率为（88.03±7.48）%。结论：紫薯花青素具有良好的体外抗氧化作用,并对H2O2诱导HepG2细胞氧化损伤具有明显的保护作用,研究初步揭示了紫薯花青素具有体外抗氧化作用。     

小麦低聚肽对H2O2所致HepG2细胞氧化损伤的保护作用

分析小麦低聚肽氨基酸组成和相对分子质量分布,并对其保护过氧化氢所致人肝癌细胞(HepG2)氧化损伤的作用进行了研究。首先采用不同浓度小麦低聚肽作用HepG2细胞4 h,然后用150μmol/L过氧化氢氧化损伤细胞4 h,以细胞存活率、细胞内活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量评价小麦低聚肽对HepG2细胞的保护作用。结果表明,小麦低聚肽相对分子质量小于1 000的组分高达93.44%,谷氨酸及脯氨酸含量较高;小麦低聚肽具有增加细胞存活率、抑制细胞内ROS生成、降低细胞内MDA含量的活性,对减少HepG2细胞的氧化应激及提高细胞抗氧化能力具有较好的作用效果。本研究从细胞水平上揭示了小麦低聚肽对过氧化氢所致的肝脏损伤具有一定的预防保护作用。     

玉米糖肽对酒精诱导损伤LO2细胞的保护效应

构建LO₂细胞酒精性损伤模型,在细胞水平上研究玉米糖肽干预对酒精诱导损伤的LO₂细胞的保护效应,并探讨玉米糖肽拮抗酒精性肝细胞损伤的可能机理。结果表明:与酒精模型组相比,50 μg/mL玉米糖肽的预处理能够增加损伤LO₂细胞中酒精代谢酶(ADH和ALDH)和抗氧化酶(SOD、CAT和GSH-Px)活力以及GSH含量;降低ROS和MDA含量,说明玉米糖肽通过促进酒精代谢和增强抗氧化活力,维持LO₂细胞结构的完整,防止肝内酶(AST、ALT和LDH)的泄露,并降低LO₂细胞早期凋亡和死亡细胞的比例,达到保护酒精诱导损伤的LO₂细胞的效果。     

白藜芦醇对不同时间高糖诱导HepG2细胞氧化损伤的保护作用

研究白藜芦醇对不同时间高糖诱导HepG2氧化损伤的保护作用。33 mmol/L高糖作为诱导剂,与不同浓度白藜芦醇(0.1、1、10μmol/L)共同孵育24、48、72 h,采用MTT法检测其对损伤细胞存活率的影响,DCFH-DA荧光探针法检测细胞自由基水平,测定细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)水平,Real-time PCR测定Nrf2、HO-1 mRNA表达水平,探讨白藜芦醇对高糖损伤细胞的保护作用及可能机制。结果表明,白藜芦醇与高糖共同作用48 h以上时,各浓度组均能显著提高损伤细胞存活率,显著降低细胞自由基水平(p0.05);各浓度组均能改善模型氧化还原状态,其中10μmol/L白藜芦醇作用48 h时效果极显著(p0.01);10μmol/L白藜芦醇作用48 h时,极显著上调Nrf2、HO-1mRNA表达水平(p0.01)。因此,白藜芦醇能通过清除细胞自由基、改善细胞氧化还原状态、上调抗氧化通路相关基因表达,抑制高糖诱导HepG2细胞的损伤。     

朝鲜蓟叶水提取物对酒精诱导人肝癌细胞株HepG2损伤的影响

目的通过建立酒精损伤HepG2细胞模型,探讨朝鲜蓟叶水提取物对酒精诱导的HepG2细胞损伤的影响。方法以人肝癌细胞株HpeG2为实验材料,采用酒精加入细胞培养液培养HepG2细胞,建立酒精损伤HepG2细胞模型,以MTT(3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide)法筛选酒精处理浓度、时间以及朝鲜蓟叶水提取物最佳作用浓度,通过检测各组细胞培养基中谷丙转氨酶(alanine aminotran-sferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)和细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、甘油三酯(triglyceride,TG)的活性,来评价朝鲜蓟叶水提取物对酒精诱导的HepG2肝细胞损伤的影响。结果分别以0.6%、1.2%、2.4%的酒精浓度联合2.5、5、10μg/mL朝鲜蓟叶水提取物培养HepG2细胞48 h。模型组随着酒精浓度增高,细胞的AST、ALT、TG、MDA水平明显升高,SOD活性显著下降。处理组随着朝鲜蓟叶水提取物使用浓度的增加,细胞中AST、ALT、TG、MDA水平与模型组相比明显下降,SOD活性升高,对HepG2细胞的保护作用增强。结论朝鲜蓟叶水提取物在一定程度上能保护酒精受损的HepG2细胞,具有深入研究和开发的潜能。     

