苦瓜多糖降血糖活性的高通量筛选研究

PPAR与2型糖尿病存在密切关系,该受体已成为抗2型糖尿病的主要靶点。本文以PPAR三种亚型PPARα、PPARγ和PPARβ/δ为靶点的高通量筛选模型,对苦瓜多糖进行活性筛选。筛选结果表明苦瓜多糖对PPARδ和PPARγ具有较强的激活效果,其激活倍数分别达1.995、1.689。苦瓜多糖是一种潜在的降糖、降脂的活性成分。     

苦瓜多糖的分子修饰及抗氧化活性研究

目的通过羧甲基化及金属络合对苦瓜多糖进行分子修饰,比较不同修饰方法对其抗氧化活性产生的影响。方法采用水提醇沉法分离制备苦瓜粗多糖(Momordica charantia polysaccharide,MCP),以DEAE-52离子交换层析梯度洗脱获得4种苦瓜多糖组分(MCPⅠ,MCPⅡ,MCPⅢ,MCPⅣ)。将其中活性较高组分MCPⅡ进行羧甲基化及金属络合获得苦瓜多糖衍生物CMMCPⅡ、MCPⅡ-Ca(Ⅱ),并以Fenton法检测其·OH清除率。结果苦瓜多糖活性组分MCPⅡ及其衍生物MCPⅡ-Ca(Ⅱ)、CMMCPⅡ均具有抗氧化活性,在质量浓度为0.7mg/m L时,其对·OH的清除率分别为58%、82%和93%,SC50值均在0.6 mg/m L以下,其中,苦瓜多糖羧甲基化衍生物的抗氧化活性最高。结论通过羧甲基化及金属络合可增强苦瓜多糖生物活性。     

水提苦瓜多糖的分离纯化及组成性质研究

目的:从苦瓜中分离水溶性苦瓜多糖,并研究其组成性质。方法:采用DEAE纤维素柱层析和凝胶柱层析分离纯化得到苦瓜多糖MCP2和MCP4,SepharoseCL-6B凝胶柱层析和醋酸纤维膜电泳检测证明为均一组分。气相色谱法和薄层层析法测定其多糖组成,凝胶过滤法测定其相对分子质量,红外光谱测定其糖苷键类型。结果:苦瓜多糖MCP2为半乳聚糖,MCP4含有鼠李糖、木糖、半乳糖和阿拉伯糖,它们的摩尔比为1:0.75:1.83:0.85。平均相对分子质量分别为5.37×104,9.65×104。它们的红外光谱中有典型的多糖吸收峰,紫外扫描无核酸和蛋白特征吸收峰。结论:MCP2,MCP4首次从苦瓜中提取获得,为均一多糖组分。     

黄茶降脂活性高通量筛选的研究

现代研究表明,PPAR与心血管疾病有着密切关系,该受体已成为血脂代谢异常的主要靶点。主要是以其3种亚型PPARα、PPARγ和PPARβ/δ作为模型,对黄茶水提物(1#)与黄茶醇提物(2#)进行高通量(HTS)活性筛选。筛选结果为:2#样品对激活PPAR受体γ、PPAR受体δ有较为明显的活性,对激活PPAR受体α则没有作用,其激活倍数分别达1.64、1.96。     

余甘子提取物降血糖活性及其主要成分研究

为研究余甘子提取物的降血糖作用机制,本文研究了其对LO2细胞葡萄糖转运蛋白2(GLUT-2)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)m RNA表达及过氧化物酶体增殖物反应元件(PPER)和核转录因子kappa B(NF-κB)活性的影响。该实验采用D101大孔树脂柱对余甘子提取物进行初步分离,得到三个组分;采用Real-Time PCR和荧光素酶报告基因方法研究余甘子提取物及其有效组分对GLUT-2和PPARγm RNA表达和PPER和NF-κB荧光素酶活性。余甘子提取物可以显著升高GLUT-2和PPARγm RNA的表达和PPRE报告基因的活性,抑制脂多糖(LPS)诱导的炎症反应,可以降低NF-κB报告基因的活性,随着浓度的升高其抑制作用增强。大孔树脂柱30%乙醇洗脱物为其有效活性组分。通过Sephadex LH-20,ODS和制备HPLC等柱色谱技术分离鉴定了一个主要的成分为没食子酸;余甘子可能是通过升高GLUT-2和PPARγ的表达和抑制相关炎症通路发挥降血糖作用,没食子酸可能为其主要的活性成分。     

苦瓜多糖的分离纯化及抗氧化性的研究

采用DEAE-Cellulose DE-52柱层析、Sephadex G-75葡聚糖凝胶柱、GPC和化学分析等手段,探讨了苦瓜粗多糖的分离纯化及抗氧化性等功能活性.结果表明,苦瓜粗多糖经分离提纯后初步得到四个部分,所占比例依次为64.28%、14.28%、7.14%和14.28%,样品纯度迭到约96%.纯化的苦瓜多糖重均分子量集中在33000Da附近.苦瓜多糖溶液对有机自由基和超氧离子具有显著清除作用.清除率随多糖溶液浓度的增加而提高,存在最适浓度,在某些条件下接近100%.     

