大豆肽和小麦肽抗疲劳功能的实验研究

目的:对大豆肽和小麦肽的抗疲劳功能和二者之间的协同作用进行研究。方法:将小鼠随机分成PBS组、大豆肽组、小麦肽组和复配组(大豆肽:小麦肽=2:1),每组10只,共40只,灌胃剂量均为6 g/60 kg·d。进行力竭游泳时间测试,取血清检测总肌酸激酶(CK)含量,小鼠骨骼肌匀浆检测MDA、T-SOD、GSH-Px、SDH含量。结果:大豆肽和小麦肽2:1复配具有协同增强作用,提高小鼠自身的抗氧化能力,阻止生物膜的脂质过氧化,减少骨骼肌的损伤,起到抗疲劳的功效。结论:大豆肽和小麦肽2:1的复合处理有更好的抗疲劳效果。     

小麦低聚肽对体外肠上皮细胞氧化应激损伤的保护作用

文中研究了小麦低聚肽对氧化应激损伤的体外肠上皮细胞的保护作用。将实验分为5组,对照Ⅰ(空白组0μmol/L H2O2)、对照Ⅱ(氧化应激组100μmol/L H2O2),处理Ⅰ、处理Ⅱ、处理Ⅲ(分别在对照组Ⅱ的条件下添加1、5、10 mg/m L小麦低聚肽),通过MTT法比较不同培养时间(12、24、48 h)小麦低聚肽对氧化应激损伤Caco-2细胞增殖率的影响,通过取培养至不同时间(12、24、48 h)的Caco-2细胞上清液、细胞裂解液,测定LDH、SOD、MDA含量变化。结果显示:1 mg/m L小麦低聚肽对损伤肠上皮细胞表现出显著的保护作用,细胞毒性降低、增殖率提高,细胞内SOD、MDA含量与氧化应激组相比均有显著性差异;小麦低聚肽对细胞的保护作用随着培养时间的延长而增强,24、48 h培养组与12 h培养组相比有显著性差异。小麦低聚肽对氧化应激损伤的体外肠上皮细胞有一定的保护作用,并且在一定范围内与浓度时间正相关。     

加工条件及体外消化对大米低聚肽结构和抗氧化活性的影响

通过酶解大米蛋白粉制备大米低聚肽,以分子质量分布、二级结构和氧自由基吸收能力(ORAC)为指标,研究不同温度、pH值和体外消化方式对大米低聚肽结构和抗氧化活性的影响。结果表明:热处理显著降低大米低聚肽在2 000~3 000 u、3 000~5 000 u和＞5 000 u范围内的分子质量(P<0.05),显著提高<150 u的分子质量(P<0.05),然而对重均分子质量、二级结构无显著影响(P＞0.05)。40 ℃下大米低聚肽的ORAC值显著高于其它温度(P<0.05)。pH值对大米低聚肽的重均分子质量、α-螺旋和平行式β-折叠无显著影响(P＞0.05)。在pH 6下大米低聚肽的ORAC值显著高于对照组(P<0.05),而pH 2和pH 4的ORAC值显著下降(P<0.05)。体外模拟消化显著降低大米低聚肽在1 000~2 000 u,2 000~3 000 u,3 000~5 000 u,＞5 000 u范围内的分子质量及重均分子质量(P<0.05),而＜150 u所占比例显著升高(P<0.05),而二级结构无显著变化(P＞0.05)。先胃蛋白酶后胰蛋白酶消化,可显著提高大米低聚肽的ORAC值(P<0.05)。研究结果表明,大米低聚肽具有一定的结构稳定性和抗氧化活性,为研发抗氧化功能性饮料奠定理论依据。     

