甲鱼蛋白酶解产物体外ACE抑制和抗氧化活性研究

目的研究甲鱼蛋白酶解产物的血管紧张素转换酶(ACE)的抑制活性和抗氧化性.方法以体外活性(ACE抑制率、·0H、O2-·和DPPH·清除率)为指标,通过正交试验确定木瓜蛋白酶的最佳酶解条件;用Sephadex G-25分离、提纯.检测各组分的ACE抑制活性和抗氧化活性.结果木瓜蛋白酶酶解甲鱼蛋白制备ACE抑制肽的最佳酶解条件为温度60℃、pH 7.0、酶解时间3 h、加酶量1.0%;在此酶解条件下酶解产物的ACE抑制率为99.96%,获得了ACE抑制活性较高的组分F4和F1,其ACE抑制率分别为67.27%、52.73%;制备抗氧化肽的最佳酶解条件为温度60℃、pH 5.0、时间4h、加酶量0.6%,得到抗氧化活性最高的组分F2,该组分的·OH、O2-·和DPPH·清除率分别为10.39%、33.00%、17.68%,其相对分子质量范围集中在307左右.结论甲鱼多肽具有较强的体外ACE抑制活性和抗氧化活性.     

卵白蛋白低聚肽的体外抗氧化及ACE抑制作用

以卵白蛋白低聚肽为研究对象,测定了理化成分,分子质量分布和氨基酸组成基础之上;通过DPPH·法、邻苯三酚自氧化法和水杨酸钠法测定对DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)和羟自由基(·OH)的清除能力,分析了其体外抗氧化作用;另外通过反向高效液相色谱法测定了对血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)的抑制作用。结果显示,分子质量低于1 000 u的卵白蛋白低聚肽占总蛋白的92.58%,并主要集中在140～500 u(占71.24%);体外抗氧化实验中,抗氧化能力与质量浓度呈现出良好的剂量关系,DPPH·、O_2~-·和·OH的半抑制浓度(IC_(50))分别为0.25、25、0.64 mg/m L;另外卵白蛋白低聚肽显示出较好的ACE抑制作用,IC_(50)值为1.5 mg/m L。结果表明,卵白蛋白低聚肽具有良好的抗氧化和ACE抑制作用,为相关抗氧化和降血压等保健类食品的开发利用提供一定的理论依据。     

挤压和发酵对小米多肽ACE抑制活性及抗氧化作用的影响

以小米为原料,制备具有血管紧张素转换酶(ACE)抑制作用的食源性活性多肽。采用挤压和发酵的方法对小米粉进行处理,研究其对小米蛋白消化率的影响,同时对在胃蛋白酶-胰酶水解条件下得到的小米多肽进行ACE抑制活性和抗氧化能力分析。结果表明,相比于原粉,挤压和发酵对小米多肽的ACE抑制活性和抗氧化能力都有显著的影响(P<0.01);挤压对小米蛋白消化率的影响较大(53.11%);挤压小米蛋白水解肽具有较强的ACE抑制活性(IC50=0.057 mg肽/mL)、DPPH自由基清除能力(10.99μmol/g肽)和铁离子还原能力(82.92μmol/g肽)。     

燕麦发芽过程中肽的变化及其相关特性研究

目的:研究燕麦发芽过程中肽及其生物活性的变化规律,考察燕麦肽的稳定性。方法:以清除1,1-苯基-2-苦肼基自由基(DPPH)和2,2-联氮-3-乙苯-二噻唑-6磺酸(ABTS)产生的自由基能力及铁还原力评价其抗氧化活性,以抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性,评价其降血压活性。结果:发芽过程中,燕麦肽含量及其抗氧化和降血压活性均呈增加的趋势。燕麦肽溶解性和ACE抑制活性在不同程度上受到pH、温度和消化酶的影响。结论:发芽可有效富集燕麦肽的含量,提高燕麦抗氧化能力和ACE抑制活性。     