甲状腺素对HepG2细胞氧化损伤的保护作用

研究甲状腺激素(T3)对人肝癌细胞(HepG2)氧化损伤的保护作用。体外建立HepG2细胞H2O2氧化损伤模型,添加不同浓度T3进行保护,测定T3对细胞ROS、存活率、抗氧化酶及相关基因的影响。10-9、10-7、10-5mol/L的T3预处理24 h可分别有效降低50、100、200μmol/L H2O2处理细胞的ROS水平,提高细胞存活率(p0.05)。但10-5mol/L的T3反而会增加50μmol/L H2O2处理细胞的ROS水平,降低存活率(p0.05)。适量T3可显著降低H2O2氧化损伤的HepG2细胞MDA含量(p0.05),显著提高T-AOC、GSH-Px以及SOD活性(p0.05)。但过量T3会增加细胞MDA水平,降低酶活。基因表达也有类似趋势,T3预处理使损伤细胞内PI3K、Nrf2的表达显著提高(p0.05),且与T3作用剂量相关。可见T3对H2O2氧化损伤的HepG2细胞的氧化还原状态具有明显的改善作用,其抗氧化保护功能与提高抗氧化酶的活性及细胞内抗氧化相关基因的表达有关,且T3作用效果与其剂量及细胞损伤水平相关。     

末水坛紫菜蛋白源抗氧化肽的制备、分离纯化与体外抗氧化活性

通过单因素试验、Box-Behnken设计响应面分析法优化酸性蛋白酶水解末水坛紫菜蛋白工艺,并测定不同水解时间的酶解产物体外抗氧化活性与分子质量分布。结果表明:当水解时间4 h、底物质量浓度2 g/100 mL、加酶量4 240 U/g、pH 3.7、温度54℃的条件下,水解度可高达11.40%。此外,通过调节水解时间以控制水解度,探讨了水解度与酶解产物抗氧化活性的关系,发现当水解时间为4 h、水解度为11.40%时,酶解产物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除活性最强,其清除DPPH自由基的半抑制率质量浓度为0.68 mg/m L,分子质量小于1 kDa的小分子肽占总量的73.46%。同时,采用凝胶色谱层析对末水坛紫菜酶解产物进行了分离纯化,得到末水坛紫菜抗氧化肽(Porphyra haitanensis antioxidant peptide,PHAP),其质量浓度为1 mg/m L时对DPPH自由基的清除率为73.32%,对羟自由基的清除率为30.15%。最后通过建立H2O2诱导人肝癌HepG2细胞的氧化应激模型,证实了PHAP对HepG2细胞的氧化损伤具有修复作用,可增强超氧化物歧化酶的活性,降低脂肪氧化产物丙二醛的含量。     

坛紫菜多酚抗氧化及抑制UVB致HSF细胞氧化损伤作用

从坛紫菜中提取分离制备多酚组分,通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、抑制β-胡萝卜素褪色能力和铁还原能力分析法评价坛紫菜多酚的体外抗氧化作用;以紫外线B(ultraviolet radiation B,UVB)致人表皮成纤维细胞(human skin fibroblast cells,HSFs)损伤模型评价坛紫菜多酚抑制紫外损伤表皮作用,考察其用于防护紫外损伤领域的可行性。体外实验结果显示,坛紫菜多酚具有较强的抗氧化作用,其DPPH自由基清除能力与同等质量浓度的二丁基羟基甲苯(butylated hydroxytoluene,BHT)相当;但抑制β-胡萝卜素亚油酸体系褪色能力和铁还原能力弱于同等质量浓度的BHT。细胞实验结果显示,坛紫菜多酚能有效降低UVB辐照所致HSFs的乳酸脱氢酶活力,维护细胞膜的完整性;降低受损细胞的活性氧类水平,增加超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性,从而降低细胞的氧化应激状态,提升内皮细胞的抵抗氧化应激的能力,显著抑制HSFs凋亡水平。坛紫菜多酚能在细胞水平有效保护HSFs免受UVB的氧化损伤,表明紫菜多酚具有用于紫外损伤防护领域的潜力。     

