陕西省典型冷冻食品中大肠杆菌的分子特征及耐药性检测

为了解冷冻食品中大肠杆菌污染情况,分析其潜在的食品安全问题,从陕西省4 市（宝鸡、咸阳、西安和渭南）共收集冷冻食品样品360 份（120 份速冻水饺和240 份冰淇淋）。通过选择培养和聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）进行大肠杆菌分离鉴定。然后对分离株进行21 种毒力基因、23 种耐药基因、15 种抗生素耐药性检测及种群分型。360 份样品中大肠杆菌污染率为13.6%（49/360）,其中5 份样品（10.2%,5/49）大肠菌群计数超过100 CFU/g。21 种被检毒力基因中有9 种毒力基因被检出,以肠外致病性大肠杆菌相关基因FyuA和iss的检出率最高（均为14.3%,7/49）。药敏结果显示,菌株对β-内酰胺类抗生素和叶酸代谢抑制剂的耐药最为普遍（均为98.0%,48/49）,其次为四环素（20.4%,10/49）。其中β-内酰胺类主要编码基因为blaCTX,四环素主要编码基因为tetA。研究还发现1 株分离株携带多黏菌素类抗性基因mcr-9。此外,20.4%的菌株为多重耐药菌株,最多可对13 种抗生素耐药。所有分离株共有4 种系统发育群（A、B1、C和F）,A群为优势群系（63.3%,31/49）。综上,陕西省典型冷冻食品中存在致病性大肠杆菌及耐多药菌株污染,存在通过食物链传播给人的风险。     

抗耐药性大肠杆菌乳酸菌的筛选及抑菌机制

筛选对耐药性大肠杆菌（Escherichia coli）拮抗活性较强的乳酸菌,并探究其作用机制。采用牛津杯打孔法筛选对耐药性E. coli具有抑制活性的乳酸菌,并通过生理生化实验和16S rDNA序列对其进行鉴定。通过测定阿奇霉素、乳酸菌粗提物、乳酸菌粗提物和阿奇霉素共同作用对耐药性E. coli电导率、胞外蛋白、紫外吸收物质等指标的影响,探究乳酸菌粗提物对耐药性E. coli的抑菌机制。结果表明：菌株XCT1-1对耐药性E. coli的抑菌直径达20.31 mm,且被鉴定为植物乳杆菌。乳酸菌XCT1-1粗提物、乳酸菌XCT1-1粗提物和阿奇霉素共同处理耐药性E. coli 10 h后,导致其胞外电导率分别增加20.54%、21.93%,胞外蛋白含量增加25.24%、27.93%,紫外吸收物质含量增加63.56%、77.12%。经扫描电镜观察,用乳酸菌XCT1-1粗提物、乳酸菌XCT1-1粗提物和阿奇霉素共同处理后,耐药性E. coli细胞壁和细胞膜被破坏,前者菌体表面出现褶皱,后者菌体细胞整体结构坍塌。结果表明,乳酸菌XCT1-1粗提物、乳酸菌XCT1-1粗提物和阿奇霉素共同作用于耐药性E. coli,都是通过膜损伤发挥拮抗作用,且乳酸菌粗提物提高了阿奇霉素对耐药性E. coli的敏感性。     

CRISPR-Cas系统在食源性致病菌中的结构与功能研究进展

规律成簇间隔短回文重复序列（CRISPR）及其相关蛋白（Cas）构成的CRISPR-Cas系统是存在于细菌和古细菌中的免疫系统的组成部分,能有效防御外源移动遗传元件,如噬菌体的侵袭。研究发现该系统可以阻止携带特征基因的外源核酸整合到细菌基因组中,同时还有调节其它功能基因表达的作用,对细菌毒性、耐药性、生物膜形成等生物学特征也有影响。本文解析常见食源性致病菌CRISPR-Cas系统的结构,综述CRISPR-Cas系统与细菌毒性、耐药性、生物膜形成、分型等的相关性,为后续CRISPR-Cas系统功能研究以及食源性致病菌的溯源、控制提供参考。     