半固态酶解法制备全谷物多肽及其抗氧化、ACE抑制活性的研究

以燕麦、荞麦为原料,通过半固态酶解法制备谷物多肽并以液态酶解作为对照组研究其抗氧化、降血压能力。通过凯氏定氮法测定酶解产物中多肽含量,通过总抗氧化能力（Ferric ion reducing antioxidant power,FRAP法）、羟自由基清除能力及体外血管紧张素转换酶（Angiotensin I converting enzyme, ACE）活性抑制实验测定酶解产物抗氧化及降血压能力。结果表明,以酶解产物中多肽含量、抗氧化和ACE抑制活性为指标确定了燕麦、荞麦半固态酶解最佳工艺参数分别为:酶解时间3 h,酶添加量为3.75%;酶解时间为1 h,酶添加量为2.50%,在此条件下,燕麦、荞麦所得酶解产物中多肽含量为7.03%和6.35%。1 mg/mL燕麦、荞麦多肽（半固态酶解组）羟自由基清除率为61.34%、69.33%,总抗氧化能力相当于（0.53±0.03） mmol/L和（0.48±0.01） mmol/L的FeSO₄,ACE抑制率为80.27%、77.60%。半固态酶解组的多肽含量及抗氧化、ACE抑制能力均显著高于液态酶解组。采用半固态酶解工艺,既可以提高谷物肽含量,又可提高其抗氧化、ACE抑制活性,为谷物高值化加工和功能性食品配料领域的应用提供理论支持。     

小米多肽酶解工艺及其抗氧化和ACE抑制活性

以小米蛋白为原料，制备具有抗氧化活性和血管紧张素转移酶(ACE)抑制活性的食源性多肽。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶酶解小米蛋白，选取最优酶解工艺。选用碱性蛋白酶酶解4 h，得到的蛋白水解液分别通过3 ku和10 ku的超滤膜，得到分子质量＜3，3~10 ku和＞10 ku的3种组分，测定其抗氧化活性和ACE抑制活性。结果表明:采用碱性蛋白酶酶解4 h得到的蛋白水解液经超滤后得到分子质量＜3 ku的多肽具有最高的抗氧化活性和ACE抑制活性，其DPPH清除能力为38.44%，ABTS自由基清除能力为81.62%，羟基自由基清除能力为68.49%，ACE抑制活性为87.53%。此方法得到的多肽分子质量小，功能氨基酸含量较高，具有良好的抗氧化活性和ACE抑制活性。本研究结果为抗氧化肽和ACE抑制肽的开发提供试验依据，对未来工业化的发展提供理论参考。     

大米蛋白体外消化产物抗氧化活性的研究

为了研究大米清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白体外消化产物的抗氧化活性,用Osborne法从大米粉中提取大米四种蛋白。采用胃-胰蛋白酶分步酶解,选择DPPH·,ABTS+·,·OH自由基清除能力和Fe2+金属离子螯合能力四个指标对消化产物的抗氧化活性进行综合评价。与市售的大豆肽比较,大米四种蛋白经模拟体外消化后具有良好的抗氧化活性。其中醇溶蛋白的消化产物抗氧化活性最好,DPPH·,ABTS+·,·OH自由基清除能力和Fe2+金属离子螯合能力的半抑制浓度分别为30.88 mg/m L、27.61 mg/m L、5.43mg/m L、0.18 mg/m L。大米四种蛋白酶解产物的Fe2+螯合能力半抑制浓度均小于1 mg/m L,具有良好的Fe2+螯合能力。研究结果表明大米四种蛋白的体外消化酶解物具有不同大小的抗氧化活性,分子量集中在181~1000 Da范围内,是一种易于被人体吸收的抗氧化肽。     

四角蛤蜊酶解多肽抗氧化活性及稳定性研究

在研究四角蛤蜊酶解多肽羟基自由基清除能力和DPPH自由基清除的前提下,以DPPH自由基清除能力为主要指标,探究酶解多肽在温度变化、pH变化、反复冻融、紫外干预及常见金属离子干预等条件下的抗氧化活性稳定性。结果表明,四角蛤蜊酶解多肽具有较强的抗氧化活性。在高温、酸性、紫外干预、冻融多种常见金属离子(Mg2+、Na+、K+、Fe2+)等条件下,酶解多肽的抗氧化活性被保存得较好;在碱性、Cu2+、Zn2+、Ca2+等条件下,酶解多肽的抗氧化活性被破坏程度较大。     

