莲子红衣多糖对胰脂肪酶活性抑制作用的研究

为考察莲子红衣多糖对体外胰脂肪酶活性的抑制效果,采用分光光度法测定了不同条件下对胰脂肪酶活性抑制作用的影响,并在单因素试验基础上运用L_9(3~4)正交法优化得到莲子红衣多糖对胰脂肪酶活性抑制作用的最佳条件。结果显示,在pH 7.2、莲子红衣多糖提取物浓度0.15 g/mL、反应时间10 min条件下,可达到最高抑制率94.61%。此外,Dixon和Lineweaver-Burk分析表明,莲子红衣多糖对胰脂肪酶的抑制作用类型为非竞争性抑制,抑制常数为0.073 6 g/mL。     

苦荞麦多糖对胰脂肪酶抑制作用的研究

以三油酸甘油酯为底物,研究苦荞麦多糖在不同条件下对胰脂肪酶抑制作用的影响,确定其最佳抑制条件、抑制作用类型及抑制常数。结果表明,苦荞麦多糖对胰脂肪酶具有明显抑制作用,其半抑制浓度IC50为28.23mg/m L。多糖浓度为30mg/m L,反应时间为15min,p H为7.5,温度为37℃时抑制效果最佳,抑制率达到52.17%,为非竞争性抑制,抑制常数Ki=43.28mg/m L。通过紫外吸收光谱测定表明胰脂肪酶紫外吸收光谱最大吸收波长发生红移,显示苦荞麦多糖是通过改变胰脂肪酶的构象,致使其酶催化活性受到抑制。苦荞麦多糖可以作为植物源的胰脂肪酶抑制剂发挥减肥因子的作用。     

黑木耳多糖对胰脂肪酶活性的抑制作用

目的:以月桂酸4-硝基苯酯为底物,考察黑木耳多糖对胰脂肪酶活性的抑制作用,确定最佳抑制条件、抑制类型及抑制常数。方法:采用水提醇沉的方法制备黑木耳多糖,阴离子交换树脂分离多糖,考察不同反应条件(浓度、p H、温度、时间)下黑木耳多糖各组分对胰脂肪酶活性的抑制效果;通过紫外吸收光谱研究黑木耳多糖与胰脂肪酶构象之间的关系;测定不同浓度底物时的反应吸光度值,初步确定黑木耳多糖对胰脂肪酶抑制作用的机理。结果:分离获得6个组分,其中中性多糖组分a对胰脂肪酶抑制效果较好。当p H为7.5、温度37℃、反应时间为60 min时抑制效果最佳,此时中性多糖组分a抑制率最高达到46.93%;反应类型为非竞争性抑制,米氏常数Km为17.68 mg/m L,最大反应速率V_(max)为1.43μmol/min,抑制常数Ki为30.32 mg/m L。通过紫外吸收光谱测定,胰脂肪酶最大吸收波长发生红移,说明黑木耳多糖改变了胰脂肪酶的构象,致使其酶催化活性受到抑制。结论:黑木耳多糖对胰脂肪酶活性具有抑制作用,表明黑木耳多糖降血脂作用可能与胰脂肪酶的活性抑制有关,为降血脂功能性产品的开发奠定理论基础。     

苦瓜皂甙的提取及其对胰脂肪酶抑制活性的研究

苦瓜皂甙可有效抑制胰脂肪酶的活力,是一种潜在的减肥辅助食物补充剂。通过响应面法对苦瓜皂甙的最佳提取工艺进行优化,并测定其对胰脂肪酶的抑制率。研究结果表明:苦瓜皂甙的最佳提取工艺为乙醇提取液的浓度为50%、料液比1∶13.5(g/mL)、提取温度38℃、浸提时间77 min、浸提次数1次,此条件下苦瓜皂甙的提取产率为1.419 1%,其对胰脂肪酶抑制的IC50值为0.384 7 mg/mL。     

金花茶叶皂苷提取工艺优化及抑制脂肪酶活性研究

以金花茶叶为研究对象,通过单因素试验和响应面法探讨了乙醇体积分数、料液比、提取温度与时间因素对皂苷提取效果的影响,并对其抑制胰脂肪酶的作用进行了研究。结果表明,金花茶叶皂苷的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数59%、料液比1∶39 (g/mL)、提取温度60℃、提取时间124min,该条件下皂苷得率为4.82%,与预测值接近;提取的皂苷在温度37℃、质量浓度6mg/mL、pH 7.5、反应30min下对胰脂肪酶抑制率可达84.76%。说明金花茶叶皂苷能有效抑制胰脂肪酶的活性,具有较好的降血脂作用。     

