柱前衍生法测定4-甲基咪唑条件的研究

用丹磺酰氯(Dns-Cl)柱前衍生的高效液相色谱法来测定4-甲基咪唑.研究了衍生试剂的用量、缓冲体系的PH值、衍生时间等条件的变化对衍生反应的影响,得到了用丹磺酰氯对4-甲基咪唑的最佳衍生条件为最佳衍生条件为:加入100倍的丹磺酰氯在pH10.0的溶液中反应40 min.     

UPLC-MS/MS检测牛奶中硝基呋喃类代谢物残留

建立了超高效液相色谱串联质谱同时测定牛奶中4种硝基呋喃类药物残留的方法。通过硝基呋喃代谢物与2-硝基苯甲醛进行反应,对硝基呋喃类代谢物进行衍生化,确定了从牛奶中提取硝基呋喃类药物代谢物的处理条件并优化了质谱的测定参数。4种代谢物在为0.5~20.0 ng/m L的范围内,其回归标准曲线方程的相关系数为0.993 5~0.997 8,回收率在89.24%~112.20%范围内,精密度为1.84%~11.21%(n=6),方法定量限为0.5μg/kg,提供了一种有效检测牛奶中硝基呋喃类代谢物残留的方法。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定淡水鱼中硝基呋喃类代谢物残留

目的建立超高效液相色谱-串联质谱测法测定淡水鱼中呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃唑酮和呋喃西林等硝基呋喃代谢物的研究方法。方法样品中加入同位素内标,经盐酸水解,用2-硝基苯甲醛衍生,乙酸乙酯液-液萃取净化后,超高效液相色谱-串联质谱仪测定,内标法定量。结果 4种硝基呋喃代谢物的检出限为0.07~0.25μg/kg;在0.1~10 ng/m L范围内线性相关系数r0.996;4种硝基呋喃代谢衍生物的加标回收率分别为94.0%~98.2%、84.0%~89.6%、94.0%~99.0%和75.4%~85.5%;相对标准偏差为2.5%~9.2%。应用建立的方法对48份淡水鱼进行测定,其中1份检出呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-噁唑烷基酮(3-amino-2-oxazolidinone,AOZ),含量为0.45μg/kg。结论建立的方法选择性高、灵敏性强、准确度高,能满足淡水鱼中硝基呋喃类代谢物残留的高灵敏分析。     

生物胺丹磺酰氯衍生条件优化研究

研究了丹磺酰氯作为衍生试剂同5种生物胺反应的条件,优化了丹磺酰氯的浓度、反应体系的p H值、反应的温度和反应时间。研究结果表明:在腐胺、尸胺、组胺、酪胺和精胺浓度分别为8μg/m L的混合生物胺溶液时,5mg/m L丹磺酰氯丙酮溶液与生物胺底物溶液用量比为1∶1时衍生效果最佳,最佳反应p H值为10.5,最佳反应温度为60℃,最佳反应时间为20min。反应条件的初步确立对于进一步优化反应条件和准确定量生物胺含量具有重要意义。     

2013年陕西省动物源性食品中硝基呋喃的污染状况调查

目的建立动物源性食品中硝基呋喃代谢物的检测方法,对2013年陕西省动物源性食品中硝基呋喃的污染现状进行调查分析。方法按照代表性、适时性和随机性原则在全省范围内采集样品737份,样品经2-硝基苯甲醛衍生化,固相萃取柱净化后采用超高效液相色谱-串联质谱法定量分析。结果动物源性食品中硝基呋喃代谢物的总检出率为3.93%(29/737),鸡肉中的硝基呋喃代谢物的检出率最高(8.05%,14/174),4种硝基呋喃代谢物中呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)的检出率最高(2.04%,15/737)。结论陕西省动物源性食品在一定程度上受到了硝基呋喃的污染,应引起监管部门的注意,加强食品监督管理,保障食品安全。     

烟台市动物源性食品中硝基呋喃的污染状况调查

目的对烟台市动物源性食品中硝基呋喃的污染状况进行调查,了解烟台市动物源性食品中硝基呋喃的污染情况。方法采用随机采样的方法,于2012~2017年于烟台辖区内养殖环节、运输环节、流通环节和餐饮环节,共采集动物源性食品样本250份,采用液相色谱-串联质谱法定量检测硝基呋喃类药物残留。结果烟台市售动物源性食品中硝基呋喃类药物总检出率为1.6%(4/250)。双壳类和鱼类水产品中有硝基呋喃代谢物检出,检出率分别为5%(2/40)和2.47%(2/81),甲壳类水产品、畜肉类、禽肉类和蛋类中硝基呋喃代谢物均未检出。4种硝基呋喃代谢物中3-氨基-2-恶唑烷基酮(3-amino-2-oxazole alkone,AOZ)的检出率最高(1.2%,3/250)。结论烟台市动物源性食品中硝基呋喃污染总体较轻,但在一定程度上存在硝基呋喃的残留,应加强监督管理,保障食品安全。     

