耐氧性双歧杆菌的驯化及其培养条件的研究

通过对一株青春双歧杆菌的耐氧驯化,获得了具一定耐氧能力的双歧杆菌ad,该菌株可在含有一定空气容积的密闭容器中良好生长。并探讨了以大豆为主要原料发酵培养青春双歧杆菌ad的工艺条件,其最佳培养基配方为:豆浆浓度3BX,葡萄糖1%,自制乳肽0.5%,番茄汁2.5%,胡萝卜汁2.5%;pH7.0;接种量2%;培养温度37℃;厌氧培养24～48h。发酵液活菌数可达6.9×109cfu/mL。青春双歧杆菌ad发酵液原液直接冷冻干燥,无须添加其他保护剂;双歧杆菌ad冻干前增加温度前处理环节,可提高菌体成活率;双歧杆菌ad含水冻干粉活菌数达1.0×1010cfu/g;绝干样品活菌数达1.1×1010cfu/g。     

长双歧杆菌多因素连续驯化的研究

双歧杆菌因对外界环境的耐受性较差,限制了其规模化生产和实际应用。通过对长双歧杆菌进行连续的耐氧、耐酸以及耐胆盐的驯化,使长双歧杆菌对氧、酸以及胆盐的耐受性有了一定的提高,活菌数和产酸性能都有所提高。耐氧驯化时,通过逐渐增加培养基中的氧分压的方法进行;耐酸驯化时,通过逐渐降低培养基的初始pH的方法进行;耐胆盐驯化时,通过逐渐增加培养基初始胆盐含量的方法进行。实验结果表明,耐氧耐酸驯化后的菌株活菌数能达到9.4×108 cfu/mL,为初始菌的1.92倍;耐胆盐驯化后的菌株在胆盐浓度为0.3%时培养也能保持一定的活菌数,而初始菌株不能存活。     

青春双歧杆菌的耐氧驯化及不同低聚糖对其增殖效果的影响

为改善青春双歧杆菌在发酵产品中活菌数低、菌种功效弱的情况,对厌氧青春双歧杆菌进行耐氧驯化,采用无氧有氧交替驯化法,在驯化过程中逐渐增加青春双歧杆菌培养液的氧分压,测定青春双歧杆菌驯化前后生理特性,并对比大豆低聚糖、低聚木糖、低聚麦芽糖对青春双歧杆菌增殖的影响。结果表明,青春双歧杆菌在耐氧驯化后对氧气的敏感程度下降,有氧条件下生长能力达标,产酸能力得到提升,菌体驯化前后形态基本一致,耐氧青春双歧杆菌代谢产生的乙酸与乳酸比值较厌氧青春双歧杆菌更适宜发酵,在3种低聚糖中,低聚木糖对青春双歧杆菌增殖作用明显,可作为青春双歧杆菌良好的双歧因子。耐氧驯化后的青春双歧杆菌有着优良的生理特性,能够作为潜在的益生菌菌种深入研究其功能并可应用于发酵食品中。     

母乳源长双歧杆菌的筛选鉴定及耐氧驯化

目的：从母乳中筛选双歧杆菌，并提高双歧杆菌在有氧条件下的耐受性。方法：采用稀释涂布法结合16S rDNA鉴定法从母乳中筛选出双歧杆菌，并采用逐渐增加氧分压和有氧厌氧交替的方法进行驯化。结果：筛选得一株MEFZ-2201菌株，通过16S rDNA测序比对，其与长双歧杆菌模式菌（NCBI登录号：ON631733.1）的同源性达到了100%，鉴定为长双歧杆菌（Bifidobacterium longum）。将长双歧杆菌MEFZ-2201进行驯化后，其有氧培养最高的活菌数为8.9×10⁹ CFU/mL，比未经驯化的菌株活菌数提高了一个数量级；此外，驯化前后菌株的生理生化及形态特征并未发生变异；在短链脂肪酸的产生量上，驯化后菌株在厌氧条件下产酸量也显著高于驯化前的菌株。结论：驯化后的长双歧杆菌MEFZ-2201在有氧条件下的活菌数明显提高，有望成为潜在的益生菌菌株进一步开发利用。     

