正红菇多糖的抗癌和免疫调节活性研究

本文选用人宫颈鳞癌细胞SiHa进行体外抗肿瘤活性试验,并通过划痕实验对其抗肿瘤活性进行验证;同时选用昆明小鼠脾脏细胞的体外增殖试验和小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红以及刺激巨噬细胞产生NO和IL-6的试验,探讨正红菇子实体多糖(HAP-I)的抗癌和免调节疫活性。结果显示,正红菇多糖在125~2000μg/mL的范围内对SiHa细胞的增殖抑制作用随着浓度的增大而增大,并有一定的剂量依赖性;通过癌细胞划痕实验,证实其对癌细胞SiHa增殖有抑制作用。多糖浓度在10~500μg/mL范围内能够促进淋巴细胞的增殖,且能协同LPS和ConA显著促进淋巴细胞的增殖,HAP-I协同LPS在50μg/mL和100μg/mL浓度时增殖作用显著(p0.05),HAP-I协同ConA在100μg/mL浓度时协同效果最佳。HAP-I能增强巨噬细胞吞噬中性红的能力,并且促进巨噬细胞分泌NO和IL-6,表明正红菇多糖有较好的免疫活性。     

蟾酥水提取物对小鼠免疫功能的影响

研究新提取的蟾酥水提取中试产品体内外对小鼠免疫功能的调节作用。体内实验设蟾酥水提取物的高(2mg/kg)、中(1mg/kg)、低(0.5mg/kg)剂量组、左旋咪唑组和生理盐水组,连续腹腔注射给药3d后分别测定小鼠脾脏和胸腺指数、血液白细胞分类计数、血清中IL-2、IL-4、IL-12和IFN-γ浓度和脾淋巴细胞体外增殖能力;无菌分离健康小鼠的脾淋巴细胞进行体外培养,加入不同质量浓度的蟾酥水提取物(20、10、5μg/ml),协同LPS或Con A共同孵育48h后,采用MTT法测定脾淋巴细胞增殖能力和ELISA法测定脾淋巴细胞上清液中的IL-2、IL-12、IL-4和IFN-γ含量。该蟾酥水提取物能协同Con A和LPS促进脾T、B淋巴细胞的体外增殖能力(P0.01),促进免疫器官生长。明显提高小鼠血清和脾淋巴细胞上清液中IL-2、IL-4、IL-12和IFN-γ水平(P0.01)。该蟾酥水提取物中试产品通过促进小鼠免疫细胞的增殖活性和细胞因子的分泌水平而发挥其免疫调节作用。     

苦瓜多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的影响（网络首发、推荐阅读）

以苦瓜多糖(MCP)为研究对象,在细胞和分子水平上探讨其对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用机制。以空白组和左旋咪唑组为对照,小鼠脾淋巴细胞经不同质量浓度(40,80,160,320μg/mL)的MCP体外刺激,检测MCP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,腹腔巨噬细胞的吞噬活性,淋巴细胞上清液中IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12分泌与mRNA表达水平。分析发现,与空白组相比,随浓度的升高细胞增殖指数倍数增长(P<0.05),MCP能不同程度的促进细胞增殖、不同程度的增强巨噬细胞的吞噬能力(P<0.05);与空白组相较,细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌量最大增幅分别为:42.73%、18%、27.81%、29.42%;IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的mRNA表达显著上升,最高表达水平分别为空白组的9.18、7.53、9.37、8.95倍,存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,MCP能有效提高细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌和mRNA表达水平,促进细胞增殖,增强巨噬细胞的吞噬活性,从而提高机体免疫功能。     