鞣花酸和石榴皮多酚提取物抗氧化活性的比较

对鞣花酸提取物(EA)和石榴皮多酚提取物(PE)的抗氧化活性进行比较研究。通过HPLC法检测EA和PE中鞣花酸的含量,Folin-酚法检测PE中总多酚含量;采用H2O2处理HepG2细胞建立细胞氧化应激损伤模型,MTT法比较不同浓度的EA和PE对HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用;采用DPPH法、·OH清除法检测PE和EA体外抗氧化作用。结果表明:与EA相比,PE中鞣花酸含量很低,但PE和EA均以剂量依赖的方式提高氧化损伤的HepG2细胞生存率,有显著的保护作用,且在同一的浓度下,PE的保护作用显著高于EA。PE和EA对DPPH法、·OH清除法的清除率均呈剂量依赖性增强。     

麦胚清蛋白抗氧化肽的筛选及对细胞氧化损伤的保护作用

本研究运用超滤与凝胶层析等分离纯化技术逐级分离麦胚清蛋白中性蛋白酶酶解产物,以氧化自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）与2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid),ABTS）阳离子自由基清除率为评价指标,筛选具有较高抗氧化活性的产物组分,并以该组分为研究对象,利用液相色谱-串联质谱结合PeptideRanker数据库活性预测技术筛选出具有高抗氧化活性的小肽,并通过高糖诱导血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）及H2O2诱导HepG2细胞与VSMCs建立细胞氧化应激模型,评价小肽对细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,经超滤与层析筛选出分子质量较小的V组分抗氧化活性最高,液相色谱-串联质谱鉴定出该组分主要由20 个小肽组成,PeptideRanker预测与抗氧化实验验证发现肽序列LNYPPY（765.3 Da）抗氧化活性最高（ORAC 3.01 μmol TE/μmol）、ABTS阳离子自由基清除率95.58%）。肽序列LNYPPY对H2O2诱导的HepG2细胞和VSMCs氧化损伤具有很好的保护作用,但对高糖诱导的VSMCs异常增殖以及活性氧水平上升无明显影响。综上,肽LNYPPY具有良好的体外抗氧化活性,且对H2O2诱导的细胞氧化损伤具有保护作用,研究可为麦胚清蛋白的开发利用提供重要的理论参考。     

不同纯度茶多酚和茶黄素的抗氧化活性

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除实验和氧化损伤酵母细胞实验模型,对不同纯度的茶多酚和茶黄素的抗氧化活性进行比较研究。结果表明,茶多酚和茶黄素均对DPPH自由基具有一定的清除能力。氧化损伤酵母细胞实验结果表明,茶多酚和茶黄素对酵母细胞氧化损伤具有一定的保护作用,且在一定浓度范围内其保护能力呈剂量依赖关系。98%茶多酚对DPPH自由基清除率最高;60%茶黄素和90%茶多酚对H2O2氧化损伤酵母细胞保护作用相当;60%茶黄素对紫外氧化损伤酵母细胞保护作用最强。茶多酚和茶黄素具有一定的体外和细胞抗氧化活性,且不同方法测得的抗氧化活性存在一定的差异。     

Antioxidant activity and hepatoprotective effect of Schizandra chinensis Baill. Extracts containing active components in alcohol-induced HepG2 cells

The antioxidant activities and hepatoprotective effects of Schizandra chinensis Baill. extracts (SCE) were evaluated. The contents of the active components schisandrin, schisandrin C, gomisin A, and gomisin N in SCE were 8.802±1.390, 1.011±0.203, 0.954±0.191, and 3.351±0.829 mg/g, respectively. The antioxidant activity of SCE was measured based on the DPPH free radical scavenging activity and the superoxide dismutase (SOD)-like activity. The IC₅₀ values for the DPPH radical scavenging activity and SOD-like activity were 18.1 and 44.2mg/mL, respectively. The protective effect of SCE against alcohol-induced oxidative injury in HepG2 cells was investigated. Cells pretreated with SCE (100–400 μg/mL) showed an increased resistance to oxidative stress in a dose-dependent manner. Expressions of Bcl-2 and pro-caspase-3 proteins were induced by SCE in HepG2 cells. SCE can be useful for management of antioxidant and hepatoprotective effects.     