长白山区核桃青皮多糖分离纯化、鉴定及抗氧化活性分析

对核桃青皮多糖（polysaccharide of walnut green husks,JPs）进行分离纯化,并对得到的多糖进行单糖组成及体外抗氧化活性分析。利用超声波辅助提取JPs,经醇沉、除蛋白、透析等一系列处理后,先后利用DEAE-Sepharose和Sephadex?G-100柱色谱分离纯化JPs得到了两种均一多糖（JPs-1-1和JPs-2-1）;利用高效凝胶渗透色谱法测定两种均一多糖的分子质量分别为5.45×104、5.22×104?u;利用PMP-柱前衍生高效液相色谱法测定了两种均一多糖的单糖组成,均是由鼠李糖（Rha）、葡萄糖醛酸（GlcA）、半乳糖（Gal）、葡萄糖（Glc）、半乳糖醛酸（GalA）、木糖（Xyl）及阿拉伯糖（Ara）以不同的物质的量比组成。总抗氧化能力实验、1,1-二苯基-2-苦味基肼自由基和羟自由基清除实验结果表明JPs及分离纯化得到的两种均一多糖均具有较好的抗氧化活性,而且抗氧化活性的能力与样品的质量浓度呈正相关。     

苦瓜果实中多糖的分离纯化及性质分析

以苦瓜果实为材料,经热水抽提、乙醇沉淀和Sevag 法去蛋白后获得了苦瓜果实粗多糖(MCP)。MCP 经DEAE- 纤维素柱离子交换柱层析分离得到4 个级分MCP-A、MCP-B、MCP-C 和MCP-D。MCP-A 经Superdex G-100 柱进一步纯化得到苦瓜果实多糖MCP-A1 组分。MCP-A1 经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)鉴定为均一组分,测定其平均分子量为93577D。经过对其理化性质鉴定表明,MCP-A1 不含蛋白质、核酸,含有糖醛酸,为非淀粉类多糖。红外光谱扫描结果表明,其具有典型的多糖吸收峰。     

高通量筛选辣椒素与辣椒素酯生物活性的初步研究

目的:研究辣椒素及辣椒素酯类物质的生物活性.方法:采用高通量药物筛选方法,以过氧化物酶增殖激活受体(Peroxisome Proliferator-Activated Receptor,PPARγ)模型及小鼠前脂肪细胞313-L1模型研究辣椒素及辣椒素酯类物质在糖脂代谢中的作用;通过乳腺癌细胞(MCF-7)和肝癌细胞(HepG2)研究它们对肿瘤细胞生长的影响.结果:辣椒素(capsaicine)及辣椒素类物质(辣椒素与二氢辣椒素混合物)在质量浓度10μg/mL时对PPARγ受体的相对激活倍数均大于2倍;酶促合成的辣椒素酯类物质(壬酸香草醇酯、癸酸香草醇酯、天然结构辣椒素酯类物质、菜油基香草醇酯类物质)4个样品的四氮唑盐酶还原法(MTS)试验毒性范围大于50μg/mL,它们的质量浓度为50μg/mL时对PPARγ受体的相对激活倍数分别达到10.7、9.2、9.9、1.5倍.当试验样品的质量浓度为10μg/mL时对小鼠前脂肪细胞3T3-L1的脂肪分化进程没有显著的抑制作用.当辣椒素类物质质量浓度为50μg/mL,酶法制备的天然结构辣椒素酯类物质(capsinoids)质量浓度为100μg/mL时,均对试验的乳腺癌细胞(MCF-7)和肝癌细胞(HepG2)有明显的抑制作用.结论:辣椒素及辣椒素酯类物质具有PPARγ活性及显著的抑制乳腺癌细胞(MCF-7)和肝癌细胞(HepG2)活性.     

冠突散囊菌胞外多糖生物活性高通量筛选试验

目的：探讨冠突散囊菌胞外多糖的生物活性以及茯砖茶的功能成分；方法：从不同培养基冠突散囊菌液体发酵液中分离出胞外多糖ECP和ECP，采用高通量筛选技术，选用PPARs、K526和HepG2模型对其减肥降脂和抗肿瘤活性进行初步研究；结果：冠突散囊菌胞外多糖对PPARα、PPARγ、PPARδ3种模型均有活性，且对PPARγ模型有强的活性，ECP和ECP#对PPARγ模型激活值分别达1．63和1．41；ECP对K562细胞有一定的抑制作用。