超滤法分级纯化五味子多糖及其影响因素的研究

运用超滤法先后使用截留分子量为100和10ku的超滤膜对五味子多糖提取液进行分离纯化和浓缩,经进一步处理得到较纯的多糖组分Sp1(分子量100ku以上)得率为6.31%,Sp2(分子量10～100ku)得率为0.93%。100、10ku两次超滤的最佳操作压力分别为0.207、0.138MPa,膜通量稳定所需时间分别为30、15min。温度对于第一次超滤膜通量影响较大。多糖浓缩液稀释3次以上时,截留液中小分子杂质含量处于较低水平。超滤法与传统层析柱法分离多糖相比,在处理速率上有着巨大优势,但所得多糖纯度略低。     

富硒黑木耳多糖的理化性质及抗氧化活性研究

采用超声辅助法对富硒黑木耳多糖和普通黑木耳多糖进行提取和分离纯化,得到富硒黑木耳多糖(Se-AAP-2)和普通黑木耳多糖(AAP-2),比较分析Se-AAP-2和AAP-2的分子量、单糖组成、纯度、糖醛酸含量、体外及体内抗氧化活性。结果表明,Se-AAP-2和AAP-2均由甘露糖和葡萄糖组成,分子摩尔比分别为1∶1.31和1∶1.28;相比AAP-2,Se-AAP-2的平均分子量降低了23.5%(P0.01),糖醛酸含量提高了33.7%(P0.01),说明富硒能够显著降低黑木耳多糖的分子量,提升其糖醛酸含量。此外,Se-AAP-2拥有更高的体外抗氧化活性,相比AAP-2,其总还原力提高了11.4%,羟基自由基和ABTS自由基清除能力IC_(50)亦分别降低了42.2%和26.4%。体内抗氧化活性评价结果表明,Se-AAP-2相较于AAP-2具有更强的体内抗氧化活性,能够显著提高小鼠肝、肾、心、血清中T-SOD、GSH-Px的活性,降低其MDA含量。     

信阳毛尖茶末多糖的分离纯化和体外抗氧化活性研究

为实现废弃茶叶资源的再利用以及探究信阳毛尖茶叶末活性多糖的体外抗氧化活性,本研究首先利用不同的乙醇终浓度沉淀优化毛尖茶粗多糖提取,然后通过DEAE-52纤维素和Sephadex-100葡聚糖凝胶分级两次纯化,并进行纯度鉴定、分子量的测定、红外光谱分析以及体外抗氧化活性的测定等。研究结果表明,90%的乙醇终浓度得率最高,为2.47%;两次分级纯化后得到XPS-5B,纯度分别为92.4%;XPS-5B符合活性植物多糖结构特征,为β-型糖苷键多糖,分子量为41208 Da;XPS-5B体外抗氧化活性随着组分浓度的增加而逐渐增强,当XPS-5B浓度为1.20 mg/mL时对DPPH自由基和羟自由基的清除率分别为89.18%、90.62%,总还原力吸光值为0.536,与未纯化的毛尖粗多糖相比,具有较强的抗氧化活性。     

淡色啤酒类黑精的分离及抗氧化活性评价

本文采用超滤结合大孔吸附树脂分离啤酒中的类黑精,并采用ABTS自由基阳离子清除活性和还原力评价其抗氧化活性。研究结果表明:大分子超滤组分(10 ku)得率和类黑精含量低,抗氧化活性弱,而小分子超滤组分(10 ku)呈现出分子量越小,得率、类黑精含量和抗氧化活性越高的趋势,其中分子量3 ku的UF4组分得率、类黑精含量和抗氧化活性均最高。UF4组分经大孔吸附树脂富集后洗脱为三个不同极性组分(D1D2D3),其中D1组分得率最高,约占UF4的94%,虽然D3组分得率不足1%,但其类黑精相对含量最高。D2组分ABTS清除活性和还原能力均最高,而D1组分抗氧化活性极弱。因此,啤酒中抗氧化活性最高的类黑精主要集中在分子量小于3 ku的组分中,经大孔树脂层析后,20%乙醇洗脱部分具有最强的抗氧化活性。     

