一种基于ATP荧光反应的洁净度检测系统的开发与验证

本文旨在建立一种基于ATP荧光反应的洁净度检测系统,并对该系统的主要性能指标进行验证,包括线性、重复性、检出限及衰减率等,并对检测结果进行分析。结果显示,本拭子对ATP标准溶液的检出限为1.77×10^-15mol/L,线性良好;对菌液的检出结果为:大肠埃希氏菌检出限2000CFU、金黄色葡萄球菌检出限800CFU、酵母菌检出限10CFU,均线性良好。该系统重复性良好,在高浓度ATP下,相对标准偏差(RSD)为8%;在低浓度ATP下,相对标准偏差为13%,均小于15%;在6min内,荧光衰减率无明显变化。故得出结论,本拭子的灵敏度、线性、重复性和衰减率指标均较好。     

宠物食品中维生素B12的快速测定

比较宠物食品中维生素B₁₂检测方法的差别,并评价微孔板法检测维生素B₁₂的检测性能。采用微孔板法与微生物法模拟样品与自然样品的检测试验,比较分析检测结果。微孔板法与微生物法的检测效果基本一致,微孔板法具有良好的检测性能。同时发现维生素B₁₂的含量受加工工艺的影响较大,在高温膨化粮中的平均含量最低,仅为6.2 μg/100 g,而在冻干粮中的含量最高,达到16.0 μg/100 g。     

副溶血性弧菌的特征、分布及其致病风险评估研究概述

<正>本文对副溶血性弧菌的个体形态、群体形态、生物学特征、食品中的分布情况及其快速检测方法进行了阐述。同时,介绍了食品中副溶血性弧菌的致病因子,并阐述了致病风险的评估步骤,以期推进食品中副溶血性弧菌致病风险的预测,并对风险预警、风险交流以及防控措施的制定有所帮助。     

两种纯化乳铁蛋白的肝素亲和柱性能对比研究

本实验运用高效液相色谱法对两种商品化肝素亲和柱的柱容量、实际样本纯化效果、重复性及操作便捷性进行了系统性对比,旨在研究两种商品化肝素亲和柱纯化乳及乳制品中乳铁蛋白的性能,同时为相关用户提供选择商品化肝素亲和柱的建议。研究结果显示,两种肝素亲和柱对1mg乳铁蛋白标准品的回收率为90.8%~95.6%,柱容量均能满足常见乳及乳制品中乳铁蛋白的检测需求;对牛乳及乳粉样本中乳铁蛋白的加标回收率为81%~95%,且重复使用3次仍能保持对牛乳及乳粉样本80%以上的加标回收率,即两种肝素亲和柱对乳及乳制品中乳铁蛋白均有良好的纯化效果且3次内可重复使用。在操作便捷性方面,两种肝素亲和柱在保证检测结果准确性的前提下,A柱操作简便、前处理时间短且可同时使用多个A柱检测多个样品,B柱则需要手动加压或使用蠕动泵进行操作,前处理时间较长且无法低成本地同时处理多个样本。综上所述,两种商品化的肝素亲和柱均可满足常见乳及乳制品中乳铁蛋白的纯化需求,在操作便捷性方面A柱优于B柱,相关用户可综合市场、价格等因素选择合适的产品。     

乳制品中沙门氏菌分子检测方法的验证研究

目的验证沙门氏菌、非沙门菌及阳性核酸模板对MICROFAST?沙门氏菌核酸检测试剂盒(PCR-探针法)的特异性和稳定性,同时比对试剂盒法与GB 4789.4—2016培养法定性检测结果的一致性。方法用实验室保存的30株沙门氏菌和15株非沙门氏菌菌株验证MICROFAST?沙门氏菌核酸检测试剂盒(PCR-探针法)的特异性。通过人工添加不同浓度沙门氏菌对30个乳制品样本,采用国家标准法和试剂盒法同时检验,探究方法的一致性。选择制备好的5份阳性核酸模板,每个模板分别使用3个批次的试剂盒进行检测,对实验结果进行重复性和显著性分析,确定不同试剂盒批次间是否存在显著性差异。结果 30株沙门氏菌菌株和15株非沙门氏菌菌株的特异性检测结果表明,MICROFAST?沙门氏菌核酸检测试剂盒(PCR-探针法)对沙门氏菌的特异性符合预期。人工添加的阳性样本检测结果表明,在乳制品样本范围内,试剂盒的假阳性率与假阴性率为0。3个批次的试剂盒对5份阳性模板检测结果之间没有显著性差异,变异系数CV均小于1%。结论该试剂盒方法与国家标准法相比,具有操作简单、快速等优势,适合乳制品加工过程微生物快速检测。     

