M2型丙酮酸激酶同工酶表达对肝细胞癌化疗敏感性的影响

【摘要】 目的 研究M2型丙酮酸激酶同工酶（PKM2）对肝癌细胞HepG2增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,探讨PKM2表达对肝细胞癌（HCC）化疗敏感性的影响。方法 采用蛋白印迹和实时定量聚合酶链反应（RT- qPCR）检测正常肝细胞株HL- 7702和肝癌细胞株HepG2中PKM2蛋白和mRNA表达。构建靶向PKM2基因重组质粒（PKM2- siRNA）和对照质粒（siRNA- NC）,并转染至HepG2细胞中,蛋白印迹和qRT- PCR检测PKM2敲低情况。细胞克隆形成、Transwell趋化和TUNEL法分析PKM2表达对细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。不同浓度多柔比星（DOX）处理各组细胞后,CCK- 8和TUNEL法检测细胞活性和凋亡。 结果 HepG2细胞株中PKM2蛋白和mRNA表达与HL- 7702相比显著上调[mRNA（1.01±0.01）%对（5.04±0.02）%,蛋白（1.34±0.04）%对（4.03±0.02）%,P＜0.05]。PKM2在PKM2- siRNA转染HepG2细胞中表达在转录和翻译水平显著降低,细胞克隆形成率、细胞侵袭数均低于空白转染组和转染siRNA- NC对照组,细胞凋亡率高于空白转染组和转染siRNA- NC对照组,DOX半抑制浓度（IC50）为7.25 μg/mL,转染siRNA- NC对照组为18.51 μg/mL。随着DOX给药浓度增加,细胞凋亡率显著增加。转染PKM2- siRNA细胞组凋亡数明显高于转染siRNA- NC对照组（P＜0.05）。 结论 PKM2在人肝癌细胞株HepG2中高表达。敲低PKM2表达可抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,增强对DOX化疗敏感性。PKM2可能是HCC治疗的潜在靶点。

     

飞燕草素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解的影响

目的:探讨飞燕草素对乳腺癌MDA-MB-231细胞糖代谢的影响。方法:以不同浓度的飞燕草素作用MDA-MB-231细胞,CCK-8检测细胞活性,免疫组化染色检测Ki67表达,划痕试验检测细胞的迁移能力;葡萄糖摄取、乳糖和三磷酸腺苷(ATP)测定试剂盒检测MDA-MB-231细胞葡萄糖摄取、乳糖和ATP的生成,己糖激酶(HK)活性试剂盒检测HK活性;蛋白质印迹法检测HK、丙酮酸激酶(PK)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和M2-型丙酮酸激酶 2(PKM2)表达。结果:飞燕草素能明显抑制MDA-MB-231细胞增殖,20和40 μmol/L飞燕草素能分别降低细胞存活率至75%和72%(P<0.05);20、40 μmol/L飞燕草素能降低乳腺癌MDA-MB-231细胞Ki67表达阳性的细胞数量,差异有统计学意义(P<0.01);飞燕草素能降低乳腺癌细胞葡萄糖的摄取,降低细胞乳糖和ATP的生成,抑制PKM2、HK和LDHA蛋白的表达,降低p-Akt和p-mTOR蛋白表达。结论:飞燕草素能抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞糖代谢,抑制Akt/mTOR通路活性可能是飞燕草素抑制乳腺癌细胞糖酵解的机制。     

酿酒酵母糖酵解途径的动态模拟

利用葡萄糖脉冲对酿酒酵母厌氧连续培养物施加扰动,通过不同时间点取样,定量细胞内外主要化合物的含量。利用测定的数据和细胞内糖酵解途径模型进行各反应途径的参数估计,结果发现实际测量值与预测值接近。代谢控制分析发现,糖酵解途径中,磷酸果糖激酶、己糖激酶和己糖转运系统具有较大的通量控制系数。随机改变细胞内外化合物的浓度对细胞能荷状态的模拟结果显示,酿酒酵母能在1min内将细胞的能荷状态恢复到初始水平。     

CYTOR通过调控miR-125b-5p/HK2通路促进宫颈癌细胞有氧糖酵解、增殖和侵袭

探讨细胞骨架RNA(CYTOR)及其下游分子轴对宫颈癌细胞增殖和侵袭的影响。选取宫颈癌组织及细胞,检测CYTOR的表达水平;采用CCK-8、Transwell、有氧糖酵解方法检测探讨CYTOR对宫颈癌细胞增殖、侵袭和有氧糖酵解的影响;同时利用双荧光素酶报告基因验证CYTOR、小分子RNA miR-125b-5p、己糖激酶2(HK2)之间的相互作用关系。结果显示,CYTOR在宫颈癌组织及细胞中明显上调(P<0.05);抑制CYTOR可明显降低宫颈癌细胞增殖、侵袭和有氧糖酵解(P<0.05);荧光素酶报告基因证实CYTOR可竞争性吸附miR-125b-5p,而miR-125b-5p可负调控HK2的表达。研究表明,CYTOR/miR-125b-5p/HK2分子轴促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和有氧糖酵解,是一个潜在的宫颈癌治疗分子靶点。     