番茄酱中单氰胺检测衍生化条件的研究

建立了柱前衍生化高效液相色谱串联质谱法检测番茄酱中单氰胺的最佳衍生化条件;在衍生化试剂丹磺酰氯浓度为10mg/mL,反应温度为60℃,反应时间为1h,缓冲体系的pH值为10.5时,衍生效果最佳,单氰胺最低检测浓度为0.00005mg/kg,衍生产物在48h内稳定。     

果酒中组胺含量快速检测方法研究

丹磺酰氯可以同组胺上的活泼氢反应,生成具有荧光的组胺-丹磺酰氯衍生物。利用组胺-丹磺酰氯衍生物的荧光性,采用荧光分析法检测果酒中的组胺含量。实验结果表明衍生物的最大发射波长为521nm,并确立最佳的衍生条件,即丹磺酰氯溶液为10 mg/m L、pH=10.5、在40℃水浴中反应30 min。测定组胺的工作曲线回归方程为F=17.57c+7.44,相关系数R~2=0.9998,线性范围为2.5μg/mL～2.5 mg/mL,检出限为2.0μg/mL。检测结果与高效液相检测结果无差异,因此可用于检测果酒中的组胺含量,操作简便、快速、结果可靠。     

超高效液相色谱-串联质谱法快速检测水产品中硝基呋喃类代谢物残留研究

以水产品中的硝基呋喃类代谢物残留为研究对象,建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留分析方法。结果显示:硝基呋喃类代谢物在1. 0～100. 0 ng/mL的范围内线性关系良好,相对回收率为86. 2%～108%,相对标准偏差为3. 4%～9. 6%,检出限为0. 25μg/kg,定量限为0. 5μg/kg。与以往采用的超高效液相色谱-串联质谱方法相比,新建方法操作简单、快速、准确,是定量检测水产品中硝基呋喃类代谢物残留的有效技术手段。     

QuEChERS-四极杆飞行时间串联质谱法测定7种蛋及蛋制品中硝基呋喃代谢物残留的基质效应

以QuEChERS方法处理样品,结合四极杆飞行时间串联质谱法(Q-TOF-MS)进行样品检测分析,建立蛋及蛋制品中硝基呋喃类代谢物残留的快速筛查技术,研究该方法下蛋及蛋制品(鲜蛋、皮蛋、咸蛋、蛋肠、蛋粉、蛋酱、卤蛋)样品对硝基呋喃代谢物残留的基质效应。样品采取5%甲酸乙腈提取,4g NaCl、50mg PSA、100mg C_(18)净化,Q-TOF质谱正离子模式扫描测定。结果 4种硝基呋喃类代谢物在5~800μg/L浓度范围内线性关系良好,方法平均回收率在78.6%~120.8%之间,相对标准偏差在1.0%~10.1%之间。7种蛋及蛋制品对硝基呋喃类代谢物残留均存在不同程度的基质效应,且多数呈基质抑制效应。该方法快速、简便、准确,适用于蛋及蛋制品中硝基呋喃类代谢物的快速筛查。     

液相色谱-串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留量前处理方法的改进

研究旨在缩短水产品中硝基呋喃类代谢物残留量检测时间，提高检测效率。方法：样品经过水浴衍生，乙酸乙酯提取，正己烷脱脂后，采用ThermoHypersilGOLDC18色谱柱，以甲酸乙腈-乙酸铵为流动相洗脱分离后，经过质谱分析，内标法定量。结果显示：四种硝基呋喃类药物(AOZ,AHD,AMOZ,SEM)能有效分离，本实验室所优化的液相色谱-串联质谱法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的前处理方法，对比国标方法大大缩短了分析时间，并符合较好的线性、回收率等质量控制参数。     

响应面法优化丹磺酰氯衍生生物胺的衍生条件

通过采用响应面法优化丹磺酰氯同8种生物胺反应的衍生温度、衍生时间和衍生剂用量,研究不同衍生因素之间的交互作用,以期为生物胺衍生条件的优化提供更为科学、直观的理论依据。研究结果表明:用10mg/m L的丹磺酰氯衍生20μg/m L的8种生物胺混标(工作)溶液,在衍生温度40. 06℃,衍生时间34. 70 min,衍生剂添加量3 m L时,生物胺的衍生产率最高,由模型得到生物胺总面积的预测值与验证试验的吻合率达到100. 05%,说明该模型能较好地预测丹磺酰氯衍生生物胺的衍生效果,具有较高参考价值。同时,通过响应面交互作用分析表明,在以8种生物胺总面积为研究对象时,衍生温度与衍生时间、衍生剂用量并没有显著的交互作用(P> 0. 05),衍生时间与衍生剂用量之间存在显著(P <0. 05)的交互作用。     