海洋胶原低聚肽的制备及其稳定性研究

利用两步酶解法制备出海洋胶原低聚肽,在对其基础理化成分进行分析的基础上,以分子量分布为指标,利用HPLC分子排阻的方法,研究了pH,温度和蛋白酶消化对海洋胶原低聚肽稳定性的影响。结果显示:(1)pH分别为2,4,6,8,10和37℃水浴2h后,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过3%;(2)分别于20℃,40℃,60℃,80℃和100℃下水浴2 h后,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过2%;(3)分别经过胃蛋白酶单独消化,胰蛋白酶单独消化,先胃蛋白酶消化再胰蛋白酶消化,海洋胶原低聚肽各个分子量区间的比例变化不超过6%。表明pH,温度和蛋白酶消化对海洋胶原低聚肽组分的影响很小,海洋胶原低聚肽具有良好的pH稳定性,热稳定性以及消化稳定性。     

模拟胃肠道消化对玉米低聚肽抗氧化作用的影响

以胃蛋白酶和胰蛋白酶在体外模拟胃肠环境,测定模拟消化前后玉米低聚肽的相对分子质量分布、DPPH自由基清除能力、·OH清除能力、ABTS自由基清除能力、ORAC值和ROS清除能力,旨在探索模拟胃肠道消化对玉米低聚肽抗氧化活性的影响。结果表明：玉米低聚肽中大部分肽段相对分子质量低于1 000。分别模拟胃、肠环境消化后,重均相对分子质量有所下降,下降率分别为1.47%、0.05%,ABTS自由基清除能力有一定程度的升高,分别为25.47%、1.39%。模拟胃环境消化前后,DPPH自由基清除能力IC50值分别约为1.41、1.50 mg/mL,·OH清除能力IC50值分别约为10.3、12.3 mg/mL;模拟肠环境消化前后,DPPH自由基清除能力IC₅₀值分别约为1.39、1.48 mg/mL,·OH清除能力IC₅₀值分别约为8.1、9.5 mg/mL。模拟胃环境消化后,ORAC值有所降低,降幅为10.4%,100、400 μg/mL玉米低聚肽对ROS清除能力分别提高了1.42%、16.78%;模拟肠环境消化后,ORAC值提高了1.4%,100 μg/mL玉米低聚肽对ROS清除能力降低1.71%,而400 μg/mL玉米低聚肽对ROS清除能力提高2.61%。     

牡蛎肽与大豆肽、胶原肽、紫苏籽肽复配促进睾丸间质细胞生成雄性激素

分析牡蛎肽、大豆肽、胶原肽和紫苏籽肽的氨基酸组成,并研究牡蛎肽与大豆肽、胶原肽、紫苏籽肽以不同比例复配作用于小鼠睾丸间质细胞(TM3)分泌睾酮、二氢睾酮等雄性激素的影响,筛选适合改善性功能的低聚肽组合。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定牡蛎肽与大豆肽、胶原肽、紫苏籽肽复配对TM3细胞存活率的影响,酶联免疫吸附法检测睾酮、二氢睾酮、环磷鸟苷(c GMP)的含量,硝酸盐还原酶法检测一氧化氮(NO)的含量、WST-8法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力、硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)浓度。结果表明,四种低聚肽富含精氨酸,尤其紫苏籽肽的精氨酸含量最高为10.02%;较对照组,牡蛎肽和紫苏籽肽(浓度均为400μg/mL,体积2:1)复配效果最好,对雄性激素睾酮、二氢睾酮、c GMP的促进作用分别是50.64%、143.69%、88.44%;此外也能提高TM3细胞NO浓度和SOD酶活,降低TM3细胞MDA浓度,维持细胞内稳定的氧化环境,表明牡蛎肽和紫苏籽肽复配促进TM3细胞生成雄性激素,具有改善男性性功能的作用。     