辽宁省市售水产品中副溶血性弧菌的污染状况及耐药性分析

分析辽宁市售水产品副溶血性弧菌污染状况、毒力基因分布及耐药情况。方法 共采集420份水产品,应用国标方法和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对水产品中分离的副溶血性弧菌进行鉴定,并对分离菌株进行毒力基因及耐药性检测。结果 经国标方法和MALDI-TOF MS鉴定分离得到123株副溶血性弧菌,总检出率为29.29%(123/420)。不同种类、不同类别水产品副溶血性弧菌检出率差异均有统计学意义,海水产品检出率为33.44%,其中海水贝类检出率最高为49.51%;另外淡水产品中河蟹检出率较高为61.29%。分离的123株菌tlh基因全部阳性,未检测到tdh和trh基因,对氨苄西林耐药性显著,耐药率为94.31%。结论 辽宁省市售水产品不同程度受到副溶血性弧菌污染,尤其在河蟹中存在较高检出,应引起重视,并采取有效措施预防由水产品引起的副溶血性弧菌食源性疾病。同时,MALDI-TOF MS作为一种快速、准确、高通量的全新微生物鉴定技术,实现了对副溶血性弧菌的特异性快速鉴定。     

四川省不同地区猪源大肠杆菌耐药性调查

[目的]了解四川省不同地区猪源大肠杆菌的耐药性.[方法] 采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法,对分离自四川各地不同养猪场的232株大肠杆菌对32种抗菌药物的耐药性进行调查.[结果] 232株大肠杆菌除对头孢噻呋、头孢唑啉、头孢曲松和阿米卡星较敏感(耐药率≤15.52%)外,对其余28种药物均表现出不同程度的耐药性(耐药率范围42%～97%);98.7%的菌株表现出多重耐药性;对部分药物,分离自规模化养殖场菌株的耐药性比分离自散养户的菌株严重.[结论]分离菌株对大部分抗菌药物均表现出耐药性.     

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及16S rRNA甲基化酶基因检测的意义

目的：探讨多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及16SrRNA甲基化酶基因检测的临床意义,为临床合理使用抗生素和控制院内感染提供依据。方法收集2011年3月至2013年12月在南昌市第二人民医院住院的ICU患者各种临床标本分离的多重耐药鲍曼不动杆菌52株。采用纸片扩散（K-B）法对52株多重耐药鲍曼不动杆菌行抗生素药敏试验,采用聚合酶链反应（PCR）检测16SrRNA甲基化酶基因（armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE和npmA基因）表达情况。结果52株多重耐药鲍曼不动杆菌对米诺环素、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南和亚胺培南耐药率分别为44．2％、53．8％、75．0％和78．8％,对其余14种抗生素耐药率均在90．0％以上。52株多重耐药鲍曼不动杆菌中有38株检出armA基因表达,表达率为73．1％（38/52）;其余均未检出。结论多重耐药鲍曼不动杆菌主要携带armA型16SrRNA甲基化酶耐药基因。米诺环素、头孢哌酮/舒巴坦对多重耐药鲍曼不动杆菌有较好的抗菌活性,而多重耐药鲍曼不动杆菌对其他多种抗生素呈多重耐药性。     

三株人源干酪乳杆菌的益生特性

评价3株人源干酪乳杆菌的益生性能,为其在食品和保健品等行业中的应用提供理论支持。通过体外测定3株干酪乳杆菌的对模拟肠道的耐受性、黏附性、抑菌性及抗生素敏感性来评价其益生性能。3株干酪乳杆菌,特别是NCU011056,对高盐、酸和胆盐均具有高耐受性,NCU011056在100 g/L NaCl、pH 2. 0和3 g/L胆盐环境下存活率分别为95. 7%、87. 2%和80%; 3株干酪乳杆菌对Caco-2细胞系黏附能力各异,其中NCU011056黏附能力较强,黏附指数为60. 08%; 3株干酪乳杆菌对4种常见革兰氏阳性和革兰氏阴性致病菌均具有较强的抑菌能力; 3株干酪乳杆菌对青霉素、阿莫西林、头孢曲松、四环素、氯霉素、红霉素、利福平、环丙沙星均敏感。3株人源干酪乳杆菌,特别是NCU011056,具有良好的益生潜力,可考虑后期应用于食品、保健品等行业中。     