锁阳多糖对巨噬细胞RAW264.7的免疫调节作用的影响

目的 研究锁阳多糖对巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响。方法 以巨噬细胞RAW264.7为研究对象, 设置空白对照组、阳性(LPS)对照组、锁阳多糖给药组(25、50、100、200、400 μg/mL), 用CCK-8法测定细胞增殖活性, 中性红法测定其吞噬活性; Griess法测定其对NO分泌量的影响; ELISA法测定其IL-6和TNF-α的释放能力。结果 与空白组比较, 不同浓度(25~400 μg/mL)锁阳多糖均能够促进巨噬细胞RAW264.7的增殖(P<0.05或P<0.01), 干预24 h和48 h的增殖活性明显高于干预6 h和12 h的增殖活性(P<0.05); 锁阳多糖(25~ 400 μg/mL)能显著促进细胞的吞噬活性(P<0.05); 干预48 h后, 锁阳多糖(25~400 μg/mL)的NO分泌量显著高于空白组和LPS组(P<0.05); 与空白组和LPS组相比, 锁阳多糖(25~400 μg/mL)能显著促进细胞IL-6和TNF-α的释放(P<0.01)。结论 锁阳多糖在一定浓度范围内对巨噬细胞RAW264.7具有良好的免疫调节作用。     

不同来源Lfcin对小鼠脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子影响的对比研究

本文以牛乳铁蛋白素Lfcin B和人乳铁蛋白素Lfcin H为研究对象,研究其对小鼠脾淋巴细胞增殖及分泌细胞因子的影响并比较两者的差异及相关性。采用CCK-8法检测不同浓度的Lfcin单独作用对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响及不同质量浓度Lfcin与丝裂原共同作用对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响;ELISA法测定IL-2、IL-4和TNF-α的含量。结果显示:Lfcin B和Lfcin H能显著促进脾淋巴细胞增殖及增强Con A诱导的T淋巴细胞的增殖和LPS诱导的B淋巴细胞的增殖,并且能显著促进脾淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、TNF-α(P0.01)。研究结果表明:Lfcin能有效的促进脾淋巴细胞的增殖,并与Con A、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用,其机制可能是通过促进细胞因子的分泌发挥免疫增强作用。     

仿刺参雌性生殖腺皂苷的免疫增强活性研究

目的:以仿刺参雌性生殖腺皂苷（gonad saponins from female of Apostichopus japonicus,AGS）为研究对象,探究其免疫增强活性。方法:通过对巨噬细胞吞噬能力和细胞因子的测定,研究AGS的体外免疫调节活性;通过对免疫低下小鼠胸腺、脾脏指数,碳廓清指数与吞噬指数,腹腔巨噬细胞增殖活性,脾细胞增殖活性,自然杀伤细胞（natural killer cell,NK cell）活力,T淋巴细胞亚群水平及小鼠血清细胞因子的测定,分析AGS在小鼠体内的免疫调节活性。结果:体外实验表明,AGS能提高小鼠体外巨噬细胞吞噬能力,促进TNF-α、IL-6、IFN-γ的分泌,且各组与正常组相比差异显著（P<0.05）;体内实验表明,与模型组相比,中剂量组和高剂量组AGS均能显著提高小鼠胸腺、脾脏指数、碳廓清指数和吞噬指数（P<0.05）,显著增强腹腔巨噬细胞和脾细胞增殖活性（P<0.05）,显著增强NK细胞的活性（P<0.05）,显著提高CD4+/CD8+水平（P<0.05）,显著促进TNF-α、IL-6、IFN-γ的分泌（P<0.05）。结论:AGS在体外和体内都表现出增强免疫的活性。     

大蒜素对脂多糖诱导腹腔巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制

目的:探讨大蒜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制。方法:建立LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应细胞模型,并用地塞米松和不同浓度大蒜素处理,MTT法检测细胞活力,中性红吞噬实验检测吞噬能力,Griess法检测一氧化氮(NO)及ELISA法检测COX-2酶活性和IL-6的分泌,qPCR检测环氧合酶2(COX-2)、一氧化氮合酶(iNOS)和IL-6的mRNA表达水平,Western Blot检测COX-2、iNOS和IL-6的蛋白表达以及核转录因子NF-κB p65及其磷酸化产物的相对表达。结果:大蒜素浓度在40~160 μg/mL范围内对腹腔巨噬细胞均无细胞毒性;与LPS组比较,大蒜素处理组能促进腹腔巨噬细胞的吞噬能力,能显著(P<0.05)抑制炎症因子COX-2酶活性、NO和IL-6的分泌,能显著(P<0.05)抑制基因COX-2、iNOS和IL-6 mRNA和蛋白的相对表达,并极显著(P<0.01)抑制NF-κB p65信号通路的磷酸化。结论:大蒜素能显著抑制LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的炎症反应,其机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关。     