桑叶蛋白抗氧化肽的酶法制备

为了提高桑叶蛋白MLP的抗氧化活性,用碱性蛋白酶Alcalase、复合蛋白酶Protamex、木瓜蛋白酶Papain、风味蛋白酶Flavourzyme、中性蛋白酶Neutrase及胰蛋白酶Trypsin等6种蛋白酶对MLP进行单酶酶解及双酶、三酶复合酶解,并对酶解前后的化学组成、分子量分布、多肽得率、氨基酸组成、自由基清除能力、还原能力等进行对比分析。结果表明,MLP主要由分子量大于6.5 ku的大分子肽及蛋白质组成,酶解物则主要由分子量为0.3~0.6 ku的小肽及0.6~6.5 ku的多肽组成;相较于过度酶解,适度酶解能更好的改善MLP的抗氧化活性;多肽得率与自由基清除能力显著正相关(r=0.916~0.985);6种蛋白酶中,碱性蛋白酶、中性蛋白酶及复合蛋白酶的酶解物抗氧化活性显著优于MLP及其他三种蛋白酶解物;中性蛋白酶单独酶解物的抗氧化活性显著优于双酶、三酶复合酶解物。对中性蛋白酶的单酶酶解条件进行优化,结果表明底物浓度为20 mg/mL,E/S为1%(W/W),用中性蛋白酶酶解2 h所得的酶解物(NH)的抗氧化活性最高,后期研究中可选用中性蛋白酶制备桑叶蛋白抗氧化肽。NH或许可以作为食品中较有潜力的抗氧化剂。     

红松壳多酚、黄酮和多糖含量及抗氧化活性相关性的研究

为了探究红松壳中主要活性成分的含量及其与抗氧化活性之间的相关性,试验以伊春红松壳为原料,使用不同浓度乙醇溶剂提取红松壳多酚、黄酮和多糖并分析其含量,采用SPSS软件分析松壳中活性物质与抗氧化活性之间的相关性。试验结果表明,当乙醇的浓度为40%时,红松壳多酚、黄酮和多糖得率均最高,分别为4.05 mg/g、1.7 mg/g和7.05 mg/g。抗氧化活性试验表明,红松壳多酚抗氧化活性显著高于黄酮和多糖,与Vc抗氧化活性相当。其中松壳多酚对DPPH·的IC50(半数清除率浓度)值是0.20±0.05μg/m L,对·OH的IC50值是13.04±0.04μg/m L,对总还原力的IC50值是40.15±0.06μg/m L。相关性分析结果也表明松壳多酚与抗氧化活性相关性最高,其中松壳多酚与DPPH·相关性是0.908,与·OH相关性是0.989,与总还原力相关性是0.989(p0.01),可以看出松壳多酚是主要的抗氧化成分。本实验研究的结果为伊春红松壳副产物的综合利用以及开发天然抗氧化剂提供了科学依据。     

不同提取方法对龙须菜多糖性质的影响

本文以龙须菜为原料,比较了热水、超声、超声协同热水和柠檬酸提取4种方法所得多糖的性质。研究表明:柠檬酸提取所得多糖的得率最高,为17.81±0.34%,其多糖分子量和粘度较低,多糖分子量的均一性较高。抗氧化实验表明,柠檬酸提龙须菜多糖具有较高的抗氧化性,其氧自由基清除能力(ORAC)值可达298.735±6.57μmol Trolox/g,在多糖浓度为2.0 mg/m L时,DPPH自由基清除率可达65.79±0.3%,还原力为0.765±0.01,均显著高于其他方法所提多糖。柠檬酸提多糖能够有效地抑制α-淀粉酶的活性。相关性分析表明,龙须菜多糖的多糖含量及糖醛酸含量与抗氧化、α-淀粉酶抑制活性之间呈正相关,而硫酸基含量、分子量、PDI值和粘度与抗氧化、α-淀粉酶抑制活性之间呈负相关。因此,柠檬酸提取是一种有效的提取龙须菜多糖的方法。该法能有效地提高多糖得率,增加产物中糖醛酸含量,降低硫酸基含量、分子量及其粘度,并提高多糖分子量的相对均一性。     

超滤对大鲵多肽抗氧化活性的影响

为了获得具有高抗氧化性的大鲵多肽,以大鲵肌肉为原料,经复合酶(风味蛋白酶和中性蛋白酶)酶解后,水解度达到44.12%,制得多肽得率为90.28%的大鲵多肽酶解液,用截留分子量分别为20、5、2、0.3 ku的超滤膜将其分离成5个分子量段,研究不同分子量段大鲵多肽对DPPH·、·OH和O-2·清除能力的影响。结果表明:不同分子量段的大鲵多肽组分的抗氧化能力大小顺序为:0.3~2 ku组分2~5 ku组分小于0.3 ku组分5~20 ku组分。分子量为0.3~2 ku的大鲵多肽抗氧化活性最高,其对DPPH·、·OH和O-2·的EC50分别为0.4、0.7、1.5 mg/m L。因此,采用截留分子量为2 ku和0.3 ku的超滤膜可以分离得到具有高抗氧化活性的大鲵多肽。     