内蒙古传统发酵乳制品中乳酸菌的分离及其耐药性研究

以内蒙古通辽地区自制的奶豆腐和酸性奶油（乌日莫）为材料,采用稀释涂布法从中分离乳酸菌,通过分子生物学技术对其进行菌种鉴定,并对其耐药性进行研究。结果表明,共分离纯化得到80株乳酸菌,经鉴定,归属于13个种,分别为短乳杆菌（Lactobacillus brevis）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、乳酸片球菌（Lactobacillus acidilacticii）、乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）、瑞士乳杆菌（Lactobacillus helveticus）、屎肠球菌（Enterococcus faecium）、戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）、副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）、食二酸乳杆菌（Lactobacillus digitalis）、奥塔基乳杆菌（Lactobacillus ottaki）、耐久肠球菌（Enterococcus durans）、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）、开菲尔乳杆菌（Lactobacillus kefir）,表现出高的生物多样性。80株乳酸菌对萘啶酸的耐药率为100%;对链霉素、环丙沙星、万古霉素的耐药率较高,分别为95.00%、80.00%、72.50%;对利福平和四环素的耐药率中等,分别为51.25%,45.00%;对红霉素、氯霉素的耐药率较低,分别为26.25%、23.75%。此外,76株（95%）的乳酸菌还具有多重耐药性。     

温州市食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌分布及分子分型研究

目的 了解温州市食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的分子分型及分布特征。方法 4 ℃增菌后用选择性培养基对食品中的小肠结肠炎耶尔森氏菌进行分离鉴定,分析阳性菌株的生物型、血清型、毒力基因型、耐药性和脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子型别。结果 采集6类食品,共676份样品,其中68份样品检出69株小肠结肠炎耶尔森氏菌,检出率为10.1%（68/676）。调理肉制品检出率最高（20.5%,9/44）,其次为速冻食品（17.2%,11/64）。95.7%（66/69）的分离株为生物1A型,生物血清型以1A/O∶5（29.0%）为主,其次为1A/O∶8（14.5%）;88.4%（61/69）的菌株仅携带ystB基因,检出1株4/O∶3型菌株携带毒力基因ail、ystA、yadA、virF。分离株对14种抗菌药物的敏感率达到94%以上。32株血清已分型菌株,分为29种PFGE带型。结论 温州市食品中存在一定程度的小肠结肠炎耶尔森氏菌污染,且检出致病性小肠结肠炎耶尔森菌,菌株耐药率处于较低水平,分子分型提示菌株呈高度遗传多态性。     

市售生禽类产品分离大肠埃希氏菌药物敏感分析

目的 生禽类产品中大肠埃希氏菌是细菌中最常见的传染病菌之一,耐药大肠埃希氏菌的生长和繁殖中能通过食物链将耐药性传递给人源致病菌,对人类健康的造成严重影响。方法 本文对市售生禽类产品中大肠埃希氏菌进行分离和鉴定,并通过抗生素最小抑制浓度确定分离菌株药敏谱。结果：从65份样本中分离得到55株大肠埃希氏菌,分离率高达84.46%;药敏结果显示,分离菌对亚胺培南(98.2%)、头孢西丁(92.73%)、头孢他啶(90.9%)、多粘菌素(90.9%)耐药率较高,对四环素最敏感(72.2%)。表型不同的大肠埃希氏菌分为典型菌株(45株)和非典型菌株(10株)药敏谱无显著性差异(P>0.5)。受试菌100%携带3种以上抗生素,有83.6%受试菌同时携带4种高耐药率的抗生素(亚胺培南、头孢西丁、头孢他啶、多粘菌素)。结论 市售生禽类产品中存在非常严重的多重耐药性大肠埃希氏菌污染,本文对大肠埃希氏菌的药性分析,旨在为临床预防治疗提供相应的理论参考。