阿胶对小鼠免疫功能的影响

目的：探讨阿胶对小鼠免疫功能的影响。方法：小鼠连续皮下注射氢化可的松建立免疫机能低下模型,用不同剂量的阿胶灌胃小鼠28d后,分别测定小鼠的免疫器官重量、血清溶血素水平、迟发型变态反应、脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬能力、血清中细胞因子白介素-3（IL-3）、γ-干扰素（IFN-γ）和白介素-4（IL-4）水平。结果：阿胶能显著升高免疫低下模型小鼠胸腺指数（P〈0.05,P〈0.01）;显著提高小鼠血清溶血素含量（P〈0.01）;显著促进小鼠的迟发型变态反应和脾淋巴细胞的增殖能力（P〈0.05,P〈0.01）;显著升高小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数（P〈0.05,P〈0.01）;显著提高血清中细胞因子IL-3和IFN-γ水平（P〈0.05,P〈0.01）,降低IL-4水平（P〈0.05,P〈0.01）,提高IFN-γ/IL-4的比值（P〈0.01）。结论：阿胶对小鼠特异性及非特异性免疫机能具有显著调节作用。     

林蛙油蛋白中性蛋白酶水解物促进脾细胞和巨噬细胞功能

用盐析法结合超声波破碎细胞处理技术,从林蛙油中提取蛋白,并用中性蛋白酶制备林蛙油蛋白酶水解物。通过小鼠脾淋巴细胞增殖实验、脾淋巴细胞分泌白细胞介素-2水平、巨噬细胞吞噬中性红实验及巨噬细胞体外释放NO实验,研究林蛙油、林蛙油蛋白及其中性蛋白酶水解物对脾细胞和巨噬细胞功能的影响。研究结果发现,林蛙油、林蛙油蛋白及其中性蛋白酶水解物均对脾淋巴细胞及巨噬细胞的免疫功能具有不同程度的促进作用,其中林蛙油蛋白中性蛋白酶水解物显示较显著的促进作用(p<0.01)。其中性蛋白酶水解物可分别增强脾淋巴细胞增殖、脾淋巴细胞分泌白细胞介素-2、巨噬细胞吞噬功能及巨噬细胞产生NO功能达19.3%、104.8%、109.1%及34.9%。以上结果表明,林蛙油蛋白的中性蛋白酶水解物可显著提高脾淋巴细胞和巨噬细胞功能(p<0.01)。     

蓝莓花色苷对小鼠淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的免疫调节作用

为探讨蓝莓花色苷对淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。无菌分离淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,制备淋巴细胞和腹腔巨噬细胞悬液,以终浓度为4、8、16、32、64 mg/mL的蓝莓花色苷作用于体外培养的淋巴细胞(48 h)和腹腔巨噬细胞(24 h),采用MTT法检测蓝莓花色苷对淋巴细胞增殖率及中性红吞噬实验检测腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,ELISA法检测蓝莓花色苷对淋巴细胞(IL-6白细胞介素-6)、(TNF-α肿瘤坏死因子-α)和腹腔巨噬细胞(IL-4白细胞介素-4)、(IL-12白细胞介素-12)分泌的影响。结果显示,蓝莓花色苷各浓度组淋巴细胞增殖率、腹腔巨噬细胞的吞噬活性、培养上清中淋巴细胞IL-6、TNF-α及腹腔巨噬细胞IL-12的分泌高于空白组(p<0.05),各浓度组与阳性组腹腔巨噬细胞IL-4分泌量均低于空白对照组(p<0.05)。蓝莓花色苷可能通过促进淋巴细胞增殖和提高腹腔巨噬细胞吞噬及分泌功能,提高机体免疫功能。     