三分子反应系统的周期解构造

讨论了一个三分子反应系统的自脉动现象是并得出结论：当反应物的浓度小于其临界时，该系统的周期解总是稳定的。     

一株嗜热厌氧糖酵解细菌的分离和特征

从四川省康定县热温泉分离出一株嗜热厌氧糖酵解细菌。该菌营养琼脂滚管表面菌落呈假根状，中央凸起，边缘叶状，不产生色素。细菌呈直杆状或微弯曲，细胞末端形成球状体，而且只有一个。单细胞１．０μｍ宽２．０－３．０μｍ长，运动，不形成芽孢，革兰氏阴性。最适生长ｐＨ６．５，最适生长温度６５℃。发酵葡萄糖淀粉生产氢，二氧化碳，醋酸，乙醇，乳酸及微量丙酸。     

蛋白质磷酸化对肉品质影响的研究进展

蛋白质磷酸化反应是生物界最普遍、最重要的蛋白质翻译后修饰方式。本文综述了磷酸化蛋白质的富集、位点分析、定量分析方法的最新研究进展。从蛋白质磷酸化反应与糖酵解、肌肉收缩、蛋白质降解的关系探讨了蛋白质磷酸化反应对肉品质的影响,并对磷酸化蛋白质组学的发展方向以及蛋白质磷酸化反应在肉品中的研究进行了展望。     

氧化还原调节、有氧糖酵解、自噬在肿瘤中的作用及其相互关系

近年来,氧化还原调节、有氧糖酵解和自噬均可作为抗肿瘤的关键因素,且三者的交叉作用与肿瘤的生物学行为密切相关.有氧糖酵解的关键代谢途径与调控氧化还原的信号通路密切相关,自噬又在有氧糖酵解的作用下起着维持细胞生长、保护细胞的作用.阐明三者在肿瘤中的作用及其相互关系,可有效增强临床诊断、监测和治疗癌症的能力,也可为临床治疗肿...     

不同品种肉羊肌肉的糖酵解潜力及其与肉品质的相关性

以8月龄巴美肉羊、小尾寒羊和苏尼特羊为实验材料,取背最长肌（longissimus dorsi,LD）、股二头肌（biceps femoris,BF）和臂三头肌（triceps brachii,TB）,测定其糖酵解潜力（glycolytic potential,GP）、乳酸含量,以探讨不同品种肉羊肌肉糖酵解潜力的差异及糖酵解潜力与肉品质的关系。结果表明：不同品种肉羊3 个部位肌肉的糖酵解潜力均为LD最大,TB最小。不同品种肉羊间的糖酵解潜力差异显著（P＜0.05）,巴美肉羊最大,小尾寒羊最小。宰后45 min的乳酸含量与糖酵解潜力大小情况并不一致。3 个品种肉羊背最长肌的剪切力值差异显著（P＜0.05）,巴美肉羊最小,小尾寒羊最大。巴美肉羊的熟肉率显著高于苏尼特羊和小尾寒羊（P＜0.05）。小尾寒羊的糖酵解潜力与a*值成显著负相关（P＜0.05）。随着糖酵解潜力的增大,pH24值及剪切力有减小的趋势。     

NO介导低氧诱导因子-1α对宰后牦牛肉糖酵解及嫩度的影响及机制

为探究一氧化氮（NO）介导宰后牦牛肉成熟过程中低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)对糖酵解水平和嫩度的影响及调控机制,本研究以牦牛背最长肌为研究对象,采用0.9%生理盐水、200μmol/L S-亚硝基谷胱甘肽（S-nitrosoglutathione,GSNO）、200μmol/L GSNO+100μmol/L YC-1(HIF-1α抑制剂)、200μmol/L GSNO+50μmol/L PD98059注射处理,分别成熟3、6、9、12、24、72 h,分析NO含量、HIF-1α、有丝分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）/细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase,ERK）通路水平、糖酵解相关酶活性、剪切力等相关指标。结果表明,宰后3～72 h,GSNO组NO含量显著高于对照组（P<0.05）,并在6 h达到峰值,ERK1/2和p-ERK1/2表达水平显著高于对照组和GSNO+PD98059组（P<0.05...