葡萄籽浸提物对胰脂肪酶活性抑制的研究

葡萄籽经正己烷脱脂、70%乙醇浸提以及AB-8大孔吸附树脂提取,得到葡萄籽浸提物(GSE);研究分析抑制物不同浓度、反应时间以及反应pH下,GSE对胰脂肪酶酶活力的影响,并分析GSE的抑制类型和Ki(抑制常数).结果表明:GSE抑制胰脂肪酶活力的IC50值为0.1284 g/L;抑制率在反应达到12min后基本趋于稳定,pH为7.5时抑制效果最佳;Dixon图和"Lineweaver-Burk图表明GSE对胰脂肪酶的抑制作用为非竞争性抑制,Ki=0.1096 g/L.     

绞股蓝内生真菌多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的:探究绞股蓝内生真菌JY25多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为绞股蓝内生真菌多糖的应用提供基础数据。方法:确定4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-N-trophenyl-α-D-glu-copyranoside,PNPG)比色法检测α-葡萄糖苷酶活力的最佳条件,以阿卡波糖为阳性对照,采用优化后的最佳条件测定JY25多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并确定抑制类型、计算抑制常数;以Caco-2细胞作为体外产α-葡萄糖苷酶模型,测定JY25多糖的抑制效果。结果:反应时间30 min、反应温度44℃、pH 6.8、底物(PNPG)浓度5 mmol/L为PNPG比色法的最佳反应条件。以此优化条件进行比色,当JY25多糖质量浓度为6.15 mg/mL时,对α-葡萄糖苷酶抑制率达到最大(68.21%);JY25多糖的半数抑制浓度(IC_(50))为(2.46±0.42)mg/mL,抑制常数Ki为1.15 mg/mL,JY25多糖为竞争性抑制剂。在JY25多糖质量浓度为10.00 mg/mL时,对培养16 d的Caco-2细胞所产α-葡萄糖苷酶的抑制率达到16.48%。结论:体外实验证实JY25多糖具有竞争性抑制α-葡萄糖苷酶的作用。     

黑豆红色素抑制胰脂肪酶催化反应动力学研究

以黑豆红色素为材料,三油酸甘油酯为底物,采用酶催化反应动力学方法,研究黑豆红色素对胰脂肪酶抑制作用的影响及其抑制作用机制,为进一步探讨黑豆红色素控制和治疗肥胖病的机制及研发相关产品提供理论依据。研究结果表明,黑豆红色素在质量浓度为3 mg/m L、pH7.5、反应15 min、37℃条件下对胰脂肪酶的抑制效果最佳,抑制率达66.67%,为非竞争性抑制作用,半抑制浓度IC_(50)=2.3776 mg/m L,抑制常数Ki=1.64 mg/m L。紫外吸收光谱分析表明,黑豆红色素通过改变胰脂肪酶的构象,而致使其酶活力降低。荧光光谱分析表明,黑豆红色素对胰脂肪酶的荧光有猝灭作用,为静态猝灭,并且随着胰脂肪酶的浓度的增大,猝灭作用越强,其结合位点数n=0.48175,结合常数K_A=3.224×10~4 L/mol。结果显示,黑豆红色素可以作为植物源的胰脂肪酶抑制剂,能有效控制胰脂肪酶的活性。     

韭菜提取物对胰脂肪酶抑制作用的研究

用乙醇提取韭菜粉末得到韭菜乙醇提取物，然后以正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇为萃取液，得到不同有机溶剂的提取物，研究其对胰脂肪酶的抑制作用，并与奥利司他的抑制作用进行比较。结果表明：不同溶剂提取物对胰脂肪酶的抑制活性强弱依次为乙酸乙酯>正己烷>二氯甲烷>正丁醇；随着不同溶剂提取物质量浓度的增大，抑制率越大；抑制胰脂肪酶的最佳反应条件为pH 7.5、反应时间15 min;乙酸乙酯提取物对胰脂肪酶的抑制为非竞争抑制类型，不如奥利司他的抑制作用强，但是可以作为良好的抑制胰脂肪酶的蔬菜原料。     

辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制研究

探讨辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用,为开发辣木叶天然胰脂肪酶抑制剂提供理论依据。在单因素试验的基础上,用正交试验优化提取条件,研究辣木叶提取物对胰脂肪酶活性的抑制作用,并结合Dixon图和LineweaverBurk图探讨其抑制类型。结果表明最佳提取条件为:料液比1∶50(g/mL)、提取液乙醇浓度70%、超声功率400 W、超声处理时间600 s、提取温度50℃;该条件下辣木叶粗提物对胰脂肪酶活力的抑制率为79.15%;辣木叶提取物对胰脂肪酶的抑制作用为非竞争性抑制。辣木叶提取物对胰脂肪酶的活性有明显抑制作用。     

板栗壳黄酮结构分析及其对胰脂肪酶活力的抑制作用

在分析板栗壳黄酮结构的基础上，研究其对胰脂肪酶的抑制作用及类型。采用醇提法提取板栗壳中的黄酮，并用AB-8大孔吸附树脂进行纯化，冻干后得到的黄酮含量为（107.50±1.00）mg/g，提取得率为（5.66±0.05）%。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱联用技术对板栗壳黄酮进行结构分析，鉴定出8 种黄酮类化合物。采用对硝基苯酚法测定胰脂肪酶活力，分别考察板栗壳黄酮对胰脂肪酶的抑制效果及不同反应条件下板栗壳黄酮对胰脂肪酶活性的影响，结果表明，板栗壳黄酮对胰脂肪酶有较好的抑制作用，半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration，IC50）为0.074 mg/mL，且使胰脂肪酶最适pH值向碱性偏移。通过Lineweaver-Burk双倒数作图法确定其抑制类型为非竞争性抑制，抑制常数Ki＝53.19 mg/mL。由此可见，板栗壳黄酮是一种效果良好的胰脂肪酶抑制剂。     

山楂多糖提取工艺优化及其降血糖、降血脂活性

本文优化了山楂多糖的微波辅助提取工艺,并对其降血糖降血脂活性进行了研究。在考察固液比、提取温度、微波功率、提取时间对山楂多糖提取量影响的基础上,采用Box-Behnken响应面法对提取工艺进行优化。通过测定初步纯化的山楂粗多糖对α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶抑制率和DPPH·清除率,评价山楂多糖的降血糖、降血脂活性。结果表明,山楂多糖的最佳提取工艺条件为:提取温度63 ℃,微波功率500 W,提取时间7 min,在此条件下山楂多糖提取量为(147.10±0.32) mg/g。山楂粗多糖对α-葡萄糖苷酶、胰脂肪酶抑制率和DPPH·清除率的IC₅₀分别为(99.22±0.89) μg/mL、(22.50±0.79) mg/mL、(185.80±0.64) μg/mL,表明山楂粗多糖具有一定的降血糖、降血脂作用。     

苦瓜总皂甙最小抑菌浓度和最佳抑菌条件的研究

苦瓜总皂甙是苦瓜中有效成分,具有抑菌等作用。通过绘制生长曲线判断苦瓜总皂甙对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉菌生长曲线的影响。采用琼脂稀释法测定苦瓜总皂甙的最小抑菌浓度(MIC)。运用正交实验设计法确定苦瓜总皂甙的最佳抑菌条件。结果表明,苦瓜总皂甙对黑曲霉菌的生长几乎没有抑菌作用。浓度为50、100、150、200mg/mL的苦瓜总皂甙对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌生长均有抑制作用,且以150mg/mL浓度时为最强,MIC分别为30、40、30mg/mL。苦瓜总皂甙对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最佳抑菌条件为:40℃下,pH为6.0时,抑菌20h。     

桑叶多糖的化学组成及其对胰脂肪酶的抑制作用研究

将复合酶辅助热水提取所得的桑叶粗多糖依次进行脱蛋白和脱色处理后得到桑叶多糖,研究其化学组成和对胰脂肪酶的抑制作用及作用类型。结果表明,桑叶多糖的总糖含量为58.28%,其单糖组成及摩尔比为甘露糖:鼠李糖:葡萄糖:半乳糖:木糖:阿拉伯糖:葡萄糖醛酸:半乳糖醛酸=8.61:23.42:4.23:12.73:1.31:3.06:41.40:123.32。桑叶多糖对胰脂肪酶有一定抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为10.32 mg/mL,抑制作用类型为非竞争性抑制。桑叶多糖有望作为胰脂肪酶抑制剂用于减肥保健食品的加工。     