黑木耳降血脂酸性多糖提取及初步纯化的研究

为优化黑木耳降血脂酸性多糖的提取工艺,应用单因素试验和响应面分析法进行研究。选择料液比、提取温度、提取时间为主要影响因素,黑木耳多糖的得率(Y_1)和与牛磺胆酸钠(STC)结合率(Y_2)为响应值,进行多个指标同步优化。获得最佳提取工艺参数为:pH为9.0、料液比为1∶80(g/m L)、提取温度为71.5℃、提取时间为2.0 h。在此最佳条件下,多糖得率为3.25%,STC结合率为19.95%。采用弱碱性的大孔阴离子交换树脂D315对该多糖进行初步纯化,有效地对多糖进行脱色和脱蛋白处理,提高多糖纯度,减少多糖活性成分降解,为黑木耳酸性多糖的进一步开发利用提供理论参考。     

铁观音茶末多糖的分离纯化和抗氧化活性

为实现废弃茶叶资源的再利用以及探究铁观音茶叶末活性多糖的抗氧化活性,以水提醇沉法提取铁观音茶末粗多糖,然后通过DEAE-52纤维素和Sephadex-100葡聚糖凝胶分级两次纯化,并进行纯度鉴定、红外光谱分析、分子量的测定以及体外抗氧化活性的测定等。结果表明,90%的乙醇终浓度得率最高,为1.97%;两次分级纯化后得到TPS-1A和TPS-4C,纯度分别为96.2%、95.1%;红外光谱图谱表明两种多糖均为β-型糖苷键多糖;分子量分别为15792、21722 Da;两种多糖组分抗氧化活性均随着组分浓度的增加而逐渐增强,当质量浓度为1.2 mg/mL时TPS-1A和TPS-4C,对DPPH自由基的清除率分别为95.41%、97.71%,羟自由基清除率分别为93.39%、94.21%,总还原力测得吸光度值为0.699、0.712。由此说明铁观音茶末多糖具有较强的抗氧化活性,且TPS-4C强于TPS-1A。     

3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力比较分析

目的：研究玉木耳、黑木耳与毛木耳3 种木耳多糖的抗氧化活性与抑菌能力。方法：利用水提醇沉法获得了3 种木耳的多糖,并测定了其多糖含量;采用分光光度法分别测定了3 种木耳多糖的总抗氧化能力,羟自由基、超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基和亚硝酸根离子清除能力;同时进行了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌实验。结果：相同提取条件下,玉木耳、黑木耳与毛木耳的粗多糖提取率分别为13.87%、11.26%、7.91%,其中3 种木耳多糖质量分数分别为49.22%、41.50%和37.97%;总抗氧化活性检测结果显示毛木耳多糖的总抗氧化能力最高,黑木耳多糖与玉木耳多糖抗氧化能力相当;其中玉木耳多糖对羟自由基清除能力略强于黑木耳多糖,且二者的超氧阴离子自由基清除能力相当,均强于毛木耳多糖;3 种木耳多糖对DPPH自由基的清除作用较明显,其中玉木耳多糖相对较优,可达80%;此外,黑木耳多糖对亚硝酸根离子的清除能力最好,略优于其他两种木耳多糖。对常见细菌的抑制作用而言,3 种木耳多糖均对大肠杆菌有一定的抑制作用,但黑木耳多糖和毛木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑制作用较弱;仅玉木耳多糖对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有较好的抑制作用。结论：3 种木耳多糖具备各自不同的抗氧化活性与抑菌能力,且差异较为明显。     