不同衍生剂柱前衍生-HPLC-SPD二极管阵列测定特殊医学用途配方粉中牛磺酸含量

考察3种不同衍生剂的衍生效果,建立柱前衍生-高效液相色谱-SPD二极管阵列对特殊医学用途配方粉中牛磺酸含量的检测方法。特殊医学用途配方粉经温水溶解,超声辅助提取,以乙酸铵溶液（pH4.2）-乙腈作为流动相,采用 2,4-二硝基氟苯（2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB）、丹磺酰氯（dansulfonyl chloride,Dansyl-Cl）、邻苯二甲醛（O-phthalaldehyde,OPA）3种不同衍生剂对其进行柱前衍生,用高效液相色谱-SPD二极管阵列进行测定。从样品检测总时长、操作步骤、回收率、样品稳定性及准确性多角度考察这3种不同衍生剂对牛磺酸含量测定的影响。结果表明：牛磺酸含量在浓度为2.01 μg/mL～60.30 μg/mL的范围内线性关系好,相关系数均达0.999以上,在20、40、80 mg/100 g的加标水平下,回收率为94.4%～103.7%,3种衍生剂均能满足特殊医学用途配方粉中牛磺酸的测定,实际样品检测结果差异不大;从整个检测分析过程看,3种不同衍生剂的衍生方式适合程度依次为2,4-二硝基氟苯＞丹磺酰氯＞邻苯二甲醛。     

氨基酸分析仪和HPLC测定食品中牛磺酸的研究比较

分别采用不同的仪器及方法:氨基酸分析仪茚三酮柱后衍生和高效液相色谱丹磺酰氯柱前衍生,建立对食品中牛磺酸测定的方法,比较了两种方法的检出限、定量限以及回收率等,结果表明两种仪器方法各有优点,适应在不同情况下对食品中牛磺酸进行测定。     

固相支撑液液萃取-平行蒸发前处理技术测定动物源性食品中4种硝基呋喃类代谢物

硝基呋喃类药物的检测常以其代谢物为目标物,建立了鸡肉、蜂蜜、牛奶中呋喃唑酮代谢物(AOZ)、呋喃它酮代谢物(AMOZ)、呋喃妥因代谢物(AHD)和呋喃西林代谢物(SEM)检测的超高效液相色谱串联质谱确证方法,硝基呋喃代谢物经衍生化后,采用硅藻土固相支撑液液萃取和平行蒸发联用前处理技术进行净化和富集衍生物,超高效1.7μm C18柱用于分离4种待测物,同位素内标法定量。AOZ和AMOZ为最低检测限为0.1μg/kg,AHD和SEM为0.25μg/kg。3个不同添加水平时该方法回收率为85.6%～104.3%,相对标准偏差(RSD)为3.2%～9.5%,通过对实际样品进行测定,结果表明该方法能简单、快速、准确地测定动物源性食品中4种硝基呋喃类代谢物。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测中华圆田螺硝基呋喃代谢物残留量

目的建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定中华圆田螺中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因和呋喃西林4种硝基呋喃代谢物的方法。方法样品经50%甲醇水洗涤除杂后,进行衍生,用磷酸氢二钾溶液调pH后,经过乙酸乙酯提取,氮吹浓缩,乙酸铵和乙腈混合溶液定容,且正己烷除脂,吸取下层液体过膜待测。在正离子模式下,采用多反应监测模式同时测定中华圆田螺中的4种硝基呋喃代谢物。结果在优化后的仪器工作条件下进行测定,4种代谢物的质量浓度在1.0～10 ng/mL的范围内线性关系良好,相关系数为0.9994～0.9998,检出限为1.07×10~(-2)～7.02×10~(-2)ng/g。加标回收率为92.0%～104.0%,批内和批间相对标准偏差均小于10%,测定结果的相对标准偏差为0.7%～4.7%(n=6)。结论该方法具有良好的精密度、准确度和重现性,可用于同时测定中华圆田螺中的呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因和呋喃西林4种硝基呋喃代谢物。     