红平菇胞外多糖体外抗氧化及对高血脂小鼠体内抗氧化能力探究

目的:探究红平菇胞外多糖（Extracellular polysaccharides,EPS）体外抗氧化能力及抵抗高血脂小鼠体内肝脏组织氧化损伤的功效。方法:通过EPS对O₂-·、DPPH自由基和·OH的清除力,测定其体外抗氧化能力;构建高血脂小鼠模型,分为空白对照组（NC）、高血脂模型组（MC）、阳性对照组（PC）、EPS高、低剂量组;NC组随机分配10只正常小鼠,剩余组每组随机分配高血脂模型小鼠10只,干预14 d后,测定EPS对高血脂小鼠肝脏组织内谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、丙二醛（MDA）、过氧化脂质（LPO）活性的影响,衡量其体内抗氧化能力。同时,观察小鼠的肝脏部位病理学切片,探究EPS对受到氧化应激损伤的肝脏细胞的修复能力。结果:EPS对O₂-·、DPPH自由基和·OH的饱和清除率分别达到55.05%、64.09%和28.91%。EPS可以显著提高（P<0.05）高血脂小鼠肝脏组织抗氧化酶系含量,显著降低（P<0.05）脂质过氧化物活性,同时对肝脏氧化应激损伤具有较好的修复作用。结论:EPS具有较强的体外抗氧化作用,并对高血脂小鼠肝脏组织表现出较好的抗氧化能力及氧化损伤修复能力。     

血根碱清除自由基及抑制生物大分子氧化的作用

目的：评价血根碱的体外抗氧化活性,为血根碱作为天然抗氧化剂的应用提供理论依据。方法：采用DPPH自由基清除法测定血根碱的体外抗氧化能力;采用Cu2+/H2O2和AAPH体系诱导牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）氧化损伤和羰基化损伤模型,研究血根碱对上述损伤的保护作用;采用TBA法分别测定血根碱对FeSO4诱导的大豆卵磷脂氧化损伤的抑制作用,及AAPH诱导的鲱鱼精DNA氧化损伤的抑制作用。结果：血根碱可有效清除DPPH自由基,且呈浓度依赖性,在100 μmol/L时清除率为85.94%;1～100 μmol/L的血根碱可显著保护Cu2+/H2O2及AAPH体系诱导的BSA损伤;10～100 μmol/L的血根碱可显著保护由Cu2+/H2O2体系诱导的BSA蛋白羰基化,当浓度为0.1～100 μmol/L时可显著保护由AAPH诱导的BSA蛋白羰基化;血根碱浓度在6.25～100 μmol/L范围内均可显著抑制由FeSO4及AAPH诱导的大豆卵磷脂及鲱鱼精DNA的氧化损伤。结论：血根碱可有效清除自由基及保护蛋白氧化损伤和羰基化损伤,亦可显著抑制脂质及DNA氧化损伤。     

北虫草多糖提取工艺优化及其细胞氧化损伤保护作用

目的:优化北虫草多糖的提取工艺,研究北虫草多糖对血管平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用L₉(34)正交实验法优化多糖提取工艺,利用羟自由基法、DPPH自由基法和FRAP法检测北虫草多糖清除自由基的能力。在细胞水平上构建过氧化氢诱导细胞氧化损伤模型,采用MTT法、ROS细胞染色法评估北虫草多糖对过氧化氢诱导大鼠主动脉平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。结果:北虫草多糖的最佳提取条件为:提取温度90 ℃,料液比1:30 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,最高得率为7.94%±0.16%。在多糖浓度为1.6 mg/mL时对羟自由基和DPPH自由基的清除能力以及总抗氧化能力分别为75.57%±1.39%、80.23%±2.75%和(0.22±0.01) mmol/mg。细胞实验表明北虫草多糖可显著抑制过氧化氢诱导细胞内ROS生成,提高细胞存活率。结论:成功优化北虫草多糖提取工艺,北虫草多糖具备良好的体外清除自由基的活性,对由氧化应激所导致的心血管疾病中起到很好的防治意义。     

玉米胚芽蛋白水解物的抗氧化活性研究

以玉米胚芽蛋白水解物为底物,通过对其羟基自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、二苯基苦味酸基苯肼(DPPH)自由基清除能力、Cu2+螯合能力、在亚油酸体系中的抗氧化性、油脂过氧化值(POV)等指标的测定,研究玉米胚芽蛋白水解物的抗氧化活性.结果表明,玉米胚芽蛋白水解物对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基具有一定的清除能力,且浓度为6mg/mL时,清除效果最好;对Cu2+具有螯合能力,并且螯合能力随着玉米胚芽蛋白水解物浓度的增加而呈上升趋势;对亚油酸氧化具有抑制作用,作用效果与剂量成正相关,同时对油脂的POV值具有抑制作用,浓度为0.1％时抑制作用最强.