22F型肺炎球菌荚膜多糖的活化及其多糖蛋白结合物的免疫原性

目的用不同活化剂进行22F型肺炎球菌荚膜多糖(type 22F streptococcus pneumoniae capsular polysaccharide)的活化,并探讨其多糖蛋白结合物的免疫原性。方法分别用溴化氰(cyanogen bromide,CNBr)和1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸酯(1-cyano-4-dimethylaminopyridinium tetrafluoroborate,CDAP)作为22F型肺炎球菌荚膜多糖的活化剂,1,6-己二酰肼(1,6-adipic acid dihydrazide,ADH)作为链接剂,制备22F型肺炎荚膜多糖衍生物(3批Pn22FpsADH1和3批Pn22Fps-ADH2);在碳二亚胺[N-(3-Dimethylaminopropyl)-N′-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDAC]的作用下,将衍生物与破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)共价结合,经凝胶过滤柱层析纯化,得到22F型肺炎链球菌荚膜多糖蛋白结合物(3批Pn22Fps-TT1和3批Pn22Fps-TT2);并对其生化指标、血清学特异性、免疫原性及异常毒性进行检测。结果衍生物Pn22Fps-ADH2的衍生率及回收率均略高于Pn22Fps-ADH1;结合物Pn22Fps-TT2的生化指标检测结果相对Pn22Fps-TT1较好;结合物Pn22Fps-TT1和Pn22Fps-TT2均可与22F型肺炎球菌诊断血清特异性结合;结合物Pn22Fps-TT1和Pn22Fps-TT2均具有良好的免疫原性;无异常毒性。结论 CNBr和CDAP均可作为22F型肺炎球菌荚膜多糖活化剂,经活化和结合反应,其抗原位点得到较好保留,但CDAP作为结合疫苗多糖的活化试剂效果更佳。     

伤寒Vi多糖与不同载体蛋白制备的结合物的特性分析

目的比较以白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)和重组铜绿假单胞菌外毒素A(recombinant Pseudomonas aeruginosa exotoxin A,r EPA)为载体蛋白,分别与伤寒Vi多糖(typhoid Vi polysaccharide,STVi)偶联的结合物的理化特性、抗原性及免疫效应。方法分别以DT、r EPA为载体蛋白,以己二酰肼(adipyl dihydrazide,ADH)为连接剂,使Vi多糖与载体蛋白共价偶联制备多糖蛋白结合物STVi-DT和STVi-r EPA,检测其理化特性指标、抗原性,再将其于0、14、28 d免疫NIH小鼠,经眼眶采血,分离血清,采用间接ELISA法检测小鼠血清抗体水平,分析其免疫原性、免疫记忆效应及免疫持久性。结果 STVi-DT、STVi-r EPA理化特性指标相似。STVi-DT针对STVi、DT抗血清均具有明显抗原性,而针对r EPA抗血清无抗原性,STVi-r EPA针对STVi、r EPA抗血清均具有明显抗原性,而针对DT抗血清无抗原性。Vi多糖和Vi多糖蛋白结合物均具有动物免疫原性,STVi蛋白结合物较STVi具有更强的免疫原性,STVi-DT的动物免疫原性试验结果略优于STVi-r EPA;免疫2剂STVi-DT和STVi-r EPA后,小鼠血清GMT明显升高,且STViDT组明显高于STVi-r EPA组(P0.05),具有较强的免疫记忆效应;免疫STVi-DT和STVi-r EPA后,小鼠血清GMT随免疫剂次增加和时间延长持续升高,直至稳定在一定水平,免疫持久性较好。结论 STVi-DT、STVi-r EPA理化特性相似,均具有显著的免疫原性、免疫记忆效应及免疫持久性,而STVi-DT免疫原性、免疫记忆效应更强。     

Protective Effects of MDG-1, a Polysaccharide from Ophiopogon japonicus on Diabetic Nephropathy in Diabetic KKAy Mice

Ophiopogon japonicus is a traditional Chinese medicine that might be effective for treating type 2 diabetes. Recent research confirmed that MDG-1, a polysaccharide from O. japonicas, activates the PI3K/Akt signaling pathway and improves insulin sensitivity in a diabetic KKA^y mouse model, but little is known about its effects on diabetic nephropathy. In this study, KKA^y mice were orally administered distilled water (control group), MDG-1, or rosiglitazone for 12 weeks. Blood glucose levels were tested every two weeks for the fed mice. At 6 and 12 weeks, blood samples were collected for biochemical examination. At the end of the experiment, all kidney tissues were collected for histological examination and western blot analysis. Results show that MDG-1 (300 mg/kg) significantly decreased the levels of blood glucose, triglycerides, blood urine nitrogen and albumin, and significantly inhibited the expression of transforming growth factor-beta 1 and connective tissue growth factor. Moreover, MDG-1 could alleviate glomerular mesangial expansion and tubulointerstitial fibrosis in the diabetic mice, as confirmed by histopathological examination. These data indicated that MDG-1 ameliorates renal disease in diabetic mice by reducing hyperglycemia, hyperinsulinemia, and hyperlipidemia, and by inhibiting intracellular signaling pathways.     