液相色谱串联质谱法测定氨糖软骨素片中硝基呋喃类代谢物残留

目的采用液相色谱串联质谱法测定氨糖软骨素片中的硝基呋喃类代谢物残留量。方法样品在酸性条件下(pH2)衍生16 h,经乙酸乙酯提取浓缩。经甲醇水溶液溶解过滤后,用液相色谱-串联质谱测定。试验过程中采用添加同位素内标法来补偿前处理过程中产生的损失。结果在0.5、1.0和2.0μg/kg 3个浓度水平上进行添加回收试验,4种代谢物的回收率范围为82.7～106.7%,相对标准偏差不大于12.3%,检出限均为0.5μg/kg。结论该方法具有良好的准确度、灵敏度和稳定性,可用于氨糖软骨素片中硝基呋喃类代谢物残留量的测定。     

动物源食品中硝基呋喃类物质及其代谢物残留的检测技术研究

呋喃类物质由于它的强毒性和致癌的副作用,已引起世界各国的高度重视。由于呋喃类物质在动物体内稳定性较差,而其代谢物与组织蛋白结合可以形成稳定的化合物,故对于呋喃类物质代谢物的研究和检测的意义就显得更为重要。本文介绍了硝基呋喃类物质的基本种类,分为呋喃唑酮(furazolidone),呋喃西林(nitrofurazone),呋喃妥因(furantoin)和呋喃它酮(furaltadone),及相应的理化特性和目前国内外的应用情况。着重介绍了硝基呋喃类物质代谢物的种类,分为呋喃唑酮(AOZ)、呋喃它酮(AMOZ)、呋喃西林(SEM)和呋喃妥因(AHD),及其毒性和危害;目前各国常用的检测方法有液相色谱-紫外法(HPLC-UV)、液相色谱-质谱法(LC-MS)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)和酶联免疫法(ELISA)。比较了各种方法的工作原理、适用范围以及各自的特点。重点介绍了酶联免疫法(ELISA)的基理、分析方法和注意事项。并就目前国内硝基呋喃类物质代谢物相关检测标准的不足,提出了建议。     

2017~2018年云南省9种新鲜鱼类产品中4种硝基呋喃代谢物的检测

目的 对2017~2018年云南省9种鱼类水产品中的4种硝基呋喃类药物呋喃它定(furaltadon)、呋喃西林(furacilin)、呋喃妥因(titrofuranyoine)、呋喃唑酮(furazolidonum)的相关代谢物3-Amino-5-morpholinomethyl- 2-oxazolidinone(AMOZ)、1-Aminohydantoin(AHD)、Semicardazide(SEM)、3-Amino-2-oxazolidinone(AOZ)进行检测。方法 每年从云南昆明(9份)、曲靖(9份)、玉溪(9份)、昭通(9份)、红河(9份)、普洱(9份)、文山(9份)、德宏(9份)共8个地市的超市和农贸市场随机取样72份, 2年共采样144份。将样品搅碎后在酸性条件(盐酸水解)下用2-NBA衍生剂衍生一夜(约16 h), 采用液液萃取的方式净化, 利用超高效液相色谱-串联质谱仪测定。用内标法定量。结果 云南省部分水产品中硝基呋喃类药物残留水平超标。结论 此方法可对当地的食品安全提供保障。     

两种柱前衍生RP-HPLC法测定酱腌菜中生物胺的比较

本研究分别采用4-氟-3-硝基三氟甲苯(FNBT)柱前衍生RP-HPLC紫外检测分析方法(简称FNBT衍生法)和丹磺酰氯柱前衍生RP-HPLC紫外检测分析方法(简称DNS-Cl衍生法)测定酱腌菜中生物胺含量,并比较这两种方法对酱腌菜中8种生物胺(组胺、色胺、β-苯乙胺、腐胺、酪胺、尸胺、亚精胺及精胺)检测的差异。结果表明,在浓度范围1~100mg/L内,两种方法对8种生物胺的检测呈现良好的线性相关性,相关系数R~2均大于0.999,FNBT衍生法的检出限(0.016~0.071mg/L)优于DNS-Cl衍生法(0.066~0.191 mg/L)。方法的精确度试验表明:FNBT衍生法的加标平均回收率(92.87%~100.18%)略优于DNS-Cl衍生法的加标平均回收率(83.52%~102.33%),两种方法的测量精密度RSD%均小于5%。DNS-Cl衍生法衍生试剂消耗大、操作繁琐,对生物胺检测的灵敏度低,而FNBT衍生法衍生试剂消耗少、操作简便、快速、灵敏度及准确性更高,适用于大批量食品中微量生物胺的快速、准确分析。用两种方法检测酱腌菜中8种生物胺的含量存在显著差异(p0.05)。