三七中人参皂苷Rh1的分离与纯化

为了得到纯净的、具有较高生理和药理活性的单体人参皂苷Rh1,从三七中提取总皂苷,并对三七总皂苷进行分离纯化获得人参皂苷Rh1单体.分别经过乙醇浸提、石油醚脱脂、水饱和正丁醇萃取、大孔吸附树脂脱糖脱色及硅胶层析,从三七总皂苷中分离得到人参皂苷Rh1.结果表明,1 000 g三七干燥根经醇提、脱脂、萃取和脱糖脱色可制得三七...     

丹参三七不同配比对缺氧复氧损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

研究了丹参、三七及其以不同质量比例配伍对缺氧复氧(H/R)人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用。采用全自动生化分析仪测定了培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出率。实验结果显示,正常对照组、H/R模型组的LDH漏出率分别为0.212与0.309,说明H/R引起HUVECs的LDH漏出率增加。而丹参、三七按质量比10∶0、10∶1、5∶1、5∶3、1∶1、3∶5、1∶5、1∶10、0∶10配伍后,使H/R损伤HUVECs的LDH漏出率分别降低为0.218、0.240、0.247、0.239、0.230、0.241、0.247、0.242、0.227,其中只有丹参三七质量比为10∶0、5∶3、1∶1及0∶10与模型组比有显著性差异,因此,丹参、三七及丹参三七质量比为5∶3、1∶1配伍,均可保护H/R诱导血管内皮损伤。     

三七挥发性物质的气相色谱分析

本项目利用气相色谱-质谱联用仪对中药三七蒸汽溶液进行分析研究,建立了相应的测定方法及获得相应的气相色谱图谱。通过检索美国国家标准与技术局(NIST)的质谱图库,测得了19种可能化合物,其中2-甲氧基-4-(1-丙烯基)-苯酚、十四烷酸、十八碳二烯酸、二十五烷的可信度达95%以上。     

三七叶总皂苷对抑郁大鼠脑内单胺及神经因子的影响

建立慢性应激抑郁大鼠模型,采用ELISA法测定5-HT、NA、DA水平,ICH法测定BDNF、TrkB、pCREB、pERK的表达,评价三七叶总皂苷对脑内单胺及神经因子的影响。建模五周后,与空白组比较,模型组大鼠体重、糖水偏好率分别降低了17.43%、39.49%,自主活动表现为探索能力降低、趋避能力升高,海马体质量百分比显著减少,呈现出人类抑郁症中体重下降、快感缺失、自主活动下降、海马体萎缩等核心症状。而给药组与模型组比较,上述指标得到有效逆转。与模型组比较,三七叶总皂苷高剂量组（100 mg/kg）可以使脑内NA、DA水平分别升高13.89%及19.66%,而对5-HT水平没影响,并且使脑内BDNF、TrkB、pCREB、pERK的表达分别上升16.67%、47.83%、20.42%、22.84%,表明三七叶总皂苷具有良好的抗抑郁作用。     

三七叶甙制备原人参二醇及其差向异构体

三七叶总甙以c(NaOH)=2mol/L的氢氧化钠水溶液溶解,沸水浴加热8h进行水解,所得产物经乙酸乙酯萃取和硅胶柱层析分离得到原人参二醇。三七叶总甙与浓盐酸常温反应7h后,再用饱和碳酸钠溶液常温搅拌24h,所得产物经乙酸乙酯萃取和硅胶柱层析分离得到20(R) 原人参二醇。它们的结构经光谱分析及与文献对照得以鉴定。     

聚氧化乙烯/海藻酸钠/羟丙基-癸烷基壳聚糖网络凝胶的制备及其对三七总皂苷的体外释放性能研究

将壳聚糖改性成两亲性的羟丙基-癸烷基壳聚糖,并通过化学交联方法制备了聚氧化乙烯/海藻酸钠/羟丙基-癸烷基壳聚糖载药网络凝胶。利用傅利叶变换红外光谱仪、X-射线衍射仪、扫描电子显微镜对凝胶结构进行了表征。实验结果表明,该凝胶具有良好的网状结构和溶胀性,同时兼具p H敏感性和温度敏感性,在不同p H环境中均对三七总皂苷具有一定的缓释作用。     