当归多糖对DPN大鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路抑制影响

目的: 分析当归多糖对糖尿病神经病变（DPN）大鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路抑制影响。方法: 选取SPF级Wistar雄性大鼠105只,随机选取15只作为正常组,剩余90只大鼠制备DPN模型,成功造模75只,随机分成5组,模型组、当归多糖低、中、高剂量组和阳性对照组,每组15只。模型组和正常组大鼠采用2 mL/100 g生理盐水灌胃,当归多糖低、中、高剂量组大鼠给予当归多糖药液灌胃,阳性对照组给予弥可保+二甲双胍溶液灌胃,每日给药体积均为2 mL/100 g。每天1次,连续灌胃10 d。给药3、10 d后检测大鼠机械缩足反应阈值（PWT）、热缩足反射潜伏期（PWL）,末次给药后检测大鼠空腹血糖、血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、白细胞介素-6（IL-6）、髓鞘碱性蛋白（MBP）、TNF-α及C反应蛋白（CRP）含量,检测大鼠运动神经传导速度（MNCV）、感觉神经传导速度（SNCV）,大鼠坐骨神经内核因子-κB（NF-κB） mRNA、髓样分子因子88（MyD88） mRNA及Toll样受体4（TLR4） mRNA表达。结果: 模型组及当归多糖低剂量组大鼠空腹血糖、MDA含量显著高于正常组,CAT、SOD及GSH-Px含量显著低于正常组,当归多糖中、高剂量组大鼠空腹血糖、MDA含量显著低于模型组、阳性对照组,CAT、SOD及GSH-Px含量显著高于模型组、阳性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;模型组、当归多糖低剂量组大鼠血清IL-6、MBP、TNF-α及CRP含量均显著高于正常组,当归多糖中、高剂量组大鼠血清IL-6、MBP、TNF-α及CRP含量均显著低于模型组、阳性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;模型组、当归多糖低剂量组大鼠NF-κB mRNA、MyD88 mRNA及TLR4 mRNA表达量均显著高于正常组,当归多糖中、高剂量组大鼠NF-κB mRNA、MyD88 mRNA及TLR4 mRNA表达量均显著低于模型组、阳性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论: 当归多糖可显著改善DPN大鼠的周围神经损伤状态,促进神经传导的恢复,其机制可能与阻断TLR4/MyD88/NF-κB信号路径的转导,降低炎性因子水平,减轻神经的氧化应激损伤有关。     

微波协同高压热水浸提法提取香菇多糖的研究

研究了香菇多糖的几种提取方法,结果表明,采用微波协同高压热水浸提法可明显提高多糖的得率;探讨了采用此法从香菇中提取活性多糖的最佳条件。通过单因素试验,分析了料液比、微波功率和微波辐射时间对香菇多糖提取率的影响,并以香菇多糖提取率为评价指标,优化提取工艺。试验结果表明,微波协同高压热水浸提法提取香菇多糖的最佳条件为:料液比为1∶50(g/mL)、微波功率为800 W、微波辐射时间为8min。在此条件下,香菇多糖的提取率为13.6%。     

采用超滤技术浓缩提纯南瓜多糖

研究了超滤技术在南瓜多糖浓缩纯化过程中的应用，发现南瓜多糖的最佳超滤条件是：采用截留分子量30KDa的超滤膜，超滤压力为0．100MPa，超滤温度为25℃。在此条件下，截留率达到94．5％，脱色率迭到68．6％，还原糖脱除率达到82．9％。     

超声波提取金花茶多糖的工艺研究

通过单因素和正交实验对超声波提取金花茶多糖的工艺进行了研究,探讨了料液比、提取温度、提取时间及超声波频率这4个影响因素,确定了金花茶多糖的最佳提取工艺条件为料液比1∶50、温度80℃、时间1.0h、超声波频率为53.2kHz,在该条件下多糖的得率为3.1%。同时将超声波法与传统浸提法进行比较,结果表明采用超声波提取法提高了茶多糖的得率1.0%。     

大蒜多糖提取液的澄清条件研究

为了获得澄清透明的大蒜多糖提取液用以生产大蒜多糖,采用不同的pH、不同的澄清剂及其用量等条件处理大蒜多糖提取液。结果表明:在pH为4的条件下,澄清时单宁和明胶用量为0.04%和0.02%,或膨润土、明胶和明矾用量比为0.1%0∶.01%0∶.015%2种方法,均获得了澄清透明的大蒜多糖溶液。该结果可用于大蒜多糖的工业化生产。     

香菇多糖L-2对荷瘤小鼠TNF-α和IL-2的影响

我们提取纯化得到一种重均分子量为2.03×105、单糖为葡萄糖的香菇多糖级分(L-2)后,评价了香菇多糖L-2对荷S-180小鼠细胞免疫的影响。连续10d通过腹腔注射给予小鼠不同剂量的香菇多糖L-2(10mg/kg体重),测定了正常小鼠与荷S-180小鼠的血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素2(IL-2)的含量,以及香菇多糖L-2对TNF-α和IL-2的mRNA表达的影响。与对照组小鼠相比,血清中TNF-α含量有显著增加,而血清中IL-2含量没有变化,与此同时,香菇多糖L-2可以上调TNF-α的mRNA的表达。结果揭示多糖L-2有增加TNF-α含量的作用,多糖增强免疫力与TNF-α含量增加以及在转录水平上调TNF-αmRNA的表达有关。     

灵芝多糖的研究进展

灵芝多糖是灵芝中含有的一种高分子活性多糖,具有多种生理功能,国内外对此开展了广泛的研究。本文对其生理功能、结构特点、发酵生产等方面的研究进行了综述。