多指标评价核桃蛋白及多肽的抗氧化活性

多指标评价药食两用核桃蛋白及多肽的抗氧化活性。利用DPPH·﹑O_2~-·﹑总还原能力和·OH 4种常用体外抗氧化活性模型,以谷胱甘肽(GSH)为对照,测定核桃蛋白及多肽抗氧化活性。在实验范围内,核桃蛋白及多肽的抗氧化活性与浓度呈量效关系,且核桃多肽对DPPH·和O_2~-·清除能力显著,抗氧化活性达到GSH的80%以上,对·OH清除能力亦达到GSH的50%以上。核桃蛋白及多肽均具有一定的抗氧化能力,且核桃多肽的抗氧化活性较蛋白更为显著。     

澳洲坚果抗氧化肽的分离纯化及肽段鉴定

为研究澳洲坚果抗氧化肽的抗氧化活性和氨基酸组成,以复配蛋白酶水解澳洲坚果粕制备粗多肽,利用超滤、大孔树脂纯化技术制备了抗氧化活性最佳的分子量小于1000 Da的多肽,采用Sephadex G-15凝胶对其分离并评价各组分对DPPH、羟基、ABTS+自由基的清除能力与还原能力,筛选出抗氧化活性最强组分,利用液相色谱-串联质谱技术(liquid chromatography and tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)进行鉴定并分析。结果表明,葡聚糖凝胶柱层析分离出G1、G2、G3组分,其中G3具有最佳的抗氧化活性,其羟基自由基清除能力半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC₅₀)6.18 mg/mL与还原能力IC₅₀ 2.19 mg/mL优于谷胱甘肽,DPPH自由基清除能力IC₅₀ 0.50 mg/mL,ABTS+自由基清除能力IC₅₀ 0.02 mg/mL;通过液相色谱-串联质谱鉴定G3含有46个肽段,肽段长度均小于...     

金华火腿加热烹饪和体外模拟消化后粗肽抗氧化和ACE抑制活性比较研究

以金华火腿为研究对象,猪腿肉为对照,分别考察从生火腿、加热烹饪后火腿和加热烹饪-体外模拟消化 后火腿中所提取的3 种粗肽的抗氧化活性和血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制活性。 结果表明：金华火腿加热烹饪后所提粗肽的游离巯基（—SH）含量降至28.97 nmol/mg,ABTS＋·清除率和Fe2＋螯 合能力降低,但是当粗肽质量浓度达5 mg/mL时,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH） 自由基清除率由生状态时的35.9%提高至52.8%,氧自由基吸收能力也略有提高,ACE抑制率增至43.01%;加热烹 饪-模拟消化后,除DPPH自由基清除率显著降低外,其他抗氧化指标均显示金华火腿粗肽的抗氧化活性显著提高, ACE抑制率也增至63.02%（P＜0.05）。与猪腿肉粗肽相比,金华火腿粗肽具有更高的抗氧化和ACE抑制活性,并 且经模拟消化后粗肽的生物活性进一步提高,显示出金华火腿对人体健康具有有益生理作用的潜能。     

体外模拟消化对大米谷蛋白结构及水解产物生物活性的影响

通过体外模拟消化,研究不同消化时间下谷蛋白结构与抗氧化和血管紧张素转换酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）抑制活性的关系。利用内源荧光光谱和傅里叶变换红光谱测定谷蛋白水解过程结构变化。通过测定水解产物抗氧化能力和ACE抑制率表征酶解产物的活性,利用四极杆串联飞行时间质谱鉴定具有抗氧化和ACE抑制活性的组分。结果表明,谷蛋白水解度在2 h内快速增加,随后趋于平缓。水解导致谷蛋白λmax红移且荧光强度增强,α-螺旋含量显著增加、β-折叠相对含量显著降低（P＜0.05）。α-螺旋结构含量的增加降低了水解物的抗氧化能力,谷蛋白β-折叠结构含量的减少能增强水解物的ACE抑制能力。水解0.5 h抗氧化能力最强,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除率的半抑制浓度（half maximal inhibitory concentration,IC50）为（1.113±0.015）mg/mL,·OH清除率IC50为（0.518±0.053）mg/mL、Fe2＋螯合能力IC50为（0.678±0.019）mg/mL。ACE抑制率先增加后降低,在2 h达到最高,IC50为（0.693±0.011）mg/mL。水解度的增加降低了水解物抗氧化能力,但增强了ACE抑制能力。水解物在0.5～2 h抗氧化能力和ACE抑制能力呈现负相关关系,随后抗氧化能力和ACE抑制能力均下降。水解物抗氧化肽和ACE抑制肽分子质量均小于2 kDa,筛选出以VEGGFLFIV为代表抗氧化活性多肽,且ACE抑制肽大部分N-端是疏水性氨基酸或者碱性氨基酸。因此,通过控制谷蛋白体外消化水解度,可制备最优的大米谷蛋白抗氧化或降血压相关功能性产品。     