动物双歧杆菌乳亚种BZ11的耐氧驯化及降胆固醇性能的研究

为了提高动物双歧杆菌乳亚种BZ11对有氧环境的耐受性,采用逐渐增加培养基中的氧分压和有氧、厌氧条件下交替培养两种方案对其进行了耐氧驯化。通过对驯化前后菌株的生长特性进行分析得出逐渐增加培养基中的氧分压的驯化方案取得了更好的效果。经最优方案驯化后的菌株在有氧条件下培养20 h后,活菌数可达到6.30×10~8CFU/m L,是初始菌株的2.24倍。驯化后菌株的降胆固醇率为27.31%±0.80%,与初始菌株相比没有显著性差异(P0.05)。通过鉴定得出,动物双歧杆菌乳亚种BZ11在耐氧驯化前后保持了相似的形态及生理生化特征。因此,驯化后的菌株有望作为1株潜在益生菌被开发利用。     

双歧杆菌纯种发酵胡萝卜汁牛乳工艺研究

以健康人体中选育出的发酵活力高、耐氧性和抗逆性强的优良发酵菌株--长双歧杆菌(Blm)为试验菌株,研究了接种量、基质起始pH值、发酵温度、氧等因素对Blm在胡萝卜汁牛乳中发酵的凝乳时间、活菌含量、pH值和感官质量的影响;利用正交试验优化并确定了Blm发酵的最佳工艺条件在胡萝卜汁牛乳培养基(添加250 mL/L胡萝卜汁和50 g/L蔗糖的牛乳培养基)中,接种量5×107 cfu/mL,基质起始pH值7.0,发酵温度39℃,有氧发酵.产品凝乳时间在5 h内,双歧杆菌活菌数在1×109 cfu/mL以上,pH值5.0.制备的胡萝卜汁双歧杆菌酸乳呈橙黄色,组织状态致密,无乳清析出,且综合了双歧杆菌、胡萝卜、牛乳的功能特性,集风味、营养、保健功能于一体.     

双歧杆菌发酵胡萝卜汁饮料的研制

采用已耐氧驯化的两歧双歧杆菌与普通乳酸菌共同发酵胡萝卜汁制得发酵饮料。通过正交试验确定的最优发酵条件为:发酵温度39℃,发酵时间9h,胡萝卜汁浓度27％,乳糖添加量1％,双歧杆菌接种量7％,乳酸菌接种量1％。用此条件所得产品中双歧杆菌和乳酸菌活菌数分别达6.5×10~7cfu/mL和1.7×10~8cfu/mL。该产品是色、香、味俱佳的天然营养保健制品。     

滑菇肽对青春双歧杆菌的益生作用

研究滑菇肽对青春双歧杆菌的体外益生作用。将滑菇肽添加到青春双歧杆菌液体培养基中,测定发酵和贮存过程中活菌数变化。结果表明,滑菇肽在添加量为0.5 g/L～4.0 g/L时对青春双歧杆菌生长具有促进作用,发酵12小时后活菌数最高可达1.78×10~9cfu/mL,为对照组的2.88倍(P<0.05)。滑菇肽能够增强青春双歧杆菌对酸性环境的耐受力,4℃冷藏28天后,活菌数仍维持在80%以上。添加1.0 g/L滑菇肽对青春双歧杆菌的促生长作用优于低聚果糖,发酵12小时后活菌数可达1.18×10~9cfu/mL,为对照组的2.04倍(P<0.05)。滑菇肽能够促进青春双歧杆菌生长,作为双歧因子应用于青春双歧杆菌产品具有潜在价值。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。实验结果表明，在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为41000％，而原始菌的增殖比例仅为8233％，且前者的凝乳时间为后者的2／3；经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高，且耐酸性明显优于未经驯化的菌株；胆盐驯化的菌株经胆盐浓度为0．5％的培养后也有较高的活菌数，其对胆盐的忍耐力明显增强。     

两歧双歧杆菌耐氧耐酸耐胆盐优良菌株的选育

本实验通过反复驯化的培养方法将两歧双歧杆菌驯化成耐氧耐酸耐胆盐的优良菌株。在耐氧驯化时,通过增加培养基中的氧气分压的方法进行驯化;在耐酸驯化的过程中,通过降低培养基的初始pH值的方法进行。实验结果表明,在牛乳培养基中耐氧驯化后的双歧杆菌的增殖比例为42000%,而原始菌的增殖比例仅为8333%,且前者的凝乳时间较后者短,为后者的2/3;再经过耐酸驯化的菌株在低pH值条件下的产酸性能也大为提高,且耐酸性明显优于未经驯化的菌株;最后再经过胆盐驯化的菌株在胆盐浓度为0.5%时培养后也有较高的活菌数,说明其对胆盐的忍耐力明显增强。