河蚬糖蛋白体外免疫功能研究

目的:研究河蚬糖蛋白对小鼠体外免疫功能的影响。方法:无菌分离小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,与不同质量浓度(5、25、125、625μg/mL)的河蚬粗糖蛋白和高纯度糖蛋白CFP共同培养,采用MTT法测定其对淋巴细胞增殖和腹腔巨噬吞噬能力的影响。结果:在无有丝分裂原诱导下,125μg/mL的粗糖蛋白和4个浓度的CFP都有促进脾淋巴细胞的作用。在有丝分裂原刺激下,粗糖蛋白和CFP的刺激指数都比未加有丝分裂原时增大。125μg/mL粗糖蛋白和4个浓度的CFP都有提高巨噬细胞的吞噬能力,且2种河蚬糖蛋白都表现出一定的剂量效应关系。结论:河蚬粗糖蛋白和CFP均有免疫增强活性,其中CFP的活性较强。     

酶解鸡蛋清寡肽混合物对小鼠体外免疫功能的影响

考察了用Alcalase（AL）、Flourezyme（FL）、木瓜蛋白酶（PA）、胃蛋白酶（PE）和胰蛋白酶（TR）酶解鸡蛋清制得的5种酶解鸡蛋清寡肽混合物（MOEE）对小鼠体外免疫功能的影响．采用体外培养，细胞吞噬试验和细胞增殖试验，观察同一MOEE不同剂量以及同一剂量不同MOEE对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和脾细胞增殖能力的影响,结果发现，所有MOEE均能显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，促进小鼠脾淋巴细胞增殖，且表现出一定的剂量效应关系．其中，1．0mg／mL不同MOEE促进巨噬细胞吞噬能力（PI）大小顺序为：FL1-5〉PA1-55〉TR1-55〉AL1-5〉PE1-5〉对照；促脾淋巴细胞增殖能力（SI）大小顺序为：FL1-5〉AL1-5〉PA1-5〉TR1-5〉PE1-5〉对照（无丝裂原），FL1-5〉PA1-5〉TR1-5〉AL1-5〉PE1-5〉对照（LPS刺激），FL1-5〉TR1-55〉PE1-5〉PA1-5〉AL1-5〉对照（ConA刺激）．结果表明，所有MOEE都具有免疫增强活性，且以FL1-5的活性最强．     

纳豆粉对小鼠免疫调节作用的试验研究

探讨纳豆粉对小鼠的免疫调节作用。方法 以不同剂量的纳豆粉连续经口给予小鼠30 d,然后通过细胞免疫、体液免疫、吞噬系统功能、自然杀伤细胞活性4个方面的试验结果评价纳豆粉对小鼠免疫系统的作用。结果 纳豆粉能够增强小鼠的脾淋巴细胞增殖、转化作用,提高小鼠的迟发型变态反应程度,促进小鼠的抗体生成细胞增殖,提高小鼠的血清溶血素水平,增强小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清能力和腹腔巨噬细胞吞噬能力,对自然杀伤细胞活性无明显影响。结论 纳豆粉可提高小鼠的免疫力。     

阿魏侧耳胞外多糖对荷瘤小鼠免疫能力的影响

通过皮下注射小鼠腹水瘤细胞构建荷瘤小鼠模型,灌胃法给药,采用血液分析仪、细胞培养、酶联免疫吸附等设备和方法测定血液中白细胞和淋巴细胞数量、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾淋巴细胞增殖能力、免疫器官指数、血浆中肿瘤坏死因子-α含量等来研究阿魏侧耳胞外多糖对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用。结果显示：与荷瘤对照组相比,灌胃100、200 mg/kg的阿魏侧耳胞外多糖可显著降低荷瘤小鼠瘤体质量（P＜0.05）、提高血液中白细胞和淋巴细胞数量（P＜0.05）、促进脾淋巴细胞的增殖（P＜0.05）,增加免疫器官指数（P＜0.05）和血浆中肿瘤坏死因子-α的含量（P＜0.05）;灌胃200 mg/kg的阿魏侧耳胞外多糖可以显著增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力（P＜0.05）。因此,一定浓度的阿魏侧耳胞外多糖可提高荷瘤小鼠的免疫能力。     