低分子量褐藻多糖的制备及其活性分析

利用抗坏血酸协同过氧化氢法降解褐藻多糖,以DPPH自由基清除率为指标,通过工艺优化得到最佳降解条件,然后用超滤技术将降解产物进行分级,获得不同分子量组分,并分析其DPPH自由基清除率、保湿效果,酪氨酸酶抑制率等活性。正交试验结果表明,最佳降解条件为H₂O₂-V_C浓度20 mmol/L、降解温度45 ℃、降解时间3 h,在此条件下获得的降解产物的DPPH自由基清除率达到61.23%,降解产物得率为73.16%。电泳结果表明,降解后的褐藻多糖的条带明显出现在低分子量区。利用超滤系统将降解产物分级为<5 kDa、5~10 kDa、10~30 kDa、>30 kDa四个不同分子量段的组分,研究发现各分子量段之间的活性存在显著差异（P<0.05）,尤其<5 kDa组分（其主要成分为2.140×103 Da,占比29.6%）的活性最好,其DPPH自由基清除率为59.27%,60 h后保湿率为75.75%,酪氨酸酶抑制率为65.28%。与褐藻多糖相比,其糖醛酸含量稍有下降。本研究结果可为褐藻多糖在功能性食品等领域的应用提供理论依据。     

预包装熟肉制品加工环境李斯特菌监控方案的构建

单核细胞增生李斯特氏菌作为一种食源性致病菌,该菌可存在于各类食品中,尤其是即食类食品,也可在食品加工环境包括生产设备、用具、地板和排水沟等中长期生存。虽然发病率相对于其他食源性致病菌较低,但危害较大。因此,对加工环境中的单核细胞增生李斯特氏菌的污染控制尤为重要。加工环境中李斯特菌监控作为一种预警和验证手段,可以在终产品检出单核细胞增生李斯特氏菌之前做好预防措施。本文汇总分析了多个加工肉制品企业环境监测的经验,构建出肉制品加工过程环境中李斯特菌监控基础方案,包括较为详细的区域划分、采样分区、采样及检测方法、预防措施和纠正措施等,形成适合自身企业的环境李斯特菌监控方案,为肉制品加工行业卫生规范细化提供一定参考依据。     

叠氮溴化丙锭-qPCR法定量检测植物乳杆菌

目的：选取植物乳杆菌单拷贝基因plnF为靶基因,设计引物探针,将叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)与实时荧光聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)相结合,建立了活性植物乳杆菌定量检测PMA-qPCR方法。方法：优化PMA反应条件,进行特异性验证,建立标准曲线,验证灵敏度,并将该方法用于检测人工添加奶粉、米粉、酸奶样品以及冻干样品中的植物乳杆菌。结果：显示经PMA条件优化,最佳PMA浓度为2μg/mL,最佳曝光时间为10min,所建立的PMA-qPCR方法可以快速、高效地检测植物乳杆菌,利用细菌纯培养物与对应Ct值建立标准曲线,可以看出纯培养物浓度与Ct值之间存在对应线性关系,相关系数(r_² )为 0.9992,最低检测限为15拷贝/反应体系,人工添加样品以及冻干样品检测中PMA-qPCR和平皿计数法结果的对数值进行配对t检验,结果显示两者结果在不同的人工添加样本以及冻干样品中均无显著性差异(P＞0.05)。结论：本研究建立的PMA-qPCR检测方法能快速准确、特异、灵敏地定量检测植物乳杆菌。     

基于酪蛋白免疫快速检测的羊奶鉴伪方法建立

为了能够快速、灵敏、低成本和方便地对市场上的羊奶进行鉴伪,本文基于竞争法原理开发了牛源酪蛋白胶体金免疫层析试纸条并对其进行了评价.通过在纯羊奶中添加不同比例的牛奶,获得含有不同浓度牛源蛋白的羊奶溶液并进行免疫层析试纸条测定,评价了该方法的检测范围和灵敏度,分析了奶制品经蒸煮和酶解处理对试纸条检测结果的影响,评价了该方法...     

黄曲霉毒素B1免疫层析试纸条和ELISA试剂盒中花生粕样本适用性优化

本实验对比了商品化酶联免疫吸附法、荧光免疫层析快速定量法和胶体金快速免疫层析快速定量法中不同提取溶剂对花生粕中黄曲霉毒素B₁检测结果的影响,旨在商品化黄曲霉毒素B₁的快速检测产品中增加花生粕样本的适用性,以满足食品加工企业、饲料加工企业以及花生粕原料贸易商对花生粕中黄曲霉毒素B₁快速检测的需求。结果显示,商品化黄曲霉毒素B₁ ELISA检测检测试剂盒、黄曲霉毒素B₁荧光快速定量检测试纸条和黄曲霉毒素B₁胶体金快速定量检测试纸条在花生粕检测中的最优提取溶剂均为30%乙腈-水溶液,食品加工企业、饲料加工企业以及花生粕原料贸易可使用此方法对花生粕中黄曲霉毒素B₁进行快速检测。