酸枣提取物的抗氧化及抗衰老作用

目的:研究酸枣提取物体外和体内抗氧化及抗衰老作用。方法:对不同质量浓度酸枣提取物（0.05、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mg/mL）进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除率、羟自由基清除率及Fe3+还原能力测定,评价酸枣提取物体外抗氧化活性;以不同质量分数（0.1%、0.5%、1.0%）酸枣提取物饲喂果蝇,通过果蝇寿命实验、逆重力爬行实验以及测定果蝇体内超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）活力、丙二醛（Malonic dialdehyde,MDA）含量、过氧化氢酶（Catalase,CAT）活力,评价酸枣提取物体内抗氧化及抗衰老作用。结果:体外实验结果显示,酸枣提取物对DPPH自由基、羟自由基均有不同程度的清除作用,其半数清除浓度（IC₅₀）值分别为:0.44、1.40 mg/mL,对Fe3+具有还原能力。体内实验结果显示,与空白组相比,1.0%酸枣提取物组雌、雄果蝇平均寿命分别显著延长了9.61%和13.91%（P<0.01）;增强30 d雌、雄果蝇逆重力爬行能力（P<0.05或P<0.01）,降低雌、雄果蝇体内MDA含量（P<0.05或P<0.01）,提高雌、雄果蝇体内SOD和CAT活力（P<0.05或P<0.01）。结论:酸枣提取物具有较好的体内外抗氧化作用和潜在抗衰老作用。     

蛋清多肽体内外抗氧化活性的研究

本试验通过体外试验和动物试验两方面研究蛋清多肽(egg white polypeptide,EWP)的抗氧化能力,测定了1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基的清除能力和总还原能力以及小鼠血清、肝脏和心脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果表明,蛋清多肽浓度为5 mg/mL时,其对DPPH自由基清除率为69.2%,羟自由基清除率为68.5%,蛋清多肽对DPPH自由基和羟自由基均有较好的清除作用,并且清除率与浓度呈正相关。蛋清多肽可显著提高小鼠血清、肝脏和心脏组织中SOD活力和GSH含量(P<0.05),显著降低机体内MDA含量(P<0.05),且蛋清多肽灌胃剂量为150~900 mg/kg时,抗氧化能力与蛋清多肽浓度有一定量效关系,且高剂量组效果最佳。本研究为开发新型生物活性肽,提高农产品附加值提供理论基础与数据支持。     

不同干燥方法对生姜叶活性成分和抗氧化活性的影响

为研究不同干燥方法对生姜叶活性成分和抗氧化能力的影响,以黄酮、多酚、精油含量及精油组分为活性成分指标,以DPPH·、ABTS+·及·OH清除率为抗氧化能力指标,对比阴干、晒干、烘干、冷冻干燥及真空干燥5种干燥方法对生姜叶的影响。结果表明,与新鲜生姜叶相比,经过不同干燥处理后生姜叶的活性成分含量及抗氧化能力均有所下降。其中,冷冻干燥处理后的生姜叶黄酮、多酚及精油含量均是最高,分别为21.62 mg/g、1.56 mg/g和1.91%;对DPPH·、ABTS+·和·OH的清除化能力最高,分别为70.42%、79.65%和63.41%。其次分别为烘干、真空干燥、阴干及晒干。通过GC-MS分析,新鲜及5种干燥方法得到的生姜叶精油共鉴定出33种组分,其主要组分为α-柏木烯、乙酸异龙脑酯、(Z)-3,7-二甲基-2,6-辛二烯醛及甲基庚烯酮,主要分为7大类,分别为萜烯类、醇类、醛类、酚类、酸类、酮类及酯类。综合比较,冷冻干燥对生姜叶中的活性成分及抗氧化能力保留效果最好。     