干酪乳杆菌胞外多糖诱导小鼠骨髓来源树突细胞成熟以及分泌IL-6、TGF-β和IL-23

为研究干酪乳杆菌（Lactobacillus casei）胞外多糖（exopolysaccharide,EPS）促进体外培养的小鼠未成熟骨髓来源树突细胞（bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs）成熟的作用,分析不同剂量的EPS对BMDCs分泌细胞因子白细胞介素（interleukin,IL）-6、转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）和IL-23的影响,并检测EPS对BMDCs抗原提呈能力的影响。首先从干酪乳杆菌中分离纯化出EPS,并检测EPS的纯度;把从BALB/c小鼠体内分离出的骨髓细胞分化为BMDCs,未成熟BMDCs分别与磷酸盐缓冲液、不同剂量EPS和脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）体外培养,采用流式细胞法检测了BMDCs成熟表面标记物MHC II和CD86的表达,酶联免疫吸附检测（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法分析了IL-6、TGF-β和IL-23的表达量,CCK-8法检测了BMDCs与小鼠脾淋巴细胞的混合培养体系中淋巴细胞的增殖率。结果表明：分离出EPS的纯度约为95%;EPS能够上调BMDCs表面MHC II和CD86的表达量;EPS可以显著促进BMDCs分泌IL-6、TGF-β和IL-23（P＜0.05）,但促进水平低于LPS;EPS可以明显促进BMDCs刺激异基因淋巴细胞的增殖。综上所述,在体外实验中,干酪乳杆菌EPS能够促进BALB/c小鼠BMDCs的成熟,诱导BMDCs分泌与辅助性T17细胞分化和增殖相关的细胞因子IL-6、TGF-β和IL-23,并且可以增强BMDCs的抗原提呈能力。     

龟甲粉对小鼠免疫功能的作用研究

目的研究龟甲粉对昆明种小鼠免疫功能的作用。方法利用40只昆明种小鼠进行龟甲粉抗体生成细胞测定、对昆明种小鼠HC_(50)的影响、碳廓清能力以及鸡红细胞吞噬率及吞噬指数的影响实验。实验设4组,灌胃的龟甲超微细粉分别为生理盐水组与不同剂量组,连续灌胃30 d后测定各项指标。结果 0.3g/(kg·bw)及0.45 g/(kg·bw)组龟甲超粉可以显著促进小鼠B细胞分泌抗体的能力(P0.05),0.45 g/(kg·bw)组龟甲粉能显著增加小鼠半数溶血值(HC_(50))(P0.01),0.15 g/(kg·bw)及0.45 g/(kg·bw)组龟甲粉可以显著提高小鼠单核-巨噬细胞碳廓清能力及小鼠腹腔巨噬细胞鸡红细胞吞噬率及吞噬指数(P0.01)。结论龟甲粉可以增强小鼠体液免疫功能和单核-巨噬细胞功能的作用。     

黑蒜粉膳食补充对环磷酰胺诱导BALB/c小鼠免疫功能的影响

目的：研究黑蒜粉对BALB/c小鼠的免疫调节作用。方法：采用环磷酰胺建立免疫抑制BALB/c小鼠动物模型,检测不同剂量（100、300、900 mg/kg）黑蒜粉对免疫抑制BALB/c小鼠脾脏、胸腺指数、脾淋巴细胞转化活性、迟发型变态反应能力、抗体生成细胞水平、半数溶血值、碳粒廓清速率、脾细胞中白细胞介素（interleukin,IL）-8和IL-12 mRNA表达水平等指标的影响。结果：与模型组相比,黑蒜粉低、中、高剂量组显著提高了小鼠的胸腺指数、抗体生成能力、脾淋巴细胞增殖能力以及脾细胞因子IL-8和IL-12 mRNA的表达量（P＜0.05）;中、高剂量组显著提升了小鼠的脾脏指数和迟发型变态反应能力（P＜0.05）;高剂量组则显著增强了小鼠的血清溶血素水平和单核-巨噬细胞吞噬活性（P＜0.05）。结论：黑蒜粉具有提高BALB/c小鼠免疫功能的作用。     

枸杞-沙棘-青稞粉复合物对小鼠的免疫调节功效

目的 探究枸杞沙棘的提取物与青稞粉复合制成的枸杞-沙棘-青稞粉复合物(wolfberry-sea buckthorn-highland barley powder complex,WSHC)对小鼠的免疫调节活性.方法 以斯普拉格-杜勒(Sprague-Dawley,SD)大鼠和昆明种小鼠为研究对象.在对WSHC进行安全...