黑木耳中多糖和类黄酮的隔氧提取及其协同抗氧化作用

采用隔氧与超声波辅助相结合方式提取黑木耳中多糖和类黄酮,研究复配比例、复配液浓度、降温过程和反应时间对DPPH自由基和羟自由基清除能力的影响,并评价黑木耳多糖与类黄酮的协同抗氧化作用。结果表明,隔氧超声提取的黑木耳多糖和类黄酮含量较高,分别为3.85%和4.2 mg/100 g,两者抗氧化能力均显著(p<0.05)高于有氧超声提取法。黑木耳多糖和类黄酮复配比例为7:3时,复配液对DPPH自由基清除率达到95%,对羟自由基清除率为62%。黑木耳多糖和类黄酮复配液浓度、反应时间与DPPH自由基清除能力显著正相关(p<0.05)。复配液浓度、反应温度与羟自由基清除能力显著正相关(p<0.05)。黑木耳多糖和类黄酮复配品可提高对DPPH自由基和羟自由基清除效率,具有协同抗氧化作用。     

黑木耳多糖的酶法生物转化工艺优化及其体外降血糖性能

以黑木耳为原料,利用生物酶法进行多糖的提取,并研究其体外降血糖性能。以降血糖性能和黑木耳多糖得率为双指标,筛选最适复合酶体系,并通过正交试验确定最佳酶转化工艺条件。采用Sevag法脱蛋白、H₂O₂法脱色,对提取的木耳粗多糖进行精制处理。利用高效液相色谱法对多糖的分子质量分布进行分析,并通过其α-淀粉酶抑制率和葡萄糖透析延迟指数对多糖的降血糖性能进行分析比较。结果表明:综合考虑木耳多糖降血糖性能与多糖得率,选择糖化酶、木瓜蛋白酶、果胶酶作为木耳多糖生物转化的酶制剂,总加酶量700 U/g,三种酶配比1:1:1,料液比1:60、pH5.0、酶解时间1.5 h、酶解温度50 ℃时,在此条件下,木耳多糖得率32.57%,α-淀粉酶抑制率为26.72%。精制处理后,黑木耳多糖提取液的颜色由棕黄色变为淡黄色,脱色率为43.15%,多糖损失率为31.27%。酶解后多糖发生了部分降解,产生了大小不一的多糖片段。此外,酶解木耳多糖的降血糖性能优于非酶解水提多糖,其α-淀粉酶抑制率提高了10.09%;葡萄糖透析延迟指数30 min时提高了13.09%,60 min时提高了3.24%,表明经酶法生物转化的木耳多糖有很好的降血糖性能。本试验通过复合酶解法对木耳多糖进行生物转化,改善木耳多糖的生物活性,对木耳多糖在保健功能方面的利用与临床应用提供了理论依据。     

三种食用菌多糖的基本结构与抗氧化活性研究

通过水提醇沉法提取香菇、黑木耳和红托竹荪的边角废料菌托中的多糖,并用Sevag试剂和透析法分离纯化,得到三种食用菌多糖。采用紫外分光光度计、高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）、红外光谱法（infrared spectroscopy,IR）、核磁共振波谱法（nuclear magnetic resonance,NMR）和刚果红实验分析三种食用菌多糖的分子量、官能团、糖苷键和三螺旋结构。将清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine free radical,DPPH·）和羟基自由基（Hydroxyl free radicals,OH·）的能力及Fe3+总还原力来判断三种食用菌多糖抗氧化能力,比较分析三种食用菌的基本结构和抗氧化活性。结果显示,制备的三种食用菌多糖都具有较好的均一性,分子量分布在万级和百万级。三种食用菌多糖含有相似的官能团,是既具有α构型又具有β构型的酸性多糖,且均具有三螺旋结构。此外,三种食用菌多糖在实验浓度范围内,均具有良好的抗氧化活性。其中红托竹荪菌托多糖在1.0 mg/mL浓度时对DPPH和在3.0 mg/mL浓度时对OH自由基的清除能力优于香菇和黑木耳多糖,高达66.86%和35.69%,对DPPH和OH自由基的清除能力IC₅₀值分别为0.010和0.195 mg/mL。综上,三种食用菌多糖的基本结构无显著性差异,但抗氧化活性差异较大,为工业化生产利用红托竹荪边角废料提取食用菌多糖奠定基础。     

黑木耳多糖的结构组成及其免疫活性研究

目的:对高温蒸汽浸提法提取得到的黑木耳多糖进行结构解析,并探究其在免疫功能方面的活性。方法:通过气相色谱(GC)、红外光谱(FT-IR)、刚果红实验等对其结构进行分析,建立RAW264.7巨噬细胞的免疫模型以探究其免疫刺激活性。结果:黑木耳多糖主要由鼠李糖、甘露糖和葡萄糖组成,其具有和免疫活性相关的β-构型糖苷键和三股螺旋构象。黑木耳多糖可以促进巨噬细胞的增殖,增强巨噬细胞的吞噬作用,显著诱导RAW264.7细胞中一氧化氮的分泌及细胞因子IL-6、TNF-α的释放。结论:黑木耳多糖具有与免疫相关的多种结构,对巨噬细胞具有强烈的刺激作用,在用作潜在的免疫刺激剂方面具有广阔的前景,黑木耳也可作为调节人类免疫力的功能性食品发挥巨大的应用价值。     