不同产地青钱柳多糖的体外抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性

本研究以清除DPPH自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)能力和α-葡萄糖苷酶抑制活性能力为指标,初步评价不同产地青钱柳多糖的体外抗氧化及降血糖活性。结果表明:不同产地青钱柳的多糖含量存在显著差异(p<0.05),其中江西修水县青钱柳的多糖含量最高,为5.85%±0.02%,贵州榕江县平阳乡多糖含量最低,为3.50%±0.10%。不同产地青钱柳多糖的DPPH自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)能力及α-葡萄糖苷酶抑制活性有所差异,且与多糖的浓度呈一定剂量关系,即随多糖浓度的增大,多糖的抗氧化及抑制α-葡萄糖苷酶活性能力增强。青钱柳多糖具有良好的体外抗氧化和降血糖活性,可对其进一步开发利用。     

干燥方式对无花果酚类物质及其抗氧化活性的影响

研究自然晒干、真空冷冻干燥、烘箱干燥、远红外干燥和真空干燥对无花果总酚含量、酚类物质组成及其 体外抗氧化活性的影响。采用福林-酚比色法及高效液相色谱法分别测定干燥后无花果的总酚含量和酚类物质的组 成,并比较多酚提取液对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl,DPPH）自由基清除能力、2,2’-联 氨-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（2,2’-azino-bis-(3-ehtybenzothiaazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt, ABTS）自由基清除能力和总还原力的影响,采用统计学方法分析酚类物质含量与其抗氧化活性的相关性。结果表 明：经不同方式干燥后无花果的总酚含量、各酚类物质含量均有显著性差异（P＜0.05）,其中真空干燥后样品的 总酚含量与酚类物质含量总和均为最高;不同干燥方式对无花果的抗氧化活性影响显著（P＜0.05）,真空干燥样 品的DPPH自由基清除能力、ABTS＋·清除能力和总还原力均为最高,且相关性分析结果显示,无花果抗氧化活性 与儿茶素、槲皮苷、阿魏酸、4-羟基苯甲酸等酚类物质的含量之间呈显著相关（P＜0.05）。综上,真空干燥处理 后无花果总酚含量及多酚各组分含量总和最多、抗氧化活性最强,适宜于无花果的干燥。     

番茄果胶和半纤维素抗氧化活性分析

为了探究番茄细胞壁中不同类型果胶和半纤维素的抗氧化活性,利用水、EDTA、Na₂CO₃、4% KOH和24% KOH溶液分步提取,得到水溶性果胶(WSP)、离子结合型果胶(CSP)、共价结合型果胶(SSP)、松散结合型半纤维素(LH)和紧密结合型半纤维素(TH)五种组分,对各组分进行了氧自由基吸收能力(ORAC)、DPPH自由基(DPPH·)清除能力、ABTS自由基(ABTS+·)清除能力和铁离子还原能力(FRAP)的分析。结果表明,番茄WSP含量显著高于CSP和SSP,为1.05 mg GalUA/g FW,TH含量显著高于LH(p<0.05),为0.09 mg Glu/g FW。番茄不同类型果胶和半纤维素均具有一定的抗氧化活性。其中,CSP的ORAC、DPPH·清除能力和ABTS+·清除能力较强,综合抗氧化活性较高。在5 mg/mL时,CSP的ORAC值相当于76.4 μmol/L Trolox,DPPH·和ABTS+·的清除率分别达到61.0%和99.8%。而SSP、LH和TH具有较强的FRAP。相关性分析表明各组分与抗氧化活性密切相关。研究结果为番茄的综合加工利用和作为功能性食品添加成分的开发提供了理论根据。     

荔枝核水提物抗氧化和抑菌作用的研究

以荔枝核为原料,经过粉碎,采用传统中药水煎法制备得到荔枝核水提物。通过测定还原能力、总抗氧化能力以及水提物对1,1-二苯基-2-三硝基苦肼自由基(DPPH.)、羟自由基(.OH)、超养阴离子自由基(O2-.)的清除能力来评价水提物的抗氧化活性。同时,通过侧定抑菌圈直径大小和最小抑菌浓度研究的荔枝核水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果。实验结果表明:荔枝核水提物有较好的抗氧化性,对DPPH.、.OH、O2-.的IC50分别是0.1819mg/mL、16.3652mg/mL、31.6767mg/mL。同时荔枝核水提物表现出一定的还原能力和抗氧化能力。通过抑菌实验,得出荔枝核水提物对金黄色葡萄球菌有抑制效果。当水提物的浓度为3.125%,抑菌圈直径为8.8±0.58mm。荔枝核水提物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为6.25%。