黑曲霉固体发酵三七药材的皂苷变化研究

为研究黑曲霉发酵三七药材过程中皂苷类成分的化学变化,利用黑曲霉对三七药材进行固体发酵,根据高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（HPLC-Q-TOF-MS/MS）联用的检测结果,对三七发酵产物的总皂苷类成分进行分析和鉴定,并探讨了皂苷含量变化。结果表明,黑曲霉可以高效的转化三七药材中皂苷类成分。三七药材经黑曲霉发酵之后,人参皂苷Rb1几乎全部转化生成其他物质,在发酵产物中已未检出,三七皂苷R1和人参皂苷Rg1大幅度减少,三七皂苷R2、人参皂苷Rh1、Rd等含量明显增加,并且在三七发酵产物中检出了稀有人参皂苷F1、Rh4、Rg3、CK、三七皂苷Rh16和T5。     

正交试验优化超声辅助法提取三七有效成分工艺

研究超声辅助法提取三七有效成分的工艺。通过单因素试验研究乙醇溶液体积分数、料液比、超声波频率和提取时间对三七人参皂苷Rg1提取率的影响。在单因素试验基础上对4个因素安排L9(34)正交试验,得出影响三七有效成分人参皂苷Rg1提取率的先后次序为：乙醇体积分数＞提取时间＞料液比＞超声频率。选出最佳提取工艺为：乙醇体积分数70%、料液比1:12(g/mL)、超声频率59kHz、提取时间60min。在此最佳工艺下,得到三七干燥后的人参皂苷Rg1含量为1.85%。     

三七总皂苷对体外培养人牙周膜细胞增殖和分化的影响

目的探讨三七总皂苷对体外培养的人牙周膜细胞(Human periodontal ligament cell,hPDLC)增殖、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性及表达的影响。方法采用组织块法原代培养hPDLC,并经免疫组化鉴定;分别用10、1.0、0.1和0.01 mg/L浓度的三七总皂苷处理体外培养的hPDLC,设只加含10%FBS的DMEM培养基为空白对照,分别于1、3、5、7 d后,MTT法检测其对hPDLC增殖活性的影响,酶标仪上检测细胞中ALP活性,Western blot法检测细胞中ALP蛋白的表达。结果免疫组化结果显示,细胞来源于外胚间充质;MTT结果显示,0.1 mg/L浓度组在第5天和1.0、10 mg/L浓度组在第3、5天hPDLC增殖活性明显高于空白对照组(P<0.01);0.1、1.0、10 mg/L浓度组在第3、5天ALP活性明显高于空白对照组(P<0.01),1.0 mg/L浓度组APL活性明显高于其他各组(P<0.01);0.01、0.1、1.0、10 mg/L浓度组ALP蛋白表达量均明显高于空白对照组(P<0.01),以1.0 mg/L浓度组ALP表达量最高。结论三七总皂苷有促进hPDLC增殖的作用,并能增加ALP活性及其表达水平。     

三七叶总皂苷对慢性应激抑郁大鼠行为学及海马体cAMP、PKA、BDNF的影响

本文研究了三七叶总皂苷的抗抑郁作用及其作用机制。40只大鼠随机分成空白组、模型组、氟西汀组和三七叶总皂苷中高剂量组,建立慢性应激抑郁大鼠模型评价三七叶总皂苷的抗抑郁活性以及对海马体cAMP、PKA、BDNF的影响。建模四周后,模型组大鼠与空白组比较,体重、糖水偏好率及自主活动水平等行为学指标分别降低了8.56%、22.48%、26.17%,表现出人类抑郁症中体重下降、快感缺失、自主活动下降等核心症状,而大鼠海马体cAMP、PKA、BDNF的水平分别降低了53.60%、53.60%、39.20%。给予三七叶总皂苷治疗后,与模型组相比,三七叶总皂苷高剂量组大鼠上述三个行为学指标分别增加了7.03%、26.21%、26.21%,上述三个生化指标也分别升高了41.29%、62.79%、49.05%。表明三七叶总皂苷能逆转抑郁大鼠行为学症状以及调节海马体cAMP、PKA、BDNF的水平。三七叶总皂苷具有良好的抗抑郁作用,其作用机制与调控海马体cAMP、PKA、BDNF水平有关。