黑木耳多糖的磷酸化修饰及其抗氧化活性研究

本研究对黑木耳胞外多糖(Auricularia auricular polysaccharide,AAP)进行磷酸化修饰,通过响应面法优化了磷酸化修饰黑木耳多糖的工艺条件,并对磷酸化黑木耳多糖(phosphorylated auricularia auricula polysaccharide,P-AAP)进行抗氧化活性研究。结果显示磷酸化修饰黑木耳多糖的最佳条件为磷酸化试剂中三聚磷酸钠(sodium tripolyphosphate,STPP)与三偏磷酸钠(sodium trimetaphosphate,STMP)质量比为5:2,反应温度88℃,反应时间5 h,反应pH为8.6,此条件下多糖中磷酸根含量为9.93%。抗氧化活性试验结果表明,与AAP相比,经过DEAE-Sepharose Fast Flow柱及葡聚糖凝胶G-100柱纯化后的P-AAP1对DPPH自由基的清除率提高了34.37%,半抑制浓度(IC₅₀)为1.07 mg/mL;对羟基自由基的清除率提高了30.39%,IC₅₀值为0.91 mg/mL;对超氧阴离子自由基的清除率提高了26.40%,IC₅₀值为0.41 mg/mL。因此,黑木耳胞外多糖通过磷酸化修饰后其抗氧化活性能被显著提高。     

响应面法优化黑木耳蛋白质的提取工艺

以黑木耳为原料,采用酶法进行前处理后用超声波辅助碱法提取黑木耳蛋白质,获得黑木耳蛋白质的最优提取工艺条件。以蛋白质得率为评价指标,进行单因素试验,并采用Box-Behnken响应面法优化黑木耳蛋白提取工艺。结果表明,纤维素酶和木聚糖酶混合酶解最佳前处理条件为:酶解温度50℃、酶解pH 4、酶解时间2 h、酶添加量(加酶量/木耳干质量)0.8%。黑木耳蛋白最佳提取条件为料液比1︰91(g/mL)、超声温度49℃、超声时间40min。最佳提取条件下黑木耳蛋白得率为4.84%。试验表明经酶法前处理后采用超声波辅助碱法能显著提高黑木耳蛋白质提取效率。     

酶解与发酵联合处理对黑木耳成分及生物活性的影响

为探究黑木耳液经过酶解与发酵联合处理后的成分和生物活性的变化,将黑木耳液利用纤维素酶、果胶酶酶解,再利用接种比例1:1的植物乳杆菌(L. plantarum)与发酵乳杆菌(L. fermentum)进行发酵,测定经酶解与发酵联合处理前后木耳液的成分变化,通过傅立叶红外光谱(FTIR)和原子力显微镜(AFM)表征其结构;对其抗氧化活性,体外抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性进行评价;建立H₂O₂诱导RAW264.7细胞氧化损伤模型,通过检测抗氧化酶含量来评价不同质量浓度木耳发酵液对细胞氧化损伤的保护作用,以及对RAW264.7细胞增殖、吞噬效果及细胞因子释放量的影响。结果表明,木耳发酵液中总糖含量由未处理木耳液的170.57 mg·g^-1提高到539.14 mg·g^-1,同时,蛋白质含量由未处理木耳液的15.00 mg·g^-1提高到81.28 mg·g^-1;FTIR光谱分析结果表明,木耳发酵液中-OH峰明显变宽;原子力显微镜结果显示,木耳发酵液的三维结构呈密...     

超声波协同半仿生法提取黑木耳多糖工艺优化

对超声波协同半仿生法提取黑木耳多糖的工艺进行优化,以黑木耳多糖提取率为指标,采用单因素试验和正交试验,确定最佳提取工艺参数。结果表明,超声波协同半仿生法提取最佳工艺参数为:料液比1∶30(g/mL),超声温度60℃,超声功率500 W,超声时间60 min,在此条件下,黑木耳多糖提取率为22.52%。