我国蛋鸡养殖中药物残留分析研究及监管建议

目的 重点围绕抗生素类兽药的使用,对我国蛋鸡养殖中的药物残留情况进行分析研究并提出监管建议。方法 采用摸底调查、监督抽检和舆情收集的方式,了解国内蛋鸡养殖过程中的用药情况。通过梳理本中心五年来鸡蛋和鸡肉的检测数据,从检出项目、样品及来源分析不合格情况；通过收集舆情,汇总国内各省近年来鸡蛋和鸡肉抽检不合格的情况。结果 发现抗生素的使用确实广泛存在于我国蛋鸡养殖过程中,并经由鸡蛋和鸡肉进入到消费者市场；监督抽检的鸡蛋和鸡肉不合格的项目主要集中在氟苯尼考、恩诺沙星、磺胺二甲嘧啶等磺胺类和甲硝唑等兽药中,这四种药物均为广谱性的抗生素。结论 结合我国国情、借鉴发达国家的做法,提出七项监管建议,为监管部门能及早、有效、最大限度地降低兽药经蛋鸡养殖途径产生的食品安全风险提供参考。     

电喷雾检测器、蒸发光散射检测器与示差折光检测器测定食品中5种糖成分的方法比较

目的比较高效液相色谱仪串联电喷雾检测器、蒸发光散射检测器和示差折光检测器测定食品中5种糖分的优缺点。方法样品依照国家标准进行前处理,流动相为乙腈-水(75:25,V:V),经色谱柱Thermo Scientific HYPERSIL APS-2分离,分别通过3种检测器进行检测,比较3种检测器检测的标准品线性回归系数、标准曲线最低点信噪比及实际样品的检测结果。结果电喷雾检测器在标准曲线最低点处信噪比显著优于蒸发光散射检测器和示差折光检测器,线性回归系数及实际样品检测重现性优于蒸发光散射检测器。结论电喷雾检测器具备较好的灵敏度、线性及重现性,具备较好的定量能力,可作为未来高效液相色谱法检测食品中糖分的备选检测器。     

PCR仪性能对检测结果的影响

目的 通过对比不同厂家和不同型号的PCR仪,对PCR仪温度准确性、温度均一性和PCR仪的恒温时间(Hold-Time)进行试验研究,以评价仪器本身对PCR检测结果的影响。方法 通过选取特定基因片段的扩增试验,研究PCR仪温度准确性和均一性的影响,研究恒温时间对扩增结果的影响。结果 当反应程序整体温度调高或降低1-2℃时,PCR仪检测弱阳性样本CT值有影响。反应板中间位置温度相较于边缘位置更均匀。实验过程中恒温时间达不到设定要求,会影响扩增结果,造成扩增失败。结论 研究结果提示实验室应通过PCR校准和检测过程的质量控制,确保检测结果质量。     

荧光重组酶介导等温扩增快速检测食品中克罗诺杆菌属

目的 克罗诺杆菌属为乳制品及婴幼儿配方制品中常见污染的食源性致病菌,传统的培养法检测无法满足口岸大批量食品的快速检测要求。建立快速简便的荧光重组酶介导等温扩增法(recombinase-aided amplification, RAA)检测克罗诺杆菌属,以满足口岸快速通关及监管需要。方法 根据克罗诺杆菌属ompA 基因保守区设计特异性引物、探针,通过引物两两组合结合探针筛选出扩增效率及灵敏度最佳的引物组合,优化反应温度及引物探针浓度,确定最佳反应条件。将建立的荧光RAA法应用于食品基质及实际样品检测中,同时与国标GB 4789.40-2016进行比对验证。结果 克罗诺杆菌属荧光RAA最佳反应温度为39℃,最佳引物、探针终浓度均为400nmol/L。建立的荧光RAA法特异性强,纯菌灵敏度达到3×10_² CFU/ mL。加标食品基质婴儿奶粉及婴儿米粉在月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST)增菌只需2h,即可检测原始浓度达到3×10_^-2 CFU/ mL的克罗诺杆菌属。荧光RAA法只需5min即可观察结果,20-30min完成扩增,速度及灵敏度明显高于国标法。结论 荧光RAA法简便、快速、无需大型仪器,可用于口岸或其他场所进行克罗诺杆菌属的快速检测与监控。     

戊型肝炎病毒食源性传播研究进展

戊型肝炎病毒（HEV）是一种全球性食源性病原体,猪、牛、兔、骆驼等多种动物均可成为其宿主。人类直接接触受HEV感染的猪和其他动物,或食用受污染的食物（未加工或未煮熟）均有感染该病毒的风险。本文综述了HEV的病原学、流行病学特征和在动物中的流行情况,以及对肉类及其制品、水生环境、水产品和蔬菜等作物的污染情况,可进一步了解HEV食源性传播风险,为预防和控制戊型肝炎的流行提供科学依据。     

食品接触材料接触面积三维测量技术与人工测量方法对比

目的 分析三维测量技术在不规则食品接触材料表面积和容积的计算中,相较于常用人工测量方法的应用优势.方法 以7种常见的不规则食品接触材料为例,分别用三维测量技术和人工测量技术测量样品表面积,每个样品平行测定6次,对比2种方法测量结果的准确度和精密度.结果 三维测量技术结果准确度高,精密度为0.0134％～1.63％;人工测量结果的精密度为0.748％～3.04％,其稳定性明显低于三维测量技术.结论 人工测量技术存在测量方法不确定、测量偏差大和测量难度大等缺点;三维测量技术操作简单、结果稳定性高、适用性广,具有广泛的应用前景.     