网地藻多糖对α-葡萄糖苷酶体外抑制作用的研究

研究网地藻多糖对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用。以网地藻为原料,采用超声辅助水提、醇沉、脱色、脱蛋白、干燥后制得网地藻多糖。利用对-硝基苯酚-α-D-葡萄糖苷(p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside,PNPG)为底物建立酶-抑制剂体外模型,采用双倒数作图法确定其抑制类型。结果表明:网地藻多糖抑制α-葡萄糖苷酶活性的大小会受到反应pH值、反应温度、反应时间及网地藻多糖质量浓度的影响,在反应pH值为6.8、反应温度为37℃、反应时间为20 min的条件下网地藻多糖对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,其IC50为22.64 mg/mL。抑制动力学试验表明网地藻多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制作用为混合型抑制。结果表明网地藻多糖具有一定的降糖作用。     

儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制作用

采用分光光度计法测定酶液加入量、底物浓度、温度、pH 值对酶活力的影响,确定最适反应条件。在30℃、pH6.8 的Na2HPO4-NaH2PO4 缓冲体系中,采用酶动力学方法研究儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制效应。结果表明：反应最适条件为酶液加入量0.5mL、底物浓度2mmol/L、温度30℃、pH6.8。儿茶素对马铃薯酪氨酸酶有抑制作用,抑制率达到50% 的儿茶素质量浓度(IC50)约为0.27mg/mL;Lineweaver-Burk 图显示儿茶素对马铃薯酪氨酸酶的抑制作用表现为竞争型抑制,抑制常数(KI)为0.16mg/mL。     

茯砖茶多酚类物质对胰脂肪酶活性的抑制作用

以湖南茯砖茶为原料通过热水浸提、树脂吸附分离得到茯砖茶多酚类物质,并采用酶动力学和荧光猝灭分析方法探讨了茯砖茶多酚类物质对胰脂肪酶的抑制作用。结果表明：茯砖茶多酚类物质对胰脂肪酶有抑制作用,半抑制浓度（IC50）为0.81 mg/mL,抑制类型为可逆非竞争性抑制,其抑制常数Ki为2.56 mg/mL。荧光光谱分析表明茯砖茶多酚类物质对胰脂肪酶具有荧光猝灭效应,与茯砖茶多酚类物质的结合可能造成了酶结构的改变,从而降低了酶的催化活性。     

苦瓜提取物的抑菌作用及其稳定性研究

采用滤纸扩散法研究了苦瓜提取物和其不同溶剂萃取物的抑菌作用及温度、pH值、紫外光等因素对其抑菌活性的影响。结果表明:苦瓜提取物对细菌的抑制作用较强,其正己烷萃取物对酵母菌和霉菌有较好的抑制效果,苦瓜提取物的抑菌活性具有很好的热稳定性和紫外光稳定性,在pH4~6的条件下抑菌效果最佳。     

柿单宁的体外降胆固醇作用

采用分光光度法和气相色谱法研究了柿单宁对胰脂酶活性和胆固醇酯酶活性的抑制作用,以及柿单宁与胆汁酸、胆固醇的结合能力。结果表明：柿单宁对胰脂酶具有显著的抑制效果,其半数抑制浓度（half inhibitoryconcentration,IC50）为（0.445±0.021） mg/mL;抑制类型为非竞争性抑制,抑制常数Ki为0.406 mg/mL;柿单宁对胆固醇酯酶也具有显著的抑制作用,其半数抑制浓度IC50为（0.442±0.017）mg/mL,抑制类型为非竞争性抑制,抑制常数Ki为0.488 mg/mL。不同质量浓度的柿单宁对胆酸（cholic acid,CA）、脱氧胆酸（deoxycholic acid,DCA）都有一定的结合能力,10 mg/mL的单宁与CA、DCA的结合率分别为58%和94%;柿单宁对胆固醇胶束化溶液有较强的结合能力,0.20 mg/mL的单宁对其抑制率达到了67%。另外,在不同的pH值下,柿单宁对胆固醇都有一定的结合作用,其中pH 7.0时的结合能力明显强于pH 2.0时的结合能力。总之,柿单宁可抑制胰脂酶活性和胆固醇酯酶活性,并与胆固醇和胆汁酸结合,减少胃肠道对脂肪的吸收,这可能是柿单宁在体内发挥强降胆固醇作用的原因之一。