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Katja F. Hellendahl Felix Kaspar Dr. Xinrui Zhou Zhaoyi Yang Prof. Dr. Zhen Huang Prof. Dr. Peter Neubauer Dr. Anke Kurreck 《Chembiochem : a European journal of chemical biology》2021,22(11):2002-2009
Selenium-modified nucleosides are powerful tools to study the structure and function of nucleic acids and their protein interactions. The widespread application of 2-selenopyrimidine nucleosides is currently limited by low yields in established synthetic routes. Herein, we describe the optimization of the synthesis of 2-Se-uridine and 2-Se-thymidine derivatives by thermostable nucleoside phosphorylases in transglycosylation reactions using natural uridine or thymidine as sugar donors. Reactions were performed at 60 or 80 °C and at pH 9 under hypoxic conditions to improve the solubility and stability of the 2-Se-nucleobases in aqueous media. To optimize the conversion, the reaction equilibria in analytical transglycosylation reactions were studied. The equilibrium constants of phosphorolysis of the 2-Se-pyrimidines were between 5 and 10, and therefore differ by an order of magnitude from the equilibrium constants of any other known case. Hence, the thermodynamic properties of the target nucleosides are inherently unfavorable, and this complicates their synthesis significantly. A tenfold excess of sugar donor was needed to achieve 40−48 % conversion to the target nucleoside. Scale-up of the optimized conditions provided four Se-containing nucleosides in 6–40 % isolated yield, which compares favorably to established chemical routes. 相似文献
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海胆酮是一种酮式类胡萝卜素,主要从海胆及藻类等海洋生物中提取。本文研究海胆酮对乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的抑制作用,应用酶动力学、荧光光谱、圆二色光谱和分子对接技术研究海胆酮对AChE的抑制机理,并用淀粉样β蛋白片段25~35(amyloid beta-peptide 25-35,Aβ25-35)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)建立阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)模型,研究海胆酮对AD细胞模型氧化应激损伤的作用。结果表明,海胆酮有很强的AChE抑制活性,其半抑制质量浓度为(16.29±0.97)μg/mL,抑制常数Ki为3.82 μg/mL,表现为竞争性抑制;海胆酮可诱导AChE二级结构改变,更容易与AChE活性中心氨基酸Ser200、His440、Trp84和Tyr121结合,阻碍底物碘代硫代乙酰胆碱(acetylthiocholine iodide,ATCI)与酶结合,从而引起酶活力降低。海胆酮能有效抑制Aβ25-35诱导PC12细胞的AChE活力,降低丙二醛含量,增加超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力,减轻Aβ25-35诱导的PC12细胞氧化应激损伤。本研究基于AChE和氧化应激阐明了海胆酮对AD的潜在作用机制,为海胆酮在功能食品、生物医药等领域的应用提供了数据支持和理论根据。 相似文献
83.
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Fluorescence‐Activated Cell Sorters: Standing Surface Acoustic Wave (SSAW)‐Based Fluorescence‐Activated Cell Sorter (Small 40/2018) 下载免费PDF全文
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隐患采空区是目前影响露天开采矿山安全生产的主要危害源之一。随着台阶开采的不断剥离,露天开采境界内各台阶与地下空区群的隔离层厚度越来越薄,随时有可能发生采空区顶板坍塌事故。考虑到露天矿采空区地质赋存条件和围岩稳固性等特征,以弓长岭露天铁矿浅层采空区为工程背景,运用现场监测和数值模拟相结合的手段综合分析了浅层采空区的稳定性。将液体静力水准地表沉降监测系统的监测数据与FLAC数值模拟结果对比,调整蠕变参数使得数值模拟的蠕变速率与现场监测结果一致,而后据此进行未来结果的预测。最终根据地表沉降数据确定的蠕变参数取值为A=1.0×10^-12、m=1.75、n=0.35。研究表明:静力水准测点地表最大沉降位移为-9.8 mm,蠕变计算结果顶板最大垂直位移约20.4 mm,应力最大值约25 MPa,综合分析显示该采空区较稳定。上述研究提供了一种基于采空区现场监测数据的数值模拟蠕变分析方法,可为类似矿山采空区稳定性分析提供借鉴。 相似文献
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利用纤维床生物反应器(FBB)发酵生产链霉素,对发酵培养基氮源进行了优化,并与传统搅拌发酵进行了比较。结果表明,以可溶性有机氮源大豆蛋白胨作为发酵培养基氮源,并添加一定量蔗糖,可以完全替代黄豆粉,在1 LFBB中发酵96 h时链霉素效价达到5 567 U·mL~(-1)。在整个发酵过程中,所有菌体都被固定在纤维床反应器上,而发酵液保持澄清,这不仅有利于从无菌体的发酵液中进行产物的提取和纯化,也可以重复利用菌体生产次级代谢产物,从而缩短发酵周期,进一步提高链霉素在发酵过程中的体积生产率。 相似文献