小麦低聚肽的结构特征及其体外抗氧化活性

通过扫描电镜、基础理化成分、相对分子质量分布、氨基酸组成、紫外光谱和圆二色光谱对小麦低聚肽结构特征进行分析,从羟基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和氧自由基吸收能力（ORAC）4个方面对其体外抗氧化活性进行考察。结果表明,小麦低聚肽具有明显的球体颗粒状,表面有不规则褶皱和气孔,蛋白质和肽含量分别为95.86%、83.74%（均以干基计）,分子质量1000 u以下的组分占92.22%,必需氨基酸和疏水性氨基酸含量分别为20.46%、33.38%,在270 nm波长处有最大吸收峰。二级结构以多种构象并存,α-螺旋、平行式β-折叠、反平行式β-折叠、β-转角和无规卷曲含量分别为5.83%、3.14%、37.57%、20.32%和33.14%。小麦低聚肽对羟基自由基和DPPH自由基的半抑制浓度（IC50值）分别为9.62、1.54 mg/mL,ABTS自由基清除能力为3.53 mmol Trolox/g,ORAC值为1035.52 μmol Trolox/g。因此,小麦低聚肽具有较强的抗氧化能力,为其在抗氧化功能食品的开发利用提供一定的理论依据。     

猕猴桃籽油微胶囊的制备及稳定性研究

以猕猴桃籽油为芯材,玉米肽为壁材,吐温-20为乳化剂,采用喷雾干燥法制备微胶囊。优化得到最佳工艺条件为:芯材与壁材配比1∶2(质量比),固形物浓度(质量分数) 15%,喷雾干燥温度160℃,高速乳化剪切转速6 000 r/min。在最佳工艺条件下,猕猴桃籽油微胶囊包埋率为94. 06%。对微胶囊产品进行了理化性质、电镜、红外光谱分析和稳定性研究,表明产品具有良好的溶解性和贮存稳定性。     

中试规模酶解制备的大豆低聚肽中抗氧化肽和ACE抑制肽的分离和鉴定

本研究开发了一种通过中试规模制备大豆低聚肽的方法,制备出的大豆低聚肽具有较高的蛋白含量（91.45%）和较低的分子量（84.37%的分子量小于1000 u）。测定了大豆低聚肽的抗氧化和血管紧张素转化酶（ACE）抑制活性,然后利用反相高效液相色谱对其进行分离纯化,收集六个主要的液相组分,分别命名为组分1~6,利用质谱仪对这些组分进行肽段结构鉴定。共鉴定出41个肽段结构,选择15个肽段进行抗氧化和ACE抑制活性评价。结果表明,大豆低聚肽中有两个新型抗氧化肽段和四个ACE抑制肽段。抗氧化肽段分别为：Tyr-Glu,8.61±0.42 mmol Trolox等同物/g样品;Asp-Tyr-Arg,6.53±0.34 mmol Trolox等同物/g样品;ACE抑制肽段分别为：Leu-Val-Arg,IC50=51.75 μM;Leu-Tyr,IC50=305.76 μM;Asp-Tyr-Arg,IC50=1082.95 μM;Asp-Phe,IC50=1106.04 μM。这些肽段大多数是从大豆中新发现的抗氧化肽段和ACE抑制肽段。大豆低聚肽和这些活性肽段可作为抗氧化或降血压物质用于食品添加剂、营养物及医药制品中。     

牡蛎过敏原Crag 1的结构与功能

Crag 1是牡蛎中主要过敏原,属于一种原肌球蛋白。原肌球蛋白是存在于肌肉和非肌肉细胞中高度保守的、分子量大约为34~38 kDa的一种结合蛋白。目前已经明确Crag 1的一级结构是由284个氨基酸构成,二级结构以α-螺旋为主,软体类主要过敏原原肌球蛋白均没有复杂的三、四级空间结构。Crag 1的过敏原性不是来自构象、非连续性表位而是来自于线性、连续性表位。Crag 1在92~105区段(IQLLEEDMERSEER)中具有IgE抗原结合表位,其他的IgE抗原结合表位有待进一步试验确认。Crag 1作为一种原肌球蛋白,对肌肉有一定的调节作用。不同物种原肌球蛋白的序列同源性较高并且存在一定的交叉反应。综述介绍了Crag 1的基本结构性质与功能,系统地描述了Crag 1,讨论了现阶段研究牡蛎过敏的意义及存在的问题,为以后治疗软体动物、甲壳类动物食品的过敏性疾病,尤其是治疗牡蛎引起的过敏疾病,提供一定的参考依据。