食品中单核细胞增生李斯特菌微滴数字PCR定量检测方法建立

目的 建立食品中单核细胞增生李斯特氏菌的微滴式数字聚合酶链式反应（ddPCR）快速定量检测方法。方法 筛选单核细胞增生李斯特氏菌的特异性引物和探针,通过对目标菌纯菌液及人工污染样品的检测,比较ddPCR方法和平板计数法的定值效果,对ddPCR结果进行特异性、灵敏性和重复性分析。结果 本研究建立的单核细胞增生李斯特氏菌ddPCR检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性。单核细胞增生李斯特氏菌纯菌液中定量限（LOQ）和检出限（LOD）均为136 CFU/mL,在鱿鱼圈和香肠样品中定量限分别为240 CFU/g和155 CFU/g。ddPCR在各梯度水平上变异系数均小于25%,ddPCR和平板计数定值对数值相对偏差均小于30%。结论 本研究建立的ddPCR方法能够快速、准确、灵敏、特异地定量检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌。     

微滴式数字聚合酶链式反应定量检测食品中金黄色葡萄球菌方法的研究

目的 建立微滴数字聚合酶链式反应(ddPCR)快速定量检测食品中金黄色葡萄球菌的方法。方法 以金黄色葡萄球菌nuc基因为靶序列,筛选出同时适用于实时荧光定量PCR(qPCR)和微滴数字PCR(ddPCR)的引物探针,建立食品中金黄色葡萄球菌ddPCR快速定量检测方法,并对该方法进行特异性、灵敏度、准确性和重复性实验。结果 梯度稀释金黄色葡萄球菌纯培养液,确定ddPCR方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ)均为110 CFU/mL;通过人工添加实验,同时进行ddPCR与平板计数检测,LOQ可达1 000 CFU/g,且4个添加水平的检测结果偏差最大为4.77%,5个平行重复的检测变异系数均小于20%,展现出良好的准确性和重复性。结论 本研究建立的金黄色葡萄球菌ddPCR定量检测方法特异性好、灵敏度高、结果准确,为快速定量检测金黄色葡萄球菌提供了参考。     

OnGuard II Ag柱对磷酸盐含量测定的影响

目的研究前处理过程中使用OnGuard Ⅱ Ag柱对磷酸盐测定值的影响。方法以食品安全国家标准方法为基础,设计了2部分的实验内容:测定不同浓度磷酸钠溶液中磷酸盐的含量;测定经过前处理后的2种鱼肉和3种肉松样品中磷酸盐的含量。结果在2部分实验的前处理中使用OnGuard Ⅱ Ag柱后,磷酸钠溶液实验中随着磷酸钠溶液浓度的增加,磷酸盐溶液的测定值回收率由106%降至15.0%;样品实验中过柱后鱼肉和肉松的磷酸盐测定值降至未过柱的8.67%~10.3%。结论在无基质和有基质干扰的情况下,使用离子色谱测定磷酸盐含量过程中使用OnGuard Ⅱ Ag柱,均会严重影响到磷酸盐测定的准确性,尤其会使高浓度磷酸盐样品中磷酸盐的测定值大幅度降低。     

叠氮溴化丙锭-qPCR法定量检测植物乳杆菌

目的：选取植物乳杆菌单拷贝基因plnF为靶基因,设计引物探针,将叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)与实时荧光聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)相结合,建立了活性植物乳杆菌定量检测PMA-qPCR方法。方法：优化PMA反应条件,进行特异性验证,建立标准曲线,验证灵敏度,并将该方法用于检测人工添加奶粉、米粉、酸奶样品以及冻干样品中的植物乳杆菌。结果：显示经PMA条件优化,最佳PMA浓度为2μg/mL,最佳曝光时间为10min,所建立的PMA-qPCR方法可以快速、高效地检测植物乳杆菌,利用细菌纯培养物与对应Ct值建立标准曲线,可以看出纯培养物浓度与Ct值之间存在对应线性关系,相关系数(r_² )为 0.9992,最低检测限为15拷贝/反应体系,人工添加样品以及冻干样品检测中PMA-qPCR和平皿计数法结果的对数值进行配对t检验,结果显示两者结果在不同的人工添加样本以及冻干样品中均无显著性差异(P＞0.05)。结论：本研究建立的PMA-qPCR检测方法能快速准确、特异、灵敏地定量检测植物乳杆菌。